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    流速對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)行為和消化酶的影響

    2017-03-28 10:06趙璐琪宋波瀾
    河北漁業(yè) 2017年3期
    關(guān)鍵詞:消化酶流速

    趙璐琪 宋波瀾

    摘要:在不同流速條件下觀測(cè)了吉富羅非魚(yú)行為學(xué)和消化酶指標(biāo),結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著流速的增大,羅非魚(yú)的呼吸頻率和擺尾頻率顯著增加,隨著作用時(shí)間的延長(zhǎng),兩種指標(biāo)保持相對(duì)穩(wěn)定。同一時(shí)間內(nèi)不同流速下7 d和30 d取樣的羅非魚(yú)的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶隨著流速的增加而增加,1 d取樣的酶活力變化不大。同一流速下,隨著水流作用時(shí)間的延長(zhǎng),三種消化酶呈增加趨勢(shì)。說(shuō)明水流能增加魚(yú)體的運(yùn)動(dòng)能力,而長(zhǎng)時(shí)間的水流作用能增加魚(yú)類(lèi)三種消化酶的活力,促進(jìn)消化和吸收。

    關(guān)鍵詞:流速;行為指標(biāo);消化酶;吉富羅非魚(yú)

    羅非魚(yú)系熱帶魚(yú)類(lèi),具有繁殖力強(qiáng)、易養(yǎng)殖、群體產(chǎn)量高等一系列優(yōu)點(diǎn),適合在各種水體中生長(zhǎng)。吉富羅非魚(yú)是運(yùn)用遺傳學(xué)技術(shù)和DNA雜交技術(shù)培育出來(lái)的優(yōu)質(zhì)品種,具有抗寒能力強(qiáng)、生長(zhǎng)速度快、雄性比例高、抗病能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)[1]。

    魚(yú)類(lèi)消化酶研究是國(guó)內(nèi)外魚(yú)類(lèi)消化生理的研究重點(diǎn),同時(shí)也是研制配合飼料的理論依據(jù)。消化酶活性的提高,可以促進(jìn)魚(yú)類(lèi)對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用,促進(jìn)魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)發(fā)育,所以國(guó)內(nèi)外大量研究者都對(duì)其進(jìn)行了深入和全面的研究和報(bào)道[2-5]。消化酶活性受外界不同環(huán)境因子如:餌料、溫度、pH值、鹽度和重金屬離子影響很大。水流作為魚(yú)類(lèi)生活環(huán)境其中一個(gè)極為重要的生態(tài)因子,可以刺激其各種感覺(jué),產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)機(jī)制[6-10]。目前,吉富羅非魚(yú)的工廠化流水養(yǎng)殖的規(guī)模已經(jīng)很龐大,形成了一套完備可靠的養(yǎng)殖方法和流程。但是關(guān)于水流對(duì)魚(yú)類(lèi)消化酶的影響,國(guó)內(nèi)外研究不多。本研究在實(shí)驗(yàn)室條件下觀測(cè)流速對(duì)吉富羅非魚(yú)的行為指標(biāo)和消化能力的影響,旨在為魚(yú)類(lèi)飼料的研制和流水健康養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1實(shí)驗(yàn)材料

    實(shí)驗(yàn)于2016年3-9月在河北農(nóng)業(yè)大學(xué)渤海校區(qū)魚(yú)類(lèi)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)魚(yú)來(lái)自河北省滄州中捷羅非魚(yú)國(guó)家良種場(chǎng),數(shù)量600尾,平均體重95±4.3 g,平均體長(zhǎng) 15.1±0.21 cm,健康、無(wú)明顯損傷。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之前在室內(nèi)暫養(yǎng)7 d以上。投試前24 h不再投喂飼料,實(shí)驗(yàn)期間通過(guò)充氣泵保持足夠的DO(≥6.5 mg/L),pH穩(wěn)定(7.11~7.32),相對(duì)恒定的水溫(21.0±1.0 ℃ )。馴化期間每天于早晨8:00和晚上18:00飽足投喂兩次羅非魚(yú)膨化配合飼料(唐山三福飼料有限公司,蛋白質(zhì)≥33,纖維≤8,脂≥5,水分≤13,鈣0.5~1.5,總磷≥1,賴氨酸≥1.6,灰分比≤14),暫養(yǎng)水溫為24士0.5 ℃,溶解氧大于6 mg/L,光照為室內(nèi)自然光。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    采用自行設(shè)計(jì)的環(huán)形水槽(9個(gè),內(nèi)徑110 cm、外徑150 cm),每水槽內(nèi)對(duì)稱(chēng)裝上兩個(gè)可調(diào)速的潛水泵,各連接一個(gè)噴水頭于環(huán)形通道左右兩側(cè),噴水方向相反而在環(huán)形水槽中形成一個(gè)環(huán)流通道,實(shí)驗(yàn)魚(yú)放在其中。設(shè)定兩種流速組(0.15 m/s,0.30m/s)換算成體長(zhǎng)/秒(1 BL/S,2 BL/S)和靜水對(duì)照組。流速測(cè)定采用澳大利亞Unidata M6526c型流速水位計(jì)。每個(gè)流速條件設(shè)3個(gè)平行組,每組放置9尾魚(yú)。水源為曝氣后的自來(lái)水,每天換水1/3。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每日早晨8:00和晚上18:00投喂相同飼料至實(shí)驗(yàn)羅非魚(yú)飽食,1 h后撈出剩餌,于投喂時(shí)間前后各停止水泵0.5 h。實(shí)驗(yàn)周期設(shè)為30 d,分別于流速處理開(kāi)始當(dāng)天水流作用1 h后取樣(1 d),實(shí)驗(yàn)后7 d和實(shí)驗(yàn)結(jié)束(30 d)上午投喂之前取樣,每平行組隨機(jī)取2尾。實(shí)驗(yàn)其他條件如暫養(yǎng)階段。

