杜撒♂×大長撒♀F1代ARHGEF37基因多態(tài)性及其對生長性狀的影響

朱怡軒 閔鵬聰 陳強 王孝義 魯紹雄 嚴達偉 李明麗

摘要：【目的】揭示ARHGEF37基因多態(tài)性及其對豬生長性狀的影響，為利用該基因標記推進滇撒豬配套系的進一步選育及開發(fā)利用提供參考依據(jù)?！痉椒ā恳?74頭杜撒♂×大長撒♀ F1代豬為試驗材料，采用PCR擴增產物直接測序法檢測ARHGEF37基因外顯子8多態(tài)性，采用最小二乘模型分析各SNP位點基因型及單倍型組合對5個生長性狀的影響?！窘Y果】在杜撒♂×大長撒♀ F1代豬ARHGEF37基因外顯子8上檢測出C1262G、T1293C、G1395A和C1398T 4個SNPs位點，分別以CC、TT、GA、CC基因型、等位基因C、T、G、C及單倍型CTGC的頻率最高;除T1293C位點外，其余各位點的雜合度在0.4552～0.4940，遺傳多樣性較豐富。C1262G位點GG基因型個體達100 kg體重日齡（258.93±2.95 d）顯著高于CG基因型個體（249.87±2.68 d）（P<0.05，下同），CG基因型個體30～60 kg日增重（462.44±15.44 g）顯著高于CC基因型個體（409.29±14.30 g）;T1293C位點TT基因型個體30～60 kg日增重（445.04±9.70 g）極顯著高于TC基因型個體（329.33±42.26 g）（P<0.01），TT基因型個體30～100 kg日增重（516.96±6.44 g）顯著高于TC基因型和CC基因型個體（470.92±28.08 g和480.64±16.94 g）。此外，達60 kg體重日齡和達100 kg體重日齡均以CTGC/GTGC組合最短（161.84±5.07 d和241.00±5.11 d），CTGC/CCGC組合最長（188.80±11.33 d和272.60±11.42 d）;30～60 kg日增重和30～100 kg日增重分別以CTGC/GTAT組合和CTGC/GTGC組合最高（479.56±20.66 g和545.42±19.76 g），均以CTAC/CCGC組合最低（275.00±84.33 g和437.00±55.88 g）?！窘Y論】ARHGEF37基因的G1395A和C1398T位點的遺傳多樣性較豐富;C1262G位點的CG基因型、T1293C位點的TT基因型及CTGC/GTGC單倍型組合對杜撒♂×大長撒♀F1代生長性狀的影響較大，攜帶有CTGC單倍型個體的各生長性狀均處于較高水平。

關鍵詞： 杜撒♂×大長撒♀ F1代豬;ARHGEF37基因;外顯子8;單核苷酸多態(tài)性;生長性狀

中圖分類號： S828.89? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標志碼： A 文章編號：2095-1191（2022）04-0918-08

Polymorphism of ARHGEF37 gene and its effect on growth traits in F1 generation pigs of （Duroc×Saba）♂×[Yorkshire×（Landrace×Saba）]♀

ZHU Yi-xuan， MIN Peng-cong， CHEN Qiang， WANG Xiao-yi，

LU Shao-xiong， YAN Da-wei， LI Ming-li*

（College of Animal Science and Technology， Yunnan Agricultural University， Kunming，Yunnan? 650201， China）

