基于“腎主生殖”理論探討卵巢顆粒細(xì)胞增殖機(jī)理研究

蔚建斌　連　方

1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東　濟(jì)南　250000 ；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，山東　濟(jì)南　250000

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基于“腎主生殖”理論探討卵巢顆粒細(xì)胞增殖機(jī)理研究

蔚建斌1連方2

1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250000 ；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，山東濟(jì)南250000

【摘要】卵巢顆粒細(xì)胞的增殖是體現(xiàn)人類生殖能力的重要環(huán)節(jié)。筆者通過概述GPER/EGFR/MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中相關(guān)蛋白促進(jìn)顆粒細(xì)胞增殖的機(jī)制及其中西醫(yī)研究進(jìn)展，初步探討此通路與人類生殖的關(guān)系并豐富“腎主生殖”理論，以期能夠從微觀化的角度為卵巢顆粒細(xì)胞增殖在中西醫(yī)生殖領(lǐng)域的治療提供新的研究思路與方法。

【關(guān)鍵詞】信號(hào)通路；細(xì)胞增殖；中西醫(yī)；腎主生殖

腎藏精，主生殖。精子、卵細(xì)胞及受精卵都應(yīng)當(dāng)列入生殖之精的范圍,相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥在卵巢顆粒細(xì)胞的增殖中發(fā)揮重要作用，可能通過GPER/EGFR/MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮作用。

1腎藏精，主生殖

生殖之精是腎精的重要組成部分，是形成子代胚胎的原始物質(zhì)?！鹅`樞·經(jīng)脈》曰“人始生，先成精，精成而腦髓生”，精子、卵細(xì)胞及受精卵都應(yīng)當(dāng)列入生殖之精的范圍[1]。《女科正宗·廣嗣總論》指出“男精壯女經(jīng)調(diào)，有子之道也”，揭示受孕的機(jī)理在于男女腎氣充盛，天癸成熟，精壯經(jīng)調(diào)，適時(shí)和合，而成胎孕。

2卵巢為奇恒之臟，卵巢藏瀉體現(xiàn)“腎主生殖”

現(xiàn)代輔助生殖技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用，使得“腎主生殖”理論的研究深入到了分子水平，為“腎主生殖”內(nèi)涵的不斷拓展提供了科學(xué)依據(jù)。卵巢屬于胞脈范疇，形態(tài)實(shí)質(zhì)與五臟相似，功能上能生成和排出卵子與六腑類同，可稱為奇恒之臟[2]。解剖上通過卵巢固有韌帶與子宮相連，藏瀉有時(shí)，于卵泡期積腎之陰陽(yáng)，以陰長(zhǎng)為主促進(jìn)卵泡的發(fā)育成熟，陰長(zhǎng)之極，重陰轉(zhuǎn)陽(yáng)，于氤氳之時(shí)瀉出元精，之后，重陰轉(zhuǎn)陽(yáng)，陰重陽(yáng)旺，陰陽(yáng)俱可，為孕育胞胎提供條件。卵巢顆粒細(xì)胞為卵泡發(fā)育成熟后隨之泄出的人之元精，在一定程度上可以反映機(jī)體腎陽(yáng)之盛衰。腎氣虛，則沖任虛衰不能攝精成孕；腎陽(yáng)虛，命門火衰，則生化失期，有礙子宮發(fā)育或不能觸發(fā)氤氳樂育之氣以致不能攝精成孕；腎陰虛而致熱擾沖任血海，均不能攝精成孕，以致女性生殖功能下降。有研究已經(jīng)證實(shí)補(bǔ)腎中藥能夠從基因、分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)等多個(gè)層次影響卵細(xì)胞質(zhì)量，改善人類生殖能力。

3“生殖之精”之卵巢顆粒細(xì)胞增殖機(jī)理探討

基于GPER/EGFR/MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)到通路探討“生殖之精”之卵巢顆粒細(xì)胞增殖機(jī)理。G蛋白偶聯(lián)雌激素受體(GPER)是上世紀(jì)90年代從不同的細(xì)胞株中克隆獲得的一種蛋白偶聯(lián)受體家族中的新型雌激素受體[3]，廣泛分布于多個(gè)系統(tǒng)的組織細(xì)胞中，包括神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及循環(huán)系統(tǒng)等，卵巢、子宮、胎盤、前列腺、腦、心臟、肝臟、淋巴、乳腺等組織均發(fā)現(xiàn)了該受體的分布[4-6]，且發(fā)現(xiàn)其在多種癌細(xì)胞包括乳腺癌[3]、卵巢癌[7]、子宮內(nèi)膜癌[8]、甲狀腺癌[9]、睪丸生殖細(xì)胞癌[10]以及前列腺癌[11]中均有表達(dá)。其作用方式主要是通過與雌激素受體結(jié)合后活化并釋放肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子激活EGFR，進(jìn)而產(chǎn)生增殖效應(yīng)以調(diào)控細(xì)胞增殖。表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)是受體酪氨酸蛋白激酶(RPTK)受體家族中的一員，為單次跨膜受體，其配體表皮生長(zhǎng)因子(EGF)與生長(zhǎng)、分化、免疫、腫瘤等有密切的關(guān)系。近年來(lái)有研究發(fā)現(xiàn)EGF能夠調(diào)節(jié)卵巢顆粒細(xì)胞的增殖與分化。如文獻(xiàn)報(bào)道[12]，EGF能夠通過旁分泌的方式與其受體結(jié)合，從而調(diào)節(jié)卵巢顆粒細(xì)胞的增殖和性激素的分泌，從而影響卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育與生殖功能的調(diào)節(jié)。馬會(huì)明等[13]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明一定劑量的EGF 對(duì)小鼠顆粒細(xì)胞增殖效應(yīng)明顯，EGF能夠通過活化小鼠卵巢顆粒細(xì)胞的PI3K/AKT信號(hào)通路，促進(jìn)顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖。絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)是哺乳動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的一種激酶，主要參與調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化與凋亡。其作用途徑主要有三條：第一，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellularsignal regulated kinase，ERK)途徑；第二，JNK途徑；第三，p38MAPK途徑。其中ERK途徑是細(xì)胞增殖分化的重要途徑。有報(bào)道指出，ERKl/2通路參與了FSH 對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞甾類激素生成的調(diào)控過程[14]，是卵巢顆粒細(xì)胞增殖的重要信號(hào)通路，并主要通過細(xì)胞周期蛋白而發(fā)揮作用。