    1.3測(cè)定指標(biāo)及方法

    1.3.1行為生理指標(biāo)用攝像機(jī)在取樣前定點(diǎn)定時(shí)記錄 10 min內(nèi)羅非魚(yú)的鰓張合次數(shù)和擺尾次數(shù),即可計(jì)算呼吸率RF和擺尾率TBF。計(jì)算公式如下:

    RF(Hz)=RRT/t

    TBF(Hz)=TBT/t

    RRT是羅非幼魚(yú)在實(shí)驗(yàn)期間的鰓張合次數(shù),t為觀察時(shí)間(min)。

    TBT是羅非幼魚(yú)在實(shí)驗(yàn)期間的擺尾次數(shù),t為觀察時(shí)間(min)。

    1.3.2消化酶指標(biāo)的測(cè)定所選吉富羅非魚(yú)消化器官的消化酶指標(biāo)為腸蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶三種。取樣解剖取出魚(yú)腸道組織,-20 ℃保存。稱(chēng)取0.5 g組織,放入20 ml的研磨器中,加4 ℃蒸餾水5 ml研磨,制成10%的勻漿。然后3 000 r/min離心10~15 min,取上清液于測(cè)定管。消化酶活力選用南京建成生物工程公司的三種消化酶試劑盒測(cè)定。蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法。

    1.4數(shù)據(jù)處理

    本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)先采用EXCEL進(jìn)行常規(guī)分析與計(jì)算,后用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)的方式來(lái)表示,各實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)之間的不同區(qū)別采用單因素方差分析(ONE-WAY ANOVA )。

    2結(jié)果與分析

    2.1流速對(duì)羅非魚(yú)行為指標(biāo)的影響

    不同時(shí)間不同流速下羅非魚(yú)行為指標(biāo)的變化見(jiàn)表1。同一時(shí)間內(nèi),1 d、7 d和30 d,呼吸頻率和擺尾頻率隨著水流的加快而升高,差異性顯著(P<005)。同一流速下,羅非魚(yú)擺尾頻率和呼吸頻率隨著時(shí)間的增加而增加,差異性不顯著(P>0.05)。

    2.2流速對(duì)羅非魚(yú)消化酶活性的影響

    不同時(shí)間不同流速下羅非魚(yú)蛋白酶活性的變化見(jiàn)表2。同一時(shí)間內(nèi),1 d差異性不顯著(P>005),7 d和30 d均差異性顯著(P<0.05),都是隨著流速的增加而升高。2 BL/S 組達(dá)到最大值235.6和288.2 U/mgpro。同一流速下,靜水組隨著時(shí)間的增加變化不大,其他兩組對(duì)照組均隨著時(shí)間的增加而升高,差異性顯著(P<0.05),并且30 d取樣組最高。同一時(shí)間內(nèi),1 d的淀粉酶活性變化不大,7 d取樣,1 BL/S和2 BL/S組差異不顯著,但均顯著高于靜水組。30 d的淀粉酶活性均隨著流速的增加而增多,差異性顯著(P>0.05),2 BL/S 組達(dá)到最大值4.61 U/mgpro。同一流速下,靜水組和兩組對(duì)照組隨著時(shí)間的推移而升高,差異性顯著(P<0.05),且30 d取樣組最大。同一時(shí)間內(nèi),1 d的脂肪酶隨著流速的增加先上升后下降,但差異性不顯著(P>0.05),7 d、30 d的脂肪酶均隨著流速的增加而增多,差異性顯著(P<0.05)。同一流速下,靜水組各時(shí)間段差異不顯著(P>0.05),兩組對(duì)照組隨著時(shí)間的推移而升高,差異性顯著(P<0.05)。最大值7.5 U/mgpro同樣出現(xiàn)在30 d 2 BL/S 組。