Abstract：【Objective】To reveal the effect of ARHGEF37 gene polymorphisms on the growth traits of pigs， so as to provide a reference for further breeding， development and the utilization of Diansa pig matching line with this gene marker. 【Method】The study used 274 F1 generation pigs （Duroc×Saba）♂×[Yorkshire×（Landrace×Saba）]♀ （hereafter DS♂×YLS♀） to screen for polymorphisms in the ARHGEF37 gene by the direct sequencing of PCR amplified products. The effects of genotypes and haplotype combinations of each SNP locus on five growth traits were analyzed by the least square model. 【Result】It was found that 4 SNPs loci were located on exon 8 of ARHGEF37 gene： C1262G， T1293C， G1395A and C1398T The frequency of CC，TT，GA and CC genotype was the highest，followed by allele C，T，G，C and haplotype CTGC. Except for the T1293C locus，the remaining showed a heterozygosity between 0.4552-0.4940， indicating more abundant genetic diversity. The age to 100 kg body weight in the C1262G GG genotype （258.93±2.95 d） was significantly higher than that in the CG genotype （249.87±2.68 d）（P<0.05，the same below）. Measurements of the average daily weight gain in pigs of 30-60 kg showed that the CG genotype （462.44±15.44 g） was significantly higher than that of the CC genotype （409.29±14.30 g） and the TT genotype （445.04±9.70 g） at T1293C was extremely significantly higher than that of the TC genotype （329.33±42.26 g）（P<0.01）. The average daily weight gain in pigs between 30-100 kg in the TT genotype （516.96±6.44 g） was significantly higher than that of the TC and CC genotypes （470.92±28.08 g and 480.64±16.94 g， respectively）. In addition， the time to achieve 60 and 100 kg body weight was the shortest in the CTGC/GTGC combination（161.84±5.07 d and 241.00±5.11 d） and the longest in the CTGC/CCGC combination（188.80±11.33 d and 272.60±11.42 d）. The average daily gains between 30-60 kg and between 30-100 kg were the highest in the CTGC/GTAT and CTGC/GTGC combinations （479.56±20.66 g and 545.42±19.76 g， respectively）， and the lowest in the CTAC/CCGC combination （275.00±84.33 g and 437.00±55.88 g）. 【Conclusion】The genetic diversity of G1395A and C1398T of ARHGEF37 gene is more abundant. The CG genotype of the C1262G locus， TT genotype of the T1293C locus and the combination of CTGC/GTGC haplotype have more influence on the growth traits of the F1 generation of DS♂×YLS♀ pigs. The growth traits of individuals carrying the CTGC haplotype are all at a relatively high level.

Key words： F1 generation of DS♂×YLS♀ pigs; ARHGEF37 gene; exon 8; single nucleotide polymorphism;growth trait

Foundation items：National Key Research and Development Program（2018YFD0501206）; Yunnan Industrial Technology Leading Talents Special Project（YNWR-CYJS-2018-056）; Yunnan? Science and Technology Planning Project （202104BI090022）; Yunnan Major Science and Technology Special Project（202102 AE090039）

