復方斑蝥膠囊對膀胱癌術(shù)后化療患者免疫功能的影響分析

宋文輝，馬洪順，楊世強，馬慶彤 （天津市第一中心醫(yī)院泌尿外科，天津300192）

復方斑蝥膠囊對膀胱癌術(shù)后化療患者免疫功能的影響分析

宋文輝，馬洪順，楊世強，馬慶彤 （天津市第一中心醫(yī)院泌尿外科，天津300192）

目的：探討中成藥制劑復方斑蝥膠囊對肌層浸潤性膀胱癌（BC）術(shù)后化療患者細胞免疫功能的影響.方法：選取經(jīng)手術(shù)及病理證實的浸潤性尿路上皮癌患者60例，隨機分為甲組（n＝30）和乙組（n＝30）.甲組采用例根治性全膀胱切除術(shù)，術(shù)后2周行GC方案化療，在化療后開始口服復方斑蝥膠囊輔助治療；乙組采用根治性全膀胱切除術(shù)，術(shù)后2周行GC輔助化療，口服安慰劑.另設(shè)正常健康人（n＝30，丙組作為對照）.在術(shù)前2天、化療前2天、化療后21天采用流式細胞儀檢查外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK細胞水平和CD4＋/CD8＋的比值.結(jié)果：與健康組相比，甲組、乙組術(shù)前的CD3＋細胞以及NK細胞的水平均降低.與手術(shù)前相比，化療前2天甲、乙組的CD3＋、CD8＋、NK細胞的水平低于術(shù)前2天水平（P＜0.05）.化療后21天，甲組CD3＋、CD4＋、CD8＋以及NK細胞的水平顯著提高（P＜0.05）；乙組NK細胞和CD4＋/CD8＋的水平無顯著提高（P＞0.05）.甲乙兩組比較，化療前2天，除NK細胞水平外，兩組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；化療后21天，甲組血CD3＋、CD4＋、CD8＋以及NK細胞水平明顯高于乙組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）.結(jié)論：膀胱癌患者治療過程中存在免疫功能紊亂，中藥復方斑蝥膠囊能提高膀胱癌患者術(shù)后免疫功能，尤其是化療后的T細胞免疫功能，可以更好的輔助患者完成化療.

膀胱癌；細胞免疫功能；復方斑蝥膠囊

0 引言

現(xiàn)代研究［1］顯示，肌層浸潤性膀胱癌（bladder cancer，BC）預后不佳，患者生存率低.當前BC治療方案仍以手術(shù)結(jié)合化療為主，筆者依據(jù)長期臨床治療經(jīng)驗體會，手術(shù)造成的創(chuàng)傷可引起B(yǎng)C患者免疫力下降，而BC的復發(fā)、進展、轉(zhuǎn)移又與患者免疫功能狀態(tài)密切相關(guān).BC患者以老年人居多，隨著身體功能的衰弱，自身免疫功能明顯下降，當患者遭受手術(shù)創(chuàng)傷時，身體免疫功能損傷更加明顯.復方斑蝥膠囊具有攻毒蝕瘡、破血消淤、抗癌等功效，針對BC術(shù)后化療患者，骨髓抑制的副作用發(fā)生率低，而且有升白細胞功效［2－5］.筆者回顧性研究了BC患者細胞免疫功能在全膀胱切除術(shù)前、術(shù)后、化療前后的變化，以及復方斑蝥膠囊對以T細胞為代表的免疫功能的影響和作用價值，現(xiàn)報道如下.

1 資料和方法

1.1 一般資料經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準，并取得患者書面同意，選取2014－04/2016－06天津市第一中心醫(yī)院收治的60例經(jīng)手術(shù)及病理證實的肌層浸潤性尿路上皮癌患者，所有入組患者均排除其他免疫系統(tǒng)疾病且3個月內(nèi)未進行免疫干預治療，隨機分為2組，實驗組甲組（n＝30）采用根治性全膀胱切除術(shù)，術(shù)后2周行GC方案化療，化療后開始口服復方斑蝥膠囊輔助治療；乙組（n＝30）采用根治術(shù)，術(shù)后2周行GC輔助化療，口服安慰劑.另設(shè)正常健康人（n＝30，丙組）.

1.2 方法兩組患者均采用根治性膀胱全切術(shù)，手術(shù)標本病理檢查證實切緣未見癌細胞，保證切緣無癌殘留，術(shù)后常規(guī)護理，保證電解質(zhì)平衡，監(jiān)控血氧，預防感染、保護肝功，預防消化道出血等.甲組化療時服用復方斑蝥膠囊（貴州益佰制藥股份有限公司，國藥準字：Z52020238），3粒/次，2次/d，服用1個月；乙組患者術(shù)后常規(guī)護理，服用等劑量安慰劑.

