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    有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液對(duì)心肌病心衰大鼠NT—proBNP的影響

    2018-09-10 16:56:31胡思遠(yuǎn)李欣春胡志希梁昊
    關(guān)鍵詞:參附注射液有氧運(yùn)動(dòng)心衰

    胡思遠(yuǎn) 李欣春 胡志?!×宏?/p>

    〔摘要〕 目的 觀察有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液對(duì)心肌病心衰大鼠N末端腦鈉素前體(NT-proBNP)的影響。方法 50只SD大鼠隨機(jī)選取10只作為對(duì)照組,其余40只腹腔注射鹽酸多柔比星建立心肌病心衰模型。造模成功后,將造模存活大鼠隨機(jī)分為模型組、參附注射液組、有氧運(yùn)動(dòng)組、有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組,每組9只。以上各組分別用生理鹽水、參附注射液、有氧運(yùn)動(dòng)、有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液干預(yù)4周,用Elisa法檢測NT-proBNP指標(biāo)。結(jié)果 成功復(fù)制心肌病心衰大鼠模型,有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組大鼠死亡率最低。模型組NT-proBNP水平較高,與其他各組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);參附注射液組與有氧運(yùn)動(dòng)組NT-proBNP比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組NT-proBNP水平明顯降低,與參附注射液組、有氧運(yùn)動(dòng)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 參附注射液、有氧運(yùn)動(dòng)均能降低NT-proBNP水平,對(duì)心衰有較好療效,且有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液的效果最佳,提示有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液治療心衰的方法值得研究和推廣應(yīng)用。

    〔關(guān)鍵詞〕 有氧運(yùn)動(dòng);心衰;參附注射液;N末端腦鈉素前體

    〔中圖分類號(hào)〕R256.2;R285.5 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A 〔文章編號(hào)〕doi:10.3969/j.issn.1674-070X.2018.06.007

    〔Abstract〕 Objective To observe the effect of aerobic exercise combined with Shenfu injection on N-terminal pro brain natriuretic peptide (NT-proBNP) in rats with cardiomyopathy-induced heart failure. Methods The 50 SD rats were randomly selected 10 rats as the control group, and the others were built for the cardiomyopathy model by intraperitoneal injection of doxorubicin hydrochloride. After the model was successful, the model group was randomly divided into the model group, the Shenfu injection group, the aerobic exercise group and the aerobic exercise combined with the Shenfu injection group, 9 rats in each group. After 4 weeks intervention respectively with saline, Shenfu injection and aerobic exercise, NT-proBNP index was detected by Elisa method. Results Heart failure rats with cardiomyopathy were successfully established, aerobic exercise combined with Shenfu injection group showed the lowest mortality rate. The level of NT-proBNP in model group was higher than other groups, the difference was ststistically significant(P<0.05). There was no significant difference of NT-proBNP between the Shenfu injection group and the aerobic exercise group (P>0.05). The level of NT-proBNP in aerobic exercise combined with Shenfu injection group was significantly lower than Shenfu injection group and aerobic exercise group (P<0.05). Conclusion Shenfu injection and aerobic exercise could reduce the level of NT-proBNP, which has a good effect on heart failure, and aerobic exercise combined with Shenfu injection shows the best efficacy, which is worthy to be clinically popularized.

    〔Keywords〕 aerobic exercise; heart failure; Shenfu injection; N-terminal pro brain natriuretic peptide

    心力衰竭(heart failure)是各種心臟疾病的終末期,是心臟結(jié)構(gòu)或其他功能性障礙所導(dǎo)致的心室充盈及射血無力的綜合征,可造成心肌收縮受限,體循環(huán)異常,血液無法良好地灌注到各組織器官,引起頭暈乏力、心慌心悸、呼吸不暢、血瘀水腫等癥狀。心肌病最終可導(dǎo)致心力衰竭,鑒于心衰的高危性與治療效果不理想,心衰可導(dǎo)致患者生活質(zhì)量下降、心理負(fù)擔(dān)與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)加重,因此如何提高治療效果和生活質(zhì)量,是心衰臨床要解決的關(guān)鍵問題。本課題運(yùn)用有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液干預(yù)心肌病心衰大鼠模型,觀察N末端腦鈉素前體(NT-proBNP)的變化,從而判斷療效,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 藥品試劑與儀器

    參附注射液,10 mL/瓶,批號(hào):140205010,雅安三九藥業(yè)有限公司;鹽酸多柔比星,10 mg/支,批號(hào):130704,浙江海正藥業(yè)股份有限公司;肝素鈉注射液,2 mL∶12 500 u,批號(hào):1404115,萬邦醫(yī)藥股份有限公司;NT-proBNP試劑盒,批號(hào):14052001,上海拜沃生物科技有限公司;水合氯醛,250 g/瓶,批號(hào):20130831,科密歐化學(xué)試劑有限公司;5417R小型高速冷凍離心機(jī),德國Eppendorf公司;YJ-E111靜水池,江蘇羽佳塑業(yè)有限公司;SonoScape-S2N彩色多普勒超聲診斷儀,深圳開立科技有限公司;超低溫冰箱,美國Thermo公司。

