了哥王藥材中7種成分的含量測(cè)定及其主成分、聚類(lèi)分析Δ

莢麗麗，魏嵐，趙健，賈玉迪，邱雨，杜超穎，孫立新#（.沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧本溪7004；.沈陽(yáng)藥科大學(xué)無(wú)涯學(xué)院，沈陽(yáng) 006）

了哥王藥材中7種成分的含量測(cè)定及其主成分、聚類(lèi)分析Δ

莢麗麗1＊，魏嵐1，趙健1，賈玉迪2，邱雨2，杜超穎1，孫立新1#（1.沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧本溪117004；2.沈陽(yáng)藥科大學(xué)無(wú)涯學(xué)院，沈陽(yáng) 110016）

目的：建立同時(shí)測(cè)定了哥王藥材中7種成分含量的方法，同時(shí)對(duì)其進(jìn)行主成分分析及聚類(lèi)分析。方法：采用高效液相色譜法。色譜柱為Diamonsil Platisil ODS，流動(dòng)相為乙腈-0.15%三乙胺溶液（磷酸調(diào)pH至6.0）（梯度洗脫），流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm，柱溫為40℃，進(jìn)樣量為10 μL。采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)含量測(cè)定結(jié)果進(jìn)行主成分分析與聚類(lèi)分析。結(jié)果：柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素和西瑞香素檢測(cè)質(zhì)量濃度線性范圍分別為2.688～53.76 μg/mL（r＝0.999 8）、5.052～101.00 μg/mL（r＝0.999 9）、2.052～41.04 μg/mL（r＝0.999 9）、2.108～42.16 μg/mL（r＝0.999 9）、5.112～102.20 μg/mL（r＝0.999 9）、0.820～16.42 μg/mL（r＝0.999 9）、2.070～41.40 μg/mL（r＝0.999 9）；定量限≤1.072 0 μg/mL，檢測(cè)限≤0.331 8 μg/mL；精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD＜2.0%；加樣回收率分別為97.8%～102.5%（RSD＝1.8%，n＝6）、97.2%～102.0%（RSD＝2.0%，n＝6）、95.2%～100.1%（RSD＝1.7%，n＝6）、95.2%～99.3%（RSD＝1.6%，n＝6）、97.0%～100.8%（RSD＝1.3%，n＝6）、95.5%～98.6%（RSD＝1.1%，n＝6）、95.0%～99.3%（RSD＝1.8%，n＝6）。10批藥材樣品有3個(gè)主成分。10個(gè)產(chǎn)地的藥材樣品可聚為2類(lèi)；廣東清遠(yuǎn)和貴州貴陽(yáng)產(chǎn)地的藥材樣品質(zhì)量較好。結(jié)論：該方法操作簡(jiǎn)便，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性好，可用于了哥王藥材中7種成分含量的同時(shí)測(cè)定；不同產(chǎn)地的了哥王藥材質(zhì)量差異較大。

了哥王；高效液相色譜法；含量測(cè)定；主成分分析；聚類(lèi)分析

了哥王為瑞香科蕘花屬植物南嶺蕘花Wikstroemia indica（L.）C.A.Mey.的干燥根或根皮，其性寒、味苦、微辛、有毒，入肝、肺經(jīng)，具有清熱解毒、化痰散結(jié)、消腫利水等作用[1]。了哥王藥材廣泛分布于我國(guó)長(zhǎng)江以南地區(qū)，盛產(chǎn)于廣東、廣西、福建等地，為民間常用中草藥[2]，其化學(xué)成分主要為黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)、木脂素類(lèi)、蒽醌類(lèi)等?，F(xiàn)代藥理研究表明，了哥王藥材具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抑菌、抗腫瘤、抗病毒等作用[3-4]。目前關(guān)于了哥王藥材高效液相色譜法（HPLC）的定量報(bào)道大多側(cè)重單一或某一類(lèi)成分的測(cè)定，難以全面控制其質(zhì)量。如熊友香等[5]測(cè)定了不同產(chǎn)地藥材中西瑞香素的含量；孫立新等[6]同時(shí)測(cè)定了藥材中羅漢松脂酚和牛蒡子苷元的含量；孫麗霞等[7]同時(shí)測(cè)定了藥材中楊梅素等4種黃酮類(lèi)成分的含量；盧雪飛等[8]同時(shí)測(cè)定了藥材中西瑞香素等4種香豆素類(lèi)成分的含量。但目前尚未見(jiàn)HPLC法同時(shí)測(cè)定了哥王藥材中不同類(lèi)別多種成分含量的報(bào)道，且該藥材產(chǎn)地較廣，不同產(chǎn)地藥材質(zhì)量可能存在差異，進(jìn)而影響其藥效。因此，筆者建立HPLC法同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地了哥王藥材中柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素和西瑞香素7種活性成分的含量，并通過(guò)SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)其進(jìn)行主成分分析及系統(tǒng)聚類(lèi)分析，對(duì)不同產(chǎn)地了哥王藥材質(zhì)量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，為合理評(píng)價(jià)該藥材質(zhì)量及指導(dǎo)臨床用藥提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

