• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    CAR-T細胞治療用于實體瘤的研究進展

    2017-11-13 05:33:48葛玉鳳韓東暉吳介恒秦衛(wèi)軍楊安鋼溫偉紅
    轉化醫(yī)學電子雜志 2017年10期
    關鍵詞:靶點抗原特異性

    葛玉鳳,韓東暉,吳介恒,楊 發(fā),謝 品,秦衛(wèi)軍,楊安鋼,溫偉紅

    (第四軍醫(yī)大學:1西京醫(yī)院泌尿外科,2基礎部免疫學教研室,陜西西安710032)

    CAR-T細胞治療用于實體瘤的研究進展

    葛玉鳳1,韓東暉1,吳介恒2,楊 發(fā)1,謝 品1,秦衛(wèi)軍1,楊安鋼2,溫偉紅2

    (第四軍醫(yī)大學:1西京醫(yī)院泌尿外科,2基礎部免疫學教研室,陜西西安710032)

    嵌合抗原受體(CAR)修飾的T細胞,即CAR?T細胞治療策略是一種非常熱門的免疫治療策略,它可特異性識別腫瘤抗原,進而發(fā)揮特異性的殺傷作用.因此靶向性好,殺傷力強,并且T細胞的有效活化和增殖不依賴于MHC分子,是一種高效的免疫殺傷策略.目前,CAR?T細胞治療正在從實驗室逐漸走向臨床.其在淋巴瘤治療中效果良好,為血液腫瘤提供了治愈的希望.在實體瘤中,由于腫瘤微環(huán)境的復雜性,CAR?T細胞的治療效果尚不理想,但是近年來在實體瘤方面也取得了不錯的進展.本文就CAR?T治療策略在實體瘤方面的研究進展進行綜述.

    嵌合抗原受體;CAR?T;免疫治療;實體瘤

    0 引言

    1 CAR-T技術簡介

    通常我們所說的CAR分子主要由三個部分組成:胞外的單鏈抗體、跨膜區(qū)和胞內的信號傳導結構.自1989年Gross[4]提出CAR的概念至今已發(fā)展至第四代CAR.一代CAR只有單一的胞內信號分子,沒有共刺激分子,因此,它雖然能識別腫瘤細胞,但是由于T細胞無法增殖,臨床效果有限.二代CAR加入了共刺激分子,如CD28,4?1BB,OX40等[5],由于共刺激信號的存在,T細胞可以持續(xù)增殖,CAR?T細胞的抗腫瘤活性得到了明顯的提高[6].為了進一步增強T細胞的殺傷能力,研究人員又在二代CAR的基礎上增加了一個共刺激分子的信號傳導結構域,也就是說三代CAR有兩個共刺激分子,研究顯示三代CAR?T細胞的增殖能力和殺傷活性都得到了進一步的提高.目前,研究人員正在進行四代CAR技術的研究,四代CAR將通過聯(lián)合細胞因子或共刺激分子的配體改善免疫微環(huán)境,從而進一步增強CAR?T細胞的活性[7].第一代至第四代CAR結構見圖1.

    圖1 四代CAR分子的結構示意圖[7]

    2 CAR-T細胞用于實體瘤治療的現(xiàn)狀

    鑒于CAR?T技術在血液腫瘤中的良好效果,研究人員也逐漸在嘗試將CAR?T技術應用于實體瘤的治療中.目前研究較多的實體瘤類型主要有神經母細胞瘤、膠質瘤、胰腺癌、前列腺癌等.

    2.1 CAR-T細胞用于神經母細胞瘤治療的研究神經母細胞瘤(neuroblastoma)是一種多發(fā)于兒童的惡性腫瘤,其惡性程度高,預后差,生存率低[8].雙唾液酸神經節(jié)苷脂(disialoganglioside,GD2)是一種糖脂類抗原,其在包括神經母細胞瘤、膠質瘤、視神經母細胞瘤等多種腫瘤中呈特異性高表達,是理想的治療靶點[9].目前以GD2為靶點的CAR?T細胞治療研究比較多.Louis等[10]用針對GD2的CAR?T細胞進行了臨床試驗,共納入了19例神經母細胞瘤患者,給患者注射GD2?CAR修飾的EBV特異性的細胞毒性T細胞(EBV?specific cytotoxic T lymphocytes,EBV?CTLs)或者活化的T細胞(activated T cells,ATCs),發(fā)現(xiàn)輸注后6周仍能檢測到這些細胞的患者預后較好,其中3例患者甚至實現(xiàn)了完全緩解.這些研究證實了CAR?T細胞用于治療神經母細胞瘤的有效性.

    此外,Esser等[11]用NK細胞作為效應細胞,通過慢病毒感染使NK?92細胞表達針對GD2的CAR分子,發(fā)現(xiàn)這種修飾后的CAR?NK?92細胞可有效增強NK?92細胞對GD2陽性細胞的特異性殺傷作用.

    2.2 CAR-T細胞用于膠質瘤治療的研究在膠質瘤的研究中,EGFR是一種有效的治療靶點.Caruso等[12]用兩種親和力不同的EGFR抗體制備了兩種不同的CAR?T細胞,發(fā)現(xiàn)親和力高的CAR?T細胞對EGFR高表達和低表達的腫瘤細胞均有殺傷作用,而親和力較低的CAR?T細胞只對EGFR高表達的腫瘤細胞有殺傷作用.這些結果提示,選擇適當親和力的CAR?T細胞有望實現(xiàn)對腫瘤細胞的特異性殺傷,而對正常組織沒有毒性,從而減少副作用.組成性激活的EGFRvIII是一種天然存在的EGFR突變體,它只在腫瘤細胞表達,而正常細胞不表達,是一種更為理想的治療靶點.Sampson等[13]構建了針對EGFRvIII的三代小鼠CAR?T細胞(EGFRvIII mCAR T),利用具有完全免疫能力的荷瘤小鼠模型,結果發(fā)現(xiàn)給小鼠輸注高劑量的這種CAR?T細胞可以治愈所有的荷瘤小鼠.同時發(fā)現(xiàn)這些CAR?T細胞的抗腫瘤作用依賴于小鼠的免疫系統(tǒng),這些小鼠還可以抵抗EGFRvIII陰性腫瘤細胞的再次荷瘤,這一研究證實了CAR?T細胞用于膠質瘤治療的有效性,并指出患者體內免疫協(xié)同作用的重要性.

