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    DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè)在胸腔積液診斷中價(jià)值

    2014-11-15 22:33:43鄭百波
    中外醫(yī)療 2014年20期
    關(guān)鍵詞:胸腔積液癌胚抗原診斷價(jià)值

    鄭百波

    [摘要] 目的 對(duì)胸腔積液患者的胸水脫落細(xì)胞進(jìn)行DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè),將兩種方法進(jìn)行比較,評(píng)估其診斷價(jià)值。方法 選取經(jīng)過臨床確診的56例胸腔積液患者作為觀察組,56例良性胸腔積液患者作為對(duì)照組,對(duì)胸水脫落細(xì)胞進(jìn)行DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè)。結(jié)果 DNA倍體分析的特異度為80.36%,靈敏度為83.93%,Youden指數(shù)為0.7029;CEA檢測(cè)的特異度為96.43%,靈敏度為60.71%,Youden指數(shù)為0.5714,兩種診斷方法在靈敏度和特異度方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01),而在Youden指數(shù)方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 DNA倍體分析檢測(cè)胸腔積液的靈敏度和特異度更高,如果和CEA聯(lián)用,診斷價(jià)值更高。

    [關(guān)鍵詞] DNA倍體分析;癌胚抗原;胸腔積液;診斷價(jià)值

    [中圖分類號(hào)] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742(2014)07(b)-0022-02

    胸腔積液是一種常見的胸膜病變,其發(fā)生原因有很多,但最主要的是結(jié)核性和惡性腫瘤[1]。對(duì)于胸腔積液的傳統(tǒng)診斷方法主要包括依據(jù)細(xì)胞學(xué)檢查、細(xì)菌學(xué)檢查以及胸膜活檢進(jìn)行確認(rèn)[2]。目前DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè)被應(yīng)用到臨床,在診斷惡性胸腔積液方面也有較大的臨床價(jià)值[3]。該研究選取該院2011年1月—2013年1月間收治的患者112例,旨在探討采用DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè)對(duì)胸腔積液患者的胸水脫落細(xì)胞進(jìn)行診斷分析,以評(píng)估這兩種方法的診斷價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取該院收治的患者112例,綜合分析患者的病史、影像學(xué)資料、各項(xiàng)檢查結(jié)果,獲得最終的診斷結(jié)果。將已經(jīng)確診的患者隨機(jī)分成兩組,其中實(shí)驗(yàn)組56例,均為惡性胸腔積液患者,男27例,女29例,年齡34~75歲,平均47歲,對(duì)照組56例,均為良性胸腔積液患者,男24例,女32例,年齡32~77歲,平均50歲,兩組一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。

    1.2 方法

    1.2.1 DNA倍體分析 選擇美國(guó)Becton Dick-inson公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),DNA倍體分析試劑盒中的A液為細(xì)胞膜穿透液,B液為RNA消化酶,C液為PI染液,光源為氬離子激光器,輸出功率為15 w,波長(zhǎng)為630 nm,保證峰的變異系數(shù)(CV)<5%,可以采用雞血紅細(xì)胞對(duì)其進(jìn)行調(diào)節(jié)[4]。主要包括以下幾個(gè)步驟:①對(duì)所有患者均進(jìn)行胸腔穿刺,從得到的胸水中取出50 mL進(jìn)行抗凝處理。②將處理之后的胸水采用1 200轉(zhuǎn)離心5 min,留下沉淀舍棄上清液,采用生理鹽水進(jìn)行洗滌和重復(fù)離心直至沉淀中出現(xiàn)紅細(xì)胞。③將紅細(xì)胞充分溶解,搖勻震蕩,并且避光靜置10 min后,采用1 200轉(zhuǎn)離心5 min,留下沉淀舍棄上清液。④采用PBS液對(duì)沉淀進(jìn)行1~2次洗滌,采用1 200轉(zhuǎn)離心5 min,留下沉淀舍棄上清液,制成單細(xì)胞懸液。⑤從單細(xì)胞懸液中取出1 mL,向其中加入250 μL的A液,然后再加入200 μL的B液,在室溫條件下進(jìn)行10 min的孵育。⑥然后向孵育后的單細(xì)胞懸液中加入200 μL的冷C液,放到冰箱中進(jìn)行10 min的避光孵育,并將冰箱溫度調(diào)至4 ℃。⑦從冰箱中取出細(xì)胞懸液,采用300目篩網(wǎng)進(jìn)行過濾,最后進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)。采用健康人外周血淋巴細(xì)胞作為正常二倍體標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,選擇每例患者的10 000個(gè)細(xì)胞進(jìn)行測(cè)定,將結(jié)果用單參數(shù)組方圖顯示,采用Cell-Quest軟件獲取細(xì)胞信息,采用ModFitLt軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。將被測(cè)標(biāo)本細(xì)胞DNA含量峰均道值與對(duì)照二倍體峰值之比為記作DNA指數(shù),即DI。若為正常人,其細(xì)胞的二倍體DI范圍是(1±0.1);若為患者,在DI>1.1或者DI<0.9且組方圖上出現(xiàn)兩個(gè)相分離的峰時(shí),可以判定其為異倍體,陽性[5]。

