人類免疫缺陷病毒抗體初篩中采取膠體層析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)的價(jià)值對(duì)比

【摘要】 目的 對(duì)比膠體層析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）應(yīng)用于人類免疫缺陷病毒

（human immunodeficiency virus，HIV）抗體初篩中的臨床價(jià)值。方法 回顧性分析2019年6月—2022年6月信豐縣疾病預(yù)防控制中心60例接受HIV感染篩查者的臨床資料，所有入選病例均接受膠體層析法與ELISA法進(jìn)行HIV抗體初篩，并經(jīng)過(guò)免疫印跡法檢測(cè)最終確認(rèn)。比較2種方法檢測(cè)HIV抗體的效能。結(jié)果 60例篩查者經(jīng)免疫印跡法確認(rèn)HIV抗體陽(yáng)性25例（41.67%），HIV抗體陰性35例（58.33%）。膠體層析法檢測(cè)HIV抗體的符合率為83.33%、靈敏度為76.00%、特異度為88.57%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為82.61%、陰性預(yù)測(cè)值為83.78%；ELISA法檢測(cè)HIV抗體的符合率為91.67%、靈敏度為92.00%、特異度為91.43%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為88.46%、陰性預(yù)測(cè)值為94.12%；膠體層析法與ELISA法比較，ELISA法檢測(cè)HIV抗體的靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值均高于膠體層析法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 ELISA法檢測(cè)HIV抗體的效能高于膠體層析法，主要表現(xiàn)在ELISA法具有更高的靈敏度與陰性預(yù)測(cè)值，有助于提高HIV感染篩查準(zhǔn)確率。

【關(guān)鍵詞】 人類免疫缺陷病毒；抗體初篩膠體層析法；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

文章編號(hào)：1672-1721（2024）04-0115-03? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ?中國(guó)圖書(shū)分類號(hào)：R512.91

獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）已成為全球性公共衛(wèi)生難題，具有病死率高、患者預(yù)后差、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)，嚴(yán)重影響患者身心健康[1]。HIV是引起AIDS的病原微生物。性接觸與血液是HIV主要傳播途徑。通過(guò)控制傳播途徑與早期病毒感染檢測(cè)能夠有效降低AIDS發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，并為AIDS患者的早期治療提供參考依據(jù)[2]。HIV抗體檢測(cè)技術(shù)是臨床篩查AIDS的重要手段，但不同檢測(cè)方法診斷效能有所差異。膠體層析法是臨床HIV抗體初篩中應(yīng)用最廣泛的檢測(cè)方法，具有操作簡(jiǎn)單、迅速且經(jīng)濟(jì)適用性好的優(yōu)勢(shì)，尤其適用于HIV急診檢測(cè)中，但膠體層析法特異度較低，存在一定假陽(yáng)性與假陰性率，篩查精度仍存在不足[3]。ELISA檢測(cè)HIV抗體的準(zhǔn)確率在一代試劑基礎(chǔ)上得到了大幅提高，具有操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、可大范圍檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)[4]。目前關(guān)于膠體層析法與ELISA法在HIV抗體初篩中的優(yōu)劣勢(shì)仍存在爭(zhēng)議。本研究以60例接受HIV感染篩查者為研究對(duì)象，進(jìn)一步對(duì)比了二者的檢測(cè)效能，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2019年6月—2022年6月信豐縣疾病預(yù)防控制中心60例接受HIV感染篩查者的臨床資料，男性33例，女性27例；年齡16～68歲，平均（30.16±11.35）歲；體質(zhì)量指數(shù)17～29 kg/m2，平均（22.35±4.69）kg/m2。

納入標(biāo)準(zhǔn)：因身體不適、與HIV患者存在血液或性接觸等原因進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)；均接受膠體層析法、ELISA法進(jìn)行HIV抗體初篩，并經(jīng)過(guò)免疫印跡法檢測(cè)確認(rèn)；入院檢測(cè)期間依從性良好；臨床資料完整。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并肢體創(chuàng)傷；合并血流感染；合并嚴(yán)重內(nèi)分泌疾??；合并精神疾病。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑

