徐剛
【摘 要】目的:研究病理技術蘇木精-伊紅染色(HE染色)在病理診斷中的應用效果。方法:選取60張宮頸組織的石蠟切片,其中30張為HE染色改進前的石蠟切片,30張為HE染色改進后的石蠟切片,比較HE染色改進前、后染色標準率。結果:HE染色技術改進前染色標準率為73.33%,HE 染色技術改進后染色標準率為 93.33%, HE染色技術改進前后染色標準率比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論:病理診斷技術是臨床病理診斷的金標準,HE 染色技術的改進有利于提高染色標準率,提高切片質量,從而提高診斷的準確率。
【關鍵詞】病理技術;病理診斷;蘇木精-伊紅染色;應用效果
引言:
在病理檢查的過程中,臨床的診斷結果會受到組織染色質量的影響,而診斷的結果會對臨床治療方案產(chǎn)生影響,從而對臨床治療的有效率以及安全性造成影響。病理組織切片的處理效果和染色效果也會對病理診斷的準確率造成一定的影響。對病理組織進行制片處理的過程中,染色處理是關鍵環(huán)節(jié),染色質量的高低會影響到病理診斷結果的準確性。目前病理診斷存在標本固定時間不規(guī)范、試劑濃度不合理、組織脫水不足等諸多弊端,導致制片質量較差,增加診斷難度,影響病理診斷的準確性。本文就HE染色技術在臨床病理診斷中的應用價值展開研究,現(xiàn)將具體的研究內容分析如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料.選取本院病理科2016年5月~2017年5月60張宮頸組織的石蠟切片作為研究對象,其中30張為HE染色改進前的石蠟切片,30張為HE染色改進后的石蠟切片,HE染色處理均在相關操作標準下嚴格進行。
1.2 方法
1.2.1 HE染色方法.采用人工染色方法,要求技術人員在取材中嚴格按照相關標準操作,制片中盡量縮短標本的脫水時間和固定時間。技術人員按照宮頸組織切片染色SOP文件進行染色,采用二甲苯脫蠟3缸,5min/缸。過無水乙醇2缸,5min/缸 , 95%乙醇1缸3 min, 90% 乙醇1缸3min、85%乙醇1缸1min, 隨后再用蒸餾水洗3min。用蘇木精染色3~5 min后,采用濃度為1%的鹽酸酒精分化5~10s,用蒸餾水清洗2min,再用稀氨水反藍。技術人員應注意對細胞核染色深度進行觀察,根據(jù)顏色深淺,進行再次分化或再染色操作。用醇溶性伊紅液染色10~20s, 可根據(jù)情況適當調整染色時間, 再梯度酒精脫水,85%乙醇1缸10s, 90%乙醇1缸20s, 95%乙醇1缸30min,無水乙醇2缸,3min/缸,隨后用二苯甲透明3缸,3 min/缸,中性樹膠封片,并粘貼標簽。
1.2.2HE染色技術改進方法:針對不同大小的宮頸組織標本的特點分別進行相應脫水、固定以及染色等操作,染色時確保細胞核變成藍色。細胞間質的顏色為粉紅或桃紅,紅血球為橘紅色,彈力纖維為亮粉紅色,嗜酸性顆粒為鮮紅色,蛋白性液體為粉紅色,膠原纖維為淡粉紅色。為了降低組織脫落的發(fā)生率,對宮頸組織進行烤片處理,完成后將烤片的溫度降低到與室溫相同的水平,再對宮頸組織進行染色處理。在染色的過程中蘇木精多次被稀釋,pH(氫離子濃度)發(fā)生改變,因此,在染色架經(jīng)水瀝干20s后放入蘇木精缸中,再滴入2滴冰醋酸,使酸堿中和,使染色具有一致性【1】。
1.3 觀察指標。比較HE染色技術改進前和HE染色技術改進后染色標準率。
1.4 統(tǒng)計學方法。采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。
2 結果
HE染色技術改進前染色標準率為73.33%, HE染色技術改進后染色標準率為 93.33%, HE 染色技術改進前后染色標準率比較差異有統(tǒng)計學意義。(P<0.05)。見表1。
3 結語
在臨床操作期間,染色質量大部分是由細胞核的染色質量所決定的,這屬于化學以及物理的共同作用之下完成的。大部分是由于組織內部有非常多的微小細孔,在染料滲透以后,與組織結合牢固之后發(fā)生溶解以及擴散細胞以及組織的HE染色的質量非常容易受到取材操作、時間以及質量等相關因素的影響,所以在組織染色當中一定要按照不同標本類型,選擇相對應的工具以及方法,以免使組織結構發(fā)生改變。另外, 需要送入檢驗科的組織全部首選要給予有效固定,可以使組織以及活體成分以及形態(tài)得到保障,同時避免出現(xiàn)自溶。
染色質量對臨床病理檢查的診斷結果有很大的影響,可對疾病治療的方案產(chǎn)生影響。進行組織染色時,技術人員應在相關操作標準的指導下進行染色操作。技術人員應加強對HE染色涉及到的相關理化學知識的重視,對不同大小的標本進行針對性處理,根據(jù)標本的大小和厚薄制定合理的固定以及脫水時間。切片組織的結構較為復雜,技術人員在使用染色劑后,應在較短的時間內使染色劑和組織充分結合,確保徹底染色。病理細胞存在酸性分子,而酸性分子會與染色劑中的陽離子結合,從而形成固定分子;而病理細胞中含有的堿性分子可以與染色劑中的陰離子結合,會使固定作用得以強化,從而保持細胞活性平穩(wěn),并維持組織結構,從而提高檢查的準確性。本次研究結果顯示,改進病理技術HE染色后,染色標準率顯著高于技術改進前(93.33% VS73.33%), 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
綜上所述,病理技術中的 HE 染色技術在病理診斷中的意義重大,技術人員應不斷提高和改進 HE 染色的操作技術,根據(jù)組織類型進行相對應的固定、脫水、切片、染色等操作從而提高切片質量,提高染色標準率,進而促進病理診斷準確性的提升,最終保證臨床治療效果【2】。
參考文獻:
[1]陳潔.研究病理技術HE染色在病理診斷中的應用價值[J].世界最新醫(yī)學信息文摘,2018,18(21):93+99.
[2]鄭菲,陳培瓊,王玉環(huán).HE染色在臨床病理診斷中的應用研究[J].中外醫(yī)療,2016,35(30):17-18+21.