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    逆轉(zhuǎn)錄

    • 艾滋病毒的耐藥性
      70萬人接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療。艾滋病毒耐藥性可能影響抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物在降低艾滋病毒發(fā)病率以及與艾滋病毒相關(guān)的發(fā)病率和死亡率方面的有效性。在向世衛(wèi)組織報告的30項調(diào)查中,有21項調(diào)查數(shù)據(jù)顯示,在開始接受一線抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的人群中,對奈韋拉平或依法韋倫的治療前艾滋病毒耐藥性達(dá)到了10%以上。在先前使用過抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物的人群中,對非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑類藥物的治療前艾滋病毒耐藥性通常高達(dá)3倍。在感染了艾滋病毒的母親所生的嬰兒中,有近一半的嬰兒對一種或多種非核苷

      家庭醫(yī)學(xué) 2023年12期2023-07-13

    • 病毒蛋白調(diào)控逆轉(zhuǎn)錄元件Ⅰ型長彌散核元件活性的影響及其意義
      130061逆轉(zhuǎn)錄元件(retroelements)又稱逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子(retrotransposons),是一類非常特殊的 DNA 元件[1]。這些元件可以經(jīng)由DNA 到RNA 再到DNA 的方式實現(xiàn)自身的復(fù)制,以擴(kuò)增基因組DNA 上的拷貝數(shù)。這些逆轉(zhuǎn)錄元件在細(xì)胞內(nèi)的拷貝數(shù)非常巨大,以一個人二倍體細(xì)胞為例,各種逆轉(zhuǎn)錄元件占據(jù)基因組DNA全部長度的40%以上。這些逆轉(zhuǎn)錄元件得以擁有大量拷貝數(shù)的一個原因是其在細(xì)胞中長期存在。一方面,逆轉(zhuǎn)錄元件被發(fā)現(xiàn)在動物、植

      中國生物制品學(xué)雜志 2023年1期2023-01-30

    • 艾滋病患者抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療依從性現(xiàn)狀及其影響因素分析
      案為高效聯(lián)合抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療,能夠有效阻止病毒復(fù)制,但該藥物無法徹底清除病毒,停藥后病毒會再次復(fù)制,因此患者需長期按照醫(yī)囑用藥,用藥依從性對治療效果有重要影響[2]。相關(guān)研究顯示,若想獲得理想的治療效果,患者服藥依從性應(yīng)超過95%以上,但受各方面因素影響,部分患者無法達(dá)到,甚至不足50%,導(dǎo)致整體效果無法達(dá)到臨床預(yù)期[3]。鑒于此,本研究進(jìn)一步探討艾滋病患者抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療依從性現(xiàn)狀及其影響因素。現(xiàn)總結(jié)如下。1 資料與方法1.1 一般資料:回顧性分析201

      哈爾濱醫(yī)藥 2022年5期2022-12-09

    • 妊娠期抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療后CD4應(yīng)答水平與乙型肝炎宮內(nèi)感染率的相關(guān)性
      18112)抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥是一類治療逆轉(zhuǎn)錄病毒(主要HIV)感染的藥物。聯(lián)合使用幾種(通常是三種或四種)抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物被稱為高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療[1]。臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn),使用該藥物還會降低肝炎的傳播率。CD4細(xì)胞作為人體免疫系統(tǒng)中最重要的免疫細(xì)胞,當(dāng)患者感染乙型肝炎(乙肝)后,病毒就會附著在CD4細(xì)胞上并開始攻擊復(fù)制,因此CD4細(xì)胞大量被破壞,導(dǎo)致患者免疫功能損傷[1-2]。本研究即探究妊娠期抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療后CD4應(yīng)答水平與乙肝宮內(nèi)感染率的關(guān)系,以期為臨

      吉林醫(yī)學(xué) 2022年5期2022-07-08

    • 新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒中酶的性能比較研究
      域[1?6]。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription,RT-PCR)是將RNA的逆轉(zhuǎn)錄和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增相結(jié)合的技術(shù)[7?9]。由于兩個反應(yīng)之間無需額外的開蓋和緩沖液更換操作,實現(xiàn)了核糖核酸的一步法檢測,具有可降低污染風(fēng)險、提高檢測速度、節(jié)省耗材、適用于高通量測定等優(yōu)點,進(jìn)一步推動了PCR技術(shù)基礎(chǔ)的革新。2019年,新型冠狀病毒肺炎(coronavius disease 2019,COVID-19)疫情爆發(fā)后,我國衛(wèi)生健康

      生物技術(shù)進(jìn)展 2021年6期2021-12-01

    • 消滅HIV 潛在治療靶點終找到
      主流療法——抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法雖能夠讓患者長期健康地生活,卻不能治愈他們,HIV 會在患者體內(nèi)“潛伏”下來,如果患者停止治療,病毒會重新醒來并迅速繁殖。長久以來,找到徹底消滅患者體內(nèi)所有HIV 的方法一直是科學(xué)家們努力的方向。在該項新研究中,研究人員首次對艾滋病病毒1 型(HIV-1)感染的單核細(xì)胞衍生巨噬細(xì)胞中的lncRNA 進(jìn)行了全基因組表達(dá)分析。他們發(fā)現(xiàn),一個被稱為HIV-1 增強(qiáng)型lncRNA(HEAL)的lncRNA,是多種HIV-1 毒株的“增強(qiáng)

