AMPK/PGC-1α通路對尿毒癥心肌病大鼠心臟損傷及線粒體能量代謝的調(diào)控機(jī)制

【摘要】目的 探究AMP活化的蛋白質(zhì)激酶（AMPK）/過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助因子1-α（PGC-1α）通路在尿毒癥心肌?。║CM）大鼠心臟損傷及線粒體能量代謝中的調(diào)控機(jī)制。方法 將30只大鼠隨機(jī)分為3組：對照組、UCM組、鹽酸阿霉素（DOX）組，每組10只。超聲心動圖檢測心功能指標(biāo)：左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左心室舒張末期內(nèi)徑（LVIDD）、E/A，HE染色檢測心肌組織病理變化，Masson染色檢測心肌組織纖維化水平，Western blotting檢測心肌組織AMPK、PGC-1α、磷酸化AMPK（p-AMPK）、磷酸化PGC-1α（p-PGC-1α）蛋白水平，JC-1試劑盒檢測線粒體膜電位，線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ試劑盒檢測線粒體復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性，ATP含量檢測試劑盒檢測ATP水平，透射電子顯微鏡檢測心肌線粒體超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 與對照組相比，UCM組大鼠心肌纖維紊亂、斷裂，心肌間隙可見膠原大量沉積，大鼠LVEF無顯著性差異，LVIDD增加，E/A降低（Plt;0.05），心肌組織中AMPK、PGC-1α表達(dá)無顯著性差異，p-AMPK、p-PGC-1α蛋白表達(dá)增加（Plt;0.05），心肌線粒體腫脹、空泡化，且部分線粒體嵴消失，線粒體膜電位減少，ATP含量減少（Plt;0.05）心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性均減少（Plt;0.05）；與UCM組相比，DOX組大鼠心肌纖維損傷改善，心肌間隙膠原沉積減少，LVEF無顯著性差異，LVIDD減少，E/A增加（Plt;0.05），心肌組織中AMPK、PGC-1α表達(dá)無顯著性差異，p-AMPK、p-PGC-1α蛋白表達(dá)減少（Plt;0.05），心肌線粒體結(jié)構(gòu)改善，線粒體膜電位增加，ATP含量增加（Plt;0.05），心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性均增加（Plt;0.05）。結(jié)論 抑制AMPK/PGC-1α通路磷酸化可改善UCM大鼠心功能及心肌組織病理學(xué)變化，改善線粒體能量代謝。

【關(guān)鍵詞】尿毒癥心肌??；AMPK/PGC-1α通路；線粒體能量代謝

【DOI】10.16806/j.cnki.issn.1004-3934.2024.12.018

Regulation Mechanism of AMPK/PGC-1α Pathway on Cardiac Injury and Mitochondrial Energy Metabolism in Rats with Uremic Cardiomyopathy

NI Qian，YAN Kaiping，LI Shujuan，XU Min，GU Jiayu，HUANG Xiaoqin，YUAN Yi

（Department of Nephrology，

Yancheng No.1 People’s Hospital，Yancheng First Hospital，Affiliated of Nanjing University Medical College，

The Fourth Affiliated Hospital of Nantong University，The First Affiliated Hospital of Jiangsu Vocational College of Medicine，Yancheng 224000，Jiangsu，China）