    1.2 動(dòng)物模型建立

    雄性SD大鼠50只,6~8周齡,體質(zhì)量180~240 g,由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司購入,SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室分籠飼養(yǎng),晝夜比12∶12,室溫20 ℃。根據(jù)Migrino Raymond Q的大鼠心衰模型建立方法[1],參考成忠煌等[2]大鼠心衰模型中的給藥周期與劑量對(duì)心肌病心衰大鼠模型進(jìn)行優(yōu)化:本實(shí)驗(yàn)將50只SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組10只與模型組40只,模型組腹腔注射鹽酸多柔比星注射液,用生理鹽水配制成2 mg/mL液體,按0.75 mL/kg劑量腹腔注射,每周2次,共7周,累積總量21 mg/kg。對(duì)照組大鼠以同樣方式注射等容量生理鹽水。

    造模結(jié)束后,觀察大鼠一般情況與行為體征,發(fā)現(xiàn)模型組大鼠出現(xiàn)精神萎靡,食欲不振,活動(dòng)量減低,毛發(fā)枯黃無澤,行走蹣跚,腹部水腫明顯等癥狀[3],腹水多呈暗紅色或淡黃色。心動(dòng)彩超檢測發(fā)現(xiàn)心衰大鼠左室舒張末內(nèi)徑(LVDD)和左室舒張末容積(LVDV)減小,左室收縮末內(nèi)徑(LVSD)增大[4];眼眶取血檢測發(fā)現(xiàn):心衰大鼠NT-proBNP數(shù)值明顯上升(均大于250 pg/mL),顯示造模成功,心肌病心衰大鼠模型成立。

    1.3 分組與干預(yù)

    按隨機(jī)數(shù)字表法將造模成功的36只心衰大鼠分為模型組、參附注射液組、有氧運(yùn)動(dòng)組、有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組,每組9只,以上各組分別用生理鹽水、參附注射液,有氧運(yùn)動(dòng)、有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射干預(yù)4周。參附注射液組、有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組(在運(yùn)動(dòng)前3 h)腹腔注射參附注射液2 mg/kg,每日1次,共4周;對(duì)照組、模型組、有氧運(yùn)動(dòng)組大鼠腹腔注射等容量生理鹽水,每日1次,共4周。

    1.4 運(yùn)動(dòng)方案

    采用有氧游泳運(yùn)動(dòng)方案[4],用圓柱形游泳水桶直徑60 cm,高120 cm,水深70 cm,水溫控制在31~36 ℃,每周運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練6 d,每天1次,共4周。第1周進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練,時(shí)間從10 min逐步增加至60 min,從第2周起,每次保持60 min的訓(xùn)練時(shí)間;如大鼠無法完成訓(xùn)練,出現(xiàn)5 s沒有到水面換氣,則撈出休息5 min后,繼續(xù)訓(xùn)練[5]。

    1.5 指標(biāo)檢測

    模型驗(yàn)證采用眼眶取血收集1.5 mL血液,于低溫離心機(jī)3 000 r/min 離心15 min,取上清液于-20 ℃保存待測。最終外周血檢測采用腹主動(dòng)脈采血的方式進(jìn)行,采用ELISA法檢測NT-ProBNP濃度,按照試劑盒說明進(jìn)行操作。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)量資料以“x±s”表示,經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn),兩兩比較采用T檢驗(yàn),多組間比較采用方差分析,方差不齊時(shí)采用秩和檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 各組大鼠死亡率統(tǒng)計(jì)

    在施加影響因素干預(yù)過程中,由于鹽酸多柔比星存在一定的毒性,加上腹腔注射,易導(dǎo)致腹腔內(nèi)肝腎的壞死與腹膜后纖維化,導(dǎo)致大鼠死亡率較高。其中模型組死亡5只,參附注射液組死亡3只,有氧運(yùn)動(dòng)組死亡4只,有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組死亡1只。見表1。

    2.2 各組大鼠血清NT-proBNP比較

    模型組NT-proBNP水平較對(duì)照組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與模型組比較,參附注射液組、有氧運(yùn)動(dòng)組、有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組NT-proBNP水平下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);參附注射液組與有氧運(yùn)動(dòng)組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與參附注射液組比較,有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組血清NT-proBNP水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與有氧運(yùn)動(dòng)組比較,有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液組血清NT-proBNP水平明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    3 討論

