黃精藥材和黃精片在炮制工藝中的質(zhì)量研究

胡中盛 鄭穎 何娥英

摘要 [目的]以黃精多糖含量為參考指數(shù)，研究黃精藥材和黃精飲片經(jīng)炮制后對黃精中黃精多糖含量的影響，為黃精在實際生產(chǎn)中優(yōu)選出更加合理的炮制工藝。[方法]預試驗采用黃精藥材和黃精片的不同炮制方法進行試驗，得到多組樣品，每個樣品粉粹成細粉，用紫外分光光度法測定黃精多糖的含量，對比得出最適合工廠生產(chǎn)的工藝。再選取潤制時間、燜制時間和蒸制時間為考察因素，每個因素設(shè)3個水平，以黃精多糖含量為指標，采用3因素3水平正交試驗對黃精炮制工藝進行優(yōu)選。最后，用優(yōu)選的炮制工藝進行可驗證性試驗。[結(jié)果]酒黃精飲片的炮制過程中，潤制時間為主要因素。對于浸出物的分析，影響浸出物含量的因素從大到小依次為蒸制時間、潤制時間、燜制時間，即蒸制時間過長，浸出物含量明顯會下降，說明酒黃精飲片在炮制過程中蒸制時間不宜過長。對于黃精多糖的分析，影響黃精多糖含量的因素從大到小依次為潤制時間、燜制時間、蒸制時間，即潤制時間和燜制時間越長，黃精多糖的含量會越來越高。[結(jié)論]該試驗以黃精多糖含量為指標，通過比較，得到黃精飲片加15%的黃酒潤制10 h，蒸制10 h，燜制10 h，取出，干燥，為黃精生產(chǎn)最佳工藝條件且可行性良好。

關(guān)鍵詞 黃精藥材;黃精片;炮制工藝;多糖含量;含量測定

Abstract [Objective]Using polysaccharide content of Polygonatum sibiricum Red as a reference index， the effect of fresh Polygonatum sibiricum Red and Polygonatum sibiricum Red tablets by processing on the content of polysaccharide in Polygonatum from Rhizoma Polygonati was studied， so that a more reasonable processing technology was selected for Polygonatum sibiricum Red.[Methods]The preliminary test uses different processing methods of fresh Polygonatum sibiricum Red and Polygonatum sibiricum Red tablets to obtain multiple groups of samples. Each sample was finely divided into powders. The content of Polygonatum sibiricum polysaccharides was determined by ultraviolet spectrophotometry， and the process most suitable for factory production was compared.Then select the steaming time， run time and stewing time as factors and each factor set three levels，the content of Polygonatum sibiricum polysaccharides was used as an index. The 3 factors and 3 levels orthogonal test was used to optimize the processing of Polygonatum sibiricum.Finally， the optimal processing technology was used to verify the feasibility of the method. [Result]The main factors were the run time in the processing of the decoction pieces of wine. For the analysis of the extract， the factors that affect the content of the extract was steaming time， run time and stewing time， the steaming time was too long， the content of the extract was obviously decreased， which indicated that the steaming time should not be too long. For the analysis of Polygonatum sibiricum polysaccharides，effects of Polygonatum sibiricum polysaccharides content was run time，stewing time and steaming time， run time and stewing time longer， Polygonatum sibiricum polysaccharides content was high. [Conclusion]Polygonatum sibiricum polysaccharides content as the index， by comparison， polygonatum tablets plus 15% of rice wine run of 10 h， steamed 10 hours， 10 hours of stewing， taking out and drying， for Polygonatum optimum technological conditions of production and good feasibility.

Key words Fresh Polygonatum sibiricum Red;Polygonatum sibiricum Red tablet;Processing technology;Polysaccharide content;Content determination

黃精，百合科植物，按其外觀形狀的不同，通常被稱為“姜形黃精”“雞頭黃精”和“大黃精”。黃精歸脾、腎、肺經(jīng)，為滋陰之佳品、補腎之良藥[1]。生品黃精具有一定的麻舌感、容易刺激咽喉，如果不慎將生黃精或其汁液接觸到人體皮膚，將會有強烈的瘙癢感，如果長時間聞黃精的氣味，會出現(xiàn)刺眼的感覺。黃精生品經(jīng)過炮制后，可以減輕它的刺激性和副作用，使之糖性增強，口感良好，利于服用。炮制后的黃精，其藥物的耐藥性產(chǎn)生一定的變化，炮制過后有利于黃精有效成分的累積，黃精中的黏液質(zhì)遭到破損并被清除，使黃精在使用時滋而不膩，在增強黃精藥效的同時，還可以增加其口感。多年的臨床實踐證明，酒制能提升藥物療效，使之同時更好地發(fā)揮補益的功效。黃精多糖具有延緩衰老、調(diào)節(jié)免疫、降低血脂、降低血糖等藥理作用[2-4]。