【Abstract】Objective To investigate the regulatory mechanism of AMP-activated protein kinase （AMPK）/peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator Ⅰ alpha （PGC-1α） pathway on heart injury and mitochondrial energy metabolism in rats with uremic cardiomyopathy （UCM）.Methods Thirty rats were randomly divided into three groups：control group，UCM group and doxorubicin （DOX） group，with 10 rats in each group.Left ventricular ejection fraction （LVEF），left ventricular internal-diastolic dimension （LVIDD） and E/A were measured by echocardiography.HE staining was used to detect the pathological changes of myocardial tissue.Masson staining was used to detect myocardial fibrosis.Western blotting was used to detect the protein levels of AMPK，PGC-1α，phosphorylated AMPK （p-AMPK） and p-PGC-1α in myocardial tissue.Mitochondrial membrane potential was measured by JC-1 kit.The activity of mitochondrial respiratory chain complex Ⅰ～Ⅴ was detected by mitochondrial respiratory chain complex Ⅰ～Ⅴ kit.ATP level was detected by ATP content detection kit.The ultrastructure of myocardial mitochondria was detected by transmission electron microscope.Results Compared with the control group，the myocardium fibers in UCM group were disorganized and broken，and a large amount of collagen could be seen in the myocardium space.There was no significant difference in LVEF，LVIDD increased，E/A decreased （Plt;0.05），there was no significant difference in the expression of AMPK and PGC-1α in myocardial tissue，while the expression of p-AMPK and p-PGC-1α increased （Plt;0.05），myocardial mitochondria were swollen and vacuolated，some mitochondrial cristae disappeared，mitochondrial membrane potential decreased，ATP content decreased （Plt;0.05），the activities of myocardial mitochondrial respiratory chain complex Ⅰ～Ⅴ were decreased （Plt;0.05）.Compared with UCM group，myocardial fiber injury was improved，collagen deposition in myocardial space was reduced，LVEF was not significantly different，LVIDD was decreased，E/A was increased （Plt;0.05），there was no significant difference in the expression of AMPK and PGC-1α in myocardial tissue，and the expression of p-AMPK and p-PGC-1α decreased （Plt;0.05），myocardial mitochondrial structure improved，mitochondrial membrane potential increased，ATP content increased （Plt;0.05），the activities of myocardial mitochondrial respiratory chain complex Ⅰ～Ⅴ were increased （Plt;0.05） in DOX group.Conclusion Inhibition of AMPK/PGC-1α pathway phosphorylation can improve cardiac function and myocardial histopathological changes in UCM rats，improve mitochondria and explore mitochondrial energy metabolism.

【Keywords】Uremic cardiomyopathy；AMPK/PGC-1α pathway；Mitochondrial energy metabolism

尿毒癥心肌?。╱remic cardiomyopathy，UCM）是一種不可逆的慢性腎臟病患者常見的心血管并發(fā)癥，與透析患者高死亡率相關(guān)^［1］。UCM的特征是異常心肌纖維化，不對稱心室肥厚，隨后出現(xiàn)舒張功能障礙，以及復(fù)雜和多因素的發(fā)病機(jī)制，其中潛在的生物機(jī)制仍未確定^［2］。AMP活化的蛋白質(zhì)激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）調(diào)控線粒體穩(wěn)態(tài)及線粒體功能障礙^［3］。過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助因子1-α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator Ⅰ alpha，PGC-1α）調(diào)節(jié)線粒體質(zhì)量控制機(jī)制，包括裂變、融合和線粒體自噬^［4］。AMPK/PGC-1α通路可調(diào)控線粒體功能障礙，參與認(rèn)知障礙、骨關(guān)節(jié)炎、急性腎損傷等多種疾病^［5-7］。Chen等^［8］研究顯示，AMPK/mTOR信號通路參與腎切除術(shù)誘導(dǎo)的UCM小鼠的心功能異常過程。線粒體能量代謝參與慢性腎臟病的尿毒癥及骨骼疾病^［9-10］。然而，線粒體能量代謝是否參與UCM，目前尚未闡明。本研究擬探究AMPK/PGC-1α通路在UCM大鼠心臟損傷與線粒體能量代謝中可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

AMPK抗體、PGC-1α抗體（美國Affinity生物技術(shù)公司）、

磷酸化AMPK（p-AMPK）抗體、磷酸化PGC-1α（p-PGC-1α）抗體、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗體（美國Santa Cruz Bicycles 公司），HE染色試劑、Masson染色試劑盒（賽默飛世爾科技公司）、JC-1試劑盒、線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ試劑盒、ATP檢測試劑盒（上海信裕生物科技有限公司），鹽酸阿霉素（doxorubicin，DOX）（美國MedChemexpress生物科技公司），全自動酶標(biāo)儀（賽默飛世爾科技公司）、JEM-1200EX透射電子顯微鏡（日本JEOL公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)分組及UCM動物模型的建立