    在膠質瘤的治療研究中,EGFR并不是單一的治療靶點.Brown等[14]制備了一種針對白細胞介素13受體α2(interleukin?13 receptor alpha 2,IL13Rα2)的CAR?T細胞,他們將這種細胞在220 d內先后在腫瘤切除部位和腦室系統(tǒng)輸注給1例膠質瘤復發(fā)的患者,發(fā)現(xiàn)治療后患者的顱內和脊髓腫瘤得到了有效緩解,腦脊液中的細胞因子和免疫細胞水平都明顯增加,這種臨床反應持續(xù)了7.5個月,并且治療過程中沒有發(fā)現(xiàn)3級以上的毒性作用.這一研究進一步證實了CAR?T細胞用于膠質瘤治療的有效性.

    2.3 CAR-T細胞用于胰腺癌治療的研究胰腺癌會在腫瘤周圍形成一個堅固的屏障,使免疫細胞無法識別,并且在血供不足的情況下,胰腺癌組織也能生存,并且非常容易轉移,因此治療比較棘手.間皮素(mesothelin)是一種與腫瘤浸潤有關的細胞膜抗原,研究發(fā)現(xiàn)很多腫瘤都有間皮素的高表達,以間皮素為靶點的CAR?T細胞在胰腺癌的治療中顯示出良好的效果[15].Beatty等[16]設計了針對間皮素的帶有CD3ζ和4?1BB共刺激結構域的二代CAR,他們用體外轉錄的mRNA使T細胞瞬時表達CAR分子,并用這種T細胞治療2例不同的實體瘤患者,分別是惡性胸膜間皮瘤和轉移性胰腺癌.結果顯示,這種CAR?T細胞在外周血中短暫存在,并且可有效到達原發(fā)灶和轉移灶,同時誘導體液免疫應答,顯示出明顯的抗腫瘤活性,而對正常組織沒有明顯的毒性,因此這種CAR?T細胞用于實體瘤的治療是安全可行的.

    在CAR?T的治療中,異常的自身抗原也可作為治療的靶點.Posey等[17]設計了一種CAR,這種CAR分子特異性識別Tn糖基化的粘蛋白1(Tn?MUC1),這種Tn?MUC1是一種新生抗原,且在多種腫瘤中呈高表達.發(fā)現(xiàn)這種CAR修飾的T細胞可在小鼠體內有效抑制胰腺癌移植瘤的生長,具有良好的特異性殺傷活性.這一研究證實異常糖基化的抗原也是一種理想的治療靶點.

    人體自主神經通過復雜的、多層次的神經體系來實現(xiàn)對心臟功能的精密調節(jié)[11] ,傳統(tǒng)觀念認為,心率的增快是交感神經活性增強造成的。人體和動物無論在安靜或運動狀態(tài)下都以迷走神經的調節(jié)作用占優(yōu)勢,運動時心率增快主要是由于迷走神經活性減弱,而不是由交感神經活性增強造成的。迷走神經通過釋放乙酰膽堿并與膽堿能受體結合,抑制靶器官作用,迷走神經為心臟的減速神經,主要表現(xiàn)為心臟的負性頻率、傳導、肌力的作用[12]。

    2.4 CAR-T細胞用于前列腺癌治療的研究隨著CAR?T技術的發(fā)展,研究者也嘗試將這一技術應用于前列腺癌的治療.前列腺特異性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)特異性表達于前列腺癌組織,是一種理想的治療靶點.Zuccolotto等[18]設計了針對人PSMA的CAR,特異性識別PSMA的CAR?T細胞可在體外有效殺傷PSMA陽性的前列腺癌細胞,并可在絕大多數(shù)的荷瘤裸鼠體內完全抑制腫瘤的生長,并有效延長小鼠的生存期.Ma等[19]比較了針對PSMA的一代CAR和二代CAR修飾的T細胞對前列腺癌細胞的特異性殺傷作用,研究證明這些CAR?T細胞均能特異性殺傷PSMA陽性的前列腺癌細胞,但二代CAR?T細胞在體內外的殺傷效果均優(yōu)于一代CAR.

    2.5 CAR-T細胞用于其它實體瘤治療的研究除了上述腫瘤,CAR?T技術也被嘗試用于其他實體瘤的治療,在這些研究中,也有很多有趣的發(fā)現(xiàn).比如,在黑色素瘤的研究中,Zhang等[20]利用一種特異性識別gp100/HLA?A2復合物的抗體制備了二代CAR,這種CAR修飾的T細胞可在體外HLA?A2存在的情況下特異性殺傷黑色素瘤細胞,也可在荷瘤小鼠體內抑制黑色素瘤的生長.Kandalaft等[21]利用針對葉酸受體α(folate receptor?α)的CAR?T細胞進行了卵巢癌的Ⅰ期臨床試驗,在給患者輸注CAR?T細胞后的第48 h輸注大量未感染的自身外周血淋巴細胞(periph?eral blood lymphocytes,PBL),研究發(fā)現(xiàn)可有效抑制CAR?T細胞的過量擴增,從而有效地抑制副作用.Geldres等[22]發(fā)現(xiàn)硫酸軟骨素蛋白聚醣4(chondroitin sulfate proteoglycan?4,CSPG4)在多種腫瘤如黑色素瘤、乳腺癌、頭頸部腫瘤等中均呈特異性高表達,制備了針對CSPG4的二代CAR?T細胞,并在荷瘤小鼠體內證實了這種CAR?T細胞的抗腫瘤作用,因此CSPG4也是一種CAR?T細胞治療的理想靶點,有望用于多種腫瘤的治療.

    除了利用特異性的單鏈抗體進行腫瘤抗原的識別,也有研究人員試圖利用配受體的特異性結合來識別腫瘤細胞.如Song等[23]設計利用NKG2D受體的胞外區(qū)去識別NKG2D配體(NKG2D ligands,NKG2DLs)制備成利用配受體的結合特異性識別腫瘤細胞的CAR?T細胞,研究發(fā)現(xiàn)這種包含NKG2D受體胞外區(qū)的CAR?T細胞也可有效識別并特異性殺傷NKG2DL陽性的卵巢癌細胞.在此基礎上,發(fā)現(xiàn)使用組蛋白去乙?;傅囊种苿¬PA(sodium valproate)可促進NKG2DL的表達,從而增強CAR?T細胞的殺傷作用.

