枯草芽孢桿菌NCD-2與化學殺菌劑復配對棉花黃萎病的防治效果

鄭德有 左東云 呂麗敏 王巧蓮 程海亮 顧愛星 宋國立

摘要：【目的】研究枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）NCD-2與化學殺菌劑復配對棉花黃萎病的防治效果，為防治棉花黃萎病提供理論依據(jù)?！痉椒ā恳悦藁S萎病致病菌大麗輪枝菌（Verticillium dahliae）強致病力菌株Vd080為研究對象，采用生長速率法測定戊唑醇、氟啶胺、咪鮮胺、代森錳鋅和百菌清這5種殺菌劑的毒力；用對峙培養(yǎng)法測定NCD-2對Vd080的毒力；篩選出與NCD-2相容性好的殺菌劑，進一步采用Horsfall法確定菌藥復配比例；在室內(nèi)開展盆栽試驗，評價不同復配處理對棉花黃萎病的防治效果（防效）?！窘Y(jié)果】5種殺菌劑中咪鮮胺對Vd080的抑制效果最好，其有效中濃度為0.027 mg·L^－1，戊唑醇和氟啶胺的抑制效果次之。NCD-2對Vd080的有效抑制中濃度為2.56×10⁷mL^－1（菌體濃度，后同）。0.4 mg·L^－1氟啶胺與2.56×10⁷mL^－1NCD-2的相容性最好，達到79.19%；2.0 mg·L^－1氟啶胺、0.02 mg·L^－1咪鮮胺次之，二者與2.56×10⁷mL^－1NCD-2的相容性分別為71.29%和63.20%。2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺、2.0 mg·L^－1氟啶胺和0.02 mg·L^－1咪鮮胺分別按照體積比3∶7、9∶1和1∶1進行復配時，增效作用最強，對Vd080的抑菌效果最好。室內(nèi)盆栽試驗發(fā)現(xiàn)，2.56×10⁷mL^－1枯草芽孢桿菌NCD-2與0.02 mg·L^－1咪鮮胺按體積比1∶1復配時，棉花黃萎病病情指數(shù)最低，防效最好（82.81%），具有很好的增效作用（增效系數(shù)為23.46）?！窘Y(jié)論】2.56×10⁷mL^－1枯草芽孢桿菌NCD-2與0.02 mg·L^－1咪鮮胺按體積比1∶1復配對棉花黃萎病有很好的防治效果，且具有明顯的增效作用。

關(guān)鍵詞：棉花；黃萎??；枯草芽孢桿菌；殺菌劑；協(xié)同防治

Control effects of combination of Bacillus subtilis NCD-2 and chemical fungicides on cotton Verticillium wilt

Zheng Deyou1， 2， Zuo Dongyun1， Lü Limin1， Wang Qiaolian1， Cheng Hailiang1， Gu Aixing2， Song Guoli1*

（1. Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences/National Key Laboratory of Cotton Bio-breeding and Integrated Utilization， Anyang， Henan 455000， China; 2. College of Agriculture， Xinjiang Agricultural University/Engineering Research Centre of Cotton， Ministry of Education， Urumqi 830052， China）

Abstract： [Objective] This research aims to study the effects of the combination of Bacillus subtilis NCD-2 and chemical fungicides on the control of cotton Verticillium wilt， so as to provide a theoretical basis for the control of cotton Verticillium wilt. [Methods] The virulent Verticillium dahliae strain Vd080， a pathogen causing cotton Verticillium wilt was used as the object， and the virulence of 5 fungicides （tebuconazole， fluazinam， prochloraz， mancozeb and chlorothalonil） were determined by growth rate method. The toxicity of NCD-2 to Vd080 was determined by dual-culture method. The fungicides with better compatibility with NCD-2 were selected， and the volume ratio of fungicides and NCD-2 was further determined by Horsfall method. The control effects on cotton Verticillium wilt of different compound treatments were evaluated in the indoor pot experiment. [Results] Among the 5 fungicides， prochloraz had the best inhibitory effect on Vd080， and its median effective concentration （EC₅₀） was 0.027 mg·L^-1， followed by tebuconazole and fluazinam. The EC₅₀of NCD-2 to Vd080 is 2.56 × 10⁷mL^-1（cell concentration）. The compatibility of 0.4 mg·L^-1fluazinam with 2.56 × 10⁷mL^-1NCD-2 was best， reaching 79.19%. The compatibility of 2.0 mg·L^-1fluazinam and 0.02 mg·L^-1prochloraz with 2.56 × 10⁷mL^-1NCD-2 were 71.29% and 63.20%， respectively. The synergistic effect of 2.56 × 10⁷mL^-1NCD-2 was the strongest when mixed with 0.4 mg·L^-1fluazinam， 2.0 mg·L^-1fluazinam， and 0.02 mg·L^-1prochloraz at the volume ratios of 3∶7， 9∶1 and 1∶1， respectively， and the inhibitory effect on Vd080 was the best. The indoor pot experiment showed that when 2.56 × 10⁷mL^-1Bacillus subtilis NCD-2 and 0.02 mg·L^-1prochloraz were mixed at the volume ratio of 1∶1， the disease index of cotton Verticillium wilt was the lowest， the control effect was the best （82.81%）， and the synergistic effect was good （synergistic coefficient was 23.46）. [Conclusion] The combination of 2.56 × 10⁷mL^-1Bacillus subtilis NCD-2 and 0.02 mg·L^-1prochloraz at the volume ratio of 1∶1 has a good control effect on cotton Verticillium wilt， and good synergistic effect.

