不同年齡發(fā)病的重性抑郁障礙患者髓鞘相關(guān)糖蛋白表達(dá)水平的差異

吳楓，孔令韜，孫嘉澤，湯艷清，2

（中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 1.精神醫(yī)學(xué)科； 2.老年醫(yī)學(xué)科，沈陽 110001）

不同年齡發(fā)病的重性抑郁障礙 （major depressive disorder，MDD） 患者顯現(xiàn)出不同的臨床癥狀、疾病嚴(yán)重程度及病程特征［1-2］。遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，早發(fā)抑郁癥 （≤25歲） 與晚發(fā)抑郁癥 （＞25歲） 的遺傳易感性受不同的因素影響［3］。還有很多神經(jīng)生物學(xué)研究［4］顯示，早發(fā)抑郁癥和晚發(fā)抑郁癥的神經(jīng)生理學(xué)機(jī)制不同。這些都提示，早發(fā)抑郁癥和晚發(fā)抑郁癥存在不同的病因和病理生理學(xué)機(jī)制。解剖學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者存在髓鞘損傷，提示髓鞘受損在白質(zhì)纖維斷裂和軸突損傷中具有重要影響［5］。髓鞘相關(guān)糖蛋白 （myelin-associated glycoprotein，MAG） 主要位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘節(jié)間部的軸突外周細(xì)胞膜上［6-7］，其主要功能在青少年和成年早期是穩(wěn)定和維持神經(jīng)元軸突的結(jié)構(gòu)，其適度表達(dá)與髓鞘的形成有關(guān)［8］。相反，MAG也抑制成年人髓鞘和軸突的生長［9］。目前，對(duì)MDD患者中MAG的研究還較少。本研究檢測(cè)了首次發(fā)作未用藥的抑郁癥患者中血漿MAG濃度，并按照年齡進(jìn)行分組，分析不同年齡的抑郁癥患者M(jìn)AG的差異。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集在中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院精神醫(yī)學(xué)科門診就診的MDD患者93例 （13～25歲57例，26～45歲36例） 。所有青少年抑郁癥患者均經(jīng)2名副高級(jí)精神科醫(yī)生使用學(xué)齡期兒童情感疾病和精神分裂癥診斷定式問卷診斷，所有成人患者均經(jīng)2名副高級(jí)精神科醫(yī)生使用美國精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)第4版 （Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders，F(xiàn)ourth Edition，DSM-Ⅳ） 結(jié)構(gòu)化臨床定式問卷診斷。MDD組的納入標(biāo)準(zhǔn)：首次發(fā)作，17項(xiàng)漢密爾頓抑郁量表 （Hamilton Depression Rating Scale-17 item，HAMD-17） ＞17分，未合并DSM-Ⅳ其他軸Ⅰ或軸Ⅱ診斷。MDD組的排除標(biāo)準(zhǔn)：有環(huán)性心境障礙和雙相障礙家族史的患者；經(jīng)過精神藥物治療、電休克治療或心理治療的患者。

按照性別、年齡、教育程度相匹配原則，納入健康對(duì)照者 （healthy control，HC） 87例 （13～25歲48例，26～39歲39例） 。HC組的納入標(biāo)準(zhǔn)：無DSM-Ⅳ軸Ⅰ或軸Ⅱ疾病，HAMD-17≤7 分，入組前1個(gè)月未服用過任何藥物。HC組的排除標(biāo)準(zhǔn)：重大軀體疾病史；一級(jí)親屬患有精神疾病或有精神疾病史。

本研究經(jīng)中國醫(yī)科大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有研究對(duì)象均在研究前被詳細(xì)告知研究的目的、方法及參加研究的可能風(fēng)險(xiǎn)，所有研究對(duì)象均自愿參加本研究并簽署知情同意書。

1.2 方法

依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作流程采集血漿。所有全血樣本進(jìn)行EDTA抗凝處理，采集30 min內(nèi)在8 ℃以2 000 r/min離心10 min，取血漿后儲(chǔ)存于-80 ℃以進(jìn)行分析。使用美國Bio Trust Specualty Zeal公司的人MAG ELISA試劑盒進(jìn)行MAG血漿濃度的檢測(cè)。開始測(cè)定程序前制備所有標(biāo)準(zhǔn)品，所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均一式兩份添加到微量滴定板上。分別設(shè)空白孔，加50 μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品到預(yù)涂好抗體的微量滴定板的孔中，輕輕混勻。在37 ℃下孵育45 min配制液體。將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。取出液體，甩干，每孔加洗滌緩沖液，30 s后取出，重復(fù)4次。所有孔加入稀釋的生物素標(biāo)記的抗IgG 50 μL，37 ℃孵育30 min，再次洗滌。然后加入鏈霉親和素-HRP 50 μL，輕輕混勻，37 ℃孵育15 min，洗滌。每孔加入顯色劑A 50 μL再加入顯色劑B 50 μL，37 ℃孵育15 min。每孔加入終止液50 μL，停止反應(yīng)。取空白孔作為零點(diǎn)，加入終止液后在15 min內(nèi)測(cè)量450 nm處的光密度。

