食品檢測中高效液相色譜的應(yīng)用

呂偉利

摘 要： 伴隨社會經(jīng)濟的高速發(fā)展及人民生活水平的不斷提升，針對食品安全，人們提出了更高的要求。作為一種新型分離分析技術(shù)，高效液相色譜技術(shù)在已知化合物內(nèi)的分析應(yīng)用可達到70%～80%。因該項技術(shù)具有分辨率高、分析速度快、精確度及重復(fù)性良好的特點，已成為食品領(lǐng)域最為關(guān)鍵的檢測分析方法。為此，本文在充分掌握高效液相色譜技術(shù)原理的基礎(chǔ)上，對食品檢測中高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用進行了分析與探討，以期全面提升食品安全。

關(guān)鍵詞： 食品檢測；高效液相色譜；食品安全

在中國自古以來就有“民以食為天”的說法，食品和人之間存在極為密切的關(guān)系。作為人類生存、生活的根本基礎(chǔ)，食品研究意義重大。自改革開放以來，我國食品加工領(lǐng)域工業(yè)化水平越來越高，進而加重了現(xiàn)代社會食品安全問題。目前，全世界每年產(chǎn)生的食品污染病例高達7000萬例以上，為此，必須重視食品安全問題，加大食品安全檢測力度。在食品生產(chǎn)環(huán)節(jié)，為滿足食品某項屬性要求，往往需要適量添加特定食品添加劑，如防腐劑、抗氧化劑及人工合成色素等，但此類添加劑的摻加，都會不同程度地影響食品安全。除此之外，因環(huán)境污染等問題，也會對植物、生物造成嚴重污染，從而通過食品鏈作用也會成為危害食品安全的重要因素。為此，必須重視食品安全問題，有效解決食品安全問題，只有這樣才能提高食品檢測技術(shù)水平，才能提高食品安全監(jiān)管水平，才能提高食品安全問題重視程度，才能進一步提高人們的生活質(zhì)量及確保身體健康。

一、高效液相色譜技術(shù)原理

食品檢測是保證食品安全的重要手段。高效液相色譜法也被叫做高效液相層析，HPLC為其簡稱。自上個世紀60、70年代高效液相色譜技術(shù)誕生，伴隨其技術(shù)水平的不斷提升，已成為食品檢測中應(yīng)用較為廣泛的分離分析技術(shù)之一。作為在經(jīng)典色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展而言的高效液色譜法，其充分引入了氣相色譜原理，技術(shù)方面，流動相更改為高壓輸送。色譜柱是選用特定方式通過小粒徑填料進行填充形成，進而有效提升色譜柱效果。除此之外，色譜柱后還與檢測器（靈敏度高）連接，能夠連續(xù)檢測流出物。

相比氣相色譜法，高效液相色譜法具有更為廣泛的應(yīng)用范圍，試樣揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性并不會對其造成影響。同時，具有種類較多的流動相，可利用流動相達到良好分離效率。通常情況下，在室溫下即可完成分析，無需高柱溫。其特點為分辨率高、分析速度快、重復(fù)性好，同時可重復(fù)利用色譜柱，實現(xiàn)自動化操作，具有較高精確度。

二、食品檢測中高效液相色譜的應(yīng)用

做好食品檢測工作，是保證食品安全的重要手段。高效液相色譜法在食品檢測中的應(yīng)用主要集中于黃曲霉毒素、N-亞硝胺等方面的檢測，具體應(yīng)用效果如下：

1、黃曲霉毒素檢測

作為食品檢測的主要對象之一，黃曲霉毒素產(chǎn)生的直接原因為食物或食物原料存放時間過長，導(dǎo)致其變質(zhì)。食物長時間放置將導(dǎo)致其自身黃曲霉菌繁殖速度進一步加快，從而出現(xiàn)黃曲霉毒素。經(jīng)檢測實踐可得，黃曲霉毒素結(jié)構(gòu)類型共8類，具有較強毒性，通過動物實驗分析，幾微克黃曲霉毒素將引發(fā)肝癌。

