肉牛支原體肺炎的流行、診斷與防控措施

摘要：肉牛支原體肺炎是由支原體引起的以壞死性肺炎為主要特征的牛呼吸道傳染病。此病主要侵害3月齡左右的犢牛，造成犢牛產(chǎn)生咳嗽、發(fā)燒、食欲減退和精神沉郁等癥狀，嚴(yán)重時(shí)可造成犢牛的死亡。肉牛支原體肺炎在我國(guó)各地均已發(fā)生，對(duì)肉牛養(yǎng)殖業(yè)造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失。熟悉肉牛支原體肺炎的流行特征、診斷方法以及防控措施可以有效降低該疾病對(duì)肉牛的影響。

關(guān)鍵詞：肉牛；支原體肺炎；診斷；防控

牛支原體肺炎是由牛支原體引起的疾病，該病原微生物最初在1961年美國(guó)發(fā)現(xiàn)，隨后在世界各地廣泛傳播[1]。我國(guó)首次分離牛支原體是在2008年，由辛九慶等從病牛肺臟病料中分離出來(lái)，并且通過(guò)生化實(shí)驗(yàn)和特異性PCR鑒定和序列比較，證明該病原微生物是牛支原體[2]。隨后該病原體在全國(guó)各地傳播，對(duì)肉牛養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。了解該疾病的流行特點(diǎn)、診斷方法以及防控措施能夠有效降低該疾病對(duì)肉牛養(yǎng)殖業(yè)的威脅。

1 牛支原體肺炎的流行特征

牛支原體肺炎是由牛支原體引起的疾病，該病原微生物是柔膜體綱、支原體目、支原體科、支原體屬、革蘭氏陽(yáng)性原核生

物[3]。該病原微生物主要侵害3月齡左右的犢牛，造成犢牛食欲減退、精神沉郁、發(fā)燒等癥狀，嚴(yán)重時(shí)可造成犢牛的死亡。犢牛感染牛支原體后能夠引起牛肺炎、乳房炎、關(guān)節(jié)炎等多種疾病，其中最嚴(yán)重和最主要的疾病是肺炎。牛支原體在水牛、奶牛、肉牛以及野牛群體中均廣泛傳播，能夠感染所有年齡階段的牛，由于犢牛免疫系統(tǒng)尚未成熟，因此對(duì)犢牛的危害最為嚴(yán)重。在牛傳染性支原體肺炎的傳播途徑里，最主要的傳播途徑是氣溶膠傳播。牛支原體從病牛的肺部釋放到空氣后，能夠在空氣中長(zhǎng)久存活，當(dāng)健康牛只吸入帶有牛支原體的氣溶膠后，就能夠受到感染。此外，牛只之間的密切接觸、健康牛只接觸到患病牛只的糞便和分泌物后均有可能感染牛支原體肺炎。因此，牛支原體肺炎在牛群中傳播速度較快，對(duì)肉牛養(yǎng)殖的危害也較大。在養(yǎng)殖過(guò)程中如果發(fā)現(xiàn)患病牛只，需要及時(shí)進(jìn)行隔離和治療，以免牛支原體肺炎在牛群中的傳播。

2 牛支原體肺炎的診斷

牛支原體肺炎在牛群中的傳播速度較快，且危害較大，及時(shí)地對(duì)牛群進(jìn)行診斷并發(fā)現(xiàn)患病牛只是預(yù)防牛支原體肺炎在牛群中快速傳播的基礎(chǔ)。牛支原體肺炎的診斷方法較多，主要方法有血清學(xué)方法、免疫組織化學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。

2.1 血清學(xué)方法

血清學(xué)方法是診斷牛支原體肺炎常用的方法之一，在使用該方法之前需要從疑似感染牛只靜脈采集血液樣本，隨后通過(guò)離心分離出血清，然后采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）或者膠體金免疫層析法進(jìn)行診斷。

ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特征。在ELISA測(cè)定過(guò)程中，牛支原體的抗原會(huì)與樣本中的相應(yīng)抗體結(jié)合，之后加入帶有酶標(biāo)記的第二抗體來(lái)識(shí)別這些復(fù)合物。通過(guò)底物顯色反應(yīng)，可以定量分析出樣本中抗體的濃度，從而判斷待診斷牛是否患有牛支原體肺炎。ELISA適合于大量樣本的精確檢測(cè)，適用于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

