病理技術HE染色在病理診斷中的應用效果分析

曹美榮 白春俠 劉麗

【摘要】 目的 研究病理技術蘇木素-伊紅（HE）染色在病理診斷中的價值， 并分析提高其應用效果的方法。方法 8000例進行病理診斷的患者作為研究對象， 對其樣本均采用HE染色進行病理診斷， 統(tǒng)計樣本合格率和不合格率， 并分析樣品不合格的主要原因。結果 在本次研究中， 樣本合格率為99.00%（7920/8000）， 樣本不合格率為1.00%（80/8000）。樣本不合格的主要原因包括：組織切片脫落26.25%（21/80）、染色不均勻21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困難17.50%（14/80）。結論 病理技術HE染色在病理診斷中應用效果較好， 其樣品合格率較高， 但是在進行染色的過程中， 需要進行更加細致的操作， 針對影響樣本合格的各種因素進行有效規(guī)避， 以降低樣本被污染的幾率， 防止出現(xiàn)不合格樣本， 進而提高診斷效率。通過上述保障， 病理技術HE染色值得在臨床病理診斷中推廣。

【關鍵詞】 蘇木素-伊紅染色;病理技術;應用價值;操作方法

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.27.036

HE染色是目前最常見的一種病理學染色技術， 該技術能夠為主治醫(yī)生在治療過程中提供具有針對性的診斷， 從而提高臨床的治療效率。但是， 就目前而言， 在利用HE染色病理技術進行診斷的過程中， 仍然存在小部分染色效果不佳的情況發(fā)生， 導致診斷結果錯誤等情況發(fā)生， 在探究過程中發(fā)現(xiàn)染色效果不佳的原因， 主要與檢驗過程中的操作有

關[1]， 因此， 為了能夠有效避免診斷誤差或者錯誤出現(xiàn)， 本文主要針對在本科室進行HE染色的病理診斷進行分析， 同時對如何提高HE染色的方法進行研究， 具體報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料

選取2018年1月～2019年1月本科室8000例進行病理診斷的患者作為研究對象， 其中男5312例， 女2688例， 平均年齡（40.23±3.45）歲。樣本來源占比分別為手術切除62.50%（5000/8000）、纖維內窺鏡25.00%（2000/8000）、穿刺取材12.50%（1000/8000）， 各類樣本占比分別為子宮內膜樣本13.75%（1100/8000）、脂肪組織樣本7.50%（600/8000）、骨組織樣本5.00%（400/8000）、腹腔臟器樣本73.75%（5900/8000）。納入標準：①均取得相關倫理研究協(xié)會的同意。②樣本涉及的患者及其家屬均簽署知情同意書。

1. 2 方法 在本次研究中， 對入選的8000例患者樣本進行HE染色， 根據(jù)選取樣本的部位， 對其進行不同的處理， 其中包括固定樣本、對樣本進行脫水處理、對切片進行染色等幾個步驟。其中， HE的染色過程主要包括：采用二甲苯進行2次去蠟處理， 再利用不同濃度的無水乙醇將切片洗凈， 同時采用蒸餾水再次清洗切片， 并將洗凈的切片采用蘇木素進行染色， 染色時間≤5 min， 并用流水浸洗， 直到切片的細胞核變?yōu)樗{色為止。然后使用伊紅進行染色， 并采用濃度為95%的乙醇進行沖洗， 使用苯酚二甲苯、二甲苯對切片進行處理， 將其利用DPX封片劑進行封存， 最后將處理好的樣本貼上標簽。

1. 3 觀察指標 統(tǒng)計樣本合格率和不合格率， 并分析樣品不合格的主要原因。

2 結果

在本次研究中， 樣本合格率為99.00%（7920/8000）， 樣本不合格率為1.00%（80/8000）。樣本不合格的主要原因包括：組織切片脫落26.25%（21/80）、染色不均勻21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困難17.50%（14/80）。