      醫(yī)藥前沿 2020年7期2020-12-05

    • 有望長效治療艾滋病的候選藥誕生
      種全新的長效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物,展現(xiàn)出治療HIV(人類免疫缺陷病毒)感染的潛力。初步臨床研究顯示,HIV 感染者單劑注射這種藥物后,體內(nèi)的病毒載量減少了,并且藥物在注射6 個多月后在體內(nèi)仍保持活性?,F(xiàn)階段,全人類針對艾滋病(AIDS)的治療主要依賴高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法。HIV 是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,其逆轉(zhuǎn)錄過程是在病毒逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下完成的。而人類采取的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療,正是將HIV 感染從一種致命的疾病轉(zhuǎn)化成一種可控的慢性疾病。不過,這也意味著艾滋病病人需要每

      醫(yī)藥前沿 2020年24期2020-12-02

    • 第三例艾滋病治愈者真的出現(xiàn)了?
      。該患者采用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法結(jié)合煙酰胺(一種維生素B3),自停藥66周以來,他的血液中沒有檢測到HIV病毒,血液中的抗體濃度也非常低。值得關(guān)注? 停藥66周未反彈“若是真如相關(guān)報道所言,‘圣保羅病人在停藥后66周內(nèi)未見反彈,那確實是一件值得關(guān)注的事?!鼻迦A大學(xué)艾滋病綜合研究中心主任張林琦表示,以往大多數(shù)通過抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療的患者,其體內(nèi)的HIV病毒通常會在停藥幾周內(nèi)迅速恢復(fù)到高水平。抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法也稱“雞尾酒療法”,就如同多種酒或飲品混合制成雞尾酒一

      發(fā)明與創(chuàng)新·大科技 2020年10期2020-11-02

    • 小菜蛾基因組中內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒元件PxERV的發(fā)現(xiàn)與特征分析
      002)內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(endogenous retroviruses,ERVs)被認(rèn)為是生物進(jìn)化過程中外源逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主基因組中的殘余序列,能夠整合進(jìn)宿主生殖系統(tǒng),所以在宿主基因組中世代存留(L?weretal.,1996)。內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組兩端有與外源逆轉(zhuǎn)錄病毒類似的長末端重復(fù)序列(long terminal repeat sequence,LTRs),中間有1~3個主要的開放閱讀框(gag,pol和env)編碼病毒復(fù)制所需的結(jié)構(gòu)和功能蛋白:

      昆蟲學(xué)報 2020年7期2020-10-10

    • 櫛孔扇貝LTR逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的基因組分布特征及時空表達(dá)模式分析*
      轉(zhuǎn)座子又被稱為逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子,這種轉(zhuǎn)座方式會直接影響基因組的大小。逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子根據(jù)結(jié)構(gòu)的不同分為LTR逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子和非常末端重復(fù)序列(non-LTR)逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子。LTR逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子是真核生物基因組最為豐富的組成成分之一[3]。LTR逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子一般包括五個不同的亞家族——Ty1-copia、PAO、DIRS、Ty-3 Gypsy和ERV(vertebrate retrovirus),它們廣泛分布于動物和植物基因組中[4]。LTR逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子結(jié)構(gòu)與逆轉(zhuǎn)錄病毒

      中國海洋大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2020年10期2020-09-17

    • 艾滋病抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療依從性的影響因素分析及護(hù)理對策
      法,高效聯(lián)合抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療是目前認(rèn)為對艾滋病最有效的治療方法[1]。研究指出,治療效果與服藥依從性存在密切關(guān)系,需要感染者長期堅持治療,想要確???span id="j5i0abt0b" class="hl">逆轉(zhuǎn)錄病毒的治療效果,服藥依從性至少保持在95%以上[2],但受多種因素的影響,部分艾滋病患者依從性低,導(dǎo)致治療效果差[3]。本研究通過分析艾滋病抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療資料,探討影響因素及護(hù)理對策,現(xiàn)報道如下。1 資料與方法1.1 一般資料 選取2018年1—12月我院診治的220例經(jīng)HIV抗體、機(jī)體免疫功能檢查確診

      護(hù)理實踐與研究 2020年13期2020-07-25

    • 酵母Ty1和Ty3轉(zhuǎn)座調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展
      反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子是逆轉(zhuǎn)錄病毒進(jìn)化的祖先[1]。反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子在RNA介導(dǎo)下,通過“復(fù)制粘貼”的方式進(jìn)行轉(zhuǎn)座,它們廣泛存在于真核生物界,在許多真核生物基因組中占很大一部分[2]。反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子在宿主基因組的重組和進(jìn)化中發(fā)揮著有益的作用,但也會導(dǎo)致基因突變和插入失活,從而產(chǎn)生多種遺傳病[3]。依據(jù)蛋白酶結(jié)構(gòu)域排列的順序不同, LTR反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子分為Ty1-copia和Ty3-gypsy兩個超家族。在釀酒酵母基因組中發(fā)現(xiàn)有5種酵母長末端重復(fù)轉(zhuǎn)座子(Transpon ye

      微生物學(xué)雜志 2020年2期2020-06-16

    • 逆轉(zhuǎn)錄過程對豬繁殖與呼吸綜合征病毒定量檢測的影響
      測,通常需要在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,將RNA分子逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,從而進(jìn)行擴(kuò)增定量。因此,逆轉(zhuǎn)錄過程是RNA分子定量檢測的關(guān)鍵步驟。本研究利用建立的逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR定量檢測方法,分析了不同逆轉(zhuǎn)錄試劑盒產(chǎn)品對PRRSV定量結(jié)果的影響。1 材料和方法1.1 病毒和試劑 HP-PRRSV毒株HuN4及PRRSV毒株CH-1a為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供。病毒RNA提取試劑盒(QIAamp Viral RNA Mini Kit)及QuantiTect Rev