細(xì)胞周期是細(xì)胞生命活動(dòng)的基本過程,細(xì)胞在周期時(shí)相的變遷中進(jìn)入增殖、分化、衰老和死亡等生理狀態(tài)。隨著近年來(lái)研究的進(jìn)展,細(xì)胞周期蛋白的種類越來(lái)越多，CyclinD是1991年由Motokura等[15]在研究甲狀旁腺癌時(shí)首先分離,它的主要功能是調(diào)節(jié)細(xì)胞周期中G1/S期的過渡,其合成是在G1早期,并到G1后期達(dá)高峰,進(jìn)入S期前降解,隨后合成的是cycnilE。CyclinE是哺乳動(dòng)物的另一種G1 期細(xì)胞周期蛋白,與相應(yīng)的細(xì)胞周期蛋白依賴激酶結(jié)合，參與細(xì)胞進(jìn)入S期。在卵巢顆粒細(xì)胞中，F(xiàn)SH通過cAMP-PKA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)，促進(jìn)細(xì)胞周期蛋白cyclinD2 表達(dá)，進(jìn)而推動(dòng)顆粒細(xì)胞增殖[16-17]。

4GPER/EGFR/MAPK信號(hào)通路促進(jìn)人類生殖能力的研究

張明敏等[18]通過研究補(bǔ)腎安胎方(菟絲子、桑寄生、川斷、丹參、黃芪、當(dāng)歸)對(duì)胚胎著床障礙小鼠子宮內(nèi)膜EGFR表達(dá)的影響，證實(shí)補(bǔ)腎中藥能夠提高EGFR的表達(dá)。許靜云等[19]通過研究補(bǔ)腎中藥對(duì)EGF表達(dá)的影響，證實(shí)菟絲子提取物可以促進(jìn)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞EGF的表達(dá)，六味地黃丸、菟絲子黃酮可以促進(jìn)雷公藤多苷對(duì)生殖損傷的恢復(fù)。李嵐等[20]通過研究補(bǔ)腎化瘀方對(duì)PCO大鼠卵巢顆粒細(xì)胞表皮生長(zhǎng)因子受體表達(dá)的影響，證實(shí)補(bǔ)腎化瘀中藥能夠改善PCO大鼠卵巢顆粒細(xì)胞EGFR的表達(dá)。

5展望

近年來(lái)，由于生活方式的變化、妊娠年齡的推后以及一大批高齡失獨(dú)家庭的出現(xiàn)，不孕不育患者人數(shù)逐年增加，如何改善人類生殖能力，提高人類生育水平成為輔助生殖領(lǐng)域亟待解決的問題。GPER/EGFR/MAPK信號(hào)通路可能參與促進(jìn)顆粒細(xì)胞增殖并為“腎主生殖”理論的提供微觀化解釋。關(guān)于此信號(hào)轉(zhuǎn)到通路介導(dǎo)細(xì)胞增殖的研究目前了解尚少，尚有待于臨床與科研的進(jìn)一步研究和考證。

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Discuss the proliferation mechanism of ovarian granulosa cell Based on the theory of “kidney main reproductive”

YU Jianbin1LIAN Fang2

1.Shandong Traditional Chinese Medicine university,Jinan 250011,China;2.Reproductive and Genetic Center of Integrated Traditional and Western Medicine Affiliated Hosptal Shandong T.C.M University,Jinan 250011,China

Abstract:The ovarian granulosa cell proliferation is an important part of the human reproductive capacity. Based on the overview of GPER/EGFR/MAPK can promote protein involved in signaling pathways in granulosa cell proliferation ,we guess preliminarily it play a role its relationship with human reproduction and enrich the theory of "kidney main reproductive", hoping to provide new research ideas and methods for the ovarian granulosa cell proliferation in the field of Chinese and western medicine treatment .

Key words:signaling pathways； cell proliferation；traditional Chinese and western medicine ；kidney main reproductive

(收稿日期：2015.11.26)

【中圖分類號(hào)】R339.2+1

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1007-8517(2016)04-0073-02

作者簡(jiǎn)介：蔚建斌,山東中醫(yī)藥大學(xué)2013年在讀碩士。通信作者：連方(1955-)，女，主任醫(yī)師。研究方向：中醫(yī)婦科。E-mail：yuyi1o@126.com

基金項(xiàng)目：基于關(guān)鍵基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的腎主生殖理論基金(81473120)(國(guó)家自然科學(xué)基金)。