1.3 儀器試劑血液樣本采用美國BD公司的四色MultiTEST IMK Kit淋巴細胞亞群檢測試劑盒進行處理，采用美國BD公司的FACSCalibur流式細胞儀進行分析；操作由專人嚴格按照說明書進行。

1.4 檢測指標甲、乙組均于術(shù)前2 d、術(shù)后化療前2 d、化療后21 d采集血液樣本，健康受試組抽血檢測T細胞亞群，監(jiān)測血液中CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK細胞占比水平，并比較CD4＋/CD8＋的值.1.5 統(tǒng)計學處理采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用±s表示，組間行獨立樣本t檢驗，組內(nèi)化療前后對比采用配對樣本t檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義.

2 結(jié)果

2.1 甲、乙組與丙組T細胞免疫功能的比較與丙組相比，甲、乙組患者術(shù)前CD3＋、NK細胞水平均明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；CD4＋、CD8＋T細胞水平微弱降低，CD4＋/CD8＋水平升高，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05，表1）.

表1 甲、乙組與丙組T細胞免疫功能的比較（n＝30， ±s）

表1 甲、乙組與丙組T細胞免疫功能的比較（n＝30， ±s）

aP＜0.05 vs丙組.

組別CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋NK細胞（%）甲組56.73±7.94a32.63±7.1823.47±8.911.36±0.7115.73±6.98a乙組55.41±8.27a31.45±6.8523.95±9.171.34±0.7516.34±8.13a丙組65.3±10.4137.21±6.9527.84±7.951.33±0.6824.93±8.71

2.2 BC患者各時間段T細胞免疫功能變化比較膀胱切除術(shù)后化療前2 d甲乙兩組患者CD3＋、CD8＋、NK細胞水平均明顯低于術(shù)前（P＜0.05），化療前2 d檢測，甲組患者NK細胞水平明顯高于乙組（P＜0.05）.化療后21 d，組內(nèi)比較，甲組CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK細胞水平，乙組NK細胞高于術(shù)前（P＜0.05）；乙組患者CD4＋/CD8＋細胞水平無顯著提高（P＞0.05）.組間比較，甲組患者CD3＋、CD4＋、CD8＋、NK細胞水平高于乙組（P＜0.05，表2）.

表2 BC患者各時間段T細胞免疫功能變化比較（n＝30，±s）

表2 BC患者各時間段T細胞免疫功能變化比較（n＝30，±s）

aP＜0.05 vs本組術(shù)前；cP＜0.05 vs乙組化療前；eP＜0.05 vs乙組化療后.

組別CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋NK細胞（%）甲組術(shù)前56.73±7.9432.63±7.1823.47±8.911.36±0.7115.73±6.98化療前50.34±9.15a28.71±6.4719.71±5.51a1.55±0.8711.32±6.45ac化療后64.2±10.18ae36.45±6.91ae27.31±7.48ae1.27±0.8123.31±7.91ae乙組術(shù)前55.41±8.2731.45±6.8523.95±9.171.34±0.7516.34±8.13化療前51.21±8.96a27.93±6.3118.45±5.17a1.58±0.9310.37±4.97a化療后50.19±7.8326.68±5.4717.73±4.871.35±0.7220.15±7.41

3 討論

在機體腫瘤治愈過程中，由T細胞介導的細胞免疫起著主導作用.按照T細胞表面分化抗原（CD）的不同，可分為CD4＋輔助T細胞、CD8＋效應T細胞兩大亞群.兩大亞群在機體自身抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)中都發(fā)揮著重要的作用.因為CD3＋是T細胞的表面標記，本研究中，選擇標記CD3＋的淋巴細胞代表T細胞［6］.CD4＋通過釋放細胞因子激活NK細胞、單核細胞、巨噬細胞，介導殺傷溶解腫瘤細胞.CD8＋T細胞亞群分為抑制性CD8＋CD28－T細胞Ts和殺傷性CD8＋CD28＋T細胞Tc.Tc亞群可以通過多種細胞因子和酶產(chǎn)生溶解細胞作用，直接特異性殺傷腫瘤細胞.而Ts亞群具有免疫抑制作用，對免疫應答有重要的負調(diào)節(jié)功能［7－9］.惡性BC患者多處于免疫抑制狀態(tài)，免疫功能下降導致T淋巴細胞亞群紊亂，CD3＋、CD4＋細胞明顯減少的同時CD8＋細胞相對增多、CD4＋/CD8＋值降低［10］.T細胞亞群在外周血中比較穩(wěn)定，通過對T淋巴細胞的檢測可以了解受試機體免疫狀態(tài)，輔助疾病的診斷治療，幫助臨床醫(yī)生探索疾病的發(fā)病機理，病情進展程度，指導提示合理的治療方案.本研究結(jié)果顯示，BC患者發(fā)現(xiàn)問題時一般已處于后期，其術(shù)前CD3＋、NK細胞水平明顯低于健康組，表明BC患者存在細胞免疫功能的紊亂，表現(xiàn)為免疫抑制.化療前2 d，甲組患者的NK細胞水平明顯高于乙組；化療后21 d，甲組患者CD3＋、CD4＋、CD8＋以及NK細胞水平明顯高于乙組.

