溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾治療大鼠腦出血并發(fā)腦心綜合征的實驗觀察

祝艷芳　杜業(yè)亮　仇學(xué)亮　孫川川　周俊研　王小雨

1)濰坊醫(yī)學(xué)院研究生院　濰坊　261042　2)山東濰坊市人民醫(yī)院腦科醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科　濰坊　261021

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溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾治療大鼠腦出血并發(fā)腦心綜合征的實驗觀察

祝艷芳1)杜業(yè)亮2)仇學(xué)亮1)孫川川1)周俊研1)王小雨1)

1)濰坊醫(yī)學(xué)院研究生院濰坊2610422)山東濰坊市人民醫(yī)院腦科醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科濰坊261021

【摘要】目的探討溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾對大鼠腦出血并發(fā)腦心綜合征(CCS)時的心電圖的變化及血漿中NO、皮質(zhì)酮濃度變化的影響。方法采用大鼠自體股動脈血注入尾狀核建立腦出血模型，連續(xù)監(jiān)測大鼠造模后2 h標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖。將實驗大鼠分為正常對照組、假手術(shù)組、CCS組、藥物組，分別觀察治療12 h、3 d、7 d后各組大鼠CCS的發(fā)生率及血漿中NO、皮質(zhì)酮水平的變化。結(jié)果藥物組大鼠CCS的發(fā)生率可能降低；血漿NO、皮質(zhì)酮水平在12 h時假手術(shù)組、CCS組、藥物組較正常組明顯升高。假手術(shù)組則快速恢復(fù)正常水平；CCS組、藥物組則在3 d、7 d時逐漸下降，CCS組在各點時始終高于正常組；藥物組NO水平在7 d低于正常組。結(jié)論溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾通過影響大鼠血漿中NO、皮質(zhì)酮的變化，可能降低應(yīng)激狀態(tài)下NO、皮質(zhì)酮的水平，減少大鼠急性腦出血并發(fā)CCS的發(fā)生。

【關(guān)鍵詞】急性腦出血；腦心綜合征；溴隱亭；普萘洛爾；NO；皮質(zhì)酮

腦心綜合征(cerebral-cardiac syndrome，CCS)是指原無冠心病及心電圖異常改變，由于急性腦病，如腦卒中、急性顱腦外傷等累及丘腦下部、腦干、自主神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致心血管功能障礙，發(fā)生的類似心律失常、心肌缺血、急性心肌梗死或心力衰竭等的一組癥狀，異常心電圖可隨腦血管病的好轉(zhuǎn)而恢復(fù)[1-2]。急性腦出血并發(fā)CCS有起病急、進(jìn)展快、病死率高的特點，有研究顯示血漿NO、皮質(zhì)酮在腦心綜合征的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。我們通過大鼠自體股動脈取血注入尾狀核建立腦出血致CCS模型，監(jiān)測溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾對大鼠血漿中NO、皮質(zhì)酮濃度變化的影響。

1材料與方法

1.1材料(1)實驗動物：成年雄性Wistar大鼠購自濟(jì)寧市魯康動物飼料經(jīng)銷中心，平均體質(zhì)量200～280 g，鼠齡約60 d，共40只。(2)實驗儀器：大鼠腦立體定位儀、50 μL微量進(jìn)樣器。(3)實驗試劑：大鼠皮質(zhì)酮、NO試劑盒(上海浩本生物科技有限公司提供)。(4)實驗藥物：溴隱亭(Novartis Farma S.p.A生產(chǎn)，2.5 mg/片)、普萘洛爾(山西云鵬制藥有限公司生產(chǎn)，10 mg/片)。

1.2模型制備所有大鼠連接心電圖，心電圖異常者剔除。(1)采用大鼠自體股動脈血50 μL注入尾狀核方法復(fù)制急性腦出血模型。(2)術(shù)后對大鼠進(jìn)行行為學(xué)監(jiān)測，應(yīng)用Berderson評分法≥1分為腦出血造模成功)，動態(tài)監(jiān)測Ⅱ?qū)?lián)標(biāo)準(zhǔn)心電圖2 h，選擇有心電圖異常(心律失常、ST段壓低、T波改變、出現(xiàn)U波等)的大鼠腦心綜合征模型(除去模型中竇性心率過緩的大鼠)。

1.3分組及給藥具體方法[4]：將大鼠分為4組，每組10只。(1)正常對照組：不進(jìn)行任何手術(shù)，常規(guī)飼養(yǎng)；每日灌服生理鹽水1.5 mL一次；(2)假手術(shù)組：參照腦出血模型的方法操作，微量進(jìn)樣器注入50 μL的生理鹽水，術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)，每日灌服生理鹽水1.5 mL一次；(3)CCS組：建立腦心綜合征模型，術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)，每日灌服生理鹽水1.5 mL一次；(4)藥物組：建立心綜合征模型，術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)，給予溴隱亭(1 mg/kg)和普萘洛爾(10 mg/kg)溶于生理鹽水1.5 mL中灌服，1次/d。

1.4樣品采集與處理各組大鼠于12 h、3 d、7 d點時，分別腹腔麻醉、固定，監(jiān)測大鼠的標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電圖，取股動脈血1 mL，在室溫下(18～25 ℃)靜置，置入離心機(jī)(3 000 r/min)離心10 min，取上清液，密封置于-40 ℃冰箱中集中待測。采用ELISA法測定大鼠血漿中NO、皮質(zhì)酮水平。

