鄭培鴻,陳維榮,林廣榮
(1.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院,廣東 汕頭 515000;2.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院,廣東 汕頭 515000)
技術(shù)方法
一種用于局部紅外線照射的大鼠簡(jiǎn)易固定裝置
鄭培鴻1,陳維榮2*,林廣榮2
(1.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院,廣東 汕頭 515000;2.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院,廣東 汕頭 515000)
目的 通過(guò)簡(jiǎn)易材料制作一種用于局部紅外線照射的大鼠固定裝置,并觀察在該裝置固定下大鼠保定效果。方法 SD大鼠12只,應(yīng)用固定裝置固定大鼠,分別觀察在室溫(24~26℃)、38~39℃及42~43℃紅外線局部照射下的保定時(shí)間,最大以60 min為觀察終點(diǎn)。結(jié)果 大部分大鼠(10/12)在室溫(24~26℃)、38~39℃及42~43℃紅外線局部照射下保定時(shí)間都能達(dá)到30 min以上,其中有8只可達(dá)到60 min,不同局部溫度下大鼠的保定時(shí)間差異無(wú)顯著性(P> 0.05)。結(jié)論 該裝置制作簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便,能實(shí)現(xiàn)較長(zhǎng)時(shí)間的保定,是一種較為方便、可靠的大鼠保定裝置。
大鼠;固定裝置;紅外線
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,大鼠為最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一,因?qū)嶒?yàn)要求常需對(duì)非麻醉狀態(tài)下的大鼠進(jìn)行不同時(shí)間的保定,如采血、注射、備皮、麻醉等,簡(jiǎn)便及適當(dāng)?shù)谋6蓽p少實(shí)驗(yàn)人員損傷,縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。市面上的大鼠固定器??蓾M足大鼠采血及注射,但因其價(jià)格稍高、適用范圍較窄而限制其使用,筆者因?qū)嶒?yàn)需要,根據(jù)固定器的技術(shù)要求[1],利用簡(jiǎn)易材料自制大鼠固定裝置,通過(guò)此裝置進(jìn)行紅外線局部照射,效果可靠,可實(shí)現(xiàn)較長(zhǎng)時(shí)間的大鼠保定,并可用于尾靜脈采血、尾靜脈注射、腹腔注射、特定部位手術(shù)切口拆線等操作,現(xiàn)介紹如下。
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料
SPF級(jí)雄性SD大鼠12只,體重260~280 g,由汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供【SCXK(粵)2012-0017】;飼育室環(huán)境溫度24~26 ℃,相對(duì)濕度60%~70%,大鼠飼料飼養(yǎng),自由飲食,實(shí)驗(yàn)操作在汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施內(nèi)進(jìn)行【SYXK(粵)2012-0079】;特定電磁波TDP治療器(波長(zhǎng)2.5~25 μm紅外線,華倫CQJ-16B臺(tái)式,重慶華倫醫(yī)療器械有限公司)、溫度計(jì)、操作臺(tái)、木板、釘子、塑料瓶、透明膠帶等。
1.2 固定裝置的制作
根據(jù)實(shí)驗(yàn)大鼠體積選擇適當(dāng)規(guī)格商品塑料水瓶制作固定裝置,裝置由錐筒狀主倉(cāng)、外圈套筒、后部副倉(cāng)、底板構(gòu)成(圖1、圖2)。
選擇350 mL類錐型塑料水瓶2個(gè),第1個(gè)剪去底部,按實(shí)驗(yàn)需要在瓶身開(kāi)窗(圖1、圖2中陰影部分,下同),做成錐筒狀主倉(cāng)(圖1-a),第2個(gè)剪去頭端1/4及尾端1/4,再順縱軸方向剪開(kāi)一邊,套于主倉(cāng)上,大致與主倉(cāng)重疊后用透明膠帶封閉剪開(kāi)邊,后在原剪開(kāi)處的對(duì)面適當(dāng)位置進(jìn)行開(kāi)窗(小于主倉(cāng)窗口),由此完成外圈套筒的制作(圖1-b);選擇500 mL頭端類半球形塑料水瓶1個(gè),剪去多余瓶身僅留類半球形頭端,制成后部副倉(cāng)(圖1-c)。
取木板一塊,約25 cm × 15 cm,按主倉(cāng)平放后瓶口高度制作墊塊釘于木板頭側(cè),并于主倉(cāng)頭尾部的兩側(cè)各釘釘子2枚以固定主倉(cāng),因本次實(shí)驗(yàn)擬進(jìn)行大鼠腹部紅外線照射,因此在相應(yīng)位置進(jìn)行木板開(kāi)窗,直徑4 cm,由此制成底板(圖1/圖2-e)。
1.3 固定裝置的使用