自古以來，黃精的炮制工藝累計達20多種[5-7]。黃精的最早加工方法見于我國南北朝時期的《雷公炮炙論》[8]，據(jù)雷公炮炙論記載：“以溪水洗凈......，曝干用”。據(jù)唐代《千斤翼方》記載：“揀肥大者，熟蒸，微曝干以蒸，待再曝干，......”，此方法即稱為“重蒸法”。根據(jù)現(xiàn)代黃精炮制研究，取黃精適量，放入鍋內(nèi)，蒸制，以清水沒過黃精，蒸至水沸騰，適時加水，煮至透心;取出，干燥，至6成干，放入蒸籠內(nèi)，蒸約4 h，取出，干燥。如此反復蒸曬多次，將蒸煮液灑在黃精上，拌勻，再蒸，干燥，放置于蔭涼處攤晾。截止至今，仍然沒有針對黃精炮制工藝的詳盡報道。目前炮制工藝分為兩類，一部分是根據(jù)傳統(tǒng)加工方法，另一部分是根據(jù)當?shù)赜盟幜晳T，總而言之全國各地方加工方法沒有統(tǒng)一的要求[9]，大部分都是基于經(jīng)驗，沒有詳細的科學數(shù)據(jù)，藥商和一些加工商基本上都是憑經(jīng)驗掌握，即以大拇指指甲掐入為度，說明蒸或煮到了黃精的適宜程度;或掰開斷面，可以看到近透心時便說明加工到了適宜程度。現(xiàn)如今對黃精炮制前后幾種混合成分的研究，側(cè)重于炮制前后因素指標的對比[10]，由于黃精的炮制工藝研究可信度差、說服力不強、沒有規(guī)范性，所以創(chuàng)建科學規(guī)范可控制的炮制方法、增加黃精藥材的外觀美感與口感勢在必行。通過嚴格控制潤制時間、蒸制時間和燜制時間，對黃精加工過程當中醇浸出物、外觀顏色、黃精多糖的含量、味道的變化進行對比分析，確定黃精最適合的加工方法，不僅體現(xiàn)中藥多成分、多層次的特點，而且對綜合評判黃精炮制工藝方法、控制產(chǎn)品質(zhì)量有研究性意義[11]。

1 材料與方法

1.1 儀器 UV-2450型紫外分光光度計（上?？茖С晝x器有限公司）;SK8200B型超聲清洗儀（上?？茖С晝x器有限公司）;萬能高速粉碎機（上海道紅商貿(mào)有限公司）;DZKW-4電子恒溫水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）;GMSX-280手提式壓力蒸汽滅菌器（北京市光明醫(yī)療儀器有限公司）;GB-T25497分析天平（奧豪素儀器有限公司）;數(shù)控中藥蒸煮鍋（康華制藥機械有限公司）。

1.2 試材 該試驗所用黃精藥材產(chǎn)自貴州，經(jīng)亳州市滬譙藥業(yè)有限公司質(zhì)量負責人高學俠鑒定為百合科植物滇黃精的干燥根莖。D-無水葡萄糖（中國食品藥品檢定研究院）;黃酒（亳州市恒碩發(fā)酵制品有限責任公司）;乙醇（天津四友，一級分析純）;蒽酮（天津市科密歐化學試劑有限公司）;硫酸（國藥化學集團）;水為純化水;其他試劑均為分析純。

1.3 方法

1.3.1 黃精的炮制方法。

1.3.1.1 酒黃精的炮制方法。稱取黃精原藥材2 kg挑選出雜質(zhì)，并清洗干凈，加入黃酒400 g，潤透，置蒸煮容器內(nèi)，蒸至內(nèi)外表面滋潤顯黑色，燜制過夜，取出，曬或烘至外部干燥內(nèi)部濕潤，切制成厚片，然后將蒸制時所得到的湯汁拌入，讓其汁液吸收均勻，取出，干燥，篩去灰屑[12]。

1.3.1.2 酒黃精飲片的炮制方法。取黃精飲片2 kg挑選出雜質(zhì)，并清洗干凈，加入黃酒300 g，潤透，置蒸煮容器內(nèi)，蒸至內(nèi)外表面滋潤顯黑色，燜制過夜，取出，然后將蒸制時所得到的湯汁拌入，曬或晾至外部干燥內(nèi)部濕潤，干燥，篩去灰屑。