Keywords： cotton; Verticillium wilt; Bacillus subtilis; fungicide; synergistic control

棉花黃萎?。╒erticillium wilt）是由大麗輪枝菌（Verticillium dahliae）引起的維管束病害^[1]，是棉花毀滅性病害之一，在世界各棉花種植區(qū)普遍發(fā)生^[2]。棉花黃萎病引起棉花葉片失綠黃化，維管束褐化，嚴重時可造成棉株死亡，給棉花生產(chǎn)造成嚴重損失^[3-4]?，F(xiàn)階段防治棉花黃萎病仍以化學方法為主，但長期施用殺菌劑會使病原菌產(chǎn)生抗藥性，且易造成環(huán)境污染^[5]。因此，篩選高效、低毒、與生防菌相容性好的殺菌劑，開展生物-化學協(xié)同防治研究，對有效防治棉花黃萎病及棉花產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

Kattan等^[6]提出用化學藥物弱化病原菌的致病性有利于生防菌的定殖，并以此作為植物病害綜合防治的一個重要方法。芽孢桿菌屬于生防菌，對多種植物病原物具有拮抗效應(yīng)，且可以在低劑量殺菌劑下正常生長，可與殺菌劑結(jié)合防治植物病害^[7]。曾艷玲等^[8]研究發(fā)現(xiàn)多菌靈與解淀粉芽孢桿菌聯(lián)用防治欒樹枝枯病的效果顯著優(yōu)于單劑。趙瑩瑩等^[9]用枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）KXZ-33與化學藥劑協(xié)同防控棉花枯萎病，發(fā)現(xiàn)甲基硫菌靈與KXZ-33聯(lián)合使用可有效提高對棉花枯萎病的防治效果（防效）。李社增等^[10]篩選并鑒定出枯草芽孢桿菌NCD-2，研究人員進一步研究發(fā)現(xiàn)NCD-2可以在棉花根際快速定殖^[11]，并分泌抗菌蛋白，對棉花黃萎病具有很好的防效^[12]，通過比較5種殺菌劑對NCD-2菌體及芽孢的影響，發(fā)現(xiàn)NCD-2可以與殺菌劑混合使用^[13]。

鑒于此，本研究采用室內(nèi)毒力測定和生物相容性測定方法篩選出對大麗輪枝菌毒力強、與NCD-2相容性好的殺菌劑與NCD-2進行復配，并篩選出最佳復配比例，進一步通過室內(nèi)盆栽試驗測定復配劑對棉花黃萎病的防效，篩選出可穩(wěn)定防治棉花黃萎病的生防菌與殺菌劑組合，為棉花黃萎病的有效防治提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試棉花材料。試驗所用陸地棉（Gossy-pium hirsutum）品種為中棉所12，種子由國家棉花種質(zhì)資源中期庫（安陽）提供。

1.1.2 供試菌種。供試病原菌為大麗輪枝菌Vd080，為強致病力菌株，由中國農(nóng)業(yè)科學院棉花研究所（中棉所）棉花病害實驗室分離、保存。供試枯草芽孢桿菌NCD-2由中棉所棉花病害實驗室提供。