    3討論

    3.1流速對(duì)羅非魚(yú)行為指標(biāo)的影響

    在傳統(tǒng)生態(tài)學(xué)教科書(shū)中,一般認(rèn)為水流是阻礙因子,阻礙了魚(yú)類(lèi)代謝系統(tǒng)對(duì)溫度、攝食等其他環(huán)境因子變化的充分反應(yīng)[7]。但也有研究者有不同意見(jiàn)[8-9]。羅非魚(yú)終生生活在水里,用鰓呼吸用鰭游泳,因此,用呼吸頻率和擺尾頻率最能直接反映出魚(yú)類(lèi)等水生動(dòng)物的行為能力[6,10]。本研究發(fā)現(xiàn)隨著流速的增大,羅非魚(yú)應(yīng)激反應(yīng)比較活躍,其呼吸頻率和擺尾頻率隨之增大,這是魚(yú)類(lèi)行為的應(yīng)激反應(yīng);羅非魚(yú)的呼吸頻率和擺尾頻率隨著流速的增加而增加,流速與羅非魚(yú)的呼吸頻率和擺尾頻率呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系。這和李丹等人對(duì)雜交鱘的實(shí)驗(yàn)結(jié)果類(lèi)似[6]。隨著時(shí)間的延長(zhǎng),羅非魚(yú)活力變化不大,呼吸頻率和擺尾率沒(méi)有明顯變化。這可能是由于長(zhǎng)時(shí)間的馴化,魚(yú)體適應(yīng)了該流速的生活,維持了正常的生理生態(tài)過(guò)程。

    3.2流速對(duì)羅非魚(yú)消化酶活性的影響

    了解消化酶特性的生物學(xué)規(guī)律對(duì)于養(yǎng)殖飼料研制具有重要的意義[11],并且對(duì)不同水流下的投喂也有一定的研究?jī)r(jià)值。消化酶活性的高低,直接影響魚(yú)類(lèi)對(duì)餌料的消化吸收,最終影響其生長(zhǎng)發(fā)育。本研究發(fā)現(xiàn)在第1 d隨著流速的增大,蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力變化不明顯,但是從7 d開(kāi)始到30 d,隨水流作用時(shí)間的延長(zhǎng),蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力有了顯著提高,均在30 d,2倍體長(zhǎng)每秒條件下達(dá)到最高值,說(shuō)明在長(zhǎng)時(shí)間的水流作用下,魚(yú)類(lèi)行為學(xué)指標(biāo)極大提高,運(yùn)動(dòng)能力加強(qiáng),長(zhǎng)時(shí)間維持一個(gè)高水平的運(yùn)動(dòng)必將消耗極多的能量[12],需要大量消化食物來(lái)補(bǔ)充,因此蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力迅速升高。German發(fā)現(xiàn)在0.5、1、1.5 BL/s三種流速下加州大比目魚(yú)10周養(yǎng)殖后特定生長(zhǎng)率在低流速下顯著高于高流速和靜水組[8]。說(shuō)明中等流速是最適生長(zhǎng)的流速。黃寧宇等通過(guò)對(duì)水流鍛煉西伯利亞鱘魚(yú)3個(gè)月實(shí)驗(yàn)后則發(fā)現(xiàn)流速和鱘魚(yú)生長(zhǎng)效率之間存在顯著正相關(guān)[9]。綜合分析以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)我們可以得出以下結(jié)論,水流對(duì)魚(yú)類(lèi)是一種刺激活動(dòng),增加魚(yú)體的運(yùn)動(dòng)能力,從而改變了魚(yú)類(lèi)生理活動(dòng),但是這種影響是相對(duì)滯后的,開(kāi)始時(shí)酶活力變化不大;隨著時(shí)間的延長(zhǎng)魚(yú)體對(duì)水流達(dá)到一種新的適應(yīng),為了維持高水平運(yùn)動(dòng)能量供應(yīng),消化能力顯著增加,因此消化酶活力進(jìn)一步提高,并維持一個(gè)相當(dāng)高的水平。

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