0 引言

【研究意義】滇撒豬配套系是我國第一個以純地方豬種（撒壩豬）選育、以專門化品系為基礎育成的豬配套系，母系父本品系和終端父本品系分別以長白豬和大約克為育種素材，歷時13年培育成功（袁躍云等，2014）。該配套系充分聚合了撒壩豬肉質優(yōu)良、耐粗飼及引進品種生長速度快、瘦肉率高等特性，在區(qū)域養(yǎng)豬生產中已得到廣泛應用（連林生等，2006）。經過持續(xù)系統(tǒng)選育的撒壩豬專門化母系有效保持了撒壩豬原有的優(yōu)點，各項性能得以明顯提升，與國外豬種雜交的雜種優(yōu)勢較突出，但目前關于滇撒豬配套系主要經濟性狀的分子遺傳機制尚不清楚。因此，進一步對相關候選基因，尤其是基于基因組學發(fā)掘的新候選基因開展針對性研究，深入揭示滇撒豬配套系主要經濟性狀的分子遺傳機制，對促進該配套系的選育提高具有重要意義?！厩叭搜芯窟M展】Rho鳥嘌呤核苷酸交換因子37（Rho guanine nucleotide exchange factor 37，ARHGEF37）基因是在彌漫性B細胞淋巴瘤（Diffuse B lymphoma）中發(fā)現(xiàn)的一種長度為45 kb的DNA序列，命名為DbI（Rossman et al.，2005）。鳥嘌呤核苷酸交換因子（ARHGEF）主要包括兩大類，即DbI家族ARHGEF與非DbI ARHGEF，其中關于DbI家族ARHGEF的研究較多。研究表明，ARHGEF參與生物胚胎發(fā)育、Rho GTPase活性調節(jié)及神經元的形成等過程，對哺乳動物的細胞功能也有重要作用。ARHGEF可影響生物的胚胎發(fā)育，與生物體內多個器官的發(fā)育及分化均有關系。研究人員將斑馬魚的遮蔽蛋白A（Obscurin A）結構域中與ARHGEF相互作用的區(qū)域去除后，斑馬魚的胚胎發(fā)育出現(xiàn)明顯受阻，其骨骼肌、心臟及大腦均出現(xiàn)發(fā)育遲緩或不完全現(xiàn)象（Raeker et al.，2010）。ARHGEF還在細胞生長分化過程中發(fā)揮多種重要作用，如細胞骨架重組、細胞內微管形成、細胞黏附作用及細胞極性等。ARHGEF對Rho GTPase活性具有調節(jié)作用。Rho GTPase在調節(jié)細胞骨架形成、基因轉錄、細胞周期及膜泡運輸中起重要作用，與腫瘤及神經性疾病的發(fā)生也有密切關系（劉明濤等，2014），且在轉錄調控和細胞轉化中發(fā)揮重要作用（丁美娟等，2020）。ARHGEF是一類通過調節(jié)Rho GTP酶的GDP/GTP交換，從而調節(jié)Rho GTPase活性的調節(jié)蛋白。在細胞的信號轉導過程中，ARHGEF起著信號轉換器或分子開關的作用，通過作用于細胞骨架或靶蛋白而產生多種生物效應（Van Aelst and D’Souza-Schorey，1997;O'Connor and Mercurio，2001;Wheeler and Ridley，2004）。正常情況下，Dbl家族成員處于自我抑制狀態(tài)，一般在出現(xiàn)N末端或C末端截斷突變后被激活，通過將Rho-GDP轉變?yōu)镽ho-GTP而激活Rho家族以控制細胞的生長發(fā)育和浸潤轉移等（唐秋琳和畢鋒，2017）。ARHGEF作為Rho GTPase家族的上游信號調節(jié)蛋白，通過微管依賴的激活機制和非微管依賴的激活機制進行活化，從而發(fā)揮多種生物學功能。ARHGEF還可影響神經元的形成。已有研究在靈長類前額葉皮層中發(fā)現(xiàn)ARHGEF亞細胞的分布能明顯影響神經元的激活（Meiri et al.，2012），并認為這種影響機制很可能是因為ARHGEF的表達調節(jié)微管與肌動蛋白之間存在的耦合作用，由于ARHGEF的不平衡分布將會影響細胞骨架的形成，神經細胞軸突和樹突的伸展也因此會受到較大影響?！颈狙芯壳腥朦c】部分基于全基因組的研究結果及本課題組前期開展簡化基因組測序結果提示，ARHGEF37基因可能是影響豬生長性狀的潛在候選基因，但目前尚無關于ARHGEF37基因多態(tài)性及其對豬經濟性狀影響的相關報道。因此，有必要開展相關研究，揭示并證實ARHGEF37基因的遺傳效應?！緮M解決的關鍵問題】將ARHGEF37基因作為杜撒♂×大長撒♀ F1代豬生長性狀相關的候選基因，通過分析ARHGEF37基因外顯子8區(qū)域的SNP變異位點與5個生長性狀間的關聯(lián)程度，以期探索此基因對杜撒♂×大長撒♀ F1代豬群生長性狀的影響，為利用ARHGEF37基因標記推進滇撒豬配套系的進一步選育及開發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗樣品

試驗樣品來自云南省楚雄州種豬種雞場，選擇生長發(fā)育正常、健康的以杜洛克♂×撒壩豬♀（杜撒）公豬為父本、大白豬♂×（長白豬♂×撒壩豬♀）母豬為母本的杜撒♂×大長撒♀ F1代豬274頭（其中母豬138頭、公豬136頭）。將采集的豬耳組織泡入裝有75%酒精的EP管中，置于-80 ℃超低溫冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1. 2 生長性能測定

豬體重達30 kg左右開始測定其生長性能指標，至110 kg左右時結束。分別測定達60 kg體重日齡、達100 kg體重日齡、100 kg活體背膘厚、30～60 kg日增重和30～100 kg日增重共5個生長性能指標，均按照NY/T 822—2019《種豬生產性能測定規(guī)程》執(zhí)行。