全自動(dòng)生化分析儀（德國(guó)西門(mén)子公司，ASVIA1800型），高速臺(tái)式離心機(jī)（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司，Avanti型），酶標(biāo)儀（美國(guó)賽默飛世爾科技公司，MULTISKAN MK3型），化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀（美國(guó)雅培公司，i2000型），實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（濟(jì)南程騰生物技術(shù)有限公司，MA-6000型），洗板儀（北京拓普分析儀器有限公司，DEMⅢ型），HIV質(zhì)控品（北京康徹思坦生物技術(shù)有限公司，批號(hào)201810203），HIV校準(zhǔn)品、HIV抗體診斷試劑（北京康徹思坦生物技術(shù)有限公司），ELISA抗體診斷試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司），膠體層析法抗體診斷試劑盒（上海晶抗生物工程有限公司），免疫印跡法檢測(cè)試劑盒（廣州達(dá)安基因股份有限公司）。

1.2.2 檢測(cè)方法

所有受檢者均采集外周靜脈血樣5 mL，將部分血樣（2～3 mL）采用高速臺(tái)式離心機(jī)常規(guī)離心后分離血

清，將血清標(biāo)本采用恒溫冰箱保存，2 h內(nèi)采用膠體層析法與ELISA法進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)，同時(shí)將剩余血樣進(jìn)行抗凝處理并留取血漿冷藏備用，以待后期進(jìn)行免疫印跡法檢測(cè)。（1）膠體層析法檢測(cè)方法及結(jié)果判定。取膠體層析法抗體診斷試劑盒，采用移液槍將60 μL待測(cè)樣本置于試劑卡加樣處，應(yīng)用免疫層析原理進(jìn)行HIV抗體定性檢測(cè)。結(jié)果判讀，試劑卡對(duì)照區(qū)與檢測(cè)區(qū)均出現(xiàn)紫紅色條帶即判定HIV抗體陽(yáng)性。（2）ELISA檢測(cè)方法及結(jié)果判定。采用ELISA抗體診斷試劑盒檢測(cè)HIV抗體，設(shè)置陰性、空白對(duì)照、陽(yáng)性各2孔，待測(cè)樣孔、酶孔分別加樣本稀釋液10 μL、100 μL，37 ℃環(huán)境下孵育60 min，洗板加100 μL酶結(jié)合物后37 ℃環(huán)境下孵育30 min，洗板加100 μL顯色液后繼續(xù)37 ℃環(huán)境下孵育30 min，洗板加50 μL終止液。結(jié)果判讀，ELISA法比色主、副波長(zhǎng)分別為450 nm、630 nm，Cutoff值以陰性對(duì)照孔均值+0.12計(jì)，S/CO＞1為陽(yáng)性[5]。（3）免疫印跡法檢測(cè)方法及結(jié)果判定。所有待測(cè)者均接受免疫印跡法進(jìn)行HIV感染確認(rèn)，取受檢者備用血液樣本，采用免疫印跡法檢測(cè)試劑盒進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，根據(jù)條帶顯色情況進(jìn)行結(jié)果判讀。gP160、gP120、gP41中同時(shí)出現(xiàn)≥2條膜帶，或gP160、gP120、gP41中出現(xiàn)1條膜帶且同時(shí)出現(xiàn)P24帶即判定為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

以免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比膠體層析法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在HIV感染篩查中的檢測(cè)效能，包括符合率、靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)意義。

2 結(jié)果

2.1 膠體層析法與ELISA法檢測(cè)HIV抗體結(jié)果比較

免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示，60例篩查者中共確診HIV抗體陽(yáng)性25例（41.67%），HIV抗體陰性35例（58.33%）。膠體層析法檢測(cè)HIV抗體陽(yáng)性23例（38.33%）、陰性37例（61.67%），ELISA法檢測(cè)HIV抗體陽(yáng)性26例（43.33%）、陰性34例（56.67%），見(jiàn)表1、表2。