    1.2.2 癌胚抗原檢測(cè) 選擇德國(guó)拜耳公司生產(chǎn)的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀進(jìn)行檢測(cè),測(cè)定方法為化學(xué)發(fā)光免疫法,診斷標(biāo)準(zhǔn)為:癌胚抗原>10 μg/L,則為陽性[6]。

    1.3 統(tǒng)計(jì)方法

    采用 SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析,定量資料根據(jù)數(shù)據(jù)的正態(tài)分布與否,對(duì)兩種診斷方法的診斷指數(shù)、特異度、陽性預(yù)測(cè)值、靈敏度和準(zhǔn)確度等進(jìn)行計(jì)算,并采用U檢驗(yàn)比較診斷指標(biāo),采用χ2比較組間陽性率。

    2 結(jié)果

    2.1 胸水DNA倍體分析結(jié)果

    在試驗(yàn)組中的56例患者,有47例胸水DNA倍體檢測(cè)為陽性,9例DNA倍體檢測(cè)為陰性,陽性率為83.93%;在對(duì)照組56例中,有11例檢測(cè)為陽性,45例為陰性,陽性率為19.64%。P=0.324,兩組陽性率相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.005,V2=32.16,V=1)。

    2.2 胸水CEA檢測(cè)結(jié)果

    在試驗(yàn)組中56例患者,有34例為陽性,22例為陰性,陽性率為60.71%;在對(duì)照組56例中,有2例為陽性,54例為陰性,陽性率為3.57%。P=0.187,兩組陽性率相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.005,V2=28.15,V=1)。

    2.3 胸水的DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè)診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)結(jié)果

    采用胸水DNA倍體分析,靈敏度=[真陽性/(真陽性+假陰性)]×100%=83.93%,特異度=[真陰性/(真陰性+假陽性)]×100%=80.36%,Youden 指數(shù)=(靈敏度+特異度)-1=0.7029;采用癌胚抗原檢測(cè),靈敏度=[真陽性/(真陽性+假陰性)]×100%=60.71%,特異度=[真陰性/(真陰性+假陽性)]×100%=96.43%,Youden 指數(shù)=(靈敏度+特異度)-1=0.5714。由此可見,兩種診斷方法在靈敏度和特異度方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Youden 指數(shù)P>0.05。endprint

