氣相色譜法測(cè)定寬葉纈草揮發(fā)油中乙酸龍腦酯含量

胡麗霞++王曉仙++趙明

【摘要】目的：建立寬葉纈草揮發(fā)油中有效成分乙酸龍腦酯的氣相色譜測(cè)定法。方法：色譜條件為DB-WAX毛細(xì)管色譜柱（0.32mm×25m），程序升溫60℃10℃/min120℃6℃/min140℃10℃/min230℃（5min），分流比為30∶1，F(xiàn)ID檢測(cè)器，內(nèi)標(biāo)為萘。結(jié)果：乙酸龍腦酯在0.016～0.250mg范圍內(nèi)呈線性關(guān)系（r=0.99999），加樣平均回收率為104.85%。結(jié)論：建立的方法簡(jiǎn)便、靈敏、易操作，為寬葉纈草植物資源的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】寬葉纈草；乙酸龍腦酯；氣相色譜法

【中圖分類號(hào)】R927.11【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2016）21-0023-03

Determination of Bornyl Acetate in Volatile oil of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq by GC

HU LixiaWANG XiaoxianZHAO Ming*

Wuhan Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine， Wuhan 430022，China

Abstract：Objecive To develop a reliable method for determination of bornyl acetate in volatile oil of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq by gas chromatography. Methods A DB-WAX quartz capillary column was used and the temperature of column （0.32mm×25m） was programmed：程序升溫60℃10℃/min120℃6℃/min140℃10℃/min230℃（5min），The splitting ratio was 1∶[KG-*3/5]30. The FID was used as detector，and the naphthalene as internal standard. Results The standard curve was linear in the concentration range of 0.016～0.250mg/mL.The average recovery was 104.85%. Conclusion The new method can be used for quality assessment of leaves of Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq. It was rapid，sensitive， precise with good reproducibility.

Keywords：Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq.；Bornyl Acetate；GC

敗醬科纈草屬植物寬葉纈草（Valeriana officinalis L.var.latifolia Miq.），在我國(guó)南部各省區(qū)廣為分布，根及根莖入藥，具有解表散寒，活血調(diào)經(jīng)，祛風(fēng)除濕，鎮(zhèn)痛解痙的作用[1]。以寬葉纈草根為原料經(jīng)水蒸氣蒸餾所得精油，為很好的香料和調(diào)香劑，在食品飲料、化妝品工業(yè)中有廣泛用途[2]。采用GC-MS測(cè)定其成分主要為乙酸龍腦酯（bornyl acetate）[3]，具有止瀉、鎮(zhèn)痛、抗炎及解痙的作用[4]。本文建立了以萘為內(nèi)標(biāo)，氣相色譜法測(cè)定寬葉纈草精油中乙酸龍腦酯的含量，為寬葉纈草生藥質(zhì)量評(píng)價(jià)提供依據(jù)，并對(duì)采集于湖北不同地區(qū)的樣品進(jìn)行了測(cè)定。

1儀器與材料

1.1儀器美國(guó)安捷倫6890N氣相色譜儀；DB-WAX毛細(xì)管柱。

1.2材料藥材分別采集于湖北西部恩施、宣恩、利川、巴東地區(qū)，經(jīng)武漢大學(xué)藥學(xué)院王有為教授鑒定為敗醬科纈草屬寬葉纈草。乙酸龍腦酯對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；內(nèi)標(biāo)萘（色譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；無(wú)水乙醇（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

2方法

2.1色譜條件色譜柱DB-WAX毛細(xì)管柱（0.32mm×25m），程序升溫60℃10℃/min120℃6℃/min140 ℃10℃/min230℃（5min），分流比為30∶1，氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度為250℃，流速為1mL/min，進(jìn)樣量1uL。色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱取乙酸龍腦酯適量，加無(wú)水乙醇制成4.16mg/mL的溶液。

2.3內(nèi)標(biāo)溶液精密稱取萘適量，加無(wú)水乙醇制成1.01mg/mL的溶液。

2.4供試品溶液的制備精密稱取揮發(fā)油50mg置10mL量瓶中，加無(wú)水乙醇至刻度，搖勻，精密量取該溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，搖勻，即得。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.038、0.075、0.15、0.3、0.6mL，分別置于10mL量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻即得濃度為0.016、0.031、0.062、0.125、0.250mg/mL的乙酸龍腦酯溶液；分別精密量取不同濃度溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，搖勻。分別進(jìn)樣測(cè)定，每次1uL。以乙酸龍腦酯濃度對(duì)乙酸龍腦酯與內(nèi)標(biāo)峰面積之比進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明乙酸龍腦酯濃度在0.016～0.250mg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為Y=1.40847X-0.001131 （r=0.99999）。

2.6精密度和重復(fù)性試驗(yàn)對(duì)同一供試品溶液連續(xù)測(cè)定6次，結(jié)果乙酸龍腦酯峰面積RSD=0.47%。對(duì)同一樣品從取樣開始重復(fù)測(cè)定6次，結(jié)果乙酸龍腦酯峰面積RSD=1.69%。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液，分別在放置0、2、4、8、12、14h后，依法測(cè)定乙酸龍腦酯的峰面積，結(jié)果表明同一供試品溶液中被測(cè)成分在14h內(nèi)基本穩(wěn)定，RSD值為1.82%。

2.8加樣回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的樣品約50mg，置10mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取1mL 5份，精密加入對(duì)照品溶液1mL，搖勻。依法測(cè)定，測(cè)得平均加樣回收率為104.85%。

2.9樣品的測(cè)定精密稱取寬葉纈草藥材40g，置揮發(fā)油提取器中，加水500mL，提取4h。精密稱取精油50mg，置10mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液和內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，搖勻，量取1uL進(jìn)樣。依法測(cè)定不同采挖時(shí)間不同地區(qū)的湖北寬葉纈草樣品。結(jié)果見(jiàn)表1。

3討論

采用GC法對(duì)寬葉纈草揮發(fā)油中乙酸龍腦酯進(jìn)行含量測(cè)定，為其質(zhì)量控制提供了依據(jù)，也為寬葉纈草藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立奠定了基礎(chǔ)。

供試品的制備考察了樣品與內(nèi)標(biāo)溶液濃度，確定5uL/mL的樣品溶液與1mg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液等體積混合成供試品溶液。色譜條件考察了不同分流比、載氣流速與升溫程序，分別確定30∶1的分流比，1mL/min的載氣流速，及60℃、120℃、140 ℃、230℃（5min）的升溫程序進(jìn)行測(cè)定。在此條件下分離效果好，乙酸龍腦酯峰及內(nèi)標(biāo)峰與相鄰峰完全分離。

測(cè)定結(jié)果表明產(chǎn)于湖北不同地區(qū)、不同采挖年限的寬葉纈草樣品中乙酸龍腦酯含量存在著差異，而是否與植被分布的生態(tài)環(huán)境、海拔高度、采挖年限因素有關(guān)，有待探討。

參考文獻(xiàn)

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[2] 陳建華，申會(huì)建，聶長(zhǎng)明. 湖南山區(qū)寬葉纈草的利用價(jià)值[J]. 湖南林業(yè)科技，1993，20（1）：36-37.

[3] 王立群，熊義濤，陶福華，等. 寬葉纈草揮發(fā)油成分分析[J]. 中藥材，1996，22（6）：289-299.

[4] 李曉光，葉富強(qiáng)，徐鴻華. 砂仁揮發(fā)油中乙酸龍腦酯的藥理作用研究[J]. 華西藥學(xué)雜志，2001，16（5）：78-79.

（編輯：陶希睿）