1.1.3 供試藥劑。80%（質(zhì)量分數(shù)，下同）戊唑醇可濕性粉劑，由浙江威爾達化工有限公司生產(chǎn)；98%氟啶胺原藥，由山東濰坊潤豐化工股份有限公司生產(chǎn)；97%咪鮮胺原藥，由山東華陽農(nóng)藥化工集團有限公司生產(chǎn)；80%代森錳鋅可濕性粉劑，由河北中天邦正生物科技股份公司生產(chǎn)；75%百菌清可濕性粉劑，由浙江威爾達化工有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗方法

1.2.1 供試藥劑的毒力測定。采用菌絲生長速率法測定5種藥劑對病原菌的室內(nèi)毒力。參照李海薇等^[14]的試驗方法，配制含不同質(zhì)量濃度（0、0.625、1.25、2.5、5、12.5、25、50 mg·L^－1）供試藥劑的馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar， PDA）培養(yǎng)基，接入直徑為5 mm的Vd080菌餅，25 ℃恒溫倒置培養(yǎng)7 d，然后測量菌落直徑，并計算抑制率（I）。

I＝[（D₁－5）－（D₂－5）]/（D₁－5）×100% （1）

式中，D₁為空白對照中菌落的直徑（mm），D₂為含有供試藥劑的PDA培養(yǎng)基中菌落直徑（mm）。

根據(jù)檀根甲等[15]的方法，將藥劑質(zhì)量濃度以10為底的對數(shù)值（x）與對應(yīng)抑制率的概率值（y）作回歸分析，得到毒力回歸方程，計算回歸直線的決定系數(shù)（determination coefficient， R²），并計算出供試藥劑對黃萎病菌的有效中濃度（median effective concentration， EC_50，mg·L^－1）：

y＝a＋bx? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? （2）

式中，a代表回歸直線在y軸上的截距，b為計算EC₅₀的中間量，其絕對值為回歸直線的斜率。

1.2.2 NCD-2對Vd080的毒力測定。挑取NCD-2單菌落接入1 mL Luria-Bertani（LB）液體培養(yǎng)基中，于37 ℃培養(yǎng)12 h，配制菌體濃度分別為1×10⁴、1×10⁵、1×10⁶、1×10⁷、1×10⁸和1×10⁹mL^－1的枯草芽孢桿菌NCD-2菌液。采用平板對峙法中的濾紙片法^[16]測定NCD-2對Vd080的室內(nèi)毒力。用十字交叉法測量Vd080菌落直徑，按照1.2.1的方法計算其平均抑制率、回歸方程、R²和EC₅₀。

1.2.3 殺菌劑與NCD-2的相容性。將菌體濃度為1×10⁵mL^－1的枯草芽孢桿菌NCD-2的菌液中分別加入含有0.02 mg·L^－1及0.07 mg·L^－1咪鮮胺、0.1 mg·L^－1及0.5 mg·L^－1戊唑醇、0.4 mg·L^－1及2.0 mg·L^－1氟啶胺的LB液體培養(yǎng)基中。每個處理3次重復，以未加入殺菌劑的LB液體培養(yǎng)基作為空白對照。28 ℃、150 r·min^－1振蕩培養(yǎng)24 h后，將培養(yǎng)液梯度稀釋至1×10^－6、1×10^－7、1×10^－8，采用平板計數(shù)法統(tǒng)計NCD-2活菌數(shù)量，用藥劑處理下的活菌數(shù)與空白對照處理的活菌數(shù)的比值表示相容性，篩選出與枯草芽孢桿菌NCD-2相容性較好的化學藥劑。

1.2.4 復配劑對Vd080的毒力測定。根據(jù)單劑的毒力測定結(jié)果，選取對Vd080抑制效果較好且與NCD-2相容性較好的2種殺菌劑進行復配。以單劑EC₅₀為基礎(chǔ)，配制單劑的有效中濃度藥液和NCD-2菌液，并將NCD-2菌液與殺菌劑分別按體積比0∶10、1∶9、1∶4、3∶7、2∶3、1∶1、3∶2、7∶3、4∶1、9∶1和10∶0進行復配^[17]。采用菌絲生長速率法，將以上不同配比的復配劑分別配制成PDA固體培養(yǎng)基，以加入等量無菌水的培養(yǎng)基為空白對照，將Vd080菌餅（直徑6 mm）接入培養(yǎng)基，每個處理設(shè)3次重復，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待對照菌落生長至占培養(yǎng)皿的1/2～2/3時，采用十字交叉法測量各處理的菌落直徑，計算抑制率（參照1.2.1的計算方法）。采用Horsfall法進行聯(lián)合毒力增效的計算^[18]。

