CD14的研究進展及臨床意義

郁秀娟

【摘要】CD14在脂多糖（lipopolysacharide，LPS）介導的全身炎癥反應綜合征中起著重要的作用，抑制CD14成為治療膿毒血癥的潛在有效方法。此外CD14在調(diào)節(jié)樹突細胞凋亡、預測心血管事件及評估慢性腎臟疾病預后中起著重要作用。sCD14同時也是檢測感染預測膿毒血癥預后的一個良好指標。用某些生物制品治療膿毒血癥時，CD14在這一過程中也發(fā)揮著至關重要的角色。因此，深入了解CD14對于臨床治療有關疾病有著深遠意義。

【關鍵詞】CD14；膿毒血癥；LPS；樹突細胞

【中圖分類號】R559 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2016.29.0.03

1 對CD14的認識

CD14分為mCD14和sCD14。在1982年的第一次白細胞分型會議上根據(jù)與單核細胞或巨噬細胞上結合的單克隆抗體的不同，CD14（mCD14）作為辨別單核細胞或巨噬細胞血統(tǒng)的一個有用標志。CD14也會表達于其它細胞的表面，它包括中性粒細胞、軟骨細胞、B細胞、樹突細胞、齒齦成纖維細胞、人腸上皮細胞。LPS是革蘭染色陰性菌細胞膜的主要組成成分。他包含一個O糖鏈，由核心低聚糖和脂質(zhì)組成[1]。人類CD14基因包含兩個外顯子，其編碼多個富含亮氨酸重復單位的356個氨基酸，成熟的蛋白表達為糖基磷脂酰肌醇固定在細胞表面的分子，他缺少跨膜區(qū)域。1990年55 kDa糖蛋白CD14被確定為內(nèi)毒素脂多糖的識別受體。CD14在檢測和清除病原微生物感染中起著決定性的作用[2]。mCD14位于免疫效應細胞表面，其作為脂多糖（lps）、肽多糖、磷酸壁酸、脂肽和多種其他微生物信號轉(zhuǎn)導受體。該分子也能識別熱休克蛋白60、神經(jīng)酰胺、磷脂類、脂蛋白、和受條理作用的微粒等內(nèi)源性配體[3]。

2 CD14與感染

在中性粒細胞減少的患者，尤其是化療的腫瘤患者，如何及時有效的監(jiān)測嚴重的細菌感染或者預測膿毒血癥以及由其引起的死亡是個重要的問題，有學者在研究癌癥兒童伴有中性粒細胞減少時怎樣快速安全預測膿毒血癥時發(fā)現(xiàn)當這些患者伴有嚴重感染或膿毒血癥時，他們的SCD14水平明顯增高，那些即將在15天之內(nèi)死去患有癌癥伴有中性粒細胞減少的患者sCD14也很高，sCD14水平與白細胞水平?jīng)]有相關性。盡管sCD14不是檢測菌血癥的敏感指標，在臨床上不能確定感染源時，檢測sCD14顯得很有意義。有調(diào)查者發(fā)現(xiàn)高濃度的sCD14與艾滋病患者逐漸增加的死亡率有關；高濃度的sCD14也與由革蘭染色陰性菌引起的膿毒血癥的死亡率增加有關[4]。

2.1 膿毒血癥

過去通常認為是在組織損傷或機體遭受嚴重病原微生物感染引起的自身免疫系統(tǒng)的過分激活緊接著的級聯(lián)炎癥反應，目前膿毒血癥更多被看作是一個動態(tài)綜合征，其特點是存在很多拮抗現(xiàn)象，膿毒血癥應該被看作從高炎癥反應到免疫麻痹的跨越過程[5]。是由各種原因引起的是在重癥監(jiān)護室非冠脈疾病中引起死亡的常見原因，它是有著高死亡率的嚴重疾病，給衛(wèi)生保健系統(tǒng)帶來了沉重負擔。不僅是在發(fā)展中國家，而且在美國以及歐洲國家，在過去20年膿毒癥的發(fā)病率一直在上升。Martin從2009年起研究了11000多嚴重膿毒血癥患者發(fā)現(xiàn)57%的病人有革蘭染氏陰性細菌的感染。革蘭染色陰性菌細胞壁成分LPS會引起全身炎癥反應，由此可見研究由CD14介導的炎癥反應對于治療由格蘭染色陰性菌膿毒血癥有重要的意義。人們對CD14在LPS引起的炎癥反應中的作用經(jīng)歷了很長的時間[6]。