    3 討論

    呼吸內(nèi)科常見的疾病之一就是胸膜疾病,對(duì)于胸腔積液患者,由于腫瘤細(xì)胞侵犯胸膜時(shí)癌細(xì)胞會(huì)直接在胸腔內(nèi)釋放腫瘤標(biāo)志物,如果發(fā)生異常,腫瘤標(biāo)志物已大量吸收入血,則血清內(nèi)腫瘤標(biāo)志物的水平將會(huì)明顯升高[7],而且胸腔液含量、形成速度及患者體質(zhì)均影響患者呼吸困難的程度,若積液含量多且形成較快,則患者肺臟功能受到影響,會(huì)出現(xiàn)端坐呼吸、呼吸困難加重甚至發(fā)紺等[8]。由于以往的診斷方法具有很多缺點(diǎn),所以我們現(xiàn)在多采用DNA倍體分析和癌胚抗原檢測(cè)。DNA倍體分析的主要基于如下原理:正常人體細(xì)胞含23對(duì)染色體,DNA含量穩(wěn)定,為二倍體,只有當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入分裂期時(shí)細(xì)胞DNA含量增加,但是腫瘤細(xì)胞由于異常增殖,往往使染色體發(fā)生突變,染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)目發(fā)生異常,常形成三倍體和亞倍體等,所以可以對(duì)細(xì)胞內(nèi)的染色體進(jìn)行檢測(cè),如果為異倍體,則提示可能出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞,但是由于有些腫瘤細(xì)胞可能會(huì)在復(fù)制時(shí)彌補(bǔ)其染色體丟失的部分,造成DNA含量平衡,而且在實(shí)體腫瘤中有很多都為二倍體腫瘤,檢測(cè)過程中若非整倍體峰很小則顯示不出來,由于種種原因也會(huì)造成DNA倍體分析出現(xiàn)假陰性,所以要仔細(xì)分析,采用多種診斷方法進(jìn)行準(zhǔn)確診斷。而癌胚抗原應(yīng)用也比較廣泛,它是一種大分子的糖蛋白,是腫瘤標(biāo)志物之一,在血清中含量較低,但是在癌癥患者的血清中含量則顯著增多,而且該物質(zhì)不容易進(jìn)入血液循環(huán),也不容易被代謝,特異度極高,具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

    在該研究中,DNA倍體分析的特異度達(dá)到了80.36%,綜合反應(yīng)靈敏度和特異度的Youden指數(shù)也達(dá)到0.7029,可見DNA倍體分析具有良好的診斷價(jià)值; CEA的靈敏度為60.71%,特異度為96.43%,Youden指數(shù)為0.5714。二者的靈敏度和特異度相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01),但兩者的Youden指數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。由此可見,兩種診斷方法在靈敏度和特異度方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。綜上,采用DNA倍體分析檢測(cè)胸腔積液更加簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確,能夠彌補(bǔ)傳統(tǒng)診斷方法的不足。將大大提高診斷率,有效提高患者的生存質(zhì)量,值得臨床推廣應(yīng)用。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1] 陳紹森.細(xì)胞DNA倍體分析聯(lián)合腫瘤特異性生長(zhǎng)因子檢測(cè)對(duì)惡性胸腔積液的診斷價(jià)值[J].廣東醫(yī)學(xué),2013,34(2):236.

    [2] 姜濤.DNA倍體分析在胸腔積液診斷中應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)師進(jìn)修,2012,36(16):28.

    [3] 張恒.胸腔積液腫瘤特異性生長(zhǎng)因子檢測(cè)對(duì)肺癌的診斷價(jià)值[J].中華全科醫(yī)學(xué),2011,7(12):1362.

    [4] 陳連周.血清五種主要腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)在肺癌診斷中的臨床價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)藥,2012,3(10):617.

    [5] 張心中.心鈉素、癌胚抗原及鐵蛋白聯(lián)合測(cè)定對(duì)良、惡性胸腔積液的鑒別價(jià)值[J].山東醫(yī)藥,2012(5):223.

    [6] 楊勝茹.四項(xiàng)生化指標(biāo)的比值在胸腔積液鑒別診斷中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,23(2):120.

    [7] 馮家伍.腺苷脫氨酶測(cè)定在結(jié)核性胸膜炎中的應(yīng)用[J].河北醫(yī)學(xué),2010,2(13):148.

    [8] 鄢斌.聯(lián)合檢測(cè)血清及胸水LDH、ADA、CEA、CA153對(duì)胸水性質(zhì)的鑒別價(jià)值[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2011,25(10):1505.

    (收稿日期:2014-04-13)endprint

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