取30只180 g SPF級SD雄性大鼠（遼寧長生生物技術(shù)有限公司）隨機(jī)分為3組：對照組、UCM組、DOX組（抑制AMPK磷酸化），每組10只。UCM組、DOX組大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d，采用改良法腎切除術(shù)通過一期手術(shù)與二期手術(shù)構(gòu)建UCM模型，一期手術(shù)過程：將大鼠固定在手術(shù)臺上，于右側(cè)肋下背直肌外側(cè)局部備皮，無菌操作下切開右背側(cè)皮膚及各層組織以暴露右側(cè)腎臟。切開右側(cè)腎臟脂肪囊后分離腎上腺并固定右腎，腎上、下極切除，止血后逐層縫合。

一周后進(jìn)行二期手術(shù)，與一期手術(shù)同樣方法暴露并摘除左腎。若出現(xiàn)左心室舒張功能異常及心肌纖維化，則UCM模型建立成功。對照組在一期和二期手術(shù)期間均僅切開右側(cè)、左側(cè)腎臟脂肪囊后逐層縫合。DOX組大鼠在術(shù)后5 d每天腹腔注射DOX（5 mg/kg）^［11］。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)鹽城市第一人民醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)[2020第（1173）號]。

1.3 超聲心動圖檢測大鼠心功能

使用脫毛膏對SD大鼠左心前區(qū)進(jìn)行備皮。將大鼠置于誘導(dǎo)盒中，向麻醉機(jī)蒸發(fā)器中倒入異氟烷，打開蒸發(fā)器誘導(dǎo)麻醉，大鼠癱倒后，提捏大鼠尾巴，若大鼠無反應(yīng)，則處于麻醉狀態(tài)。將大鼠仰臥位固定于手術(shù)操作臺上，同時(shí)用麻醉面罩將口鼻完全罩住，以保持麻醉狀態(tài)。待大鼠心率穩(wěn)定在400～600次/min后，應(yīng)用Vevo2100 VisualSonics 超聲檢測大鼠心功能，采用標(biāo)準(zhǔn)的左心室長軸切面與心尖四腔心切面，測定左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）、左心室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular internal diastolic dimension，LVIDD），左心室舒張?jiān)缙诔溆逯邓俣?左心室心房收縮期峰值充盈速度（E/A）比值。

1.4 HE染色檢測大鼠心肌組織病理形態(tài)

將各組大鼠心肌組織切片烘烤，浸入二甲苯溶液中透明組織，浸入下行梯度酒精中脫水。將心肌組織切片浸入自來水中水化，滴加適量蘇木素染液浸染心肌組織中的細(xì)胞核，將心肌切片置于緩慢的水流中反藍(lán)，滴加適量的伊紅染液浸染細(xì)胞質(zhì)，再浸入上行梯度酒精、二甲苯溶液中脫水、透明，封片后在光鏡下觀察并拍照。

1.5 Masson染色檢測大鼠心肌組織中膠原沉積情況

將各組大鼠心肌組織切片脫蠟，鉻處理后自來水洗滌，Regaud蘇木精滴染5 min，使用蒸餾水洗滌后將組織切片浸入Masson麗春紅酸性復(fù)紅液中5 min，再浸入2%冰醋酸溶液中3 min，1%鉬酸水3 min，滴加苯胺藍(lán)染色5 min，浸入0.2%冰醋酸溶液中3 min，再依次浸入梯度酒精與二甲苯溶液中脫水透明，封片后鏡下觀察并拍照。