2.1.1 CD14在革蘭染色陰性菌介導的炎癥反應中的作用機制

脂多糖（LPS）是革蘭染色陰性菌細胞膜的主要成分，其介導的炎癥反應主要是在LPS的參與下進行的，在血漿中LPS與LBP蛋白結合，LBP能夠促進LPS單體與CD14結合很可能是改變了LPS聚集物的排布[7]。CD14是一個馬蹄形的二聚體，涉及結合LPS結構位于CD14單體氨基末端的疏水口袋[8]。當LPS穿越水環(huán)境時，白蛋白能夠遮蔽疏水的脂質(zhì)A，故白蛋白能夠促進LPS向CD14的轉(zhuǎn)移[9]。隨后在白蛋白的幫助下，當TLR4/MD-2（髓樣分化蛋白-2）復合體形成時，CD14將LPS傳遞給MD-2。隨后TLR4二聚作用促進募集TIRAP/MyD88和TRAM/TRIF兩對銜接蛋白，通過同型TIR–TIR結構域相互作用，MyD88然后募集IRAK4和IRAK2（或IRAK1）激酶形成一個復合體[10]。這種多分子的復合體觸發(fā)級聯(lián)放大信號早期引起NF-κB和MAP激酶的活化，導致TNF-a、IL-6等細胞因子的釋放；另一方面TRIF引起的轉(zhuǎn)導信號激活IRF3轉(zhuǎn)錄因子，導致Ⅰ型干擾素（IFN）的表達，IFN也會誘導炎癥趨化因子IL-10和RANTES的表達；晚期也會有NF-κB和MAP激酶的活化[11]。可見CD14在LPS介導的炎癥反應過程中起著重要的作用。sCD14的功能與mCD14相似，在沒有LBP存在時，LPS與sCD14結合，LPS-sCD14絡合物刺激內(nèi)皮細胞、中性粒細胞、單核細胞活化[12]。LPS也可以通過LBP轉(zhuǎn)移給sCD14[13]。Scd14有與病原微生物配體有效結合的受體。

2.1.2 有學者發(fā)現(xiàn)在用凋亡細胞治療膿毒血癥時

CD14在這一過程中起著重要作用[14]。體外實驗已經(jīng)顯示膿毒血癥的BALB/c小鼠，經(jīng)尾靜脈注射凋亡的嗜中性粒細胞（PMN）能夠抑制由巨噬細胞激活的促炎因子的分泌，比如會抑制TNF-α的分泌，同時也會曾加抗炎因子TGF-β（轉(zhuǎn)化生長因子）的分泌，他們發(fā)現(xiàn)LPS能夠很快的與凋亡細胞結合，這些LPS包被的凋亡細胞以CD14/凝血酶/玻連蛋白受體的形式被巨噬細胞識別，然后被清除，這一過程會抑制TNF-α的表達，也會增加IL-10的表達。

3 所有成熟的樹突細胞的終末階段是凋亡

這個過程對于調(diào)節(jié)外周耐受具有重要作用，由于樹突細胞凋亡不足將會引起樹突細胞的蓄積，繼而引起淋巴細胞的過度活化，引起系統(tǒng)性自身免疫疾病[15]。小鼠樹突細胞受到LPS刺激時引起Src激酶家族和磷脂酶C-γ2活化，引起細胞外的Ca2+和鈣神經(jīng)素依賴的核NFAT（激活T細胞核因子）異位，引發(fā)這一過程不依靠TLR4的參與，而唯一需要的就是CD14，他們也展示LPS誘導的NFAT（激活T細胞核因子）活化是通過CD14途徑，會引起終末分化型樹突細胞凋亡，這對于保持自身耐受和預防自身免疫疾病有重要作用。封閉這條途徑會延長樹突細胞生存時間增加T細胞的引導能力。該研究展示了CD14在LPS觸發(fā)的樹突細胞分子信號通路中的新作用，CD14通過缺乏活化t細胞的核因子活化起到調(diào)節(jié)樹突細胞周期的作用[16]。