      中國動物傳染病學(xué)報 2020年2期2020-04-02

    • 第三例艾滋病治愈者真的出現(xiàn)了?
      。該患者采用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法結(jié)合煙酰胺(一種維生素B3),自停藥66周以來,他的血液中沒有檢測到HIV病毒,血液中的抗體濃度也非常低。值得關(guān)注 停藥66周未反彈“若是真如相關(guān)報道所言,‘圣保羅病人’在停藥后66周內(nèi)未見反彈,那確實是一件值得關(guān)注的事。”清華大學(xué)艾滋病綜合研究中心主任張林琦表示,以往大多數(shù)通過抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療的患者,其體內(nèi)的HIV病毒通常會在停藥幾周內(nèi)迅速恢復(fù)到高水平。抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法也稱“雞尾酒療法”,就如同多種酒或飲品混合制成雞尾酒一

      發(fā)明與創(chuàng)新 2020年37期2020-02-24

    • 艾滋病應(yīng)用高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法的治療效果和耐藥情況分析
      近年來,高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法逐漸開始字艾滋病的臨床中應(yīng)用[1-2]。本研究以2016年12月至2018年2月我院收治的128例艾滋病患者為研究對象,分析對艾滋病患者應(yīng)用高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法進(jìn)行治療的治療效果,報道如下。1 資料與方法1.1 一般資料:抽取2016年12月至2018年2月在我院就診的128例艾滋病患者,將其隨機(jī)分為研究組和對照組,每組各64例。對照組患者中,38例患者為男性,26例患者為女性,患者年齡最小33歲,最大52歲,平均年齡為(42.

      中國醫(yī)藥指南 2019年24期2019-09-20

    • 聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃器:抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法能阻止HIV傳播
      者接受有效的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療時,不會發(fā)生HIV傳播。這項研究招募了近1 000名男同性戀伴侶,其中一名伴侶感染了HIV而另一名沒有。研究表明,HIV感染者在接受有效的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法從而使病毒載量受到抑制時,沒有發(fā)生病毒傳播。聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃署執(zhí)行主任西迪貝表示:“這是個好消息。HIV感染者現(xiàn)在可以確信,如果他們定期接受治療并抑制病毒載量,他們就沒有傳染性。這提供了一個強(qiáng)有力的積極信息,有助于減少HIV引起的恥辱感,提高感染者的自尊心和自信心?!痹谶@項為期

      家庭醫(yī)學(xué) 2019年6期2019-06-27

    • 哈獸研發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄病毒拮抗 HIV限制性因子的新機(jī)制
      鄭永輝研究員在逆轉(zhuǎn)錄病毒拮抗艾滋病病毒宿主限制因子的研究中取得新進(jìn)展,相關(guān)研究成果發(fā)表在《生物化學(xué)雜志(Journal of biological chemistry)》上。絲氨酸整合蛋白5(Ser5)是新近發(fā)現(xiàn)的天然免疫分子,其能夠阻止艾滋病病毒對靶細(xì)胞的侵入。而Ser5的這一功能卻被三個結(jié)構(gòu)上完全不相關(guān)的逆轉(zhuǎn)錄病毒附屬蛋——艾滋病病毒的Nef蛋白、鼠白血病病毒的glycoMA蛋白以及馬傳染性貧血病毒的S2蛋白所拮抗。然而,涉及到的分子機(jī)制目前仍不完全清

      家禽科學(xué) 2019年5期2019-06-11

    • 神經(jīng)系統(tǒng)中LINE-1轉(zhuǎn)座的研究進(jìn)展
      NE-1)屬于逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子,至今仍在人類基因組中保留自主轉(zhuǎn)座的活性,并在基因組中占有很高的比例,其頻繁轉(zhuǎn)座會引起基因組不穩(wěn)定,導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。通常宿主細(xì)胞運用多種機(jī)制對其轉(zhuǎn)座進(jìn)行嚴(yán)格控制,所以LINE-1在大多數(shù)體細(xì)胞中是無活性的,然而近年來有研究證實在神經(jīng)元細(xì)胞中LINE-1可以表達(dá)并轉(zhuǎn)座,插入基因組的不同位置,導(dǎo)致每個神經(jīng)元細(xì)胞在基因水平上都是獨特的。此外,LINE-1的轉(zhuǎn)座可能在長期記憶等方面具有一定生理學(xué)意義,也有可能產(chǎn)生一些病理影響。希望本文能對

      中國醫(yī)藥導(dǎo)報 2019年5期2019-04-28

    • 去甲基化酶在腫瘤中的致病機(jī)理獲得揭示
      轉(zhuǎn)座子,又稱為逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子, 是以 RNA 為媒介進(jìn)行轉(zhuǎn)座的,其復(fù)制方式通常被形容為“復(fù)制-粘貼”模式,即首先通過轉(zhuǎn)錄合成 RNA中間體,再以該 RNA 為模板逆轉(zhuǎn)錄合成 DNA 整合入基因組其他位置。近年的研究表明,逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子在腫瘤組織中拷貝數(shù)增加,而且更活躍,但是其調(diào)控機(jī)制和生物學(xué)功能尚未很清楚。組蛋白去甲基化酶KDM4B是一個逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子LINE-1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,并驅(qū)動進(jìn)化上年輕的LINE-1在基因組中的跳躍,引起 DNA損傷以及基因組的不穩(wěn)定,