平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照和樣品的重復(fù)讀數(shù)，減去平均零標(biāo)準(zhǔn)光密度。通過繪制y軸上每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度與x軸上濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過圖上的點(diǎn)繪制最佳擬合曲線。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用雙樣本t檢驗(yàn)比較MDD組和HC組的年齡、HAMD-17評(píng)分和MAG濃度。進(jìn)一步分析中考慮到年齡的影響，將受試者按年齡和診斷分為4組：MDD年齡較小 （younger MDD，yMDD） 組 （13～25歲） 和MDD年齡較大 （older MDD，oMDD） 組 （26～45歲） ；HC年齡較小 （younger HC，yHC） 組 （13～25歲） 和HC年齡較大 （older HC，oHC） 組 （26～45歲） 。采用t檢驗(yàn)和雙因素方差分析比較組間MAG濃度的差異。P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料分析

MDD組和HC組在年齡方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MDD組的HAMD-17評(píng)分顯著高于HC組 （P ＜ 0.05） ，提示MDD組具有更高的抑郁水平。見表1。

2.2 不同年齡發(fā)病MDD組和HC組血MAG水平的比較

MDD組血漿MAG濃度顯著高于HC組 （P ＜ 0.05） 。4組間比較，不同年齡的MDD組和HC組間MAG的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （F = 4.834，P ＜ 0.05） 。組間兩兩比較結(jié)果顯示，yMDD組MAG濃度顯著高于yHC組 （P ＜0.05） ，oMDD組MAG濃度顯著高于oHC組 （P ＜ 0.05），yHC組MAG濃度顯著低于oHC組 （P ＜ 0.05） ，而yMDD組MAG濃度顯著高于oMDD組 （P ＜ 0.05） 。見表1。

表1 4組間一般資料和血MAG濃度的比較Tab.1 Clinical data of and MAG concentration of subjects in 4 groups

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)MDD組的血漿MAG濃度高于HC組，且HC組中MAG濃度呈隨年齡增加趨勢(shì)，而MDD組則相反。本研究采用劃分不同年齡對(duì)MDD和HC的MAG血漿濃度進(jìn)行比較研究，目前國內(nèi)外未見相關(guān)報(bào)道。本研究提示，早發(fā)抑郁和晚發(fā)抑郁的發(fā)病機(jī)制可能與MAG濃度在不同年齡的差異相關(guān)。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，MAG在早期髓鞘的近軸層中由少突膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)，并且持續(xù)穩(wěn)定膠質(zhì)-軸突相互作用，以維持神經(jīng)元軸突的結(jié)構(gòu)和髓鞘的形成，MAG在成年期被認(rèn)為是限制神經(jīng)突生長的第一個(gè)髓鞘相關(guān)蛋白［7］。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的MAG大部分釋放到腦脊液，小部分透過血腦屏障釋放入血。當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損時(shí)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)MAG含量的變化透過血腦屏障使血漿MAG含量發(fā)生改變，測(cè)定血漿MAG含量可以及時(shí)反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)MAG的變化。MAG在MDD中的研究很少。尸檢研究表明，MAG表達(dá)在BA 21中下調(diào)［10］或在MDD患者的皮質(zhì)下區(qū)域中沒有異常［11］。在活體研究中，SZABOLCS等［12］發(fā)現(xiàn)，在認(rèn)知行為心理治療前后，MAG是MDD的一種分子情緒特征。本研究發(fā)現(xiàn)，MDD中MAG水平高于HC，這與近期研究［13］相符。在青少年和成人早期，MAG與髓鞘化密切相關(guān)，更高的MAG可能意味著軸突和髓鞘異常發(fā)育，過高的MAG表達(dá)可能帶來過度的髓鞘化，導(dǎo)致青少年抑郁患者情緒不穩(wěn)定。成年過程是伴隨著軸突剪枝的過程，而成年后期更高的MAG可能表明其過度抑制MDD中髓鞘和軸突，剪枝過度，導(dǎo)致患者出現(xiàn)抑郁癥狀。本研究首次發(fā)現(xiàn)MDD血漿中MAG含量增加，可能與MDD不同年齡段的軸突和髓鞘生長有關(guān)。

綜上所述，首次發(fā)作、未用藥的抑郁癥患者中，異常的MAG可能是影響MDD患者發(fā)病的重要因素，且在不同年齡段呈現(xiàn)不同的病理生理機(jī)制。這一機(jī)制的進(jìn)一步闡明，需要應(yīng)用多種方法，如腦功能影像學(xué)、遺傳學(xué)以及臨床心理學(xué)聯(lián)合研究。