1. 3 基因多態(tài)性檢測

1. 3. 1 DNA提取與檢測 采用北京擎科（昆明）生物技術有限公司的DNA提取試劑盒（TSINGKE）提取基因組DNA，再通過1%瓊脂糖凝膠電泳和超微量檢測儀（NanoDrop 2000）完成待測DNA樣品的定性和定量分析。檢測合格的DNA條帶清晰明亮，無明顯拖帶，符合擴增要求，置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1. 3. 2 引物合成和PCR擴增 通過Ensembl數(shù)據(jù)庫（http：//asia.ensembl.org/index.html）獲取豬ARHGEF37基因外顯子8序列，利用Primer Premier 5.0設計1對引物，序列為F：5'-TTTGACGACCACCCGATAC-3';R：5'-CTGCTGCGTTTGAGTCCC-3'，預擴增片段大小857 bp。PCR反應體系25.0 μL：2×Taq PCR Mix 12.5 μL，正、反向引物各0.5 μL，DNA模板1.0 μL，滅菌水10.5 μL。擴增程序：94 ℃預變性5 min;94 ℃ 30 s，62 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，進行35個循環(huán);72 ℃延伸7 min。

1. 3. 3 測序與基因分型 檢測合格的PCR產物經直接測序后，使用BioEdit v7.0.9完成序列比對，再結合其序列峰圖找出SNP位點，各SNP位點的位置及其基因型由CDS序列和相應的堿基名稱命名。

1. 4 統(tǒng)計分析

根據(jù)ARHGEF37基因分型結果，分別統(tǒng)計試驗豬群中不同SNP位點相應基因型的個數(shù)，并進行群體遺傳學分析，再使用Phase 2.0對ARHGEF37基因各SNP位點完成單倍型分析，最后采用最小二乘模型對杜撒♂×大長撒♀ F1代豬的生長性狀進行關聯(lián)分析：

Yij=μ+Gi+Sj+eij

式中，Yij為性狀觀察值;μ為群體均值;Gi為該SNP位點的第i基因型效應或單倍型組合效應;Sj為第i性別效應，eij為隨機誤差，假定服從N（0，σ[2e]）分布。

統(tǒng)計分析由SAS 9.0的GLM過程完成（魯紹雄和林連生，2003），結果以最小二乘均數(shù)±標準誤的形式表示，且進行差異顯著性檢驗，多重比較在α=0.05和α=0.01水平上進行。

2 結果與分析

2. 1 目的片段擴增與SNP位點檢測結果

ARHGEF37基因的PCR擴增電泳結果（圖1）顯示，擴增條帶單一、大小為857 bp，與預期結果一致，滿足DNA測序要求。PCR產物測序在ARHGEF37基因第8外顯子區(qū)域發(fā)現(xiàn)4個SNPs位點：即CDS序列1262 bp處C→G（C1262G）為錯義突變，導致ARHGEF37蛋白第421位的氨基酸由蘇氨酸（Thr）突變?yōu)榻z氨酸（Ser）;1293 bp處T→C（T1293C）、1395 bp處G→A（G1395A）及1398 bp處C→T（C1398T），均為同義突變，分別對應編碼絡氨酸（Tyr）、甘氨酸（Gly）和天冬氨酸（Asp）。4個SNPs位點均檢測出3種基因型，即C1262G位點存在CC、CG和GG基因型（圖2），T1293C位點TT、TC和CC基因型（圖3），G1395A位點GG、GA和AA基因型（圖4），C1398T位點存在CC、CT和TT基因型（圖5）。

2. 2 ARHGEF37基因多態(tài)性分析結果

杜撒×大長撒F1代ARHGEF37基因C1262G、T1293C、G1395A和C1398T位點的等位基因頻率和基因型頻率見表1。由表1可知，C1262G、G1395A和C1398T位點均為中度多態(tài)，多態(tài)信息含量（PIC）分別為0.3720、0.3550和0.3516。其中，G1395A和C1398T位點遺傳多樣性較豐富，雜合度（H）分別為0.4615和0.4552，且達Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)（P>0.05），C1262G位點未達Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)（P<0.01）。T1293C位點為低度多態(tài)（PIC為0.2143），未達Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)（P<0.01）。此外，等位基因頻率顯示，C、T、G、C分別是對應位點的優(yōu)勢等位基因。