    CAR?T治療策略在實體瘤的治療研究中取得了一些進展,但相對于CAR?T細胞在血液腫瘤中的顯著效果,CAR?T治療策略應用于實體瘤還不夠成熟.要想將CAR?T技術成功應用于實體瘤的治療還需要進一步改進方法,提高療效.

    3 CAR-T細胞在實體瘤治療中存在的問題及改進方法

    相比于在血液腫瘤的顯著療效,CAR?T技術在實體腫瘤的治療方面還存在一定的困難,面臨的主要問題有:缺乏特異性的靶點、CAR?T細胞不能有效浸潤入腫瘤組織及腫瘤微環(huán)境對CAR?T細胞的抑制性作用等[24-26].為了使CAR?T細胞技術更好地應用于實體瘤的治療,學者們進行了多方面的探索,也找到了一些改進的方法.

    3.1 細胞因子風暴CAR?T免疫治療技術要想在臨床進行應用,首先要考慮的就是CAR?T免疫療法的安全性,而細胞因子風暴(cytokine release syndrome,CRS)無疑成為CAR?T技術在臨床應用中比較難避免的風險.CAR?T技術的關鍵是T細胞利用具有識別靶細胞表面抗原能力的CAR受體,結合到靶細胞表面的分子,這個過程中使T細胞內部信號產生,來激活T細胞,進而快速摧毀靶細胞,同時,CAR?T細胞大量擴增,釋放大量的細胞因子[27].之前JUNO公司JCAR015導致患者死亡,后來研究發(fā)現(xiàn)是治療時癌細胞進入神經中樞系統(tǒng),在炎癥條件下,CAR?T細胞通過血腦屏障后與癌細胞發(fā)生了反應,局部的CRS使患者腦水腫死亡.最近,Cellectis公司研發(fā)的通用型CAR?T產品——UCART123宣布上市后,在治療時出現(xiàn)了1例患者死亡的事件.據推測患者死亡也是由嚴重CRS導致的,但CRS爆發(fā)的原因尚不明確.

    現(xiàn)在看來,在CAR?T免疫治療的過程中,CRS釋放暫時是無法避免的.目前急需要找到CRS的主要病因減少細胞因子的釋放,從而緩解或者克服CAR?T應用安全性.目前,臨床上的解決方案不多,在各種免疫療法中,尋找腫瘤殺傷效果更突出、作用更持久的免疫細胞有可能會減弱細胞因子風暴的強度,緩解患者免疫細胞回輸后發(fā)熱、發(fā)燒的癥狀.

    3.2 缺乏特異性的靶點CAR?T細胞治療策略在血液腫瘤中能取得理想的效果,很重要的一個原因是血液腫瘤存在特異性的靶點,而實體瘤中很難找到像血液腫瘤那樣的特異性抗原,大部分抗原在腫瘤細胞上都是相對高表達,正常細胞也會有少量的表達,因此很難避免對正常細胞的非特異性殺傷,從而產生“On?target but off?tumor”的副作用.為了解決這個問題,F(xiàn)edorov等[28]設計了一種抗原特異性的抑制性CAR分子(inhibitory CAR,iCAR),這種CAR分子胞外區(qū)識別特定正常細胞上的抗原,而胞內區(qū)使用抑制性受體PD?1或CTLA?4的胞內區(qū).他們通過病毒感染使T細胞同時表達這種iCAR分子和識別腫瘤抗原的CAR分子,研究發(fā)現(xiàn)當靶細胞只表達腫瘤抗原時,這種CAR?T細胞可有效殺傷腫瘤細胞,而當細胞同時表達特定正常抗原和腫瘤抗原時,iCAR則會發(fā)揮抑制性的作用,這時T細胞不殺傷這種正常細胞.通過這種設計有望實現(xiàn)對CAR?T細胞的動態(tài)安全調控.

    除此之外,為了避免單一治療靶點可能引起的“On?target but off?tumor”副作用,研究人員設計了針對雙靶點的CAR?T細胞.比如,Wilkie等[29]將CD3ζ提供的第一信號和共刺激分子提供的第二信號分開,分別由ErbB2和MUC1特異性的CAR分子來提供,他們發(fā)現(xiàn)這種雙靶點的CAR?T細胞可有效殺傷ErbB2陽性細胞,但是T細胞的增殖需要ErbB2和MUC1兩種抗原的同時存在.Kloss等[30]也設計了與之類似的雙靶點CAR?T細胞,兩個信號分別由針對PSMA和PSCA的CAR分子提供,研究證實這種雙靶點的CAR只殺傷表達雙靶點的腫瘤細胞,而對表達單一抗原的細胞沒有殺傷作用.因此針對雙靶點的CAR?T細胞不僅增強了治療效果,還提高了治療的安全性.

    3.3 CAR-T細胞不能有效浸潤入腫瘤組織CAR?T細胞只有浸潤入腫瘤組織才能更好地發(fā)揮抗腫瘤作用,為了實現(xiàn)CAR?T細胞的有效浸潤,Chinnasamy等[31]設計了一種CAR?T細胞,這種細胞表達針對VEGFR?2的CAR分子,同時表達單鏈的IL?12分子.結果顯示,這種CAR?T細胞可有效抑制多種荷瘤模型中腫瘤的生長,而只表達其中一種分子的T細胞均沒有抑制作用.他們發(fā)現(xiàn)這種CAR?T細胞可有效浸潤入腫瘤組織,有效擴增并可持續(xù)較長的時間,其抗腫瘤作用可能是通過抑制VEGFR?2陽性的CD11b+Gr1+髓系抑制性細胞改變了免疫抑制性腫瘤微環(huán)境,從而實現(xiàn)了對腫瘤的有效抑制.