針對黃曲霉毒素，選用高效液相色譜法進行測定時，色譜柱以Sil-x-II為準，室溫條件下淋洗劑可選取氯仿-異辛烷，一次沖出黃曲霉素的主要結(jié)構(gòu)內(nèi)容，如B1、B2、G1、G2等，通常以7min為其分析時間。一次將黃曲霉毒素含量、結(jié)構(gòu)類型檢測出來。相比氣相色譜技術(shù)，樣品揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性等都不會影響液相色譜檢測結(jié)果，只需將檢測樣品進行溶液制作，且利用各類液相色譜法就能夠達到分離的目的。

2、N-亞硝胺檢測

在腌制類食品中，如臘肉、臘腸等，為保證腌制食品色澤、口感良好，往往會存在摻加硝酸鹽、亞硝酸鹽等現(xiàn)象，從病理學角度分析，硝酸鹽并不具備危害性，但當添加量超過一定比例后，因還原作用影響，肉制品極易產(chǎn)生N-亞硝胺，于人體健康而言，N-亞硝胺具有較大危害，長期使用此類肉制品，將引發(fā)肝癌、結(jié)腸癌等疾病。氣相色譜法是N-亞硝胺檢測的傳統(tǒng)手段，但此類檢測方法，只能檢測樣品的揮發(fā)性N-亞硝胺，精準度較低，同時檢測時間過長，通常在1h以上，嚴重影響檢測質(zhì)量。而高效液色譜法的應(yīng)用，不僅能夠提高檢測精準度，還能大幅度縮短檢測時間，僅需13min即可完成整個檢測過程。

3、多環(huán)烴與雜環(huán)芳烴檢測

多環(huán)烴與雜環(huán)芳烴等往往產(chǎn)生于加工制作油炸、燒烤肉制品內(nèi)，此類污染物內(nèi)存有典型性致癌物，如二苯并芘、3.4-苯并芘等，如檢測其有害物質(zhì)含量時，選用氧化鋁層析柱，則檢測時間過長，為減短檢測時間，可選用高效液相色譜法。其檢測主要內(nèi)容為：（1）色譜柱填充劑為十二烷、化學鍵合薄殼型硅膠；（2）固定相為Zipax擔體上涂漬0.5%AgNO3；（3）淋洗液為乙青-正己烷，以此進行分離。

4、芳香胺檢測

作為人工合成色素的重要原材料，長期大量攝入芳香胺將對人體代謝系統(tǒng)產(chǎn)生嚴重影響，甚至導(dǎo)致膀胱癌等疾病發(fā)生。根據(jù)國家食品安全法規(guī)定，嚴禁添加芳香胺，因此，做好芳香胺檢測工作極為關(guān)鍵。在實際分離檢測過程中，色譜柱可選用PermaphaseETH，選取甲醇-環(huán)戊烷作為移動相。而針對2.6-二甲苯胺此類有毒物質(zhì)，分離檢測時的色譜柱可選用Aurapak，淋洗劑可選用異丙醇-乙烷，檢測時間可控制在5min以內(nèi)。

5、氨基酸檢測

作為生物體主要生命元素，氨基酸是酶、蛋白質(zhì)的主要構(gòu)成成分，對食品內(nèi)氨基酸含量進行精確、靈敏地檢測，對保證食品安全意義重大。當前，主要選用鄰苯二甲醛（OPA）-9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）進行氨基酸柱前衍生，氨基酸含量檢測可選用RP-高效液相色譜法。由此測定，三個濃度不同梯度氨基酸標準溶液具有良好線性關(guān)系，且在0.1min以內(nèi)控制樣品保留時間絕對誤差，4%以內(nèi)控制重現(xiàn)性RSD值，加標回收率可控制在90%～110%。

三、結(jié)束語

綜上所述，伴隨我國國民經(jīng)濟的迅速發(fā)展，食品安全問題也得到了人們的普遍關(guān)注。將高效液相色譜法合理應(yīng)用于食品檢測，可有效提高檢測的精確性，有效解決食品安全問題，促進我國食品檢測事業(yè)的發(fā)展，為人們提供更多安全、放心的食品。

參考文獻

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