2結(jié)果

(1)12 h、3 d、7 d時，CCS組心電圖異常大鼠分別是8、4、1；藥物組分別是6、4、0，總體上CCS組異常率可能高于藥物組。(2)血漿NO、皮質(zhì)酮水平在12 h時假手術(shù)組、CCS組、藥物組較正常組明顯升高(P<0.05)。假手術(shù)組則快速恢復(fù)正常水平；CCS組、藥物組則在3 d、7 d時逐漸下降(P<0.05)，CCS組在各點時始終高于正常組(P<0.01)；藥物組中皮質(zhì)酮、NO在3 d、7 d時比CCS組下降較快(P<0.05)；藥物組NO水平在7 d時低于正常組。大鼠NO、皮質(zhì)酮水平見表1、表2。

表1　4組血漿大鼠皮質(zhì)酮水平比較　

注：同一時點，與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與假手術(shù)組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與藥物組比較，☆P<0.05，☆☆P<0.01

表2　4組血漿大鼠NO水平比較　

注：同一時點，與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與假手術(shù)組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與藥物組比較，☆P<0.05，☆☆P<0.01

3討論

目前腦心綜合征的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，國內(nèi)外主要認(rèn)為有以下幾個方面[3-4]：(1)急性腦出血可以導(dǎo)致顱內(nèi)高壓，嚴(yán)重時累及腦干、下丘腦等植物神經(jīng)中樞，交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)活動增強，兒茶酚胺類合成增加，內(nèi)因子和應(yīng)激性類固醇分泌，導(dǎo)致各種心律失常及冠狀動脈痙攣、缺氧、心肌缺血等。(2)心血管的運動中樞在腦干下部，其功能受損直接可出現(xiàn)心功能障礙的表現(xiàn)。(3)也可能與腦出血后各種并發(fā)癥(如電解質(zhì)紊亂、高凝狀態(tài)或血液濃縮等)和應(yīng)用甘露醇等藥物脫水降顱壓加重了心臟的負(fù)荷，誘發(fā)心肌缺氧、心功能不全等有關(guān)。

皮質(zhì)醇是一種類固醇類激素，由腎上腺皮質(zhì)分泌，在大鼠體內(nèi)主要以皮質(zhì)酮的形式存在。腦出血時，皮質(zhì)醇的濃度可在2 h內(nèi)迅速升高，其機(jī)制為[5]：(1)腦組織破壞造成下丘腦等的損害，垂體ACTH分泌增多，反饋作用減弱，皮質(zhì)醇升高；(2)腦組織損傷后，神經(jīng)介質(zhì)向周圍血管釋放，導(dǎo)致兒茶酚胺或5-HT促使ACTH分泌；(3)急性腦出血時免疫反應(yīng)被激活，后者可激活下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸，皮質(zhì)醇增加。在腦血管病急性期，NO升高是由機(jī)體通過自身反饋誘導(dǎo)型NOS含量增加所致[6]。研究認(rèn)為，NO有雙向作用，既可通過改善腦血流供應(yīng)保護(hù)損傷的腦組織，也可產(chǎn)生神經(jīng)毒性，或抑制DNA合成，導(dǎo)致細(xì)胞程序性死亡，使邊緣組織向梗死發(fā)展[7]。正常情況下皮質(zhì)醇、NO保持動態(tài)平衡狀態(tài)，參與各種機(jī)體的生理及病理過程，是經(jīng)典的應(yīng)激狀態(tài)反應(yīng)指標(biāo)，隨著腦出血的好轉(zhuǎn)，異常的皮質(zhì)醇、NO也可得到糾正。

雖然本實驗研究例數(shù)較少，CCS的發(fā)生率缺乏有效的統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)，但仍足以看到溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾干預(yù)治療后CCS發(fā)生率的減輕趨勢。在腦心綜合征急性期，皮質(zhì)酮、NO釋放失去平衡，處于病理性升高狀態(tài)，本實驗顯示皮質(zhì)酮、NO在假手術(shù)組有短暫的升高，很快降至正常水平，是一種短期內(nèi)的應(yīng)激反應(yīng)，說明發(fā)生CCS時機(jī)體的應(yīng)激狀態(tài)較單純腦出血更為明顯；藥物組中皮質(zhì)酮、NO在3 d、7 d時比腦心綜合征組下降較快(P<0.05)。β受體阻滯劑[8]尤其是普萘洛爾有較好的滲透性和親脂性，更容易通過血腦屏障，能有效降低血中兒茶酚胺濃度，降低新陳代謝率，降低心率，減少心輸出量和外周阻力，使其他器官、組織的血流下降，卻并不明顯降低腦血流量，臨床上可用來作為控制交感神經(jīng)興奮的首選藥物。而溴隱亭是多巴胺受體激動劑，通過激動多巴胺受體，抑制IL-6的活性降低ACTH水平，進(jìn)而達(dá)到控制交感神經(jīng)過度興奮的目的[9]。已有臨床研究表明[10]，溴隱亭聯(lián)合普萘洛爾對中樞神經(jīng)損害所致的交感神經(jīng)過度興奮綜合征有治療效果。CCS早期給予普萘洛爾聯(lián)合溴隱亭治療，可能通過降低交感神經(jīng)的興奮性，對糾正皮質(zhì)酮、NO的平衡失調(diào)起到一定影響，從而能穩(wěn)定丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸功能，減輕腦出血后CCS的發(fā)生與發(fā)展。

4參考文獻(xiàn)

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(收稿2015-04-20)

【中圖分類號】R-332

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1673-5110(2016)05-0031-02