    為了實現(xiàn)CAR?T細胞的有效浸潤,Di等[32]給靶向CD30的CAR?T細胞共表達趨化因子受體CCR4,他們利用皮下淋巴瘤模型證實表達趨化因子CCL17或CCL22的淋巴瘤細胞可有效募集表達CCR4的CAR?T細胞,從而實現(xiàn)對腫瘤的有效殺傷.此外,Ca?ruana等在研究中發(fā)現(xiàn),體外擴增的CAR?T細胞缺乏乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)的表達,他們給CAR?T細胞同時過表達HPSE,使其有效降解細胞外基質(extracellular matrix,ECM),從而有效浸潤入腫瘤組織,增強對實體瘤的殺傷活性,這種CAR?T細胞有望應用于富含基質的實體瘤的治療.

    免疫抑制性介質如前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和腺苷酸的存在限制了CAR?T細胞治療在實體瘤中的應用,這是因為它們可通過激活蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)而抑制T細胞的活化.由于PKA對T細胞的抑制性作用依賴于其與膜分子ezrin的結合,因此,Newick[33]等設計了一種小分子多肽RIAD(regulatory subunit I anchoring disruptor)這種多肽可有效抑制PKA與ezrin的結合,從而解除PKA對T細胞的抑制性作用.研究發(fā)現(xiàn)這種多肽可促進CAR?T細胞的遷移和浸潤,從而促進其對實體瘤細胞的有效殺傷.

    3.4 腫瘤微環(huán)境對CAR-T細胞治療的影響腫瘤微環(huán)境中的免疫抑制性細胞可通過對CAR?T細胞的功能抑制消弱其對腫瘤細胞的有效殺傷.抑制這些免疫抑制性細胞的功能有望提高CAR?T細胞在實體瘤中的治療效果.John等[34]在利用針對HER2的CAR?T細胞治療乳腺癌的過程中,聯(lián)合使用針對PD?1的阻斷抗體,發(fā)現(xiàn)這種聯(lián)合治療可增強CAR?T細胞的抗腫瘤作用,同時研究發(fā)現(xiàn),這種聯(lián)合治療可顯著下調腫瘤微環(huán)境中Gr1+CD11b+骨髓源性抑制性細胞(myeloid?derivedsuppressor cells,MDSC)的比例.因此,這種聯(lián)合治療有望大大提高CAR?T細胞的治療效果.Burga等[35]在利用針對癌胚抗原(carcinoem?bryonic antigen,CEA)的CAR?T細胞進行肝轉移治療的研究中,發(fā)現(xiàn)肝MDSC(liver MDSC,L?MDSC)可通過PD?L1抑制CAR?T細胞的殺傷功能,而去除MDSC或中和MDSC賴以生存的GM?CSF或聯(lián)合使用PD?L1的阻斷抗體可增強CAR?T細胞的殺傷效果.

    腫瘤細胞在受到免疫攻擊后會上調免疫抑制性配體如PD?L1的表達,這些配體與CAR?T細胞的相應受體如PD?1的結合可明顯抑制T細胞的殺傷活性,從而減弱其抗腫瘤效果.Cherkassky等[36]在利用針對間皮素的CAR?T細胞治療小鼠胸膜間皮瘤模型時發(fā)現(xiàn),腫瘤微環(huán)境中PD?1的表達大大抑制了CAR?T細胞的殺傷活性,研究發(fā)現(xiàn)使用PD?1阻斷抗體,用shRNA抑制細胞內PD?1的表達或表達PD?1的顯性負突變體蛋白均可有效增強CAR?T細胞的抗腫瘤效果.因此研究認為聯(lián)合使用PD?1/PD?L1的阻斷抗體有望提高CAR?T細胞的抗腫瘤效果.

    為了消除PD?1介導的免疫抑制,Liu等[37]設計了一種轉換受體,這種受體由PD?1的胞外區(qū)和CD28的跨膜和胞內區(qū)組成,他們給CAR?T細胞感染這種轉換受體,發(fā)現(xiàn)可有效增強CAR?T細胞向腫瘤組織的浸潤,并減弱免疫微環(huán)境對CAR?T細胞的免疫抑制,展示出明顯增強的抗腫瘤活性.Suarez等[38]設計了一種CAR?T細胞,這種細胞表達針對碳酸酐酶IX(carbonic anhydrase IX,CAIX)的CAR分子,同時分泌可介導ADCC作用的PD?L1抗體,他們用這種CAR?T細胞治療轉移性腎透明細胞癌荷瘤小鼠,發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤活性比對照CAR?T細胞高5倍,腫瘤重量減少50%~80%.因此這種策略有望進一步提高CAR?T細胞在實體瘤中的治療效果.

    4 展望

    目前,隨著CAR?T技術在血液腫瘤中的成功應用,CAR?T細胞技術進入了一個嶄新的時代,也為腫瘤患者帶來了新的希望.然而,盡管CAR?T細胞在血液腫瘤中顯示了良好的治療效果,但在實體瘤的應用中還面臨諸多困難,如缺乏特異性的靶點、CAR?T細胞不能有效浸潤入腫瘤組織和免疫抑制性微環(huán)境對CAR?T細胞的抑制性作用等.CAR?T細胞治療的最終目標是治愈腫瘤,目前研究人員正在進行多方面的嘗試,試圖通過提高靶點的特異性或選擇多個靶點進行治療,促進CAR?T細胞向腫瘤組織的遷移浸潤,解除腫瘤微環(huán)境的免疫抑制性,提高CAR?T細胞在實體瘤中的抗腫瘤效果.相信通過研究人員的不斷探索,CAR?T細胞策略最終將成功應用于實體瘤的治療,使治愈實體瘤成為可能.

    [1] Maude SL,F(xiàn)rey N,Shaw PA,et al.Chimeric antigen receptor T cells for sustained remissions in leukemia[J].N Engl J Med,2014,371(16):1507-1517.

    [2] Brudno JN,Kochenderfer JN.Chimeric antigen receptor T?cell therapies for lymphoma[J].Nat Rev Clin Oncol,2017.

    [3] Batlevi CL,Matsuki E,Brentjens RJ,et al.Novel immunotherapies in lymphoid malignancies[J].Nat Rev Clin oncol,2016,13(1):25-40.

    [4] Gross G,Waks T,Eshhar Z.Expression of immunoglobulin?T?cell receptor chimeric molecules as functional receptors with antibody?type specificity[J].Proc Natl Acad Sci U S A,1989,86(24):10024-10028.