底板置于操作臺(tái),將套筒套上主倉(cāng),錯(cuò)開(kāi)窗口位置以閉合瓶身,并使主倉(cāng)窗口朝下,從鼠籠中取出大鼠,將其頭部靠近并對(duì)準(zhǔn)主倉(cāng)尾側(cè)開(kāi)口,因大鼠鉆洞習(xí)性,放松尾巴后大鼠會(huì)鉆入固定裝置中,后將大鼠尾巴穿過(guò)副倉(cāng)開(kāi)口,再將副倉(cāng)套入主倉(cāng)內(nèi)并使尾部開(kāi)口稍向下傾斜,向頭端輕微用力抵住副倉(cāng)以固定大鼠,再取透明膠帶封住主倉(cāng)尾側(cè)及副倉(cāng)(圖1/圖2-d),旋轉(zhuǎn)套筒以重合主倉(cāng)及套筒窗口暴露大鼠腹部,將固定裝置轉(zhuǎn)移至底板上。
圖1 固定裝置側(cè)視圖Fig.1 Side view of the fastening device
注:a.主倉(cāng) b.套筒 c.副倉(cāng) d.透明膠帶 e.底板 f.墊塊 g.底板圓窗 h.釘子。圖2 固定裝置俯視圖Note. a. Main cabin. b. Sleeve. c. Vice cabin. d. Stick band. e. Bottom board. f. Heel block. g. Hole of the board. h. Nail.Fig.2 Top view of the fastening device
1.4 實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)第1天,應(yīng)用固定裝置分別固定大鼠,從固定裝置轉(zhuǎn)移至底板上開(kāi)始計(jì)時(shí),若大鼠沿縱軸輕微轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)可旋轉(zhuǎn)套筒調(diào)整窗口所暴露位置,若大鼠于固定裝置內(nèi)掙扎則結(jié)束計(jì)時(shí),由此記錄大鼠保定時(shí)間,最大記錄終點(diǎn)定為60 min。第2天及第3天實(shí)驗(yàn)前先于操作臺(tái)(由兩張平板桌組成,中間留一寬約5 cm縫隙)下方放置特定電磁波TDP治療器,燈頭朝上以照射大鼠腹部,于底板圓窗處(圖2-g)放置溫度計(jì)以觀測(cè)溫度,調(diào)整燈頭高度使溫度分別穩(wěn)定于38~39℃及42~43℃,其余同第1 天操作。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
應(yīng)用SPSS 16.0軟件包分析,所得資料采用多個(gè)相關(guān)樣本比較的Friedman M檢驗(yàn),P< 0.05說(shuō)明差異有顯著性。
如表1所示,應(yīng)用大鼠固定裝置對(duì)大鼠進(jìn)行固定,83.3% (10/12)的大鼠在室溫(24~26℃)及38~39℃、42~43℃兩種局部溫度的紅外線照射下保定時(shí)間都能達(dá)到30 min以上,66.7% (8/12)的大鼠可達(dá)到60 min。
應(yīng)用Friedman M檢驗(yàn)得到χ2=1.733,P> 0.05,說(shuō)明不同局部溫度下大鼠保定時(shí)間差異無(wú)顯著性。
表1 不同局部溫度下大鼠的保定時(shí)間
對(duì)于大鼠較長(zhǎng)時(shí)間的保定常見(jiàn)方式有麻醉、器具固定等,但麻醉并不適用于需要反復(fù)多次固定的大鼠實(shí)驗(yàn),市面上現(xiàn)有的大鼠固定裝置多用于時(shí)間較短的注射及采血,而棉繩捆縛四肢法固定常需配合麻醉進(jìn)行,對(duì)于清醒的大鼠不易掌握棉繩的松緊度,太緊易致肢體末端缺血,太松達(dá)不到固定效果,且單人操作不便。許多研究者[2-6]根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行大鼠固定器制作,如袁林祥等[3]制作的固定裝置用于大鼠斷尾采血,但因選擇的材料拼合后與大鼠外形仍有較大差異,大鼠活動(dòng)度較大,不利于長(zhǎng)時(shí)間固定;郭潔汝等[4]通過(guò)海綿及塑料薄膜制作的固定裝置僅適用于腹腔及靜脈采血,同樣不利于長(zhǎng)時(shí)間固定;王路路等[5]設(shè)計(jì)的批量輻射固定裝置符合大鼠體型,固定效果較好,但僅可用于大鼠背部的照射,且制作較困難。筆者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇一定規(guī)格的塑料水瓶進(jìn)行裁剪拼接制成固定裝置,具有以下特點(diǎn):①類錐型主倉(cāng)及類半球形副倉(cāng)的組合較為符合大鼠外形,不易引起大鼠不適,可起到較好的保定效果,延長(zhǎng)保定時(shí)間;②主倉(cāng)及套筒的開(kāi)窗組合可以暴露實(shí)驗(yàn)所需部位,大鼠輕微的轉(zhuǎn)動(dòng)可通過(guò)旋轉(zhuǎn)套筒進(jìn)行調(diào)整;③此固定裝置可由一人獨(dú)立操作,并可通過(guò)此裝置進(jìn)行尾靜脈采血及注射,開(kāi)窗設(shè)計(jì)可進(jìn)行腹腔注射、特定部位手術(shù)切口拆線等操作。