2.2 膠體層析法與ELISA法檢測(cè)HIV抗體的效能比較

ELISA法與膠體層析法比較，ELISA法檢測(cè)HIV抗體的靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值均高于膠體層析法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；2種方法的特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、符合率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表3。

3 討論

AIDS是臨床常見(jiàn)傳染病。大量研究已證實(shí)[6-7]，AIDS會(huì)使患者免疫系統(tǒng)功能損傷，而免疫功能的破壞極易導(dǎo)致多重感染、惡性腫瘤等嚴(yán)重并發(fā)癥，危害患者生命安全。HIV感染是引起AIDS的直接原因。HIV是一種傳播途徑多樣的逆轉(zhuǎn)錄病毒，其傳播途徑包括血液、母嬰和性傳播等[8]。AIDS呈全球分布趨勢(shì)，截至2019年，世界范圍內(nèi)AIDS患者已超過(guò)3 800萬(wàn)例，其中僅2019年全球AIDS新發(fā)病例就超過(guò)了170萬(wàn)例。我國(guó)AIDS患者人數(shù)較多，一項(xiàng)關(guān)于中國(guó)1990—2017年的AIDS疾病相關(guān)研究顯示[9]，1990—2017年中國(guó)的AIDS疾病負(fù)擔(dān)呈逐年升高趨勢(shì)，1990—2017年中國(guó)的AIDS年齡別標(biāo)化傷殘調(diào)整壽命年率為（1.61～9.13）/10萬(wàn)，年齡別標(biāo)化病死率為（0.03～0.20）/10萬(wàn)。HIV感染防控形勢(shì)嚴(yán)峻，給我國(guó)公共衛(wèi)生醫(yī)療體系帶來(lái)了沉重負(fù)擔(dān)。利用HIV抗體檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)IDS風(fēng)險(xiǎn)人群進(jìn)行早期篩查與診斷，從而為AIDS的預(yù)防與控制提供參考。

HIV抗體檢測(cè)技術(shù)發(fā)展至今已有數(shù)十年歷史，是臨床HIV感染快速篩查以及早期診斷的主要方式。膠體層析法因價(jià)格實(shí)惠且操作簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì)被普遍應(yīng)用，但有學(xué)者研究指[10]出，膠體層析法在HIV感染早期存在靈敏度低、假陽(yáng)性率高等不足。ELISA法的運(yùn)用為HIV抗體篩查提供了新的選擇，但其臨床接受度相對(duì)較低，關(guān)于膠體層析法和ELISA法在HIV抗體篩查中的價(jià)值仍不明確。本研究分別采用膠體層析法與ELISA法進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)，結(jié)果顯示膠體層析法檢測(cè)HIV抗體的符合率為83.33%、靈敏度為76.00%、特異度為88.57%，而ELISA的符合率為91.67%、靈敏度為92.00%、特異度為91.43%，與苗岳等[11]的研究相似，表明膠體層析法與ELISA在HIV抗體檢測(cè)中均具有較高的準(zhǔn)確率。比較膠體層析法與ELISA檢測(cè)HIV抗體的效能，結(jié)果顯示，ELISA檢測(cè)HIV抗體的靈敏度與陰性預(yù)測(cè)值均高于膠體層析法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與鐘秀琴[12]的研究基本對(duì)應(yīng)，表明ELISA法在HIV抗體檢測(cè)中的效能高于膠體層析法。分析原因，ELISA法檢測(cè)時(shí)可將HIV抗原于固相載體包被，利用酶催化底物反應(yīng)顯色后經(jīng)酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，不受樣本溶血及脂血的影響，穩(wěn)定性高且靈敏度增加，保證了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。ELISA法對(duì)于檢測(cè)條件的要求相對(duì)較低，不僅能夠在室內(nèi)常規(guī)溫度下進(jìn)行檢測(cè)，還無(wú)需價(jià)格昂貴的特種設(shè)備，操作簡(jiǎn)單、便捷，極大地降低了HIV抗體檢測(cè)過(guò)程中對(duì)于設(shè)備與操作者水平的要求。ELISA法能一次性檢測(cè)多個(gè)待測(cè)樣本，在廣泛性HIV感染篩查過(guò)程中具有顯著優(yōu)勢(shì)，能夠?yàn)镠IV抗體檢測(cè)提供客觀、科學(xué)的參考依據(jù)，提高HIV篩查診斷準(zhǔn)確率。