    [5] Savoldo B,Ramos CA,Liu E,et al.CD28 costimulation improves expansion and persistence of chimeric antigen receptor?modified T cells in lymphoma patients[J].J Clin invest,2011,121(5):1822-1826.

    [6] Frigault MJ,Lee J,Basil MC,et al.Identification of chimeric antigen receptors that mediate constitutive or inducible proliferation of T cells[J].Cancer Immunol Res,2015,3(4):356-367.

    [7] Terakura S,Yamamoto TN,Gardner RA,et al.Generation of CD19?chimeric antigen receptor modified CD8+T cells derived from virus?specific central memory T cells[J].Blood,2011,119(1):72-82.

    [8] Sait S,Modak S,Anti?GD2 immunotherapy for neuroblastoma[J].Expert Rev Anticancer Ther,2017,17(10):889-904.

    [9] Suzuki M,Cheung NK.Disialoganglioside GD2 as a therapeutic target for human diseases[J].Expert Opin Ther Targets,2015,19(3):349-362.

    [10] Louis CU,Savoldo B,Dotti G,et al.Antitumor activity and long?term fate of chimeric antigen receptor?positive T cells in patients with neuroblastoma[J].Blood,2011,118(23):6050-6056.

    [11] Esser R,Müller T,Stefes D,et al.NK cells engineered to express a GD2?specific antigen receptor display built?in ADCC?like activity against tumour cells of neuroectodermal origin[J].J Cell Mol Med,2012,16(3):569-581.

    [12] Caruso HG,Hurton LV,Najjar A,et al.Tuning Sensitivity of CAR to EGFR density limits recognition of normal tissue while Maintaining Potent AntitumorActivity[J].CancerRes,2015,75(17):3505-3518.

    [13] Sampson JH,Choi BD,Sanchez?Perez L,et al.EGFRvIII mCAR?modified T?cell therapy cures mice with established intracerebral glioma and generates host immunity against tumor?antigen loss[J].Clin Cancer Res,2014,20(4):972-984.

    [14] Brown CE,Alizadeh D,Starr R,et al.Regression of glioblastoma after chimeric antigen receptor T?cell therapy[J].N Engl J Med,2016,375(26):2561-2569.

    [15] Morello A,Sadelain M,Adusumilli PS.Mesothelin?targeted CARs:driving T cells to solid tumors[J].Cancer Discov,2016,6(2):133-146.

    [16] Beatty GL,Haas AR,Maus MV,et al.Mesothelin?specific chimeric antigen receptor mRNA?engineered T cells induce anti?tumor activity in solid malignancies[J].Cancer immunol Res,2014,2(2):112-120.

    [17] Posey AD Jr,Schwab RD,Boesteanu AC,et al.Engineered CAR T cells targeting the cancer?associated Tn?glycoform of the membrane mucin MUC1 control adenocarcinoma[J].Immunity,2016,44(6):1444-1454.

    [18] Zuccolotto G,F(xiàn)racasso G,Merlo A,et al.PSMA?specific CAR?engineered T cells eradicate disseminated prostate cancer in preclini?cal models[J].PloS One,2014,9(10):e109427.

    [19] Ma Q,Gomes EM,Lo AS,et al.Advanced generation anti?prostate specific membrane antigen designer T Cells for prostate cancer immu?notherapy[J].Prostate,2014,74(3):286-296.

    [20] Zhang G,Wang L,Cui H,et al.Anti?melanoma activity of T cells redirected with a TCR?like chimeric antigen receptor[J].Sci Rep,2014,4:3571.

    [21] Kandalaft LE,Powell DJ Jr,Coukos G.A phase I clinical trial of adoptive transfer of folate receptor?alpha redirected autologous T cells for recurrent ovarian cancer[J].J Transl Med,2012,10:157.

    [22] Geldres C,Savoldo B,Hoyos V,et al.T lymphocytes redirected against the chondroitin sulfate proteoglycan?4 control the growth of multiple solid tumors both in vitro and in vivo[J].Clin Cancer Res,2014,20(4):962-971.

    [23] Song DG,Ye Q,Santoro S,et al.Chimeric NKG2D CAR?expressing T cell?mediated attack of human ovarian cancer is enhanced by histone deacetylase inhibition[J].Human gene therapy,2013,24(3):295-305.

    [24] ScarfòI,Maus MV.Current approaches to increase CAR T cell potency in solid tumors:targeting the tumor microenvironment[J].J Immunotherapy Cancer,2017,5:28.

    [25] Johnson LA,June CH.Driving gene?engineered T cell immunotherapy of cancer[J].Cell Res,2017,27(1):38-58.

    [26] Newick K,O'Brien S,Moon E,et al.CAR T cell therapy for solid tumors[J].Annu rev Med,2017,68:139-152.

    [27] Barrett DM,Grupp SA,June CH.Chimeric antigen receptor?and TCR?modified T cells enter main street and wall street[J].J Immunol,2015,195(3):755-761.

    [28] Fedorov VD,Themeli M,Sadelain M.PD?1?and CTLA?4?based inhibitory chimeric antigen receptors(iCARs)divert off?target immunotherapy responses[J].Sci Transl Med,2013,5(215):215ra172.

    [29] Wilkie S,van Schalkwyk MC,Hobbs S,et al.Dual targeting of ErbB2 and MUC1 in breast cancer using chimeric antigen receptors engineered to provide complementary signaling[J].J Clin Immunol,2012,32(5):1059-1070.

    [30] Kloss CC,Condomines M,Cartellieri M,et al.Combinatorial antigen recognition with balanced signaling promotes selective tumor eradication by engineered T cells[J].Nat Biotechnol,2013,31(1):71-75.

    [31] Chinnasamy D,Yu Z,Kerkar SP,et al.Local delivery of interleukin?12 using T cells targeting VEGF receptor?2 eradicates multiple vascularized tumors in mice[J].Clin Cancer Res,2012,18(6):1672-1683.

    [32] Di Stasi A,De Angelis B,Rooney CM,et al.T lymphocytes coexpressing CCR4 and a chimeric antigen receptor targeting CD30 have improved homing and antitumor activity in a Hodgkin tumor model[J].Blood,2009,113(25):6392-6402.