L-2130型HPLC儀，包括L-2400紫外檢測(cè)器、D-2000 Elite色譜工作站（日本Hitachi公司）；JF1004型電子分析天平（余姚市金諾天平儀器有限公司）；TG332A型微量電子分析天平（湘儀天平儀器設(shè)備有限公司）；PB-10型pH計(jì)（德國(guó)Sartorius公司）；RE2000A型旋轉(zhuǎn)揮發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；KQ-500E型超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑

柚皮苷對(duì)照品（寶雞市辰光生物科技有限公司，批號(hào)：20150119，純度：≥98%）；楊梅素對(duì)照品（批號(hào)：130924，純度：＞99%）、牛蒡苷對(duì)照品（批號(hào)：130120，純度：＞98%）均購(gòu)自上海融禾醫(yī)藥科技有限公司；木犀草素對(duì)照品（成都曼思特生物科技有限公司，批號(hào)：MUST-12100401，純度：≥98%）；槲皮素對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100081-200903，純度：≥98%）；芹菜素對(duì)照品、西瑞香素對(duì)照品（沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)室自制，經(jīng)核磁共振檢測(cè)確定結(jié)構(gòu)，HPLC測(cè)定純度均＞99%）；甲醇、乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為蒸餾水。

1.3 藥材

試驗(yàn)收集不同來(lái)源的了哥王藥材10批（見(jiàn)表1），經(jīng)沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院路金才教授鑒定為真品。

2 方法與結(jié)果

表1 了哥王藥材來(lái)源Tab 1 Resource of W.indica

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil Platisil ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈（A）-0.15%三乙胺溶液（磷酸調(diào)pH至 6.0）（B），梯度洗脫（0～4 min，8%→10%A；4～17 min，10%→14%A；17～23 min，14%→17%A；23～35 min，17%→18%A；35～45 min，18%→19.5%A；45～60 min，19.5%→20%A；60～80 min，20%A；80～96 min，20%→22%A；96～100 min，22%→23%A；100～125 min，23%→31%A；125～135 min，31%→35%A）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 混合對(duì)照品溶液 取待測(cè)成分對(duì)照品各適量，精密稱定，加75%甲醇溶液超聲（功率：250 W，頻率：40 kHz）處理20 min，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得單一對(duì)照品貯備液。精密量取上述單一對(duì)照品貯備液適量，加75%甲醇溶液制成柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、西瑞香素質(zhì)量濃度分別為134.4、252.6、102.6、105.4、255.6、41.04、103.5 μg/mL的混合對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取藥材樣品粉碎，過(guò)40目篩，取約0.5 g，精密稱定，加水15 mL，加熱回流2次，每次2 h，濾過(guò)，取續(xù)濾液，合并2次濾液，于80℃下旋轉(zhuǎn)蒸干，殘?jiān)糜? mL量瓶中，加75%甲醇溶液溶解并定容，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取“2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液、供試品溶液各適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜，詳見(jiàn)圖1。結(jié)果，理論板數(shù)以柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、西瑞香素峰計(jì)均＞3 000；分離度＞1.5，各成分基線分離良好。

2.4 線性關(guān)系考察

分別精密量取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液0.2、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0 mL，分別置于10 mL量瓶中，加75%甲醇溶液定容，制成系列混合對(duì)照品溶液。精密量取上述系列混合對(duì)照品溶液各10 μL，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、西瑞香素質(zhì)量濃度（x，μg/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸?；貧w方程與線性范圍見(jiàn)表2。