1.6 Western blotting檢測AMPK、PGC-1α、p-AMPK、p-PGC-1α蛋白水平

收集大鼠心肌組織，提取心肌組織中的總蛋白，使用BCA試劑盒檢測各組蛋白濃度，配置合適的體系，高溫將蛋白變性處理，置于-20 ℃?zhèn)溆?。提前配備合適濃度的凝膠塊，向凝膠孔道中加入相同體積的樣品進(jìn)行電泳，電泳條件為：120 V 30 min，80 V 1 h。預(yù)先配備轉(zhuǎn)膜液進(jìn)行預(yù)冷，將電泳結(jié)束的凝膠與聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜按照一定順序置于轉(zhuǎn)膜夾中80 V轉(zhuǎn)膜適當(dāng)時(shí)長，轉(zhuǎn)膜后浸入快速封閉液中封閉，磷酸鹽吐溫緩沖液（phosphate buffered saline with Tween 20，PBST）清洗3次，每次10 min，分別孵育AMPK、PGC-1α、p-AMPK、p-PGC-1α、GAPDH抗體，PBST清洗3次，每次10 min，室溫孵育對應(yīng)的二抗，PBST清洗3次，每次10 min，使用發(fā)光液進(jìn)行曝光，最后使用Image J軟件分析。

1.7 透射電子顯微鏡檢測心肌組織中線粒體超微結(jié)構(gòu)

將心肌組織切成小塊后用2.5%戊二醛固定，使用磷酸鹽緩沖液漂洗3次，用1%O_SO₄固定1 h，并用Epon 812包埋。將心肌組織切割成超薄切片，將切片用2%醋酸雙氧鈾、枸櫞酸鉛染色，用JEM-1200EX透射電子顯微鏡拍照。

1.8 試劑盒檢測大鼠心肌線粒體膜電位、ATP及線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ水平

按照J(rèn)C-1試劑盒、線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ試劑盒、ATP檢測試劑盒說明書進(jìn)行操作，將所得的數(shù)據(jù)參考說明書進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，GraphPad 9.0軟件進(jìn)行繪圖。計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，多組間比較采用One-way ANOVA檢驗(yàn)。Plt;0.05為具有顯著性差異，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DOX對尿毒癥大鼠心功能及心肌組織病理結(jié)構(gòu)的影響

與對照組相比，UCM組大鼠心肌纖維紊亂、斷裂，心肌間隙可見大量膠原沉積；與UCM組相比，DOX組大鼠心肌纖維化損傷改善，心肌間隙膠原沉積減少（圖1A）。與對照組相比，UCM組大鼠LVEF無顯著性差異，LVIDD增加，E/A降低（Plt;0.05）；與UCM組相比，DOX組大鼠LVEF無顯著性差異，LVIDD減少，E/A增加（Plt;0.05），見圖1B和表1。

2.2 DOX對UCM大鼠心肌組織中AMPK、PGC-1α及其磷酸化蛋白表達(dá)水平的影響

與對照組相比，UCM組大鼠心肌組織中AMPK、PGC-1α表達(dá)無顯著性差異，p-AMPK、 p-PGC-1α蛋白表達(dá)增加（Plt;0.05）；與UCM組相比，DOX組大鼠心肌組織中AMPK、PGC-1α表達(dá)無顯著性差異，p-AMPK、p-PGC-1α蛋白表達(dá)減少（Plt;0.05），見圖2。

2.3 DOX對UCM大鼠心肌線粒體超微結(jié)構(gòu)、膜電位及ATP含量的影響

與對照組相比，UCM組大鼠心肌線粒體腫脹、空泡化，且部分線粒體嵴消失，線粒體膜電位減少，ATP含量減少（Plt;0.05）；與UCM組相比，DOX組大鼠心肌線粒體結(jié)構(gòu)改善，線粒體膜電位增加，ATP含量增加（Plt;0.05），見圖3和表2。

2.4 DOX對UCM大鼠心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性的影響

與對照組相比，UCM組大鼠心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性均減少（Plt;0.05）；與UCM組相比，DOX組大鼠心肌線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性均增加（Plt;0.05），見表3。

3 討論

慢性腎臟病是一個全球健康問題，影響了10%～12%的人口^［12］。慢性腎臟病患者出現(xiàn)心血管功能障礙，通常稱為UCM，特征性改變主要表現(xiàn)為左心室舒張性肥厚，射血分?jǐn)?shù)保留的心力衰竭，繼而可見心室間質(zhì)纖維化，心臟毛細(xì)血管壁變薄和收縮功能障礙^［13］。本研究顯示，UCM大鼠LVEF無顯著性差異，LVIDD增加，E/A降低，且心肌組織病理結(jié)構(gòu)異常，心肌間隙出現(xiàn)明顯的纖維化，這提示UCM大鼠出現(xiàn)射血分?jǐn)?shù)保留的心力衰竭，與既往研究保持一致。然而，由于UCM復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制，目前尚未完全闡明。