    [33] Newick K,O'Brien S,Sun J,et al.Augmentation of CAR T?cell trafficking and antitumor efficacy by blocking protein kinase A localization[J].Cancer immunol Res,2016,4(6):541-551.

    [34] John LB,Devaud C,Duong CP,et al.Anti?PD?1 antibody therapy potently enhances the eradication of established tumors by gene?modified T cells[J].Clin Cancer Res,2013,19(20):5636-5646.

    [35] Burga RA,Thorn M,Point GR,et al.Liver myeloid?derived suppressor cells expand in response to liver metastases in mice and inhibit the anti?tumor efficacy of anti?CEA CAR?T[J].Cancer immunol,immunother,2015,64(7):817-829.

    [36] Cherkassky L,Morello A,Villena?Vargas J,et al.Human CAR T cells with cell?intrinsic PD?1 checkpoint blockade resist tumor?mediated inhibition[J].J Clin invest,2016,126(8):3130-3144.

    [37] Liu X,Ranganathan R,Jiang S,et al.A chimeric switch?receptor targeting PD1 augments the efficacy of second?generation CAR T cells in advanced solid tumors[J].Cancer Res,2016,76(6):1578-1590.

    [38] Suarez ER,Chang de K,Sun J,et al.Chimeric antigen receptor T cells secreting anti?PD?L1 antibodies more effectively regress renal cell carcinoma in a humanized mouse model[J].Oncotarget,2016,7(23):34341-34355.

    Research progress of CAR-T cell therapy in solid tumors

    GE Yu-Feng1,HAN Dong-Hui1,WU Jie-Heng2,YANG Fa1,XIE Pin1,QIN Wei-Jun1,YANG An-Gang2,WEN Wei-Hong21Department of Urology,Xijing Hospital,2Department of Immu?nology,F(xiàn)ourth Military Medical University,Xi'an 710032,China

    T cells modified by chimeric antigen receptor(CAR)therapy strategy,the CAR?T cell therapy,is a popular immune therapy strategy,which could specifically identify tumor antigens and then play a specific killing effect.It is a highly effective immune killer strategy with accurate targeting,strong lethality,and effective activation and proliferation of T cells is not depend?ent on MHC molecules.At present,CAR?T cell therapy is gradu?ally used from laboratory to clinic,which provides a cure hope for patients with blood tumor owing to a good treatment in lymphoma.The effect of CAR?T cells is not ideal in solid tumors due to the complexity of the tumor microenvironment,while there has been some good progress in solid tumors in recent years.In this paper,CAR?T treatment strategy in solid tumor research progress will be reviewed.

    chimeric antigen receptor;CAR?T;immunothera?py;solid tumor

    R730.51

    A

    2017-08-28;接受日期:2017-09-16

    國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973)(2013CB530500);國家自然科學基金(81372225)

    葛玉鳳.碩士.研究方向:免疫.E?mail:gyfeng_yzx@163.com

    溫偉紅.博士,副教授.研究方向:免疫.E?mail:wenweih@fmmu.edu.cn楊安鋼(共同通訊作者).博士,教授,博導.研究方向:免疫.E?mail:agyang@fmmu.edu.cn