      醫(yī)藥前沿 2019年12期2019-01-05

    • 藥物聯(lián)用療法有望延緩艾滋病病毒反彈
      現(xiàn)有的“抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法”無法治愈艾滋病,原因是艾滋病病毒(HIV)會“潛伏”在細(xì)胞的“病毒庫”中。美國研究人員發(fā)現(xiàn),兩種藥物聯(lián)用有望延緩“抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法”停止后的病毒反彈。發(fā)表在英國《自然》雜志上的一項研究顯示,將靶向HIV的抗體與先天免疫系統(tǒng)刺激劑聯(lián)用,可延緩或改善獼猴體內(nèi)的病毒反彈。研究人員讓44只獼猴感染“SHIV”、即結(jié)合了部分“SIV”(猴免疫缺陷病毒)和“HIV”(人類艾滋病病毒)基因組的病毒,并在感染一周后開始進(jìn)行130周的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治

      醫(yī)藥前沿 2019年7期2019-01-05

    • 重組質(zhì)粒pGEM-HERV-K gag的構(gòu)建與鑒定
      率。人類內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(Human endogenous retrovirus sequences,HERVs)普遍存在于人類染色體中,是與逆轉(zhuǎn)錄病毒同源的DNA序列[1],約占人類基因組的8%[2]。近年來很多研究表明,HERVs基因的活化與多種疾病相關(guān)[3-4],包括與白血病[5]、乳腺癌[6]、1型糖尿病[7-8]等。本實驗通過分離人外周血單核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),選擇HERV-K基

      西南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2018年5期2018-11-24

    • 2018年3月FDA批準(zhǔn)新藥概況
      準(zhǔn)用于與其他抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物聯(lián)合使用治療多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療后產(chǎn)生多重耐藥的人類免疫缺陷病毒-1(MDR HIV-1)感染的成年患者。Trogarzo是一種人源化免疫球蛋白G4單克隆抗體,它與CD4細(xì)胞受體的第二個胞外區(qū)域結(jié)合,阻止HIV病毒入侵這些細(xì)胞,但不同于市面上已經(jīng)使用過的藥物的其他結(jié)合位點。這種藥物的出現(xiàn)可以讓那些對目前自己治療方案耐藥的患者在接觸到致命數(shù)量的病毒之前,將其加入到治療方案。Trogarzo為10多年來首款具有全新作用機(jī)制的抗逆

      上海醫(yī)藥 2018年19期2018-10-24

    • 新型HIV藥物Trogarzo獲FDA批準(zhǔn)用于治療選擇有限的患者
      美國公司新型抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物Trogarzo(ibalizumab-uiyk)用于治療HIV,適用于既往嘗試過多種HIV藥物(高強(qiáng)度治療經(jīng)歷)的成人患者及HIV感染不能以目前可用療法(耐多藥HIV,或MDR HIV)治療的患者。Trogarzo以靜脈注射使用,由經(jīng)過培訓(xùn)的醫(yī)學(xué)專業(yè)人員每14天注射一次,注射時與其他抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物一起使用?!半m然大多數(shù)HIV患者通過聯(lián)合使用兩種或更多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物可得到成功治療,但有少部分患者過去服用多種HIV藥物后會產(chǎn)

      首都食品與醫(yī)藥 2018年15期2018-03-19

    • 研究人員開發(fā)長效可注射的抗HIV藥
      達(dá)至少一個月。逆轉(zhuǎn)錄病毒治療將HIV感染從一種致命病狀轉(zhuǎn)化成一種可控的慢性疾病。然而,這就意味著病人需要每天注射藥物,對其產(chǎn)生依賴,這有可能導(dǎo)致抗藥性HIV病毒的產(chǎn)生。不需要如此高頻率注射的藥物(比如每周、每月或每兩個月一次)或許是更受歡迎的替代療法。美國奧馬哈內(nèi)布拉斯加大學(xué)醫(yī)學(xué)中心的Howard Gendelman和同事在化學(xué)結(jié)構(gòu)上修飾了度魯特韋(一種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥)。他們在度魯特韋上添加一個長碳鏈,并將前體藥物(一種不活潑化合物,通過新陳代謝可產(chǎn)生一種

      醫(yī)藥前沿 2018年17期2018-01-16

    • 鯉春病毒血癥病毒逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(RT—LAMP)檢測方法的建立
      立了SVCV的逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(RT-LAMP)檢測方法。結(jié)果表明,本方法可在64℃下1h內(nèi)實現(xiàn)目標(biāo)核酸區(qū)段的大量擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳呈現(xiàn)梯形條帶,反應(yīng)體系中添加SYBR Green I熒光染料后,綠色陽性結(jié)果明顯區(qū)別于橙色陰性結(jié)果。該檢測體系具有極高的特異性,只能檢測到目標(biāo)病毒,與草魚呼腸孤病毒(GCRV)和斑點叉尾鮰呼腸孤病毒(CCRV)無交叉反應(yīng),其靈敏度比RT-PCR高100倍。本研究建立的檢測方法靈敏度及特異性高,且不需要昂貴儀器設(shè)備,為

      武昌理工學(xué)院學(xué)報 2017年1期2017-05-11

    • 扶正排毒Ⅰ號聯(lián)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療艾滋病臨床效果觀察
      聯(lián)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療艾滋病臨床效果觀察劉衛(wèi)東,賈江波(山西省大同市第四人民醫(yī)院,山西 大同 037008)目的觀察扶正排毒Ⅰ號聯(lián)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療艾滋病臨床效果。方法選擇2011年1月~2016年12月我院收治的艾滋病患者126例作為研究對象,采用隨機(jī)信封法將其分成研究組(n=63)與對照組(n=63),對照組給予高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療,研究組給予扶正排毒Ⅰ號聯(lián)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療,對比兩組患者臨床治療有效率。結(jié)果研究組臨床治療有效

      臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)雜志(電子版) 2017年50期2017-03-07

    • 辣椒Ty3-gypsy逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄酶序列的克隆及分析
      3-gypsy逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄酶序列的克隆及分析李寧,楊生保,楊濤,王柏柯,唐亞萍,王強(qiáng),帕提古麗·艾斯木托拉,余慶輝(新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝作物研究所,烏魯木齊 830091)【目的】從辣椒基因組中克隆Ty3-gypsy逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄酶序列,分析其家族特性及進(jìn)化關(guān)系?!痉椒ā扛鶕?jù)Ty3-gypsy逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄酶保守區(qū)域設(shè)計簡并引物,通過PCR擴(kuò)增、回收、克隆、測序得到的目的基因序列。【結(jié)果】克隆從辣椒基因組14條逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄酶序列,序列大小

      新疆農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年12期2017-01-09

    • Evaluation and integration of normalization approaches and internal reference genes in real-time quantitative reverse transcription PCR in liver tissues of db/db mice*
      肝臟中實時定量逆轉(zhuǎn)錄PCR內(nèi)參照基因及標(biāo)準(zhǔn)化方法的評估與整合李開濟(jì), 田增有, 田景瑞, 門秀麗, 吳 靜△(華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)系,河北省慢性疾病重點實驗室,唐山市慢性病臨床基礎(chǔ)研究重點實驗室,河北 唐山 063000)目的:實時定量逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-qPCR)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)化對于保證最終結(jié)果的準(zhǔn)確性尤其重要。常用的標(biāo)準(zhǔn)化方法包括用加入的核酸量校正(ΔCt法)、用單個內(nèi)參照基因校正(ΔΔCt法)和用統(tǒng)計學(xué)軟件計算多個內(nèi)參照基因的幾何平均值進(jìn)行校

      中國病理生理雜志 2016年11期2016-12-26

    • 病毒讓人類更聰明?
      人類內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(ERVs)基因約占整個人類基因組的5%,在幾百萬年前感染人類并被整合到人類基因組中,卻一直被認(rèn)為是進(jìn)化殘余,故被稱為垃圾基因。而瑞典隆德大學(xué)的約翰·杰克博森及其團(tuán)隊最近的一項研究表明它們并非毫無價值:病毒在搭建人類大腦特有的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)中扮演著重要的角色,似乎讓人類更聰明。研究人員在人類大腦的神經(jīng)祖細(xì)胞中進(jìn)行了探究,他們用特定的阻遏物來控制ERVs的激活或沉默。結(jié)果顯示,神經(jīng)祖細(xì)胞中ERVs的激活會影響其附近基因的表達(dá)水平。此外,ERVs

      奧秘 2016年11期2016-12-17

    • 南非要在2030年努力結(jié)束艾滋病流行
      nce封面:抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物的研發(fā),南非力爭在2030年消除艾滋病。Science雜志第6294期封面文章報道南非全國對艾滋病的抗?fàn)?。目前,南非統(tǒng)計數(shù)字顯示有六百六十萬人感染HIV(Human Immunodeficiency Virus)病毒,是世界上感染艾滋病最多的國家。其中,約有一半感染者接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒(ARV)的治療,這對國家的醫(yī)療體系產(chǎn)生巨大的壓力。HIV通過破壞人體的T淋巴細(xì)胞,進(jìn)而阻斷細(xì)胞免疫和體液免疫過程,導(dǎo)致免疫系統(tǒng)癱瘓,從而致使各種疾

      科學(xué)中國人 2016年9期2016-11-04

    • 2014年廣州新塘地區(qū)手足口病病原體基因檢測結(jié)果分析
      法采用實時熒光逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法對臨床診斷為手足口病的患兒進(jìn)行柯薩奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CoxA16)、腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)及腸道病毒(enterovirus,EV)基因檢測。結(jié)果病毒核酸陽性率為28.48%(1 225/4 301),其中CoxA16 占20.73%(25

      分子診斷與治療雜志 2016年3期2016-07-13

    • 高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療艾滋病患者的臨床療效及不良反應(yīng)觀察
      觀察評價高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療(HAART治療)對艾滋病的療效,為抗病毒治療的改善提供依據(jù)。方法 采集艾滋病患者80例進(jìn)行高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療,定期隨訪截止于2015年10月。分析評價高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒經(jīng)治療后,對藥物不良反應(yīng)發(fā)生進(jìn)行觀察。結(jié)果 患者中末梢神經(jīng)炎(6.20%)在治療后3、5、6、8個月出現(xiàn);肝毒性(11.13%)在治療后(3.3±2.1)個月發(fā)生;骨髓抑制(12.42%)在治療后(3.4±2.0)個月發(fā)生;脂肪萎縮(1.28%)在治療后12個月

      當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2016年6期2016-06-13

    • 外周循環(huán)血微小RNA表達(dá)水平與冠心病發(fā)病風(fēng)險的關(guān)聯(lián)分析
      冠狀動脈疾??;逆轉(zhuǎn)錄;實時定量聚合酶鏈反應(yīng);Gensini評分微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是一類高度保守的內(nèi)源性小分子單鏈非編碼RNA,幾乎存在于所有真核微生物中[1]。其可通過與特定靶基因mRNA的3′端非翻譯區(qū)互補(bǔ)性結(jié)合促使其降解或抑制其翻譯,從而在轉(zhuǎn)錄后水平對基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控[2]。研究發(fā)現(xiàn)外周循環(huán)血中存在miRNAs,作為調(diào)節(jié)因子在心臟發(fā)育、血管發(fā)育和血管再生中起著重要作用[3]。目前在人類基因組中已發(fā)現(xiàn)約800種miRNAs,