AMPK是一種由能量狀態(tài)下降激活的細(xì)胞能量傳感器，可通過促進(jìn)產(chǎn)生ATP的分解代謝途徑，同時(shí)抑制能量消耗過程，從而恢復(fù)能量穩(wěn)態(tài)^［14］。AMPK可調(diào)節(jié)碳水化合物和脂質(zhì)代謝、線粒體和溶酶體穩(wěn)態(tài)以及DNA修復(fù)，參與癌癥、肥胖、糖尿病、尿毒癥等多種疾病進(jìn)展^［15］。Yang等^［16］研究顯示，AMPK/UCP2通路參與尿毒癥毒素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大。PGC-1α是一種轉(zhuǎn)錄性共激活劑，為線粒體生物發(fā)生和功能的主要調(diào)節(jié)劑。PGC-1α在高能量需求的組織中高度表達(dá)，與代謝綜合征的發(fā)病機(jī)制及其主要并發(fā)癥有關(guān)，包括肥胖、2型糖尿病、心血管疾病和肝脂肪變性^［17］。此外，AMPK的磷酸化水平在腎切除術(shù)誘導(dǎo)的UCM小鼠中明顯增加^［8］。目前，關(guān)于AMPK/PGC-1α通路在UCM中的作用機(jī)制尚未完全闡明。本研究顯示，UCM大鼠心肌組織中AMPK、PGC-1α總蛋白無顯著性差異，磷酸化的AMPK、PGC-1α表達(dá)明顯增加。這提示，AMPK/PGC-1α通路參與UCM過程，然而潛在的發(fā)病機(jī)制有待繼續(xù)研究。

線粒體是獨(dú)特且必不可少的細(xì)胞器，介導(dǎo)能量代謝和細(xì)胞死亡等許多重要的細(xì)胞過程^［18］。值得關(guān)注的是，AMPK參與線粒體能量代謝功能障礙^［19］。研究^［5-7］顯示，AMPK/PGC-1α通路可調(diào)控線粒體功能障礙，參與認(rèn)知障礙、骨關(guān)節(jié)炎、急性腎損傷等多種疾病。線粒體能量代謝參與慢性腎臟病的尿毒癥及骨骼疾病^［9-10］。然而，AMPK/PGC-1α通路是否可調(diào)控線粒體能量代謝參與UCM，未見報(bào)道。本研究結(jié)果顯示，UCM大鼠心肌線粒體能量代謝異常，即線粒體結(jié)構(gòu)異常、膜電位下降、ATP合成減少且線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ～Ⅴ活性均減少。抑制AMPK磷酸化可改善心功能及心肌病理學(xué)變化，改善心肌線粒體能量代謝相關(guān)指標(biāo)，這提示AMPK/PGC-1α通路可調(diào)控線粒體能量代謝，在UCM大鼠心肌損傷中發(fā)揮重要作用。

綜上所述，UCM大鼠心肌線粒體能量代謝異常，抑制AMPK/PGC-1α通路磷酸化可改善UCM大鼠心功能、心肌組織病理學(xué)變化及線粒體能量代謝。本研究首次發(fā)現(xiàn)AMPK/PGC-1α調(diào)控的能量代謝參與UCM大鼠心肌損傷過程，這將為治療UCM提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。然而，本研究只是初步闡明二者之間可能的聯(lián)系機(jī)制，具體深入的調(diào)控機(jī)制仍需繼續(xù)探究。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］Amador-Martínez I，García-Ballhaus J，Buelna-Chontal M，et al.Early inflammatory changes and CC chemokine ligand-8 upregulation in the heart contribute to uremic cardiomyopathy［J］.FASEB J，2021，35（8）：e21761.