    2095?6894(2017)10?50?04

    猜你喜歡
    靶點抗原特異性
    維生素D受體或是糖尿病治療的新靶點
    中老年保健(2021年3期)2021-12-03 02:32:25
    腫瘤免疫治療發(fā)現(xiàn)新潛在靶點
    精確制導 特異性溶栓
    BOPIM-dma作為BSA Site Ⅰ特異性探針的研究及其應用
    重復周圍磁刺激治療慢性非特異性下腰痛的臨床效果
    梅毒螺旋體TpN17抗原的表達及純化
    兒童非特異性ST-T改變
    結核分枝桿菌抗原Lppx和MT0322人T細胞抗原表位的多態(tài)性研究
    心力衰竭的分子重構機制及其潛在的治療靶點
    APOBEC-3F和APOBEC-3G與乙肝核心抗原的相互作用研究
    观看美女的网站| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产又爽黄色视频| 考比视频在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 桃花免费在线播放| 曰老女人黄片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 两性夫妻黄色片| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产在视频线精品| 伊人久久国产一区二区| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产熟女午夜一区二区三区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲第一av免费看| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 老司机影院毛片| 街头女战士在线观看网站| 国产片内射在线| 国产老妇伦熟女老妇高清| 高清在线视频一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久5区| 99久久精品国产亚洲精品| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 日本 av在线| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 深夜精品福利| 亚洲性夜色夜夜综合| 日本a在线网址| 久久久久久久精品吃奶| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| av超薄肉色丝袜交足视频| 99在线视频只有这里精品首页| 中文字幕人妻熟女乱码| 操出白浆在线播放| 日本vs欧美在线观看视频| 成人亚洲精品av一区二区 | avwww免费| 亚洲视频免费观看视频| 久久久久久大精品| 亚洲人成伊人成综合网2020| netflix在线观看网站| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产有黄有色有爽视频| 人妻久久中文字幕网| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 波多野结衣av一区二区av| 久久中文字幕一级| 校园春色视频在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产成年人精品一区二区 | 亚洲精品在线观看二区| 久久久久久大精品| 精品久久久久久电影网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 老司机午夜福利在线观看视频| 又黄又粗又硬又大视频| av在线播放免费不卡| 最近最新中文字幕大全免费视频| 91大片在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产av又大| 精品国产乱子伦一区二区三区| 日本黄色视频三级网站网址| 美女高潮到喷水免费观看| 波多野结衣一区麻豆| 高潮久久久久久久久久久不卡| 妹子高潮喷水视频| 免费高清视频大片| 色婷婷av一区二区三区视频| 岛国在线观看网站| 久久狼人影院| 嫁个100分男人电影在线观看| 久久影院123| 成人特级黄色片久久久久久久| 欧美激情 高清一区二区三区| 嫁个100分男人电影在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频 | 亚洲精华国产精华精| 久久伊人香网站| 黄色成人免费大全| 岛国视频午夜一区免费看| 久久午夜亚洲精品久久| 脱女人内裤的视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲七黄色美女视频| www.精华液| 国产精品免费视频内射| 国产欧美日韩精品亚洲av| 免费在线观看黄色视频的| 看片在线看免费视频| 国产深夜福利视频在线观看| 欧美成人性av电影在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 午夜免费成人在线视频| 国产成人精品久久二区二区91| 精品日产1卡2卡| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲精品在线观看二区| 电影成人av| av天堂久久9| 久久久久久免费高清国产稀缺| 十八禁网站免费在线| 一进一出抽搐动态| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 欧美在线黄色| 久久精品亚洲av国产电影网| 午夜日韩欧美国产| 男女下面进入的视频免费午夜 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 免费不卡黄色视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 真人做人爱边吃奶动态| 丁香欧美五月| 国产成人精品久久二区二区91| 国产av一区在线观看免费| 在线观看www视频免费| 99在线人妻在线中文字幕| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 午夜91福利影院| 精品久久久久久,| 一二三四在线观看免费中文在| 国产av一区二区精品久久| 国产精品成人在线| 日韩免费高清中文字幕av| 亚洲片人在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 免费日韩欧美在线观看| 十八禁网站免费在线| 很黄的视频免费| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲成人国产一区在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 热re99久久国产66热| 亚洲美女黄片视频| 桃红色精品国产亚洲av| 韩国av一区二区三区四区| 一a级毛片在线观看| 一区二区三区精品91| 欧美最黄视频在线播放免费 | 99精品久久久久人妻精品| 亚洲av成人一区二区三| 在线观看一区二区三区激情| 欧美乱妇无乱码| 黄片播放在线免费| 久久人人97超碰香蕉20202| 日本免费a在线| 成人18禁在线播放| 波多野结衣高清无吗| 日本a在线网址| 国产av一区在线观看免费| 久久久久久人人人人人| 亚洲av熟女| 欧美大码av| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 国产亚洲欧美精品永久| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 免费人成视频x8x8入口观看| 一级毛片高清免费大全| 国产又色又爽无遮挡免费看| 精品熟女少妇八av免费久了| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 国产成人av教育| 超碰成人久久| 日韩欧美三级三区| 久久久久九九精品影院| 精品久久蜜臀av无| 久久青草综合色| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产真人三级小视频在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 国产亚洲av高清不卡| 国产在线观看jvid| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 久久精品成人免费网站| 最新在线观看一区二区三区| 咕卡用的链子| 午夜精品国产一区二区电影| 亚洲,欧美精品.| 日韩av在线大香蕉| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 黑人猛操日本美女一级片| 91九色精品人成在线观看| 身体一侧抽搐| 欧美午夜高清在线| 超色免费av| 亚洲情色 制服丝袜| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 中文字幕人妻丝袜一区二区| 香蕉丝袜av| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲成国产人片在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 色哟哟哟哟哟哟| 99热只有精品国产| 一区二区三区精品91| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| av视频免费观看在线观看| 夜夜爽天天搞| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日日干狠狠操夜夜爽| 成人三级做爰电影| 亚洲五月色婷婷综合| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 一区在线观看完整版| 国产成人精品久久二区二区免费| 波多野结衣av一区二区av| 一级片免费观看大全| 精品久久久久久久久久免费视频 | 国产精品九九99| 极品人妻少妇av视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 午夜a级毛片| 亚洲人成电影观看| 黄色怎么调成土黄色| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 天堂动漫精品| 国产黄色免费在线视频| 夫妻午夜视频| 高清欧美精品videossex| 日韩欧美国产一区二区入口| 日本黄色日本黄色录像| 成年人黄色毛片网站| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲专区国产一区二区| 精品人妻在线不人妻| 交换朋友夫妻互换小说| 欧美一级毛片孕妇| 国产精品国产高清国产av| 99re在线观看精品视频| 午夜福利在线观看吧| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 老司机午夜十八禁免费视频| 999久久久精品免费观看国产| 在线看a的网站| 一级毛片精品| 国产精品二区激情视频| 国产单亲对白刺激| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产精品免费一区二区三区在线| 精品电影一区二区在线| 国产一区二区三区综合在线观看| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美激情久久久久久爽电影 | 美国免费a级毛片| 成人国产一区最新在线观看| 国产xxxxx性猛交| 免费搜索国产男女视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产主播在线观看一区二区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲av电影在线进入| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产精品 欧美亚洲| 成人av一区二区三区在线看| 99精国产麻豆久久婷婷| 欧美中文综合在线视频| 曰老女人黄片| 日本黄色日本黄色录像| 日本vs欧美在线观看视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 香蕉国产在线看| 啦啦啦在线免费观看视频4| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 午夜成年电影在线免费观看| 午夜两性在线视频| 久久香蕉国产精品| 国产区一区二久久| 欧美日韩av久久| 99精品欧美一区二区三区四区| 精品国产一区二区久久| 老司机亚洲免费影院| 亚洲激情在线av| 制服诱惑二区| 美女福利国产在线| 色在线成人网| 电影成人av| av国产精品久久久久影院| 丁香欧美五月| 日韩大码丰满熟妇| 国产1区2区3区精品| 亚洲国产精品sss在线观看 | 黄色成人免费大全| 精品福利永久在线观看| 日韩精品中文字幕看吧| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久久久久久久中文| 91精品三级在线观看| 国产精品永久免费网站| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美成人免费av一区二区三区| 婷婷精品国产亚洲av在线| 一区在线观看完整版| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 欧美日韩av久久| 狠狠狠狠99中文字幕| 日韩免费高清中文字幕av| 国产亚洲欧美在线一区二区| xxxhd国产人妻xxx| www.999成人在线观看| 黄色丝袜av网址大全| avwww免费| 欧美一级毛片孕妇| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 欧美黄色淫秽网站| 村上凉子中文字幕在线| 视频区图区小说| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久久水蜜桃国产精品网| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产一区二区三区视频了| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久人妻av系列| www.