圖1 高效液相色譜圖Fig 1 HPLC chromatograms

表2 回歸方程、線性范圍與定量限、檢測(cè)限Tab 2 Regression equations，linear ranges and limits of quantify，limits of detection

2.5 定量限與檢測(cè)限考察

分別精密量取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，倍比稀釋，并按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，當(dāng)信噪比為10∶1時(shí)，得定量限；當(dāng)信噪比為3∶1時(shí)，得檢測(cè)限，詳見(jiàn)表2。

2.6 精密度試驗(yàn)

取“2.2.1”項(xiàng)下混合對(duì)照品溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄峰面積。結(jié)果，柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、西瑞香素峰面積的RSD分別為1.2%、1.2%、1.0%、1.1%、0.9%、1.5%、1.4%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液（No.S2），適量，分別于室溫下放置0、4、8、12、24 h時(shí)按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、西瑞香素峰面積的RSD分別為1.8%、1.5%、1.7%、1.0%、1.6%、1.8%、1.6%（n＝5），表明供試品溶液室溫放置24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取樣品（No.S2）適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，共6份，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算含量。結(jié)果，柚皮苷、楊梅素、牛蒡苷、木犀草素、槲皮素、芹菜素、西瑞香素含量平均值分別為162.6、220.6、305.8、408.2、964.2、115.1、318.5 μg/g，RSD分別為1.5%、1.7%、1.1%、1.4%、1.2%、1.4%、1.5%（n＝6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量樣品（No.S2）適量，共6份，分別加入一定質(zhì)量的待測(cè)成分對(duì)照品，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 3 Results of recovery tests（n＝6）

續(xù)表3Continued tab 3

2.10 藥材樣品含量測(cè)定

取10批藥材樣品各適量，分別按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算樣品含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 藥材樣品含量測(cè)定結(jié)果（±s，n＝3，μg/g）Tab 4 Results of content determination of samples（±s，n＝3，μg/g）

表4 藥材樣品含量測(cè)定結(jié)果（±s，n＝3，μg/g）Tab 4 Results of content determination of samples（±s，n＝3，μg/g）

No.S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10柚皮苷467.5±6.428 162.6±2.378 277.0±3.037 314.9±3.928 186.5±2.122 435.9±3.601 339.6±4.694 278.5±4.350 147.5±2.706 114.8±2.077楊梅素706.2±7.959 220.6±3.857 343.3±5.164 449.2±5.311 178.4±3.105 331.3±5.764 306.2±3.467 761.1±10.85 212.5±4.122 356.3±3.816牛蒡苷161.4±2.610 305.8±3.499 120.4±1.680 68.68±0.686 179.0±2.150 114.0±1.058 145.8±1.779 148.6±1.442 186.9±3.027 140.1±2.230木犀草素299.5±5.701 408.2±5.623 107.9±2.193 258.3±2.691 227.0±2.558 217.2±2.606 270.0±2.120 225.7±3.301 162.5±3.053 283.3±3.055槲皮素940.7±10.900 964.2±11.620 726.1±10.700 661.8±8.099 991.5±9.403 699.2±11.690 971.7±11.650 928.2±8.924 831.3±12.580 862.2±12.140芹菜素126.3±1.550 115.1±1.650 80.44±1.338 115.4±2.311 95.35±1.616 92.31±1.294 74.57±1.307 76.56±1.275 85.20±1.640 95.42±1.404西瑞香素351.0±4.493 318.5±4.881 370.4±5.690 260.4±4.204 344.3±4.382 210.6±2.593 324.9±3.478 380.5±5.012 337.2±5.084 285.9±5.262

2.11 主成分分析

通過(guò)SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)10批藥材樣品的含量測(cè)定結(jié)果進(jìn)行主成分分析[9-10]。結(jié)果，特征值＞1的主成分有3個(gè)，且累積方差貢獻(xiàn)率為84.074%，基本可以客觀反映藥材樣本信息。藥材樣品主成分分析結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可見(jiàn)，牛蒡苷、槲皮素和西瑞香素對(duì)主成分1貢獻(xiàn)較大，木犀草素和芹菜素對(duì)主成分2貢獻(xiàn)較大，柚皮苷和楊梅素對(duì)主成分3貢獻(xiàn)較大。根據(jù)各主成分得分，以各主成分相應(yīng)的方差貢獻(xiàn)率占累積方差貢獻(xiàn)率的百分比為權(quán)重，對(duì)3個(gè)主成分進(jìn)行線性組合，可反映原樣本信息的綜合主成分得分[11]，用F值表示（即：F＝0.351×F1+0.341×F2+0.308×F3），F(xiàn)值越大說(shuō)明了哥王藥材中各待測(cè)成分綜合含量越高，了哥王藥材質(zhì)量越好。綜合主成分評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表6。由表6可知，S1、S8藥材樣品的質(zhì)量較好。