膠體金免疫層析法，也是一種快速、簡(jiǎn)便的現(xiàn)場(chǎng)診斷方法。利用膠體金標(biāo)記的抗體與樣本中的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合，在試紙上形成可見(jiàn)的彩色線條，這種方法在幾分鐘內(nèi)即可得出結(jié)論，是一種簡(jiǎn)便快速診斷牛支原體肺炎的方法。

2.2 免疫組織化學(xué)方法

免疫組織化學(xué)方法具有免疫學(xué)方法的特異性和組織學(xué)的可視化的特點(diǎn)，是一種診斷牛支原體肺炎在特定組織中的分布以及病理變化的方法。使用該方法之前需要獲得患病牛組織（通常是患病牛的肺臟），然后通過(guò)甲醛等試劑進(jìn)行固定，隨后做成組織切片，在做組織切片時(shí)需要用血清或者蛋白阻斷劑進(jìn)行處理防止非特異性成分的結(jié)合，隨后將處理好的切片與抗體進(jìn)行孵育，孵育后即可加入特定標(biāo)記物進(jìn)行染色并觀察。通過(guò)該方法的診斷，可以確定患病牛肺臟中牛支原體的具體定位，并推斷該患病牛只的病理變化。

2.3 分子生物學(xué)方法

在分子生物學(xué)方法中，使用較多的是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR），PCR具有專一性高和靈敏度好的特點(diǎn)，是實(shí)驗(yàn)室診斷牛支原體常用的方法。PCR能夠特異性地?cái)U(kuò)增目標(biāo)DNA，即使采集到的血清中牛支原體量少，也能夠通過(guò)PCR將牛支原體特定的DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增，并且該方法與傳統(tǒng)的支原體培養(yǎng)方法相比，時(shí)間上做到了極大縮短，能夠在幾小時(shí)內(nèi)就可以將樣品處理完并且得出結(jié)論。PCR法的操作步驟簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)室人員只需要根據(jù)說(shuō)明書(shū)即可完成所有步驟的操作。隨著實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在也出現(xiàn)了類似于實(shí)時(shí)熒光定量PCR的技術(shù)，這種方法能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)牛支原體序列的擴(kuò)增進(jìn)程，并且定量分析出樣本中牛支原體的含量，從而為牛支原體疾病的監(jiān)控提供了有效的依據(jù)。

3 牛支原體的防控措施

養(yǎng)殖過(guò)程中，疾病以預(yù)防為主，治療為輔。

3.1 牛支原體肺炎的預(yù)防

牛支原體主要通過(guò)氣溶膠進(jìn)行傳播，因此在健康的養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)，保證空氣的清潔十分重要，按時(shí)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行消毒并保證養(yǎng)殖密度，確保牛群處于一種舒適的狀態(tài)。正常情況下肉牛養(yǎng)殖場(chǎng)要做到自繁自養(yǎng)，避免從外部引進(jìn)牛只，如果需要從外界引進(jìn)牛只則需要將引進(jìn)來(lái)的牛進(jìn)行隔離，確保在隔離期間內(nèi)引進(jìn)的牛只不發(fā)病且能夠通過(guò)各種檢查[4]。另外，安全的養(yǎng)牛場(chǎng)需要?jiǎng)澐侄鄠€(gè)分區(qū)，至少將養(yǎng)牛場(chǎng)劃分為生活區(qū)、工作區(qū)、隔離區(qū)和獸醫(yī)區(qū)。在養(yǎng)牛場(chǎng)入口還需要設(shè)立消毒區(qū)，從養(yǎng)牛場(chǎng)外進(jìn)來(lái)的車(chē)輛和人員進(jìn)行消毒才可以 進(jìn)入養(yǎng)牛場(chǎng)，確保養(yǎng)牛場(chǎng)不會(huì)因?yàn)橥饨缫蛩貛?lái)細(xì)菌和病毒。在生產(chǎn)區(qū)內(nèi)，確保養(yǎng)牛場(chǎng)飼料營(yíng)養(yǎng)上的均衡以及飲水上的清潔，保證牛群不會(huì)因?yàn)轱暳虾惋嬎霈F(xiàn)疾病。在養(yǎng)牛場(chǎng)內(nèi)，一旦發(fā)現(xiàn)患病牛只，則需要及時(shí)將患病牛只隔離開(kāi)來(lái)，并且對(duì)其他健康牛進(jìn)行診斷，發(fā)現(xiàn)帶病或者攜帶病原體的牛要及時(shí)進(jìn)行隔離和治療。隔離期間，要注意隔離牛的健康，通過(guò)糞便以及覓食情況判斷隔離牛的恢復(fù)情況，

