葉延瑤,張 洪,宋 敏
1.重慶市高新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,重慶 400039;2.重慶大學(xué)醫(yī)學(xué)院,重慶 400044;3.陸軍軍醫(yī)大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科,重慶 400038
艾滋病是由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的以免疫功能障礙為特征的傳染性疾病,傳播途徑主要為性傳播、血液傳播和母嬰傳播[1]。目前對(duì)于艾滋病的診斷主要依據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),包括HIV抗體檢測(cè)、HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)、免疫印跡試驗(yàn)(WB)、重組/線性免疫印跡試驗(yàn)(RIBA/LIA)及核酸檢測(cè)等。由于醫(yī)學(xué)界至今仍無(wú)針對(duì)艾滋病的有效疫苗及特效藥物,早發(fā)現(xiàn)、早治療便成為控制傳染源的關(guān)鍵[2]。為了進(jìn)一步保障血液安全,2010年起我國(guó)各血液中心便陸續(xù)開(kāi)始對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行核酸檢測(cè),不斷有報(bào)道單獨(dú)HIV核酸陽(yáng)性的獻(xiàn)血者被檢出[3],有效地降低了HIV經(jīng)血傳播的風(fēng)險(xiǎn)。為了進(jìn)一步減少醫(yī)院內(nèi)感染,陸軍軍醫(yī)大學(xué)附屬第一醫(yī)院(以下簡(jiǎn)稱本院)對(duì)輸血、手術(shù)及有高危行為特定患者行HIV-1型核酸檢測(cè)?,F(xiàn)將本院發(fā)現(xiàn)的1例HIV抗原抗體檢測(cè)呈陰性而核酸檢測(cè)呈陽(yáng)性的病例情況報(bào)道如下。
1.1一般資料 患者,女,76歲,2020年于1月19日從外院轉(zhuǎn)入本院肝膽科,有多次輸血史,多次手術(shù)史,2月5日HIV抗原抗體檢測(cè)為陽(yáng)性后,在本院4 ℃標(biāo)本庫(kù)(HIV陽(yáng)性血液標(biāo)本長(zhǎng)期保存,HIV和核酸檢測(cè)血液標(biāo)本保存1個(gè)月以上,常規(guī)血液標(biāo)本保存1周以上)中找到1月20日、1月26日、2月1日不同日期的血液標(biāo)本進(jìn)行HIV抗原抗體和HIV核酸檢測(cè)。
1.2儀器與試劑 HIV抗體篩查試劑(HIV抗原抗體診斷試劑盒,北京萬(wàn)泰公司,批號(hào):H20201115),核酸提取試劑(廣州美基公司,批號(hào):202008),HIV-1型核酸檢測(cè)試劑(中山大學(xué)達(dá)安基因,批號(hào):2020004),全自動(dòng)加樣儀(瑞士HAMILTON),全自動(dòng)酶免分析儀(瑞士HAMILTON),核酸提取儀(Thermo Fisher Scientific),熒光定量PCR儀(美國(guó)ABI7500)。
1.3檢測(cè)方法
1.3.1檢測(cè)流程 收集該患者1月20日、1月26日、2月1日、2月5日血液標(biāo)本,采用HIV抗原抗體檢測(cè)試劑進(jìn)行雙孔酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱酶免檢測(cè)),采用HIV-1型核酸檢測(cè)試劑進(jìn)行核酸檢測(cè)。
1.3.2酶免檢測(cè) 標(biāo)本嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作,S/CO值≥1判為有反應(yīng),S/CO值<1判為無(wú)反應(yīng)。