2. 3 ARHGEF37基因多態(tài)位點的單倍型分析結果

通過Phase 2.0進行單倍型分析，結果（表2和表3）顯示，C1262G、T1293C、G1395A和C1398T 4個SNPs位點共計11種單倍型，20種單倍型組合。單倍型以CTGC的頻率最高（0.3755），GTAT的頻率次之（0.2863），CCAT的頻率最低（0.0009）（表2）。單倍型組合則以CTGC/CTGC組合的頻率最高（0.1861），CTGC/GTAT的頻率次之（0.1825），10種單倍型組合CTAC/GCGC、GCAT/GCAT、GTGC/GTGT、CTAT/CCGT、CTAC/GTAT、CCGC/CCAT、CTGC/CTAC、CTAT/CCGC、CCGC/GTGC和CTAC/CTAC均只檢測出1個個體（表3）。

2. 4 ARHGEF37基因各SNP位點不同基因型的生長性狀差異

杜撒×大長撒F1代ARHGEF37基因C1262G、T1293C、G1395A和C1398T位點各基因型的生長性狀見表4。由表4可知，C1262G位點GG基因型個體達100 kg體重日齡（258.93±2.95 d）最長，顯著高于CG基因型個體（P<0.05，下同），CG基因型個體達100 kg體重日齡（249.87±2.68 d）最短，且CG基因型個體30～60 kg日增重（462.44±15.44 g）最高，顯著高于CC基因型個體（409.29±14.30 g）;T1293C位點TT基因型個體30～60 kg日增重（445.04±9.70 g）最高，極顯著高于TC基因型個體（329.33±42.26 g）（P<0.01，下同），TT基因型個體30～100 kg日增重（516.96±6.44 g）最高，顯著高于TC基因型和CC基因型個體（470.92±28.08 g和480.64±16.94 g）。

2. 5 ARHGEF37基因不同單倍型組合的生長性狀差異

杜撒×大長撒F1代ARHGEF37基因C1262G、T1293C、G1395A和C1398T位點各單倍型組合的生長性狀見表5。由表5可知，除100 kg活體背標厚外，4個SNPs突變位點的不同單倍型組合在其他生長性狀上均表現(xiàn)出顯著或極顯著差異。其中，達60 kg體重日齡和達100 kg體重日齡均以CTGC/GTGC組合最短（161.84±5.07 d和241.00±5.11 d），CTGC/CCGC組合最長（188.80±11.33 d和272.60±11.42 d）;30～60 kg日增重和30～100 kg日增重分別以CTGC/GTAT組合和CTGC/GTGC組合最高（479.56±20.66 g和545.42±19.76 g），均以CTAC/CCGC組合最低（275.00±84.33 g和437.00±55.88 g）。

3 討論

DNA分子標記技術的飛速發(fā)展和應用，為人們從分子水平揭示包括豬在內的畜禽主要經濟性狀的遺傳基礎提供了有力工具，而候選基因法已成為檢測豬經濟性狀相關基因或分子標記的重要途徑之一。目前有關滇撒豬配套系生長性狀的候選基因研究主要集中在其母系母本撒壩豬專門化品系上。魯紹雄等（2007）研究表明，肌細胞生成素（Myogenin，MYOG）基因Msp I酶切位點多態(tài)性對撒壩豬4月齡體重和45日齡～6月齡日增重有顯著影響，且均以AB基因型個體最高，AA基因型個體最低。李國治等（2008）研究報道，心臟脂肪酸結合蛋白（H-FABP）基因的5'上游區(qū)1125～1817區(qū)段的Hinf I酶切位點不同基因型對撒壩豬生長性狀無顯著影響。丁艷等（2012）的研究結果顯示，胰島素樣生長因子1（Insulin-like growth factor 1，IGF-1）基因Hha I酶切位點AB基因型為撒壩豬120日齡體重、180日齡體重和45～180日齡階段日增重的增效基因型。錢錦花和連林生（2014）研究表明，撒壩豬SLA-DQA基因EcoR I酶切位點對0～45日齡日增重和70日齡～4月齡日增重有顯著影響，其中AB基因型個體的0～45日齡日增重最大，70日齡～4月齡日增重則以BB基因型個體最高。