綜上所述，ELISA法檢測(cè)HIV抗體的效能高于膠體層析法，主要表現(xiàn)在ELISA法具有更高的靈敏度與陰性預(yù)測(cè)值。ELISA法不僅可以進(jìn)行單份標(biāo)本檢測(cè)，還可以一次性進(jìn)行多樣本檢測(cè)，對(duì)于提高HIV感染篩查準(zhǔn)確率具有重要價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] 班立芳，趙鮮麗，孔慶飛，等.醫(yī)院艾滋病住院患者合并真菌感染的菌種分布及影響因素[J].中國(guó)感染控制雜志，2021，20（5）：397-402.

[2] AMARE H，OLSEN M F，F(xiàn)RIIS H，et al.Predictors of glucose metabolism and blood pressure among Ethiopian individuals with HIV/AIDS after one-year antiretroviral therapy[J].Trop Med Int Health，2021，26（4）：428-434.

[3] 裴麗健，赫曉霞，王月華，等.尿液HIV-1抗體快速檢測(cè)（膠體金法）實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證質(zhì)控品的制備與應(yīng)用[J].中國(guó)艾滋病性病，2020，26（5）：483-486，492.

[4] 董莉.在臨床疑似艾滋病血清HIV檢測(cè)中ELISA法與膠體金免疫層析試驗(yàn)法的檢測(cè)效果分析[J].黑龍江中醫(yī)藥，2021，50（3）：440-441.

[5] 賈思公，田娜，王曉帥.兩種品牌膠體金法檢測(cè)抗-HIV結(jié)果假陽(yáng)性1例報(bào)告[J].醫(yī)藥前沿，2020，10（15）：209.

[6] BURGHI G，BIARD L，ROUX A，et al.Characteristics and outcome according to underlying disease in non-AIDS patients with acute respiratory failure due to pneumocystis pneumonia[J].Eur J Clin Microbiol Infect Dis，2021，40（6）：1191-1198.

[7] ZHAO N X，ZENG Z L，LIANG H Y，et al.Estimation of renal function by three CKD-EPI equations in Chinese HIV/AIDS patients：a STROBE-compliant article[J].Medicine（Baltimore），2021，100（22）：e26003.

[8] 金晶，潘玥，高智勇.2012—2018年北京市海淀醫(yī)院HIV抗體檢測(cè)結(jié)果分析及防控策略[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2020，27（2）：186-189.

[9] 郭劍，高洪艷，王媛.1990—2017年中國(guó)艾滋病疾病負(fù)擔(dān)分析[J].中國(guó)艾滋病性病，2021，27（4）：356-359.

[10] LIANG Y H，LI L H，SHUI J W，et al.Reduction of anti-HIV antibody responses in subjects receiving antiretroviral therapy during chronic HIV-1 infection[J].J Clin Virol，2020，128（1）：104414.

[11] 苗岳，郭波，王欣銳，等.ELISA與膠體金法在HIV篩查中的診斷效果對(duì)比[J].臨床醫(yī)學(xué)工程，2021，28（11）：1519-1520.

[12] 鐘秀琴.酶聯(lián)免疫吸附法與膠體金法在篩查HIV感染中的意義[J].中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志，2020，43（6）：430-431.

（編輯：郭曉添）

作者簡(jiǎn)介：劉小蓮，女，大專。