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    乙酰谷酰胺注射液中有關(guān)物質(zhì)的研究

    2016-06-03 23:33:48王燕錢偉鋼厲昌衛(wèi)徐菁華孫東艷
    上海醫(yī)藥 2016年9期

    王燕+錢偉鋼+厲昌衛(wèi)+徐菁華+孫東艷+周華娜+王雪敏

    摘 要 目的:建立HPLC法測定乙酰谷酰胺注射液中的有關(guān)物質(zhì)。方法:HPLC檢測采用Sepax HP-C18柱、以0.1%的高氯酸水溶液-甲醇(99∶1)為流動相、檢測波長為210 nm、柱溫25 ℃。 結(jié)果: 6個有關(guān)物質(zhì)能較好地分離,專屬性、線性、定量限、檢測限、校正因子、系統(tǒng)精密度、溶液穩(wěn)定性、重復(fù)性均符合2010年版中國藥典要求,結(jié)論:該方法可將乙酰谷酰胺注射液中的乙酰谷酰胺與6個有關(guān)物質(zhì)完全分離。

    關(guān)鍵詞 乙酰谷酰胺注射液 HPLC 有關(guān)物質(zhì)

    中圖分類號:R977.9; R927.11 文獻標(biāo)識碼:A 文章編號 :1006-1533(2016)09-0071-05

    Study on the relevant substance in aceglutamide injection

    WANG Yan1*,QIAN Weigang1,LI Changwei1,XU Jinghua1,SUN Dongyan1,ZHOU Huana2,WANG Xuemin2**

    (1. Shanghai Zhaohui Pharmaceutical Co. LTD., Shanghai 201908, China;

    2. Nanjing Zeheng Pharmaceutical Technology Development Co. LTD., Nanjing 210046, China)

    ABSTRACT Objective: To establish an HPLC method for determination of relevant substances in aceglutamide injection. Methods: HPLC was performed on a Sepax HP-C18 column with a mobile phase of 0.1% perchloric acid and methanol(99:1) at detection wavelength of 210 nm and column temperature of 25 ℃. Results: Six relevant substances were well separated. The specificity, linearity, limit of quantitation and detection, correction factor, system precision, solution stability and repeatability were conformed to the requirements of 2010 version of Chinese Pharmacopoeia. Conclusion: Aceglutamide can be completely separated with 6 relevant substances in aceglutamide injection by this method.

    KEY WORDS aceglutamide injection; HPLC; relevant substance

    乙酰谷酰胺為腦功能改善藥,具有改善神經(jīng)細胞代謝、維持神經(jīng)應(yīng)激機能及降低血氨的作用[1]。臨床上主要用于腦外傷性昏迷、神經(jīng)外科手術(shù)等引起的昏迷、癱瘓及智力減退、記憶力障礙等適應(yīng)證的治療[2-3]。乙酰谷酰胺注射液收載于中國藥典2010版,采用自身對照色譜法檢測有關(guān)物質(zhì)[4],該方法僅對最大單雜質(zhì)及總雜質(zhì)進行限度檢查;《日本藥典》16版XVI Official Monographs中乙酰谷酰胺鋁有關(guān)物質(zhì)檢測采用的是雜質(zhì)外標(biāo)及峰面積歸一化法,該方法對雜質(zhì)2-acetamidoglutarimide及總雜質(zhì)進行檢測[5],但未對其它已知雜質(zhì)進行定性研究。本文參考中國藥典2010版二部乙酰谷酰胺注射液有關(guān)物質(zhì)檢查方法和《日本藥典》16版XVI Official Monographs乙酰谷酰胺鋁有關(guān)物質(zhì)檢查方法,建立了乙酰谷酰胺注射液有關(guān)物質(zhì)檢測方法,通過對乙酰谷酰胺原料合成工藝及乙酰谷酰胺注射液長期留樣有關(guān)物質(zhì)進行分析,經(jīng)與有關(guān)物質(zhì)對照品比較,共定性研究了6個有關(guān)物質(zhì),為乙酰谷酰胺的生產(chǎn)及質(zhì)量控制提供了重要的依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    高效液相色譜儀(日本島津公司),含LC-20AT泵及SDP-20AT紫外檢測器及HT-230A型柱溫箱(日本島津公司)。色譜柱為Sepax HP-C18(美國賽分科技有限公司,4.6 mm×250 mm,5 μm)。乙酰谷酰胺對照品(中國食品藥品檢定研究院,批號:100859-200501);乙酰谷酰胺注射液(111002,111003,111004,上海朝暉藥業(yè)有限公司,規(guī)格:5 ml,0.25 g);有關(guān)物質(zhì)A(谷氨酸,中國食品藥品檢定研究院,批號:100023-198601);有關(guān)物質(zhì)B(L-谷氨酰胺,Dr. Ehrenstorfer Gmbh惠贈,批號:10408);有關(guān)物質(zhì)C(N-乙酰-D-谷氨酰胺,自制,批號:20130110);有關(guān)物質(zhì)D(焦谷氨酸,Council of EuropeEDQM,批號:004P51);有關(guān)物質(zhì)E(N-(2,6-二氧代-3-哌啶基)乙酰胺,自制,批號:20130120);有關(guān)物質(zhì)F(N-乙酰-L-谷氨酸,自制,批號:20120917);甲醇為色譜純,其他試劑均為分析純,水為純化水。

    1.2 有關(guān)物質(zhì)檢測方法

    參考中國藥典2010版二部乙酰谷酰胺注射液有關(guān)物質(zhì)檢查方法和JP XVI Official Monographs乙酰谷酰胺鋁有關(guān)物質(zhì)檢查方法,建立了HPLC方法測定乙酰谷酰胺注射液的有關(guān)物質(zhì)。取本品,加流動相溶解并稀釋制成每毫升中約含1 mg的溶液,作為供試品溶液;精密量取1 ml,置100 ml量瓶中,加流動相稀釋制成10 μg/ml的溶液,作為對照溶液;同法配置缺乙酰谷酰胺的空白輔料溶液;另精密稱取乙酰谷酰胺與有關(guān)物質(zhì)A、B、C、D、E、F對照品適量,加流動相制成0.2 mg·ml-1的溶液,作為對照品儲備液;分別取乙酰谷酰胺及有關(guān)物質(zhì)A、B、C、D、E和F對照品儲備液適量,加流動相溶解并稀釋成每1 ml中含有關(guān)物質(zhì)A、B各10 μg,乙酰谷酰胺、有關(guān)物質(zhì)C、D和F各5 μg,有關(guān)物質(zhì)E 0.5 μg的溶液,作為系統(tǒng)適用性溶液,按相同的方法分別配制相同濃度的單個對照品溶液作有關(guān)物質(zhì)定位溶液。用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以0.1%的高氯酸水溶液-甲醇(99∶1)為流動相;檢測波長為210 nm;柱溫25 ℃,進樣量為20 μl。

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