1.3.2 浸出物測定。參照《中國藥典》2015年版四部的通則項下熱浸法測定浸出物[1]，包括水溶性浸出物和醇溶性浸出物。

1.3.2.1 水溶性浸出物。取黃精樣品大約4 g，精密稱取，放置于250 mL的具塞錐形瓶中，精密量取水100 mL，密閉，稱定其重量，安靜環(huán)境下放置1 h后，連接回流冷凝裝置，加熱至液體沸騰，并保持微沸騰1 h。放冷后，取下錐形瓶，密閉，再稱定重量，用蒸餾水補足失去的重量，振蕩，搖勻，用干燥過濾器濾過，精密量取過濾液25 mL，置干燥且恒重的蒸發(fā)皿中，放置于水浴鍋上蒸干后，于105 ℃條件下干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，快速精密稱定其重量[1]。

1.3.2.2 醇溶性浸出物。按照“1.3.2.1”項下的水溶性浸出物測定法測定。用稀乙醇代替水作溶劑。

1.3.3 溶液的制備。

1.3.3.1 對照品溶液的制備。取經(jīng)過105 ℃干燥至恒重的無水葡萄糖對照品33 mg，精密稱定，置100 mL量筒中，加水，溶解，稀釋至刻度，振蕩，搖勻，即得每1 mL中含無水葡萄糖0.33 mg[1]。

1.3.3.2 酒黃精樣品溶液的制備。取酒黃精樣品細粉0.25 g，精密稱定，置250 mL圓底燒瓶中，加80%乙醇溶液150 mL，置水浴中加熱回流1 h，趁熱過濾，過濾剩余的殘渣用80%熱乙醇洗滌3次，每次10 mL，將殘渣及濾紙置燒瓶中，加水150 mL，置沸水浴中加熱回流1 h，趁熱過濾，第二次過濾的殘渣及燒瓶用熱水洗滌4次，每次10 mL，合并濾液與洗液，冷卻，轉(zhuǎn)移至250 mL容量瓶中，加水至刻度，振蕩，搖勻，即得[1]。

1.3.3.3 酒黃精飲片樣品溶液的制備。精密稱取酒黃精飲片樣品細粉0.25 g，其余操作同“1.3.3.2”項下，制備得到酒黃精飲片樣品溶液。

1.3.3.4 0.2%蒽酮-硫酸試液的配制。稱取約0.20 g蒽酮，加入100 mL硫酸溶液，放置于棕色瓶中，搖勻后放于冰箱中（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

1.3.4 方法學考察。

1.3.4.1 標準曲線的繪制。精密量取對照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL，分別放置于10 mL具塞刻度試管中，分別加水至2.0 mL，振蕩，搖勻，在冰水浴中緩緩滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，混勻，放冷后置水浴鍋中保溫10 min，取出，立即放置于冰水浴中再冷卻10 min，取出，以蒸餾水作為空白試驗，在582 nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標、對照品濃度為橫坐標繪制標準曲線，確定線性范圍[1]。

1.3.4.2 精密度試驗。精密吸取對照品溶液1.0 mL，置于具塞試管中，其余操作同“1.3.4.1”，于582 nm處測定吸光度，連續(xù)測定6次，計算RSD值，要求該值小于3%。

1.3.4.3 重復性試驗。平行稱取酒黃精樣品和酒黃精飲片樣品各6份，按“1.3.3.2”和“1.3.3.3”方法制備樣品溶液，測定其吸光度，計算RSD值，要求該值小于3%。

1.3.4.4 穩(wěn)定性試驗。取酒黃精樣品和酒黃精飲片樣品，按照“1.3.3.2”和“1.3.3.3”方法制備樣品溶液，分別于10 min、30 min、1 h、2 h、3 h測定吸光度，計算RSD值，要求該值小于3%。

1.3.4.5 加樣回收率試驗。取已知黃精多糖含量為18.1%的黃精飲片藥材粉末約0.3 g，平行5份，加入無水葡萄糖1 mL，合0.33 mg，精密稱定，按照“1.3.3.2”和“1.3.3.3”方法制備供試品溶液，按紫外分光光度計法測定供試品溶液黃精多糖含量，計算加樣回收率和RSD。

1.3.5 單因素試驗。

1.3.5.1 酒潤方法?？疾炀茲櫡ㄖ胁煌泳屏亢蜐欀茣r間對藥材性狀的影響，分別稱取黃精原藥材和黃精飲片約100 g，加酒量為5%、10%、15%、20%，分別潤制8、10、12、16 h，觀察藥材性狀。