在使用過(guò)程中的幾點(diǎn)體會(huì):①為了進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的固定,在鼠籠中取出大鼠前可輕拉大鼠尾巴,另一手輕拍背部末端,以刺激大鼠排尿排便,可減少固定過(guò)程中排泄的可能,避免其不適,以延長(zhǎng)保定時(shí)間,另外,越長(zhǎng)時(shí)間的固定大鼠排泄的可能越大,因此可在副倉(cāng)后下方放置吸水墊以減少污染;②有時(shí)大鼠多次輕微轉(zhuǎn)動(dòng)可能使窗口位置偏移,因此可根據(jù)需要制作窗口寬度較大的主倉(cāng),通過(guò)旋轉(zhuǎn)套筒調(diào)整大鼠暴露部位;③若實(shí)驗(yàn)動(dòng)物較多,可多制作幾套固定裝置,便于消毒交替使用;④因瓶子規(guī)格的限制,固定裝置僅適用于一定體積范圍的大鼠,由此,需根據(jù)實(shí)驗(yàn)所用大鼠體積來(lái)選擇瓶子;⑤小部分的大鼠無(wú)法耐受長(zhǎng)時(shí)間的固定,因此在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)需盡可能減少動(dòng)物的固定時(shí)間,或被迫剔除此觀察對(duì)象。
紅外線烤燈常用于臨床局部理療,其治療作用包括非熱效應(yīng)及熱效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)中所用特定電磁波TDP治療器屬于中短波紅外線,基于常用實(shí)驗(yàn)溫度選擇38~39℃[7, 8]及42~43℃[9]為測(cè)試溫度。在38~39℃、42~43 ℃兩種溫度的紅外線局部照射下,大鼠的保定時(shí)間與室溫(24~26℃)狀態(tài)下的保定時(shí)間并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,說(shuō)明在43℃以內(nèi)的局部紅外線照射下并不影響固定裝置的保定效果,本次實(shí)驗(yàn)也間接的反映大部分大鼠可耐受30 min以上43℃以內(nèi)的局部紅外線照射。
應(yīng)用文中所述自制簡(jiǎn)易固定裝置進(jìn)行大鼠固定,對(duì)于大部分大鼠可達(dá)到較長(zhǎng)時(shí)間的保定效果,在所需位置進(jìn)行固定器開(kāi)窗,可實(shí)現(xiàn)局部紅外線照射的目的,材料易得,價(jià)格低廉,制作簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便,是一種較為方便、可靠的保定裝置。
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A simple fastening device for local infrared irradiation in rats
ZHENG Pei-hong1, CHEN Wei-rong2*, LIN Guang-rong2
(1. Shantou University Medical College, Shantou 515000, China;2.The Second Affiliated Hospital of Shantou University Medical College, Shantou 515000)
Objective To construct a rat fixation device for local infra-red irradiation in rats, observe the binding effect of this fixation device, and assess its practical application. Methods Twelve SD rats were held by this home-made simple device. The holding time was recorded at room temperature (24℃ to 26℃), 38℃ to 39℃ and 42℃ to 43℃ by infrared irradiation, respectively, and the maximum observation point was 60 min. Results Most rats (10/12) were held for more than 30 minutes at room temperature, 38℃ to 39℃ and 42℃ to 43℃ infrared irradiation. While 8 rats reached 60 min. There was no statistically significant difference among the holding times at various temperatures (P> 0.05). Conclusion This self-made device is simple, easy to operate and can be used to hold rats for a long time, and is a convenient and reliable holding device in animal experiments.
Rats; Fastening device; Infrared irradiation
鄭培鴻(1990-),男,碩士研究生,專業(yè):普通外科。E-mail:phzheng90@163.com
陳維榮(1963-),男,主任醫(yī)師,醫(yī)學(xué)博士,研究方向:直腸癌微淋巴系統(tǒng)。E-mail:chen93662@163.com
R-33
A
1671-7856(2017) 03-0084-03
10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.03.016
2016-08-16