E_th＝I₁×V₁＋I₂×V₂（3）

式中，E_th為復配劑的理論防效，即復配劑對Vd080的理論抑制率，I₁為NCD-2對Vd080的抑制率，V₁為混劑中NCD-2所占體積比，I₂為殺菌劑對Vd080的抑制率，V₂為混劑中殺菌劑所占體積比^[19]。

I_R＝E_ab/E_th（4）

式中，I_R為增效比率，E_ab為復配劑的實際防效，即復配劑對Vd080的抑制率。根據(jù)I_R值判斷不同配方的協(xié)同作用效果。I_R＞1表示增效作用；I_R＝1表示加和作用；I_R＜1表示拮抗作用^[20]。

1.2.5 溫室試驗測定菌藥復配劑對棉花黃萎病的防效。采用蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液法^[21]進行棉苗培育和病原菌的接種。每缽播種3粒棉種，出苗后留苗1株；每10個營養(yǎng)缽為1個處理，每個處理重復3次。在棉苗兩葉一心期進行藥劑處理，在施藥后15 d左右觀察發(fā)病情況，調(diào)查病情指數(shù)，統(tǒng)計防效和增效系數(shù)。棉花苗期黃萎病的分級、病情指數(shù)和防效計算均參照國家標準《棉花抗病蟲性評價技術(shù)規(guī)范 第5部分：黃萎病》（GB/T 22101.5－2009）^[22]。采用Mansour等^[23]的二元混劑等毒法進行增效作用的判定。

假設(shè)混用的藥劑（菌液）分別為A和B，單用防效分別以百分數(shù)表示為C_a和C_b，混用的實際防效為C_S，A、B混用的理論防效（C₁）和增效系數(shù)（C_TC）計算公式如下，

C₁＝C_a＋（1－C_a）×C_b（5）

C_TC＝（C_S－C₁）×100? ? ? （6）

式中，C_TC≥20表示增效作用，C_TC≤－20表示拮抗作用，－20＜C_TC＜20表示相加作用。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2019和IBM SPSS Statistics 20.0軟件進行整理和統(tǒng)計分析，通過回歸分析計算室內(nèi)毒力回歸方程；病情指數(shù)和防效經(jīng)過描述性統(tǒng)計后進行正態(tài)性檢驗，均符合正態(tài)分布，然后采用單因素方差分析和最小顯著差數(shù)法（least significant difference， LSD）進行差異顯著性比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 單劑室內(nèi)毒力測定

2.1.1 5種殺菌劑對Vd080的室內(nèi)毒力測定。試驗結(jié)果（表1）表明，咪鮮胺、戊唑醇、氟啶胺、百菌清和代森錳鋅這5種殺菌劑對大麗輪枝菌Vd080均有一定的抑制作用。其中咪鮮胺對病原菌Vd080的毒力最強，戊唑醇、氟啶胺次之，且三者的EC₅₀都小于0.5 mg·L^－1；百菌清和代森錳鋅對Vd080的毒力較差，二者的EC₅₀都高于3 mg·L^－1。

2.1.2 NCD-2對Vd080的毒力測定。通過對峙培養(yǎng)法測定枯草芽孢桿菌NCD-2對大麗輪枝菌Vd080的室內(nèi)毒力。試驗結(jié)果（表2）顯示，隨著濃度的增加，NCD-2對Vd080的抑制率逐漸升高。毒力回歸方程為y＝0.300x－2.222，R²為0.949，NCD-2對Vd080的EC₅₀為2.56×10⁷mL^－1。