待恢復(fù)差不多的時(shí)候還需要進(jìn)行診斷，確保隔離牛不再攜帶病原體。

防控牛群患病除了環(huán)境控制以及飼料和飲水外，疫苗接種也是防控牛支原體的最好方法。疫苗的接種可以使牛產(chǎn)生多種抗體，并且牛支原體疫苗已經(jīng)得到了廣泛的研究。有研究表明，給牛注射牛支原體疫苗后，第16天即可檢測(cè)到抗體的存在，且有效抗體可以持續(xù)半年之久[5]。為了研究出更加高效的疫苗，研究人員將牛支原體分離后培養(yǎng)，培養(yǎng)到150代后的牛支原體的毒力已經(jīng)十分微弱，且將培養(yǎng)150代后的牛支原體感染健康牛只，牛不會(huì)產(chǎn)生病癥，且體內(nèi)可以產(chǎn)生有效的抗體，這為牛支原體弱毒疫苗的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)，且表明弱毒疫苗能夠更加有效保護(hù)牛群健康[6]。

3.2 牛支原體肺炎的治療

牛支原體通常不會(huì)導(dǎo)致牛死亡，導(dǎo)致牛產(chǎn)生嚴(yán)重的病因主要是由于病牛在發(fā)病過(guò)程中產(chǎn)生了類似于肺部功能下降而導(dǎo)致的缺氧以及其他繼發(fā)性疾病。因此，治療牛支原體肺炎以去除支原體和細(xì)菌為主，同時(shí)需要進(jìn)行相應(yīng)癥狀的治療。臨床上，泰拉霉素、泰地羅新、恩諾沙星、林可霉素以及替米考星等抗生素均能夠有效治療牛支原體肺炎。以泰拉霉素和泰地羅新為例，在治療時(shí)可按照2.5 mg/kg·bw注射連續(xù)用藥15 d即可；泰地羅新效果好一些，僅需要注射4 mg/kg·bw，且只需要注射一針即可[7]。對(duì)癥治療則需要根據(jù)具體癥狀進(jìn)行有效的治療，對(duì)于發(fā)熱和食欲低的牛，需要喂食一些易于消化的飼料，如優(yōu)質(zhì)干草、稀釋的燕麥粥或是煮熟的玉米面，這些飼料易于消化。避免喂食高纖維以及難以消化的粗飼料，減輕消化系統(tǒng)負(fù)擔(dān)。實(shí)際操作中還可以在飼料中配合一些紅糖以及多添加一些豆粕，這樣可以盡快使牛恢復(fù)體況。對(duì)于腹瀉的牛則可以在飲水或飼料中添加益生菌（如乳酸菌、雙歧桿菌等）和益生元（如菊粉、低聚果糖等可促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)的物質(zhì)），可以幫助恢復(fù)腸道內(nèi)的有益菌群，抑制有害菌生長(zhǎng)，加速腸道黏膜修復(fù)，進(jìn)而控制腹瀉，穩(wěn)定腸道環(huán)境。

4 小結(jié)

我國(guó)作為養(yǎng)殖肉牛的大國(guó)，每年因?yàn)榧膊〉脑驅(qū)е铝酥卮蟮慕?jīng)濟(jì)損失。牛傳染性支原體肺炎作為一種較為廣泛的傳染病，在奶牛、肉牛以及野生牛上廣泛傳播，科學(xué)的飼養(yǎng)以及及時(shí)的診斷隔離和有效的治療能夠降低該疾病對(duì)養(yǎng)牛業(yè)的危害。隨著科學(xué)的發(fā)展以及研究人員的努力，疫苗等有效的防控措施是減少牛支原體肺炎傳播的重要途徑。

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