1.3.5.2 蒸法?？疾煺舴ㄖ姓糁茣r間對藥材性狀的影響，分別稱取黃精原藥材和黃精飲片約100 g，將水燒開后再放藥材，分別蒸6、8、10、12 h，觀察藥材性狀。

1.3.5.3 蒸制次數(shù)?？疾煺舴ㄖ姓糁拼螖?shù)對藥材性狀的影響，分別稱取酒黃精原藥材和酒黃精飲片藥材約100 g，分別蒸制2、3、4、5次，觀察藥材性狀。

1.3.6 正交試驗。根據(jù)初步的測試結(jié)果，以及《中國藥典》和各省市炮制規(guī)范，確定以燜制時間、蒸制時間、潤制時間為考察因素（黃精藥材黃酒用量為20%，黃精飲片黃酒用量為15%），每個因素3個水平，因素水平見表1～2。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法學考察

2.1.1 標準曲線的繪制。按照“1.3.4.1”方法操作，以吸光度為縱坐標、對照品濃度為橫坐標繪制標準曲線，得葡萄糖的回歸方程為Y=0.059 21x+0.050 33（r=0.996），表明葡萄糖含量在19.44～32.40 μg有良好的線性關(guān)系。

2.1.2 精密度試驗。按照“1.3.4.2”方法操作，計算得出RSD為1.61%，表明儀器精密度良好，符合含量測定要求。

2.1.3 重復性試驗。按照“1.3.4.3”方法操作，測得酒黃精樣品的RSD為1.27%，酒黃精飲片樣品的RSD為0.77%，表明該方法重復性良好。

2.1.4 穩(wěn)定性試驗。按照“1.3.4.4”方法操作，測得酒黃精樣品的RSD為1.59%，酒黃精飲片樣品的RSD為1.54%，表明該樣品溶液在3 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.1.5 加樣回收率試驗。由表3可知，葡萄糖的平均加樣回收率為98.4%，RSD為0.77%，表明該方法回收率較好，方法可行。

2.2 單因素試驗

2.2.1 酒潤方法。由表4可知，加酒量為5%時藥材中間一直有干心;加酒量為10%、潤制16 h時藥透無干心;加酒量為20%時，藥材潤制12 h藥透。因此，黃精原藥材的酒潤法初步選用加酒量20%、潤制時間12 h的工藝。

由表5可知，加酒量為5%時黃精飲片中間一直有干心;加酒量為10%、潤制16 h時藥透無干心;加酒量為15%時，藥材潤制10 h藥透;加酒量為20%時，藥材潤制12 h藥透。因此，黃精飲片的酒潤法初步選用加酒量15%、潤制時間10 h的工藝。

2.2.2 蒸法。對黃精原藥材和飲片分別蒸6、8、10、12 h，觀察原藥材性狀分別出現(xiàn)6 h稍硬、8 h略硬、10 h部分略硬、12 h 軟硬適當，因此選擇黃精原藥材蒸制時間為12 h。觀察飲片性狀分別出現(xiàn)6 h稍硬、8 h軟硬適當、10 h過軟、12 h過軟，因此選擇黃精飲片蒸制時間為8 h。

2.2.3 蒸制次數(shù)。分別稱取酒黃精原藥材和酒黃精飲片藥材約100 g，分別蒸制2、3、4、5次，觀察原藥材性狀分別出現(xiàn)蒸2次蒸制不完全、3次有殘留黃酒、4次蒸制完全、5次蒸制完全，飲片2次蒸制不完全、3次蒸制完全、4次蒸制完全、5次過黏，因此選擇酒黃精原藥材在反復蒸制4次可蒸制完全，酒黃精飲片在反復蒸制3次即可蒸制完全。

對比3組單因素試驗，考慮到大生產(chǎn)中的生產(chǎn)成本和生產(chǎn)效率等諸多因素，在實際生產(chǎn)中可考慮選用黃精飲片進行生產(chǎn)，可節(jié)省成本和時間。

2.3 正交試驗

2.3.1 酒黃精的正交試驗。從表6可以看出，在酒黃精的炮制過程中，燜制時間可視為主要因素。對于浸出物的研究可知，浸出物的含量隨著燜制的時間延長而增高，但是如果蒸制時間過短，則會影響浸出物含量。對于黃精多糖的研究可知，黃精多糖含量的影響因素從大到小依次為C、A、B，即燜制時間越長，黃精多糖的含量越高。因此由以上各個數(shù)據(jù)分析可得，酒黃精的最佳炮制工藝為A2B3C3，即黃精藥材除去雜質(zhì)后洗凈，加20%的黃酒拌勻潤制12 h，蒸制12 h，再燜制14 h，取出，干燥，切制成厚片。