2.2 殺菌劑對NCD-2的影響

根據(jù)上述5種殺菌劑對Vd080的室內(nèi)毒力測定結(jié)果，選取毒力較強的咪鮮胺、戊唑醇和氟啶胺，進一步研究其對生防菌NCD-2的影響。依據(jù)室內(nèi)毒力測定所得EC₅₀和EC₇₅（抑制率75%時的藥劑濃度）的近似濃度，共設(shè)置6個處理（0.02 mg·L^－1、0.07 mg·L^－1的咪鮮胺；0.1 mg·L^－1、0.5 mg·L^－1的戊唑醇；0.4 mg·L^－1、2.0 mg·L^－1的氟啶胺）以及空白對照（CK）。試驗結(jié)果（圖1）顯示，枯草芽孢桿菌NCD-2在LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h后，CK處理的活菌數(shù)為5.19×10⁷mL^－1，顯著高于其余處理；0.4 mg·L^－1氟啶胺與NCD-2的相容性最好，活菌數(shù)為4.11×10⁷mL^－1，相容性達到79.19%。2.0 mg·L^－1氟啶胺、0.02 mg·L^－1咪鮮胺與NCD-2的相容性次之，活菌數(shù)分別為3.70×10⁷mL^－1和3.28×10⁷mL^－1，相容性分別為71.29%和63.20%；0.5 mg·L^－1戊唑醇與NCD-2的相容性最差，僅為8.86%，其活菌數(shù)顯著低于其余處理。

2.3 復配劑對大麗輪枝菌Vd080的毒力測定

根據(jù)以上試驗結(jié)果，將菌體濃度為2.56×10⁷mL^－1的NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺、2.0 mg·L^－1氟啶胺和0.02 mg·L^－1咪鮮胺按照不同體積比進行復配，進行室內(nèi)聯(lián)合毒力測定。結(jié)果（表3）顯示，NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺分別按體積比9∶1、7∶3、3∶2、1∶1和3∶7進行復配對Vd080的抑制具有明顯增效作用（I_R＞1），其中體積比為3∶7時I_R為1.66，實際抑菌率為93.27%，顯著高于其余體積比處理下的抑菌率，增效作用最強，抑菌作用效果最好。因此3∶7為2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺的最佳復配比例。

2.56×10⁷mL^－1NCD-2與2.0 mg·L^－1氟啶胺分別按體積比9∶1、4∶1和3∶2進行復配對Vd080的抑制具有明顯增效作用（I_R＞1），其中體積比為9∶1時I_R為1.39，實際抑菌率為96.22%，顯著高于其余體積比處理下的抑菌率，增效作用最強，抑菌作用效果最好。因此，9∶1為2.56×10⁷mL^－1NCD-2與2.0 mg·L^－1氟啶胺的最佳復配比例。

2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.02 mg·L^－1咪鮮胺分別按體積比4∶1、7∶3、3∶2、1∶1和3∶7進行復配時，對Vd080的抑制具有明顯增效作用（I_R＞1），其中體積比為1∶1時I_R為1.36，實際抑菌率為94.67%，顯著高于其余體積比處理下的抑菌率，增效作用最強，抑菌作用效果最好。因此，1∶1為2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.02 mg·L^－1咪鮮胺的最佳復配比例。

2.4 復配劑室內(nèi)防效測定

室內(nèi)防效測定結(jié)果（表4）顯示，3種復配組合（2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺、2.0 mg·L^－1氟啶胺和0.02 mg·L^－1咪鮮胺分別按體積比3∶7 、9∶1和1∶1復配）中，2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.02 mg·L^－1咪鮮胺按體積比1∶1復配的效果最好，對棉花黃萎病的防效可達82.81%，顯著高于其他藥劑或菌藥復配處理，其增效系數(shù)為23.46（＞20），具有很好的增效作用；該處理下棉花的病情指數(shù)顯著低于其余處理。2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺按體積比3∶7復配的防效（51.56%）次之，增效系數(shù)為－11.40，表明二者具有相加作用。2.56×10⁷mL^－1NCD-2與2.0 mg·L^－1氟啶胺按體積比9∶1復配的防效較差（35.94%），低于單劑的防效，增效系數(shù)為－34.25（＜－20），表明二者具有很強的拮抗作用。

3 討論

黃萎病是棉花生產(chǎn)中的毀滅性病害之一，很難根治，嚴重威脅棉花產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展^[24]?？莶菅挎邨U菌具有耐受性強、繁殖快、分布廣等特點，在防治棉花黃萎病方面發(fā)揮重要作用。李社增等^[10]利用枯草芽孢桿菌NCD-2防治棉花黃萎病，發(fā)現(xiàn)其具有很好的防效，并且能改善棉花的纖維品質(zhì)。李海濤等^[25]利用枯草芽孢桿菌Jaas ed1防治棉花黃萎病，結(jié)果顯示其在有效防治黃萎病的同時還可促進棉花生長發(fā)育，提高棉花產(chǎn)量。雖然枯草芽孢桿菌已廣泛應(yīng)用于防治棉花黃萎病，但目前關(guān)于菌藥協(xié)同防治的研究報道較少，生物-化學協(xié)同防治策略在指導棉花黃萎病有效防治方面具有重大意義。