      中國心血管雜志 2016年2期2016-06-04

    • 逆轉(zhuǎn)錄病毒和逆轉(zhuǎn)錄酶簡介
      ”一節(jié)中提到了逆轉(zhuǎn)錄酶。有少部分教師和相當(dāng)一部分學(xué)生對逆轉(zhuǎn)錄酶的來源與合成、逆轉(zhuǎn)錄的過程和病毒致癌因子的致癌機(jī)理不是十分清楚。筆者查閱了相關(guān)的資料,將逆轉(zhuǎn)錄病毒和逆轉(zhuǎn)錄酶的主要知識整理如下。1逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)及性質(zhì)1970年,H.M. Temin和S. Mizutani及D. Baltimore分別從致癌RNA病毒中發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶。逆轉(zhuǎn)錄酶是一種多功能酶,它兼有三種酶的活力:①用RNA作模板,合成一條互補(bǔ)的DNA鏈,形成RNA-DNA雜種分子(RNA指導(dǎo)的D

      生物學(xué)教學(xué) 2016年3期2016-04-10

    • 白細(xì)胞介素2和6對肝癌細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮生長因子D的調(diào)節(jié)
      進(jìn)行刺激,采取逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RT-PCR)觀察其VEGF-D基因表達(dá)。結(jié)果IL-2使細(xì)胞株SMMC-7721和BEL-7402產(chǎn)生VEGF-D mRNA減少;IL-6對肝癌細(xì)胞株BEL-7402 VEGF-D mRNA表達(dá)存在促進(jìn)效果,但是無法從作用時間上來顯著判斷。IL-6對肝癌細(xì)胞株SMML-7721 VEGF-D mRNA表達(dá)存在促進(jìn)效果,當(dāng)濃度條件滿足情況下,促進(jìn)作用和作用時間存在正相關(guān)。結(jié)論抑制肝癌細(xì)胞VEGF-D mRNA的表達(dá)方

      中國老年學(xué)雜志 2015年19期2015-12-29

    • 己糖激酶-Ⅱ在直腸癌組織中表達(dá)臨床意義
      系。方法:通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白質(zhì)印跡方法、免疫組織化學(xué)方法了解己糖激酶-Ⅱ在直腸癌100例組織中表達(dá),探討與腫瘤病理因素關(guān)系。結(jié)果:RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示直腸癌組織陽性表達(dá)己糖激酶-Ⅱ在RNA水平顯著高于正常組織陽性表達(dá)。直腸癌組織中己糖激酶-Ⅱ表達(dá)陽性率顯著高于對照組(P<0.01)。腫瘤大小、分化程度、合并腫瘤分期與己糖激酶-Ⅱ的表達(dá)呈正相關(guān)(P值分別為P=0.001,P=0.000,P=0.019),而淋巴轉(zhuǎn)移與否

      交通醫(yī)學(xué) 2015年1期2015-12-17

    • 高中生物教材中幾個疑難點的解讀
      子 SD序列 逆轉(zhuǎn)錄 兩重性高中生物教材涉及了生物學(xué)的多個方面,其中很多問題限于篇幅、深度的原因,都是點到即止,言之不詳,使得一些善于思考的學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中產(chǎn)生了疑問。筆者就學(xué)生提出的幾個疑點進(jìn)行解讀。問題一:多聚U中無起始密碼子,如何進(jìn)行翻譯?問題背景:1.“每支試管中預(yù)先加入了ATP、游離的氨基酸、酶和核糖體……他們成為世界上第一個破譯遺傳密碼的人?!薄侗匦?遺傳與進(jìn)化(蘇教)》P692.“mRNA上的起始密碼子(如AUG)位于核糖體的第一位置上。

      考試周刊 2015年91期2015-09-10

    • 新研究揭示艾滋病病毒如何侵襲健康細(xì)胞
      了艾滋病病毒等逆轉(zhuǎn)錄病毒從基因?qū)用嫒肭纸】导?xì)胞的過程,這一發(fā)現(xiàn)有助于艾滋病新藥和新基因療法的研發(fā)。研究人員發(fā)現(xiàn),逆轉(zhuǎn)錄病毒往往會強(qiáng)行將自己的基因注入宿主細(xì)胞的染色體中,入侵過程由一種名為“整合酶”的物質(zhì)來主導(dǎo),這種物質(zhì)在每種逆轉(zhuǎn)錄病毒上都存在。整合酶會捕捉“核小體”(染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位),然后完成整個侵襲過程。了解這一入侵原理后,就明白為什么這類病毒那么難被根除,從而未來將可開發(fā)出有針對性的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物來更好地治療艾滋病。此外,這種入侵機(jī)制還給基因療

      科學(xué)家 2015年7期2015-07-21

    • 艾可清膠囊結(jié)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療艾滋病患者臨床研究
      結(jié)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療艾滋病患者臨床研究蓋鴻艷 齊齊哈爾市第七醫(yī)院目的:探討采用艾可清膠囊結(jié)合高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法治療艾滋病患者的臨床效果。方法:將我院收治的22例艾滋病患者平均分為觀察組和對照組。對照組患者僅采用高效抗病毒逆轉(zhuǎn)錄療法進(jìn)行治療,觀察組患者在對照組患者的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用艾可清膠囊進(jìn)行治療。結(jié)果:治療后兩組患者的T淋巴細(xì)胞亞群各項指標(biāo)均有所改善,觀察組患者的改善情況更為明顯(P<0.05),同時觀察組患者治療后的體征積分明顯低于對照組患者(