4 CD14與腎病

劉芝[17]等人在發(fā)現(xiàn)CD14與慢性腎?。–KD）有密切關系，其通過對不同分期慢性腎病病人及正常人（對照組）進行循環(huán)血液中（TLR4）+CD14+單核細胞檢查，結果顯示：慢性腎病患者CD14+，（TLR4）+CD14+單核細胞數(shù)量比正常人明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），TNF-α和IL-6水平也很低下；CD14+，（TLR4）+CD14+單核細胞數(shù)量與慢性腎病的嚴重程度成負相關。CD14+TLR4+單核細胞數(shù)量與腎小球路過濾和血細胞壓積正相關，但是與血尿氮水平﹑血清肌酐﹑C反應蛋白呈負相關，在慢性腎病患者中TLR4+單核細胞明顯減少和對LPS應答減弱也許與中國慢性腎病患者的進展有關。Ruben Poesen[18]等學者通過對495名輕到中度慢性腎病患者血漿sCD14濃度進行測量發(fā)現(xiàn)血漿sCD14水平與eGFR負相關，即使后來這些患者的腎功能有所改變。血漿sCD14水平能夠預測CKD患者的死亡率，血漿Scd14水平與CKD患者腎功能的進展密切相關。在一項常染色體顯性遺傳多囊腎病的研究中發(fā)現(xiàn)腎臟中的CD14表達、尿sCD14、血漿Scd14與該病的進展相關[43]。

5 CD14與心血管事件之間存在著關聯(lián)

Scd14水平升高與主動脈硬化、頸動脈斑塊形成、不穩(wěn)定型心絞痛密切相關[19]。在一個心血管健康研究中發(fā)現(xiàn)sCD14水平與亞臨床的心血管疾病和未來的臨床心血管疾病風險密切相關。賈雪芹[20]等冠狀動脈疾病患者進行SCD14檢測時發(fā)現(xiàn)AMI（急性心肌梗死）組和UAP（不穩(wěn)型心絞痛）組血清SCD14水平明顯高于SAP（穩(wěn)定型心絞痛）組與對照組，提示SCD14的水平與CHD（冠心?。┎∏閲乐匦悦芮邢嚓P，在在對照組和SAP組間SCD14的含量，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），提示SCD14可能更多參與了CHD急性事件的發(fā)生發(fā)展。隨著Gensini評分在對照組SAP組UAP組AMI組逐漸增高，血清CRP、SCD14濃度亦相應增高，此兩項指標與Gensini評分均呈正相關，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；提示血清SCD14濃度與Gensini評分一樣可以評價冠脈病變嚴重程度，血清CRP、SCD14濃度在單支 雙支三支病變組逐漸增高，且組間比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），提示血清SCD14濃度可以作為冠脈病變血管支數(shù)的預測因子。

6 CD14與消化系統(tǒng)疾病

對腸道細菌的先天性和適應性免疫反應異常被認為與炎癥性腸病的發(fā)病機制有關。Lenka Frolova等人研究了在炎癥性腸病和正常對照組的腸粘膜活檢標本TLR4、CD14的表達情況，與正常對照組相比TLR4的表達在潰瘍性結腸炎患者緩解期末端回場和直腸明顯上調(diào)，與對照組相比TLR4在克羅恩病患者急性期時末端回腸的表達也明顯上調(diào)。與對照組相比CD14在克羅恩病的緩解期或急性期時以及在潰瘍性結腸炎的緩解期或急性期時末端回腸的表達明顯上調(diào)。因此TLR4、CD14在不同部位腸粘膜調(diào)節(jié)異?；蛟S對炎癥性腸病的發(fā)病起著決定性的作用。

綜上所述，CD14在心血管、腎臟、消化系統(tǒng)疾病以及感染性疾病中都發(fā)揮著重要作用，具有很大的臨床診斷與治療參考價值，CD14作為LPS的主要受體，在機體免疫反應尤其是革蘭染色陰性菌介導的全身反應發(fā)揮著重要的作用。因此更深入的研究CD14顯得尤為重要。

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本文編輯：趙小龍