自偷自拍.com| 一级,二级,三级黄色视频| 在线观看舔阴道视频| 亚洲,欧美精品.| 欧美黄色淫秽网站| 一级a爱视频在线免费观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 色综合欧美亚洲国产小说| 妹子高潮喷水视频| 99热只有精品国产| 在线观看免费午夜福利视频| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲激情在线av| 国产熟女午夜一区二区三区| 一本综合久久免费| 亚洲美女黄片视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 欧美大码av| 乱人伦中国视频| av网站免费在线观看视频| 窝窝影院91人妻| 美女午夜性视频免费| 操出白浆在线播放| 九色亚洲精品在线播放| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产成人啪精品午夜网站| 男人舔女人的私密视频| 亚洲av熟女| 国产1区2区3区精品| av视频免费观看在线观看| 三级毛片av免费| 久久香蕉精品热| 51午夜福利影视在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 在线观看一区二区三区激情| 99精品久久久久人妻精品| av免费在线观看网站| 嫩草影视91久久| 1024香蕉在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 在线观看66精品国产| 成人免费观看视频高清| 最新美女视频免费是黄的| 国产三级在线视频| 日韩大码丰满熟妇| 美女福利国产在线| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 精品国产一区二区久久| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 99精品在免费线老司机午夜| 一a级毛片在线观看| 操美女的视频在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲国产欧美一区二区综合| 丁香六月欧美| 午夜福利一区二区在线看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲av成人av| 国产av又大| 欧美性长视频在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 国产激情久久老熟女| 亚洲精品一区av在线观看| 男人的好看免费观看在线视频 | 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 9热在线视频观看99| 村上凉子中文字幕在线| 夜夜爽天天搞| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 日韩视频一区二区在线观看| 国产高清videossex| 波多野结衣av一区二区av| 一级作爱视频免费观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 日韩视频一区二区在线观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 一区福利在线观看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 激情视频va一区二区三区| 久久久久久久久久久久大奶| 国产成+人综合+亚洲专区| 久久精品人人爽人人爽视色| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 99香蕉大伊视频| 亚洲欧美激情在线| 午夜福利在线观看吧| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 亚洲色图av天堂| 又大又爽又粗| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 欧美黄色淫秽网站| 国产av一区二区精品久久| 丰满迷人的少妇在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 亚洲国产欧美网| 天堂中文最新版在线下载| 国产乱人伦免费视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 少妇粗大呻吟视频| 在线av久久热| 日韩欧美一区二区三区在线观看| xxxhd国产人妻xxx| 极品教师在线免费播放| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 久久九九热精品免费| 男人舔女人的私密视频| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲成人国产一区在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲专区国产一区二区| 在线观看日韩欧美| 成人三级黄色视频| www.熟女人妻精品国产| 国产成人av激情在线播放| 一二三四社区在线视频社区8| 丁香六月欧美| а√天堂www在线а√下载| 午夜激情av网站| 两性夫妻黄色片| 97碰自拍视频| 亚洲avbb在线观看| 91精品三级在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 91av网站免费观看| 亚洲一区中文字幕在线| 制服诱惑二区| 色在线成人网| 级片在线观看| 久久久久久大精品| 9热在线视频观看99| 成人手机av| 99久久人妻综合| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲av美国av| 精品久久久精品久久久| 1024视频免费在线观看| 12—13女人毛片做爰片一| 热99re8久久精品国产| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产亚洲欧美在线一区二区| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 1024视频免费在线观看| 好男人电影高清在线观看| 大码成人一级视频| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 午夜91福利影院| 一级片免费观看大全| 成人av一区二区三区在线看| 欧美一级毛片孕妇| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产成+人综合+亚洲专区| 免费看十八禁软件| 国产深夜福利视频在线观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 91精品三级在线观看| av电影中文网址| 免费看十八禁软件| 99久久人妻综合| 国产成人啪精品午夜网站| 久久精品影院6| 欧美乱色亚洲激情| 一区二区三区精品91| 99国产极品粉嫩在线观看| av网站在线播放免费| 日韩欧美三级三区| 一本综合久久免费| 桃红色精品国产亚洲av| 男女午夜视频在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久久水蜜桃国产精品网| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产成+人综合+亚洲专区| 久久久久国内视频| 99久久人妻综合| 日本三级黄在线观看| 国产一区二区激情短视频| 不卡av一区二区三区| 国产成人影院久久av| 亚洲 国产 在线| 成人三级做爰电影| 久久久水蜜桃国产精品网| 热99国产精品久久久久久7| 两性夫妻黄色片| 久久国产乱子伦精品免费另类| 成人影院久久| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲精品成人av观看孕妇| 热99re8久久精品国产| 一区二区日韩欧美中文字幕| 中文字幕高清在线视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 美女大奶头视频| 91大片在线观看| 久久中文字幕一级| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 欧美乱码精品一区二区三区| 十八禁人妻一区二区| 免费看a级黄色片| 最新美女视频免费是黄的| 丝袜美腿诱惑在线| 国产99白浆流出| 久久草成人影院| 亚洲av成人av| 欧美不卡视频在线免费观看 | 男女下面进入的视频免费午夜 | 免费不卡黄色视频| 免费在线观看完整版高清| 欧美乱色亚洲激情| 真人一进一出gif抽搐免费| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品一区二区三区av网在线观看| 香蕉丝袜av| 亚洲精品国产区一区二| 一级片'在线观看视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 色婷婷久久久亚洲欧美| 操出白浆在线播放| av视频免费观看在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 免费看十八禁软件| 色在线成人网| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产成人精品无人区| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲国产中文字幕在线视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 久久香蕉精品热| 少妇的丰满在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 免费av毛片视频| 黑人操中国人逼视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 国产精品久久久久成人av| 麻豆国产av国片精品| av欧美777| 丝袜美足系列| 国产精华一区二区三区| 99re在线观看精品视频| 中文字幕高清在线视频| 黄片大片在线免费观看| 国产真人三级小视频在线观看| 丁香六月欧美| 丝袜人妻中文字幕| 在线观看一区二区三区激情| 久久 成人 亚洲| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 热99re8久久精品国产| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产成人av教育| 欧美午夜高清在线| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 女人被狂操c到高潮| 免费高清视频大片| 97人妻天天添夜夜摸| 国产区一区二久久| 成年人免费黄色播放视频| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 1024视频免费在线观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产亚洲欧美98| 国产精品国产av在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 天天添夜夜摸| 欧美日韩瑟瑟在线播放| www.www免费av| 97碰自拍视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成人av一区二区三区在线看| 久久久国产成人精品二区 | 黄色丝袜av网址大全| 国产一区二区激情短视频| 日韩国内少妇激情av|