      科學(xué)中國人 2015年9期2015-06-10

    • 讓藏在細(xì)胞里的HIV現(xiàn)形
      病人在服用完抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物后,服下安塔布司。服用最大劑量安塔布司的病人其體內(nèi)蟄伏的艾滋病病毒被激活,與此同時他們沒有發(fā)現(xiàn)該藥物對病人有任何副作用。在艾滋病病毒潛伏期,即便人們服用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物,病毒也會在患者體內(nèi)潛伏,這是治愈病毒感染導(dǎo)致的艾滋病的最大障礙之一。據(jù)聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃署統(tǒng)計,艾滋病病毒自20世紀(jì)80年代以來已經(jīng)殺死了約3400萬人。截至2014年年末,全球共有約3690萬人攜帶艾滋病病毒。每年約有兩百萬人是新受感染的人???span id="j5i0abt0b" class="hl">逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物能有

      成功 2015年12期2015-03-18

    • 小鼠H1foo逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)
      小鼠H1foo逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)許 榮1,2,張春林1,寧 靜1,李 建1,雷安民1(1 西北農(nóng)林科技大學(xué) 動物醫(yī)學(xué)院,陜西 楊凌 712100;2 第四軍醫(yī)大學(xué) 西京醫(yī)院老年病科,陜西 西安 710032)【目的】 構(gòu)建小鼠pMX-H1foo逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,并使其在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)中異位表達(dá),為進(jìn)一步研究H1foo在重編程方面的作用奠定理論基礎(chǔ)。【方法】 根據(jù)NCBI公布的小鼠H1foo基因的mRNA序列設(shè)計引物,以小鼠卵巢組織總RN

      西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2015年5期2015-02-21

    • 小鼠T-bet逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建與功能驗證
      因Tbx21的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。該載體上含有Thy1.1報告基因,可與T-bet共同轉(zhuǎn)錄表達(dá)。Thy1.1表達(dá)于細(xì)胞表面,因此可以通過檢測 Thy1.1的表達(dá)方便地鑒定出表達(dá)T-bet的細(xì)胞。此外,本實驗還進(jìn)一步證明了包裝的病毒可以感染小鼠T細(xì)胞,并且外源表達(dá)T-bet后,可進(jìn)一步激活T-bet的靶基因Ifng[2],從而引起γ干擾素 (IFN-γ)的表達(dá)。該方法可證明構(gòu)建的載體具有表達(dá)功能正常的小鼠T-bet的能力。通過構(gòu)建該載體,為在小鼠來源的細(xì)胞中進(jìn)一

      生物工程學(xué)報 2014年10期2014-10-31

    • Importin α1與HIV-1整合酶相互作用及其對病毒復(fù)制的影響
      微生物系人類逆轉(zhuǎn)錄病毒實驗室,溫尼伯 曼尼托巴,加拿大)Productive infection of non-dividing cells by HIV-1 requires viral double stranded DNA (dsDNA), which associates with viral and cellular proteins in a large preintegration complex (PIC) to actively ent

      遵義醫(yī)科大學(xué)學(xué)報 2014年3期2014-08-11

    • 攜帶LMO3基因逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及其在NIH/3T3細(xì)胞中的表達(dá)
      帶LMO3基因逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及其在NIH/3T3細(xì)胞中的表達(dá)羅 蕓,張新宇,萬東君,劉曉花,付學(xué)鋒目的構(gòu)建單純LIM蛋白3(LMO3)的逆轉(zhuǎn)錄表達(dá)載體,并觀察其在NIH/3T3細(xì)胞中的表達(dá)情況。方法 重組載體pLXSN-LMO3經(jīng)酶切及測序鑒定后,脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染到pA317包裝細(xì)胞,G418篩選穩(wěn)定的病毒產(chǎn)生細(xì)胞株。重組逆轉(zhuǎn)錄病毒體外感染NIH/3T3,并對其進(jìn)行病毒滴度檢測,NIH/3T3細(xì)胞分為3組:以pLXSN-LMO3轉(zhuǎn)染為實驗組,以pLXSN

      解放軍醫(yī)藥雜志 2014年5期2014-02-27

    • YWHAZ重組腺病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒的制備
      YWHAZ重組逆轉(zhuǎn)錄病毒并在293T細(xì)胞中驗證基因表達(dá)情況,為體內(nèi)外進(jìn)一步研究YWHAZ基因及其相關(guān)信號通路在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用奠定基礎(chǔ)。1 材料和方法重組穿梭質(zhì)粒pacAd5CMV-IRES-GFP、腺病毒骨架載體pacAd5 9.2-100(Cell BioLabs公司);重組逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒PLXSN-IRES-GFP(實驗室現(xiàn)有);E.coliDH5α感受態(tài)細(xì)胞(TIANZHEN BIOTECH 公司);腺病毒包裝細(xì)胞293T(實驗室現(xiàn)有);逆轉(zhuǎn)錄

      中國實驗診斷學(xué) 2013年3期2013-10-09

    • 不同逆轉(zhuǎn)錄載體系統(tǒng)應(yīng)用于水牛胎兒成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)基因的探索
      毒載體主要包括逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、慢病毒載體和腺病毒載體.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法以其自身高效的轉(zhuǎn)基因效率,最早被用于基因治療、轉(zhuǎn)基因研究和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)的研究中[2-3].一些常用的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體有pMSCV、pMIG、pMX 和pLXSN 等.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)主要包括運載外源基因的載體,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染到包裝細(xì)胞的包裝蛋白(gagpol)和包膜質(zhì)粒攜帶包膜蛋白(env)[4].病毒的包膜蛋白決定重組病毒的靶向性,包膜蛋白能否與靶細(xì)胞上的受體結(jié)合,是病毒