復方斑蝥膠囊主要成分為斑蝥素，具有破血祛淤、攻毒蝕瘡等功效，用于各種原發(fā)性癌癥等.動物研究證實，斑蝥、半枝蓮等均有良好的抗腫瘤作用.而且復方制劑中還有人參、黃茂、刺五加等補益類中藥，具有良好的補益功效，能提高患者自身免疫力.有研究［3，11－13］表明，復方斑蝥膠囊可逆轉(zhuǎn)H22肝癌小鼠細胞免疫功能受抑制的狀況，提升小鼠免疫力，達到抗腫瘤的療效.依據(jù)多年臨床使用經(jīng)驗，BC患者應用復方斑蝥膠囊無骨髓抑制作用，且有很好的升白功能，與臨床相關(guān)報道［14］一致.有學者［15－17］指出，復方斑蝥膠囊可抑制HepG2215細胞中的HBV?DNA復制，誘導肝癌細胞的凋亡；并通過提高免疫功能移植肝癌細胞的成長，明顯延長小鼠的中位生存時間.該中藥的有效成分主要是斑蝥素，是否對BC的腫瘤細胞也具有同樣的凋亡作用，還需要臨床更多的實驗性研究應用進行證實.

本研究認為復方斑蝥膠囊可以增強老年人自身免疫力，尤其針對老年BC患者，對患者手術(shù)后、化療后的T細胞為代表的免疫功能有顯著的提升作用，有利于遏制潛在BC腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和發(fā)展，改善患者的預后，幫助BC患者提高對于手術(shù)和化療的適應能力，故值得臨床大力推廣.

［1］ Chen W，Zheng R，Baade PD，et al.Cancer statistics in China，2015［J］.CA Cancer J Clin，2016，66（2）：115－132.

［2］ 胡衛(wèi)東，趙傳印.肌層浸潤性膀胱癌患者行保留膀胱手術(shù)可行性探討［J］.臨床醫(yī)學，2016，36（4）：87－89.

［3］ 李兆元，寧四清，易鐵男，等.復方斑蝥膠囊聯(lián)合化療及放療治療中晚期原發(fā)性肝癌的療效觀察［J］.中華全科醫(yī)學，2013，11（8）：1250－1251.

［4］ 蘆曉磊，王衛(wèi)星.復方斑蝥膠囊對老年肝癌患者術(shù)后T細胞免疫功能的影響［J］.西部醫(yī)學，2012，24（11）：2099－2101.

［5］ Decker D，Tolba R，Springer W，et al.Abdominal surgical interven?tions：local and systemic consequences for the immune system??a pro?spective study on elective gastrointestinal surgery［J］.J Surg Res，2005，126（1）：12－18.

［6］ Nakamura H，Kawasaki N，Hagiwara M，et al.Cellular immunologic parameters related to age，gender，and stage in lung cancer patients［J］.Lung Cancer，2000，28（2）：139－145.

［7］ Chang WJ，Du Y，Zhao X，et al.Inflammation?related factors pre?dicting prognosis of gastric cancer［J］.World J Gastroenterol，2014，20（16）：4586－4596.

［8］ 張 毅，黃建釗，石承先，等.復方斑蝥膠囊對老年肝癌患者術(shù)后T細胞免疫功能的影響［J］.山東醫(yī)藥，2008，48（27）：89－90.

［9］ Evdokimova VN，Liu Y，Potter DM，et al.AFP?specific CD4＋help?er T?cell responses in healthy donors and HCC patients［J］.J Immu?nother，2007，30（4）：425－437.