［2］D’Agostino M，Mauro D，Zicarelli M，et al.miRNAs in uremic cardiomyopathy：a comprehensive review［J］.Int J Mol Sci，2023，24（6）：5425.

［3］Wu S，Zou MH.AMPK，mitochondrial function，and cardiovascular disease［J］.Int J Mol Sci，2020，21（14）：4987.

［4］Halling JF，Pilegaard H.PGC-1α-mediated regulation of mitochondrial function and physiological implications［J］.Appl Physiol Nutr Metab，2020，45（9）：927-936.

［5］Wang D，Cao L，Zhou X，et al.Mitigation of honokiol on fluoride-induced mitochondrial oxidative stress，mitochondrial dysfunction，and cognitive deficits through activating AMPK/PGC-1α/Sirt3［J］.J Hazard Mater，2022，437：129381.

［6］Sun J，Song FH，Wu JY，et al.Sestrin2 overexpression attenuates osteoarthritis pain via induction of AMPK/PGC-1α-mediated mitochondrial biogenesis and suppression of neuroinflammation［J］.Brain Behav Immun，2022，102：53-70.

［7］Tong D，Xu E，Ge R，et al.Aspirin alleviates cisplatin-induced acute kidney injury through the AMPK-PGC-1α signaling pathway［J］.Chem Biol Interact，2023，380：110536.

［8］Chen Q，Li Z，Liu B，et al.［Protective effects of Zhenwutang on cardiac function in mice with uremic cardiomyopathy induced by subtotal nephrectomy］［J］.Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao，2015，35（12）：1725-1728.

［9］Thome T，Kim K，Dong G，et al.The role of mitochondrial and redox alterations in the skeletal myopathy associated with chronic kidney disease［J］.Antioxid Redox Signal，2023，38（4-6）：318-337.

［10］Thome T，Kumar RA，Burke SK，et al.Impaired muscle mitochondrial energetics is associated with uremic metabolite accumulation in chronic kidney disease［J］.JCI Insight，2020，6（1）：e139826.

［11］保靖夫.嚙齒類動物尿毒癥心肌病模型構(gòu)建研究［D］.廣州：南方醫(yī)科大學(xué)，2022.

［12］Sárk?zy M，Watzinger S，Kovács ZZA，et al.Neuregulin-1β improves uremic cardiomyopathy and renal dysfunction in rats［J］.JACC Basic Transl Sci，2023，8（9）：1160-1176.

［13］Sárk?zy M，Kovács ZZA，Kovács MG，et al.Mechanisms and modulation of oxidative/nitrative stress in type 4 cardio-renal syndrome and renal sarcopenia［J］.Front Physiol，2018，9：1648.

［14］ Steinberg GR，Hardie DG.New insights into activation and function of the AMPK［J］.Nat Rev Mol Cell Biol，2023，24（4）：255-272.

［15］Entezari M，Hashemi D，Taheriazam A，et al.AMPK signaling in diabetes mellitus，insulin resistance and diabetic complications：a pre-clinical and clinical investigation[J].Biomed Pharmacother，2022，146：112563.

［16］Yang K，Xu X，Nie L，et al.Indoxyl sulfate induces oxidative stress and hypertrophy in cardiomyocytes by inhibiting the AMPK/UCP2 signaling pathway［J］.Toxicol Lett，2015，234（2）：110-119.

［17］Rius-Pérez S，Torres-Cuevas I，Millán I，et al.PGC-1α，inflammation，and oxidative stress：an integrative view in metabolism［J］.Oxid Med Cell Longev，2020，2020：1452696.

［18］Esteras N，Abramov AY.Nrf2 as a regulator of mitochondrial function：energy metabolism and beyond［J］.Free Radic Biol Med，2022，189：136-153.

［19］Yang L，Chen Y，Zhou J，et al.Aconitine induces mitochondrial energy metabolism dysfunction through inhibition of AMPK signaling and interference with mitochondrial dynamics in SH-SY5Y cells［J］.Toxicol Lett，2021，347：36-44.

收稿日期：2024-05-09