NGAL、IL-6和Cys-C聯(lián)合檢測在2型糖尿病腎病早期診斷中的價(jià)值

黃 穎，錢 錦

（泰州市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，江蘇 泰州 225300）

隨著2型糖尿?。═2DM）病情的進(jìn)展，患者會出現(xiàn)各種并發(fā)癥，包括腎病。約20%～40%的糖尿病患者會發(fā)展為腎病。其發(fā)病隱匿，早期癥狀較輕。一旦進(jìn)入大量蛋白尿期，進(jìn)展速度異常加快。因此早期診斷、早期預(yù)防或治療對于延緩糖尿病腎病的發(fā)展速度有著非常重要的價(jià)值。微量白蛋白尿是糖尿病腎病的主要形式，其作為糖尿病腎病進(jìn)展的預(yù)測因子已被認(rèn)可[1]。然而糖尿病腎病早期可表現(xiàn)為尿白蛋白陰性，癥狀不明顯，易被忽略，單純作為糖尿病腎病早期預(yù)測因子并不完全適合，因此發(fā)現(xiàn)除微量白蛋白尿以外的早期標(biāo)志物顯得尤為重要。本研究通過對血清中NGAL、IL-6和Cys-C在2型糖尿病不同階段含量的檢測，探討其聯(lián)合檢測DN早期診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年3月～2017年9月我院內(nèi)分泌科確診的2型糖尿病患者共136例作為研究對象。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2013年版中國2型糖尿病防治指南。根據(jù)24h尿微量白蛋白排泄率（UAER）將患者分為3組：單純DM組（A組）48例，UAER＜30mg/24h，其中男27例，女21例；年齡29～82歲，平均55.4歲；早期DN組（B組）45例，30mg/24h≤UAER≤300mg/24h，其中男21例，女24例，年齡27～79歲，平均58.7歲；DN組（C組）43例，UAER＞300mg/24h，其中男23例，女20例，年齡36～82歲，平均61.3歲。以上各組均排除以下情況：其他內(nèi)分泌疾?。恍?、肝、肺、腦疾病；惡性腫瘤、自身免疫性疾病或結(jié)締組織疾病，感染及其他腎臟疾病。另選40例健康體檢者作為對照組（CTL組），男21例，女19例；年齡32～79歲，平均51.8歲。四組性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有入選人員均知情同意。

1.2 儀器與試劑 NGAL測定儀器為山東麥田生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的MTP-400定量免疫層析分析儀，試劑為其配套的膠體金法檢測試劑盒。IL-6測定儀器為北京熱景生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的UPT-3A上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀，試劑為其配套試劑。Cys-C測定儀器為Beckman Coulter AU5800全自動(dòng)生化分析儀，試劑為重慶中元Cys-C測定試劑盒。所有檢測操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 方法 NGAL采用定量免疫層析法測定。IL-6采用上轉(zhuǎn)發(fā)光法測定。Cys-C采用免疫透射比濁法測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以s表示，多組間比較采用單因素方差分析，方差不齊時(shí)采用Kruskal-Wallis分析。NGAL、IL-6和Cys-C與糖尿病腎病的相關(guān)性，其敏感性和特異性比較應(yīng)用ROC曲線。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各項(xiàng)檢測結(jié)果比較A組UAER、UREA、Scr、Cys-C、IL-6和NGAL結(jié)果和CTL組比較無顯著差異（P＞0.05）。B組UREA、Scr結(jié)果和CTL組及A組相比無顯著差異（P＞0.05），但NGAL、IL-6和Cys-C結(jié)果高于A組（P＜0.05）。C組和A組、B組及CTL組相比均有顯著差異（P＜0.05）。見表1。

表1 各組UREA、Scr、Cys-C、IL-6和NGAL比較

2.2 以Cys-C、IL-6、NGAL和聯(lián)合預(yù)測因子作為檢驗(yàn)變量，以UAER小于30作為狀態(tài)變量繪制ROC曲線（圖1）。由圖1可知，NGAL曲線下面積為85.9% （95%Cl：0.778～0.940），Cys-C曲線下面積為80.1%（95%Cl：0.712～0.891），IL-6曲線下面積為78.4%（95%Cl：0.686～0.882）。Cys-C、IL-6、NGAL的Cut Off值和對應(yīng)的靈敏性、特異性見表2。

圖1 血清Cys-C、IL-6、NGAL和聯(lián)合預(yù)測因子在2型糖尿病腎病早期診斷中的ROC曲線

表2 糖尿病腎病早期診斷中血清Cys-C、IL-6、NGAL和聯(lián)合預(yù)測因子的診斷效能評價(jià)