1.3.3HIV-1型核酸檢測(cè) 采用HIV-1型核酸提取試劑,通過(guò)Thermo Fisher Scientific核酸提取儀進(jìn)行樣本核酸提取,用HIV-1型核酸檢測(cè)試劑在ABI7500 PCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行擴(kuò)增,整個(gè)操作嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)和儀器操作指南進(jìn)行操作。核酸檢測(cè)循環(huán)閾值(Ct值)≤45則視為有反應(yīng),Ct值>45則視為無(wú)反應(yīng)。
1月20日的血液標(biāo)本核酸檢測(cè)為有反應(yīng)(Ct值為38.92,病毒載量為18.56 copy/mL),酶免檢測(cè)為無(wú)反應(yīng),確證檢測(cè)為HIV-1型抗體陰性;1月26日標(biāo)本核酸檢測(cè)為有反應(yīng)(Ct值為32.39,病毒載量為2.26×103copy/mL),酶免檢測(cè)為無(wú)反應(yīng),確證檢測(cè)為HIV-1型抗體陰性;2月1日標(biāo)本核酸檢測(cè)為有反應(yīng)(Ct值為25.42,病毒載量為3.79×105copy/mL),酶免檢測(cè)為無(wú)反應(yīng),確證檢測(cè)為HIV-1抗體陰性;2月5日標(biāo)本核酸檢測(cè)為有反應(yīng)(Ct值為18.16,病毒載量為7.89×107copy/mL),酶免檢測(cè)為有反應(yīng),確證檢測(cè)為HIV-1抗體不確定;2月12日,核酸檢測(cè)為有反應(yīng)(Ct值為14.23,病毒載量為1.42×108copy/mL),酶免檢測(cè)為有反應(yīng),確證檢測(cè)為HIV-1抗體陽(yáng)性,該患者首次于陸軍軍醫(yī)大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診時(shí),HIV型核酸檢測(cè)便已呈現(xiàn)有反應(yīng),陽(yáng)性強(qiáng)度隨時(shí)間推移逐次增高,HIV-1型核酸檢測(cè)比HIV抗原抗體檢測(cè)HIV的窗口期要短,見(jiàn)表1。
表1 HIV酶免檢測(cè)及核酸檢測(cè)結(jié)果
截至2020年,中國(guó)艾滋病的感染人數(shù)已經(jīng)超過(guò)百萬(wàn)[4],在目前該病無(wú)法治愈的情況下,預(yù)防艾滋病感染顯得尤為重要,早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)、早治療是一種行之有效的方法[5]。血站在全面開(kāi)展獻(xiàn)血者HIV核酸檢測(cè)后,每年都會(huì)有大量的窗口期感染者被發(fā)現(xiàn),大大減少了經(jīng)血傳播HIV的風(fēng)險(xiǎn)[6]。對(duì)患者而言開(kāi)展HIV核酸篩查也有重要意義:其一,早發(fā)現(xiàn)、早治療可有效減少醫(yī)院內(nèi)感染的風(fēng)險(xiǎn);其二,有利于患者更早得到有效治療,HIV感染者可以通過(guò)調(diào)整手術(shù)臺(tái)次或轉(zhuǎn)到??漆t(yī)院就診,減少醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露和患者間交叉感染的風(fēng)險(xiǎn);其三,早期發(fā)現(xiàn)HIV窗口期的感染者,近親屬間采取防護(hù)措施可有效避免HIV傳播;其四,可減少因窗口期問(wèn)題而導(dǎo)致的醫(yī)療糾紛事件。
盡管HIV核酸檢測(cè)可以大大縮短窗口期,但是所有的檢測(cè)方法均存在窗口期,HIV-1核酸檢測(cè)的窗口期約7 d,HIV抗原抗體檢測(cè)的窗口期約為14 d,HIV抗體檢測(cè)約為21 d[7-8]。另外,由于HIV-2型非常少見(jiàn),目前HIV核酸檢測(cè)試劑主要針對(duì)HIV-1型,因而,對(duì)于 HIV-2型則會(huì)漏檢。同時(shí),對(duì)于免疫力低下的HIV感染患者,則會(huì)出現(xiàn)HIV抗體持續(xù)陰性的可能,另外,終末期艾滋病患者或孕產(chǎn)婦等特殊人群HIV檢測(cè)結(jié)果有差異[9-10]。因此,建議采用核酸和酶免方法同時(shí)檢測(cè)的模式,以提高HIV感染者的檢出率。