2.12 系統(tǒng)聚類(lèi)分析

為評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地的了哥王藥材的質(zhì)量差異，采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)藥材樣品進(jìn)行系統(tǒng)聚類(lèi)分析，選用組間聯(lián)結(jié)法，采用歐式距離作為藥材樣品的測(cè)度，結(jié)果10個(gè)產(chǎn)地的了哥王藥材可分為2類(lèi)，第一類(lèi)：S1和S8；第二類(lèi)：S2、S3、S4、S5、S6、S7、S9和S10。聚類(lèi)分析樹(shù)狀圖見(jiàn)圖2。

表5 藥材樣品主成分分析結(jié)果Tab 5 Results of principal component analysis of medicinal materials samples

表6 綜合主成分評(píng)價(jià)結(jié)果Tab 6 Results of comprehensive principal component evaluation

圖2 聚類(lèi)分析樹(shù)狀圖Fig 2 Cluster analysis tree diagram

3 討論

3.1 色譜條件的確定

筆者選擇有機(jī)相時(shí)考察了甲醇和乙腈，結(jié)果顯示，乙腈的洗脫效果和分離效果較好；選擇水相時(shí)考察了磷酸、甲酸、三氟乙酸、磷酸鹽、醋酸鹽、三乙胺等，結(jié)果顯示，加入三乙胺后，可明顯增加色譜峰的分離度并改善峰形。預(yù)試驗(yàn)進(jìn)行了三乙胺的加入量（0.1%、0.15%、0.2%）與pH（2.5～7）優(yōu)選，結(jié)果顯示，三乙胺的加入量為0.15%（pH 6.0）時(shí)，色譜峰分離度較大，峰形較好。

3.2 提取方法的優(yōu)化

本試驗(yàn)對(duì)供試品的提取方式進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果，在加熱回流法下供試品的提取率為20.17%，超聲提取法下供試品提取率為11.46%，可見(jiàn)加熱回流法較超聲提取法的提取效率更高，提取更加完全。本試驗(yàn)繼而考察了提取時(shí)間（1、2、3 h）、提取次數(shù)（1、2、3次）和料液比（1∶10、1∶20、1∶30），結(jié)果顯示，在料液比為1∶30，提取2次，2 h/次時(shí)供試品提取率較高，待測(cè)成分的響應(yīng)值較大。筆者選擇復(fù)溶溶劑時(shí)分別考察了水和體積分?jǐn)?shù)分別為25%、50%、75%和100%的甲醇，結(jié)果顯示采用75%的甲醇溶液復(fù)溶藥材樣品時(shí)，待測(cè)成分色譜峰的響應(yīng)值較大。

3.3 不同產(chǎn)地了哥王藥材中7種成分含量的差異

主成分分析是使用較廣泛的多指標(biāo)線性降維變換的多元統(tǒng)計(jì)分析方法。它是將原來(lái)具有一定相關(guān)關(guān)系的較多指標(biāo)重新組合成一組新的相互無(wú)關(guān)的綜合指標(biāo)來(lái)概括原指標(biāo)信息，從而以最少的主成分?jǐn)?shù)盡可能多地反映原來(lái)指標(biāo)信息的方法。由研究結(jié)果可知，不同產(chǎn)地藥材樣品中7種化學(xué)成分的含量具有較大差異，其中槲皮素的含量相對(duì)于其他6種成分的含量在10個(gè)產(chǎn)地中較高；芹菜素的含量較低，與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的了哥王藥材中芹菜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)明顯高于木犀草素、楊梅素的結(jié)果不同，原因可能為二者的提取方式與提取溶劑不同，供試品提取率也不同；而西瑞香素在各個(gè)產(chǎn)地中的含量較穩(wěn)定，與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的不同產(chǎn)地了哥王藥材中西瑞香素的含量差異較小相一致。