［10］ Binah O.Cytotoxic lymphocytes and cardiac electrophysiology［J］.J Mol Cell Cardiol，2002，34（9）：1147－1161.

［11］ 宋亞頎，王萬偉，陶光州.復方斑蝥膠囊對食管癌放療增敏作用的研究［J］.中國腫瘤臨床與康復，2012，19（4）：326－328.

［12］ 章 迅，安 青，葉麗紅，等.復方斑蝥膠囊合復方紅豆杉方加減治療三陰乳腺癌臨床觀察［J］.世界中醫(yī)藥，2013，8（7）：748－749.

［13］ 張 鵬，林 晨，張曉凱，等.去甲斑蝥素抑制胃癌MGC?803細胞生長并誘導其凋亡［J］.暨南大學學報（自然科學與醫(yī)學版），2013，34（4）：385－390.

［14］ 張 蕻，梁小軍，樸晉華，等.復方斑蝥膠囊體內(nèi)外抗腫瘤作用的實驗研究［J］.山西中醫(yī)學院學報，2003，4（2）：17－19.

［15］ Divrik RT，Yildirim U，Zorlu F，et al.The effect of repeat transure?thral resection on recurrence and progression rates in patients with T1 tumors of the bladder who received intravesical mitomycin：a prospective，randomized clinical trial［J］.J Urol，2006，175（5）：1641－1644.

［16］ 陳守華，王建紅，譚清和，等.去甲斑蝥酸鈉聯(lián)合DF方案治療晚期胃癌［J］.腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2013，26（4）：311－313.

［17］ 韓建軍，于金明，吳會勇，等.復方斑蝥膠囊抑制人肝細胞癌HepG2215小鼠移植瘤的生長［J］.中華腫瘤雜志，2012，34（11）：821－825.

Analysis of influence of Compound Banmao capsule on immune function of patients with bladder cancer undergoing chemotherapy after surgery

SONG Wen-Hui，MA Hong-Shun，YANG Shi-Qiang，MA Qing-Tong
Department of Urology，F(xiàn)irst Central Hospital of Tianjin，Tianjin 300192，China

AIM：To investigate the influence of Compound Banmao capsule on immune function of patients with bladder cancer undergoing chemotherapy after surgery.METHODS：A total of 60 patients with muscular invasive urothelial carcinoma confirmed by surgery and pathology were randomly divided into group A and group B，with 30 cases in each group.Patients in group A was given radical cystectomy，then accepted GC chemo?therapy two weeks after surgery，and they were administered with Compound Banmao capsule orally at the beginning of the chemo?therapy as adjuvant therapy.Patients in group B was given radical cystectomy，then accepted GC chemotherapy two weeks after surgery，and they were administered with placebo orally.In addition，30 cases of normal healthy people were set as control group（group C）.The levels of CD3＋，CD4＋，CD8＋T cells，NK cells and CD4＋/CD8＋radio were examined by blood flow cytometry 2 days before surgery，2 days before chemotherapy and 21 days after chemotherapy.RESULTS：The levels of CD3＋and NK cells before surgery in group A and group B were lower than those of group C，with statistically significant differences（P＜0.05）.The levels of CD3＋，CD8＋and NK cells in group A and group B 2 days before chemotherapy were lower than those 2 days before surgery，with statistically significant differences（P＜0.05）.The levels of CD3＋，CD4＋，CD8＋and NK cells in group A were significantly improved 21 days after chemotherapy，with statistically significant differences（P＜0.05）.There were no significant increase in the levels of NK cells and CD4＋/CD8＋radio in group B（P＞0.05）.Besides of NK cells，there were no statistically significant differ?ences on levels of other cells 2 days before chemotherapy between group A and group B（P＞0.05）.The levels of CD3＋，CD4＋，CD8＋，NK cells in group A 21 days after chemotherapy were significantly higher than those of group B，with statistically signifi?cant differences（P＜0.05）.CONCLUSION：There were immune dysfunction in patients with bladder cancer in the course of treat?ment.Compound Banmao capsules can improve postoperative T cell immune function of patients with bladder cancer，especially after chemotherapy.

bladder cancer；cellular immune；Compound Ban?mao capsule

R737.14

A

2017－01－16；接受日期：2017－02－02

天津市中醫(yī)藥管理局課題（13121）

宋文輝.碩士，副主任醫(yī)師.研究方向：泌尿腫瘤及臨床轉(zhuǎn)化.Tel：022?23626850 E?mail：15822661308＠163.com

2095?6894（2017）10?40?03