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病患者發(fā)病率和死亡率最高的長期并發(fā)癥之一[2]。在糖尿病腎病患者中，腎小球結(jié)構(gòu)和功能變化的進(jìn)展，導(dǎo)致炎性細(xì)胞特別是巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的間質(zhì)浸潤。愈來愈多的炎性細(xì)胞被受傷的腎臟組織所釋放的細(xì)胞因子和趨化因子所吸引，反過來加重了腎臟組織的炎癥反應(yīng)[3]。一般腎活檢為糖尿病腎病的權(quán)威診斷方法。但因其有創(chuàng)，操作要求高，臨床上未將其作為常規(guī)檢查項(xiàng)目。因此糖尿病腎病的診斷往往為中晚期。中晚期糖尿病腎病存在復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差的風(fēng)險(xiǎn)。由此可見，糖尿病腎病的早期診斷對糖尿病腎病患者具有重要的臨床意義。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白（NGAL）是脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族中的一員，最初被認(rèn)為是先天免疫的一個(gè)組成部分，在系統(tǒng)炎癥過程中扮演著重要作用[4]。NGAL在許多病理狀況下均會增加，如炎癥、缺血、心臟手術(shù)和腎損傷等。近年來，NGAL作為一種新的腎臟病標(biāo)志物得到很多研究支持。有報(bào)道稱血清NGAL可作為T2DM診斷糖尿病腎病的新型生物標(biāo)志物[5]。De Carvalho等人的研究進(jìn)一步顯示NGAL在尿微量白蛋白正?；蜉p度增加的時(shí)候依然會增加，表明即便在糖尿病腎病最早階段，也有可能發(fā)生腎小管或腎小球損傷[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，NGAL在糖尿病早期未產(chǎn)生微量白蛋白尿時(shí)便可增加，并隨病程的發(fā)展而增加，因此佐證了De Carvalho等人的研究結(jié)論，提示糖尿病在診斷的早期就應(yīng)該考慮腎損傷的發(fā)生，并應(yīng)提早進(jìn)行干預(yù)，防止腎病往終末期發(fā)展。

白細(xì)胞介素-6（IL-6）是一種多功能細(xì)胞因子，可以參與造血細(xì)胞的生長、分化以及免疫和炎癥反應(yīng)。腎小球和腎小管上皮細(xì)胞可以產(chǎn)生一些促炎癥因子，如IL-6、IL-18等[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，IL-6在A組中雖有增加，但和對照組相比無明顯差異。隨著糖尿病腎病的發(fā)展，B組的IL-6水平遠(yuǎn)高于A組和對照組，C組的IL-6水平又高于B組，并存在明顯差異。這可能意味著IL-6與糖尿病腎病有關(guān)，并且與糖尿病腎病的嚴(yán)重度呈正相關(guān)。國外研究也證實(shí)了IL-6和腎臟腎小管成分（腎小管間質(zhì)性纖維化）的沉積是糖尿病腎病進(jìn)展的主要決定因素[8]。

胱抑素C是由所有有核細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量（13kDa）蛋白酶抑制劑，其生理學(xué)變化小于肌酐，以恒定速率合成，不受肌肉質(zhì)量的影響，被腎小球完全過濾并被近端腎小管細(xì)胞重吸收[9]。胱抑素C水平與腎小球?yàn)V過率（GFR）具有良好的相關(guān)性，不僅與腎病的進(jìn)展相關(guān)，而且當(dāng)腎小球?yàn)V過率（GFR）保持＞60mL/min時(shí)，胱抑素C水平同樣發(fā)生變化[10]，這說明胱抑素C可以作為糖尿腎病早期極為敏感的標(biāo)志物。有文獻(xiàn)報(bào)道[11]顯示胱抑素C對于2型糖尿病腎病的診斷具有很高的特異性。本研究通過ROC曲線計(jì)算出的胱抑素C診斷高特異性結(jié)果證實(shí)了這一點(diǎn)。

糖尿病腎病臨床診斷最常用的是24小時(shí)尿微量白蛋白定量檢測。但尿微量白蛋白對診斷2型糖尿病腎病的特異性不足，對預(yù)測病情的轉(zhuǎn)歸也存在局限性。所以尿微量白蛋白用于診斷依據(jù)時(shí)需進(jìn)行長期隨訪、多次檢測。Cys-C、IL-6、NGAL均可作為糖尿病腎病標(biāo)志物，其靈敏度和特異性各有優(yōu)勢和不足。NGAL在腎損傷2小時(shí)左右便會升高，是一個(gè)極為靈敏的腎損傷標(biāo)志物，但其特異性不高，許多組織器官均可釋放NGAL。胱抑素C作為國內(nèi)外公認(rèn)的糖尿病腎病早期標(biāo)志物，對于反映腎臟病變的特異性更好，但因其在人體內(nèi)含量較低，因此檢測的靈敏度并不高。糖尿病腎病已被證實(shí)是一種慢性炎癥反應(yīng)，白細(xì)胞介素-6作為一種炎癥因子，其對于腎病的發(fā)展及預(yù)后具有很高的提示作用。通過對聯(lián)合檢測ROC曲線研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合預(yù)測因子ROC曲線下的面積最大，敏感度和特異度均高于單項(xiàng)指標(biāo)獨(dú)立檢測。因此聯(lián)合檢測意義更大，對于早期預(yù)測糖尿病腎病的效果也更好。