ARHGEF對哺乳動物的細胞功能有顯著影響，如在細胞骨架、細胞屏障功能、細胞分裂、細胞周期、樹突棘形態(tài)及癌細胞的增殖、凋亡和侵襲轉移等過程中發(fā)揮重要作用（王莉和李曉東，2015）。豬的ARHGEF37基因位于2號染色體上，共有12個外顯子和11個內含子。Fernández等（2012）利用PorcineSNP60 BeadChip芯片對利比利亞豬×長白豬雜交的F3代群體進行全基因組連鎖分析，發(fā)現(xiàn)豬的2號染色體112～117 cM區(qū)域存在顯著影響生長和胴體組成的QTL?；谡n題組前期試驗篩選，ARHGEF37基因第8外顯子的遺傳變異較豐富，具有一定代表性。本研究通過PCR產物直接測序，在杜撒×大長撒F1代ARHGEF37基因第8外顯子上發(fā)現(xiàn)4個SNPs突變位點：C1262G、T1293C、G1395A和C1398T，且均檢測出3種基因型，分別以CC、TT、GA、CC基因型及C、T、G、C等位基因的頻率最高。由χ2檢驗可知，C1262G和T1293C位點未達Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，而G1395A和C1398T位點達Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，可能是選種選育過程中人工選擇所致（李金澤等，2008）。此外，根據(jù)Botstein等（1980）提出的標準，C1262G、G1395A點和C1398T位點均為中度多態(tài)（0.25≤PIC≤0.50），T1293C位點為低度多態(tài)（PIC<0.25）。G1395A和C1398T位點雜合度較豐富（H為0.4615和0.4552），且遺傳多樣性也較豐富，說明該基因的選擇潛力較大，可作為有效遺傳標記應用于開展其與經濟性狀的關聯(lián)分析。

不同位點各基因型及其單倍型組合的關聯(lián)分析結果表明，ARHGEF37基因的4個SNP突變位點對杜撒×大長撒F1代的部分生長性狀有不同程度的影響：C1262G位點以雜合型CG型相對于突變型GG型顯著縮短達100 kg體重日齡，雜合型CG型相對于野生型CC型顯著提高30～60 kg日增重;T1293C位點以野生型TT型相對于雜合型TC型顯著提高30～60 kg日增重，野生型TT型相對于雜合型TC型和突變型CC型顯著提高30～100 kg日增重。除100 kg活體背膘厚外，4個SNPs突變位點的不同單倍型組合在其他生長性狀上均表現(xiàn)出顯著或極顯著差異，其中，達60 kg體重日齡和達100 kg體重日齡均以CTGC/GTGC單倍型組合最短，30～60 kg日增重及30～100 kg日增重分別以CTGC/GTAT組合、CTGC/GTGC組合最高。可見，CTGC/GTGC組合對杜撒×大長撒F1代生長速度的影響最大。同時，攜帶有CTGC單倍型個體的各生長性狀也均處于較高水平，說明CTGC單倍型具有提高杜撒×大長撒F1代豬群生長速度的效果，4個SNPs位點對生長性狀的影響表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作用。究其原因可能是某些情況下，單個突變位點的作用較小，而多個位點聯(lián)合可能會對目標性狀產生顯著影響效果（閆霞，2014）。

綜上所述，可推斷ARHGEF37基因對杜撒×大長撒F1代豬的生長性狀具有顯著影響，鑒于當前有關于豬ARHGEF37基因的研究報道十分匱乏，若能綜合考慮該基因相鄰區(qū)域的其他基因或SNP分子標記，并在不同品種的豬群中加以研究確認，將有利于更深入地揭示ARHGEF37基因的真實效應，對育種實際具有重要指導意義。

4 結論

ARHGEF37基因G1395A和C1398T位點的遺傳多樣性較豐富;C1262G位點的CG基因型、T1293C位點的TT基因型及CTGC/GTGC單倍型組合對杜撒×大長撒F1代豬生長性狀的影響較大，攜帶有CTGC單倍型個體的各生長性狀均處于較高水平。

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收稿日期：2021-07-21

基金項目：國家重點研發(fā)計劃項目（2018YFD0501206）;云南省產業(yè)技術領軍人才專項（YNWR-CYJS-2018-056）;云南省科技計劃項目（202104BI090022）;云南省重大科技專項（202102AE090039）

通訊作者：李明麗（1969-），https：//orcid.org/0000-0002-3073-4035，教授，主要從事動物生產與環(huán)境衛(wèi)生研究工作，E-mail：xiaolucao@126.com

第一作者：朱怡軒（1996-），https：//orcid.org/0000-0001-6932-276X，研究方向為動物生產，E-mail：1418247662@qq.com