本研究通過(guò)系統(tǒng)聚類(lèi)分析將10個(gè)產(chǎn)地的藥材樣品分為2類(lèi)，S1和S8被聚為一類(lèi)，結(jié)合主成分分析，在綜合主成分得分排序中分別為第1、2位，且有效成分含量較高，表明廣東清遠(yuǎn)、貴州貴陽(yáng)產(chǎn)地的藥材樣品質(zhì)量較好；其余藥材樣品被聚為另一類(lèi)，在綜合主成分得分排序中為第3～10位，這與主成分分析結(jié)果一致，表明該類(lèi)藥材質(zhì)量稍差，二者相互驗(yàn)證，共同評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地了哥王藥材的質(zhì)量。造成以上藥材質(zhì)量不同的原因可能與藥材生長(zhǎng)的氣候條件、土壤質(zhì)量、采收時(shí)間、儲(chǔ)存條件等因素有關(guān)。

綜上所述，本方法操作簡(jiǎn)便，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性好，可用于了哥王藥材中7種成分含量的同時(shí)測(cè)定；不同產(chǎn)地的了哥王藥材質(zhì)量差異較大。

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Content Determination of 7 Constituents in Wikstroemia indica and Its Principal Component and Cluster Analysis

JIA Lili1，WEI Lan1，ZHAO Jian1，JIA Yudi2，QIU Yu2，DU Chaoying1，SUN Lixin1（1.School of Pharmacy，Shenyang Pharmaceutical University，Liaoning Benxi 117004，China；2.Wuya College，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China）

OBJECTIVE：To establish a method for simultaneous determination of 7 constituents in Wikstroemia indica，and to conduct principal component analysis and cluster analysis.METHODS：HPLC method was adopted.The determination was performed on Diamonsil Platisil ODS column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.15%triethylamine solution（pH adjusted to 6.0 with phosphoric acid，gradient elution）at the flow rate of 1.0 mL/min.The detection wavelength was set at 280 nm，and column temperature was 40 ℃.The sample size was 10 μL.The principal component analysis and cluster analysis were conducted for the results of content determination by SPSS 22.0 statistical software.RESULTS：The linear ranges were 2.688-53.76 μg/mL for naringin（r＝0.999 8），5.052-101.00 μg/mL for myricetin（r＝0.999 9），2.052-41.04 μg/mL for arctiin（r＝0.999 9），2.108-42.16 μg/mL（r＝0.999 9），5.112-102.20 μg/mL（r＝0.999 9），0.820-16.42 μg/mL（r＝0.999 9），2.070-41.40 μg/mL（r＝0.999 9），respectively.The limits of quantitation were no higher than 1.072 0 μg/mL，the limits of detection were no higher than 0.331 8 μg/mL.RSDs of precision，stability and reproducibility tests were all lower than 2.0%.The recoveries were 97.8%-102.5%（RSD＝1.8%，n＝6），97.2%-102.0%（RSD＝2.0%，n＝6），95.2%-100.1%（RSD＝1.7%，n＝6），95.2%-99.3%（RSD＝1.6%，n＝6），97.0%-100.8%（RSD＝1.3%，n＝6），95.5%-98.6%（RSD＝1.1%，n＝6），95.0%-99.3%（RSD＝1.8%，n＝6），respectively.Three main components were belong to the samples of 10 batches of medicinal materials.The samples of medicinal materials from 10 producing area could be divided into 2 categories.The quality of W.indica from Qingyuan Guangdong and Guiyang Guizhou were better than others.CONCLUSIONS：The method is simple，precise，stable and reproducible，and it can be used for simultaneous determination of 7 constituents in medicinal material.The quality of W.indica from different regions are quite different.

Wikstroemia indica；HPLC；Content determination；Principal component analysis；Cluster analysis

R917

A

1001-0408（2017）33-4706-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2017.33.27

遼寧省教育廳“遼寧特聘教授”項(xiàng)目（No.遼教發(fā)〔2014〕187號(hào)）

＊碩士研究生。研究方向：藥物分析。電話：024-43520599。E-mail：827227389@qq.com

#通信作者：教授，博士。研究方向：藥物分析。電話：024-43520600。E-mail：sunlixin67@yahoo.com

（編輯：張 靜）

2017-03-12

2017-06-25）