    3.1 NT-proBNP在心衰診斷中的應(yīng)用

    N末端腦鈉素前體(NT-proBNP)是一種具有多種生物活性的多肽,有較好的穩(wěn)定性,是目前心力衰竭診斷和評(píng)估的重要生物標(biāo)志物。2014年《中國心力衰竭診斷和治療指南》[6]中認(rèn)為NT-proBNP作為急慢性心力衰竭的診斷指標(biāo),在診斷心力衰竭分級(jí)、評(píng)估心力衰竭造模成功與否以及評(píng)價(jià)心力衰竭治療效果上均有較大的意義。這標(biāo)志著NT-proBNP是目前診斷心衰的最佳指標(biāo)之一。目前應(yīng)用多個(gè)指標(biāo)聯(lián)合診斷的研究也越來越多,尤其是利用NT-proBNP與其他相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測。如血清結(jié)締組織生長因子(CTGF)和NT-proBNP聯(lián)合檢測有著理想的靈敏度和特異性,能有效的提高心衰診斷的準(zhǔn)確性[7]。有學(xué)者認(rèn)為聯(lián)合運(yùn)用NT-proBNP、超聲心動(dòng)圖及血?dú)夥治鲚^單獨(dú)使用其中某一指標(biāo)更能提高急性左心衰診斷的準(zhǔn)確性[8]。

    本文通過心動(dòng)彩超聯(lián)合NT-proBNP檢測,觀察心衰的發(fā)生、發(fā)展變化程度及治療干預(yù)的效果;而比較各組間NT-proBNP的變化,不僅能驗(yàn)證模型是否成功,還能觀察各干預(yù)因素對(duì)模型動(dòng)物的影響。造模成功后,模型組NT-proBNP明顯升高,特別是有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液能明顯降低心衰大鼠NT-proBNP,因此,NT-proBNP可能是評(píng)價(jià)心衰的重要客觀指標(biāo)。

    3.2 有氧運(yùn)動(dòng)與藥物聯(lián)合應(yīng)用可能是心衰治療的最佳方式之一

    越來越多的研究表明,適宜的運(yùn)動(dòng)有益于心力衰竭的康復(fù)[9-14]。目前認(rèn)為適宜的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)調(diào)節(jié)和改善心力衰竭患者的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)、增強(qiáng)心臟功能、抑制心室重構(gòu)、改善離子通道紊亂、提高血液流變性、增強(qiáng)血液纖溶能力等方面有積極意義,運(yùn)動(dòng)或許能抑制心力衰竭的發(fā)展進(jìn)程[10]。研究表明,游泳是有氧運(yùn)動(dòng)的一種較好的形式,運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可以減緩慢性收縮性心力衰竭的發(fā)展進(jìn)程;能夠抑制慢性心力衰竭患者交感神經(jīng)系統(tǒng)的激活,影響交感神經(jīng)的輸出,抑制中樞激活,減緩心臟重構(gòu),從而改善心力衰竭的程度,提高生活質(zhì)量,降低心衰等級(jí)[11]。運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練也能導(dǎo)致血漿去甲腎上腺素及NT-proBNP下降[12],可以促進(jìn)心肌線粒體的合成,而運(yùn)動(dòng)后心肌線粒體合成的增加,可能是對(duì)心衰后心肌功能下降的代償反應(yīng)[13]。還有研究指出腿部被動(dòng)運(yùn)動(dòng)可以改善舒張性心衰患者的心臟功能,提高生命質(zhì)量和運(yùn)動(dòng)耐量,改善內(nèi)皮細(xì)胞的功能[14]。運(yùn)動(dòng)聯(lián)合藥物對(duì)心力衰竭的效果可能比單一方式更好,文獻(xiàn)報(bào)道抗心衰藥物聯(lián)合有氧運(yùn)動(dòng)的方式更能改善心功能、提高患者的運(yùn)動(dòng)能力、耐力水平及紅細(xì)胞分布寬度[15]。如使用通絡(luò)補(bǔ)心化瘀湯聯(lián)合太極拳和運(yùn)動(dòng)康復(fù)訓(xùn)練對(duì)心力衰竭患者進(jìn)行康復(fù)治療,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合作用的效果更佳[16];運(yùn)用益氣活血復(fù)方聯(lián)合運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練治療心力衰竭,在保護(hù)心功能、減輕心室重構(gòu)方面較單一治療組有顯著效果[17]。美國心臟協(xié)會(huì)已經(jīng)承認(rèn)適宜運(yùn)動(dòng)能夠改善心力衰竭[18]。通過運(yùn)動(dòng)對(duì)心力衰竭的干預(yù)研究,有助于探索出一套經(jīng)濟(jì)有效的預(yù)防、治療策略或方式。

    本文選用參附注射液來源于“參附湯”,出自《圣濟(jì)總錄》卷五十九,由人參與附子組成,用于回陽救逆,有溫陽強(qiáng)心利尿之功效,是臨床上治療心力衰竭最常用的中藥注射劑。本研究利用有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液對(duì)心衰大鼠進(jìn)行干預(yù),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合參附注射液治療比單純的參附注射液、有氧運(yùn)動(dòng)治療更能降低NT-proBNP水平,且在大鼠死亡率上,聯(lián)合治療組死亡率最低。表明聯(lián)合治療方法較單一治療方式的效果好,可能是心衰治療的最佳方式之一,值得研究和推廣應(yīng)用。

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    (本文編輯 李 杰)

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