本研究通過5種化學殺菌劑咪鮮胺、戊唑醇、氟啶胺、百菌清和代森錳鋅對大麗輪枝菌Vd080的毒力測定表明，咪鮮胺對大麗輪枝菌Vd080的抑制效果最好，戊唑醇和氟啶胺次之；代森錳鋅與百菌清抑制效果較差。這與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中常使用咪鮮胺、戊唑醇等咪唑類及三唑類殺菌劑防治棉花黃萎病的情況相符。通過研究化學殺菌劑咪鮮胺、戊唑醇、氟啶胺、百菌清和代森錳鋅對NCD-2的毒力，發(fā)現(xiàn)氟啶胺、咪鮮胺與生防菌NCD-2的相容性均較好。其中，在較高濃度氟啶胺下，NCD-2仍能正常生長，且無明顯抑制作用；這與鹿秀云等^[13]的研究結(jié)果相符。本研究通過室內(nèi)毒力測定及相容性測定，最終選用氟啶胺和咪鮮胺分別與NCD-2混配。

利用生防微生物與化學藥劑協(xié)同防治植物病害具有明顯的增效作用，近年來采用生物與化學藥劑協(xié)同防治植物土傳病害的相關(guān)研究報道較多^[26-27]，但應(yīng)用于防治棉花黃萎病的研究報道還較少^[28]。本研究突破以化學藥劑為主防治棉花黃萎病的局限性，利用生防微生物與低毒化學藥劑協(xié)同防治棉花黃萎病。2.56×10⁷mL^－1枯草芽孢桿菌NCD-2與0.4 mg·L^－1氟啶胺、2.0 mg·L^－1氟啶胺和0.02 mg·L^－1咪鮮胺分別按體積比3∶7、9∶1和1∶1進行復配時對大麗輪枝菌Vd080具有很好的抑制效果，且具有明顯的增效作用。盆栽試驗表明，2.56×10⁷mL^－1NCD-2與0.02 mg·L^－1咪鮮胺按體積比1∶1進行復配時對棉花黃萎病的防治效果最佳，防效可達82.81%，且增效作用明顯。

本研究采用生物防治與化學防治相結(jié)合的策略，在有效提高棉花黃萎病防效的同時減少了殺菌劑使用量，利于延緩病原菌對殺菌劑的抗藥性^[29]?；瘜W藥劑能降低習居微生物（包括病原菌）對生防微生物的排斥作用，使生防微生物能順利定殖、生長，并逐步發(fā)展成為優(yōu)勢微生物，更好地發(fā)揮生物防治作用^[30]，彌補生防菌防效緩慢和易受環(huán)境影響的不足^[31]，通過菌藥復配的協(xié)同作用可達到菌藥優(yōu)勢互補、化學農(nóng)藥用量減少、防效增加的目的^[32]。

4 結(jié)論

化學殺菌劑咪鮮胺、戊唑醇、氟啶胺和生防菌枯草芽孢桿菌NCD-2對大麗輪枝菌Vd080均具有良好的抑制效果，可用于棉花黃萎病的防治?？莶菅挎邨U菌NCD-2在較高濃度下的氟啶胺、咪鮮胺溶液中仍能正常生長，可復配使用?？莶菅挎邨U菌NCD-2（菌數(shù)為2.56×10⁷mL^－1）與0.02 mg·L^－1咪鮮胺按體積比1∶1進行復配時對棉花黃萎病的防效最佳，增效作用明顯，具有開發(fā)成菌藥制劑的潛力，用于生產(chǎn)中棉花黃萎病的防治。

參考文獻：

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（責任編輯：王小璐 責任校對：秦凡）

收稿日期：2022-09-22? ? ?第一作者簡介：鄭德有（1996―），男，碩士研究生，2970836442@qq.com。*通信作者：songguoli@caas.cn

基金項目：國家自然科學基金（31621005）；中國農(nóng)業(yè)科學院科技創(chuàng)新工程（CAAS-ASTIP-CCRI）