      華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報 2013年4期2013-07-12

    • TRIM5α——艾滋病治療的潛在靶點
      在免疫系統(tǒng)抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的一個組成部分,其作為HIV-1的一種抑制因子,為艾滋病的治療提供了新的方向。1 TRIM5α的結(jié)構(gòu)人 TRIM5α(TRIM5αhu)基因與其他 TRIM6、21、22和34位于人的第11p15染色體上[1]。TRIM5α是由RING、1個或2個B-box區(qū)域和coil-coil區(qū)域、變化的C末端(RBCC)以及羧基末端3.0區(qū)域組成。恒河猴的TRIM5α(TRIM5αrh)能特異有效地抑制HIV-1感染,是HIV-1感染的細(xì)

      山東醫(yī)藥 2013年10期2013-04-07

    • 世界衛(wèi)生組織發(fā)布艾滋病治療新指南
      發(fā)布了《使用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療和預(yù)防艾滋病毒感染合并指南》。報告指出,及早開始使用安全、可負(fù)擔(dān)和易于管理的藥物治療,能夠保持艾滋病毒感染者的身體健康,降低血液中的病毒數(shù)量,進(jìn)而降低艾滋病的傳播風(fēng)險。報告鼓勵所有國家對CD4細(xì)胞計數(shù)等于或低于500個/立方毫米的艾滋病毒感染的成人啟動治療,并為所有5歲以下艾滋病毒感染兒童、所有艾滋病毒感染孕婦和哺乳婦女、所有患活動性結(jié)核病或乙肝的艾滋病毒感染者提供抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療。同時建議為所有開始接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的成

      中國衛(wèi)生政策研究 2013年7期2013-01-30

    • FDA批準(zhǔn)Intelence用于兒童HIV-1型患者治療
      應(yīng)癥,與其他抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物聯(lián)用,用于有以往用藥經(jīng)驗且對其他非核苷類逆轉(zhuǎn)錄病毒抑制劑或抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物有耐藥性的6~18歲的兒童HIV-1患者。獲得批準(zhǔn)的新劑型為25 mg規(guī)格,餐后口服,可溶于水中再與其他飲料混合服用。Intelence的安全性、有效性、藥代動力學(xué)以及耐受性是通過一項為期24周、納入101名HIV-1型兒童患者的II期臨床試驗(PIANO)進(jìn)行評估的。結(jié)果表明,52%的患者血清中檢測不到HIV-1病毒,67%的患者血清中HIV-1病毒拷貝

      藥學(xué)研究 2012年5期2012-08-15

    • 逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)系統(tǒng)感染原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞
      GFP)基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞(HSF),判斷逆轉(zhuǎn)錄病毒對HSF細(xì)胞的感染情況,為下一步HSF細(xì)胞重編程實驗提供技術(shù)保證。1 材料與方法1.1 材料與主要試劑 皮膚標(biāo)本來源于南方醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院,經(jīng)患者及其家屬同意簽字后方可取標(biāo)本。高糖型DMEM、10%FBS、PBS、明膠、pMX-GFP、pCL 包裝質(zhì)粒、polybrene、磷酸鈣轉(zhuǎn)染用試劑盒。1.2 原代培養(yǎng)HSF細(xì)胞〔5〕手術(shù)取患者上臂內(nèi)側(cè)至真皮層2 cm×2 cm皮膚組織

      中國老年學(xué)雜志 2012年11期2012-06-28

    • 基于逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的外源基因表達(dá)系統(tǒng)的評價和應(yīng)用
      節(jié)[3-4]。逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)系統(tǒng)通常由包膜蛋白載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和包裝細(xì)胞系組成。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體攜帶的外源目的基因整合到宿主細(xì)胞時,具有傾向發(fā)生于染色體開放區(qū)和轉(zhuǎn)錄活躍位點的明顯特點[5-6]。這一基因整合特性能有效地將外源目的基因整合入靶細(xì)胞基因組并使之穩(wěn)定高效地表達(dá)。同時,由于逆轉(zhuǎn)錄病毒可以與多種細(xì)胞表面蛋白結(jié)合而進(jìn)入細(xì)胞,其宿主細(xì)胞范圍很廣,具有感染終末分化細(xì)胞的能力,使其成為基因治療研究、RNA干擾和基因功能研究中廣泛采用的基因轉(zhuǎn)移載體[7-9]

      生物工程學(xué)報 2011年8期2011-02-09

    • 螢火蟲熒光素酶報告基因重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及鑒定
      酶報告基因重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的構(gòu)建及鑒定邊素艷 蓋魯粵 葉 平 楊月峰 王榮亮 王 華 郭子寬 王立生目的構(gòu)建含螢火蟲熒光素酶報告基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,為進(jìn)一步研究生物發(fā)光活體動物體內(nèi)光學(xué)成像奠定基礎(chǔ)。方法利用重組DNA技術(shù),將熒光素酶報告基因載體pGL3-Basic雙酶切得到的目的基因fluc+亞克隆至逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN中,重組質(zhì)粒pL(fluc)SN在脂質(zhì)體介導(dǎo)下“乒乓”轉(zhuǎn)染GP+E86和PA317包裝細(xì)胞,G418篩選,直至出現(xiàn)抗性克隆。擴(kuò)大培

      組織工程與重建外科雜志 2009年2期2009-04-11

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