3 討論

HE染色， 就是利用蘇木素和伊紅進行染色， 在臨床醫(yī)學中作為一項重要的病理診斷， 但是由于在染色過程中步驟較為復雜， 導致染色結果存在一定的誤差， 為了能夠有效確保每例樣本的準確率， 在進行HE染色的時候， 對其操作方法進行仔細研究[2]。

HE染色法是石蠟切片技術中的一種常見的染色方法， 其中， 蘇木素的染液主要呈現(xiàn)出堿性， 通過染色以后， 切片中的細胞核會被染上紫藍色， 伊紅是一種酸性染料， 能夠使切片的細胞質、細胞外的物質染成紅色。在實驗中， 對蘇木素和伊紅進行染色的時候， 步驟較為復雜， 尤其是在本次研究中， 通過實驗結果可以發(fā)現(xiàn)， 8000例樣本中， 仍然有1.00%的樣本存在不合格的情況， 通過對導致樣品不合格的原因進行詳細分析以后， 發(fā)現(xiàn)導致樣本不合格的主要原因包括：組織切片脫落26.25%（21/80）、染色不均勻21.25%（17/80）、染色模糊16.25%（13/80）、切片污染18.75%（15/80）、染色困難17.50%（14/80）。因此， 為了能夠提高HE染色效率， 就要對實驗室的相關染色技術進行不斷的提高， 從而有效滿足醫(yī)院病理診斷的需要。

在本次研究中， 導致樣品不合格的主要原因之一是切片染色不均勻， 造成切片染色不均勻的主要原因包括：技術人員在對樣本進行取材和固定的時候， 由于固定的位置不恰當、樣本的脫水時間太短， 切片的厚度不均勻、切片上存在橫紋、染色過程中處理不恰當?shù)龋?導致染色效果不佳。同時， 由于切片組織的取材較大， 切片較厚， 固定樣本時采用的固定液濃度較大， 導致組織不能完全被固定好， 從而影響了中間組織的著色效果， 造成著色模糊等現(xiàn)象發(fā)生， 另外， 脫水時間較短， 從而導致切片中存在水分， 導致切片的透明度較低， 影響最終的著色效果[3-5]。

導致樣品不合格的另一個重要原因為染色模糊， 切片染色模糊主要是因為在檢驗過程中， 工作人員在取材的時候， 操作不當導致的， 例如在取材過程中， 標本出現(xiàn)自溶情況， 在固定樣本的時候不及時， 從而引起組織結構模糊的現(xiàn)象發(fā)生。另外， 在采用固定劑進行固定的時候， 也是非常重要的， 如果固定不良， 就會導致切片染色模糊的現(xiàn)象發(fā)生， 另外， 在使用乙醇進行標本固定的時候， 也有可能導致染色出現(xiàn)模糊的現(xiàn)象發(fā)生。在取材過程中， 如果選取了淋巴組織， 會導致切片發(fā)灰， 這是由于淋巴細胞較為密集、其結構較為復雜， 同時， 在制作樣本的時候， 溫度過高、染料質量較差、細胞分化太嚴重等， 也會導致染色模糊[6-8]。

而染色中組織切片脫落主要是與組織自身有關， 同時也與工作人員在處理樣本時， 處理不當?shù)仍蛴嘘P。切片污染和染色困難主要是因為樣本中的組織被污染， 是染液、試劑等不干凈導致的[9-12]。

綜上所述， 病理技術HE染色在病理診斷中應用效果較好， 其樣品合格率較高， 但是在進行染色的過程中， 需要進行更加細致的操作， 針對組織切片脫落、染色不均勻、染色模糊、切片污染、染色困難等影響樣本合格的因素進行有效規(guī)避， 以降低樣本被污染的幾率， 防止出現(xiàn)不合格樣本， 進而提高診斷效率。通過上述保障， 病理技術HE染色值得在臨床病理診斷中推廣。

參考文獻

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[收稿日期：2019-02-14]