小柴胡軟膠囊制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

鐘彩金　劉俊紅　邱建波　張秀娟　邱燕祥

摘 要：本文對(duì)小柴胡軟膠囊制備工藝進(jìn)行了研究，提出了降低生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率的方法，為患者提供多一種劑型選擇；通過建立和完善小柴胡軟膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，能有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：小柴胡軟膠囊；制備工藝；質(zhì)量控制方法

中圖分類號(hào)：G917 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-1422（2015）05-0105-03

《中國藥典》2010年版原小柴胡片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)【1】增加了君藥柴胡、臣藥姜半夏和佐藥黨參的鑒別項(xiàng)，使質(zhì)量更可控和合理；因原工藝提取物料有一定的揮發(fā)性和熱不穩(wěn)定性成分入藥，在實(shí)踐過程中發(fā)現(xiàn)所得干浸膏由于含有較多的糖類等物質(zhì)，易吸濕，受熱易軟化，而且片劑制備工藝復(fù)雜，改成軟膠囊后，較原劑型更能與其工藝相適應(yīng)，生產(chǎn)成本降低，生產(chǎn)效率提高；軟膠囊劑較片劑的外觀美觀，質(zhì)量穩(wěn)定，易于服用，崩解、釋放迅速，生物利用度高，患者更易接受。適合工業(yè)化大生產(chǎn)的新劑型小柴胡軟膠囊劑，為患者提供了更多的劑型選擇。

一、制備工藝的研究

1.工藝內(nèi)容物處方

處方：柴胡 355.7g 姜半夏 177.5g 黃芩 133.5g 黨參 133.5g 甘草 133.5g 生姜 133.5g 大棗

處方來源是根據(jù)《中國藥典》2010年版原小柴胡片的處方進(jìn)行調(diào)整而得，根據(jù)目前軟膠囊劑的生產(chǎn)技術(shù)水平，軟膠囊劑的內(nèi)容物含固體量一般不宜超過50%，而在45%左右在大生產(chǎn)上較易于控制，每粒裝量一般在0.65g以下，經(jīng)研究擬將相當(dāng)于4片片劑的藥材量制成5粒軟膠囊，每粒含藥材量為1.2g，規(guī)格為每粒裝0.62g，每次服用量為5～7粒，原片劑處方藥材總量為1502g，可制成1251粒軟膠囊（1502/1.2=1251），則制成1000粒軟膠囊的處方中各藥應(yīng)為原片劑處方的1000/1251倍，即為上述小柴胡軟膠囊的處方。

2.制法

以上七味，黨參66.7g及甘草粉碎成細(xì)粉，取142.2g采用濕熱滅菌法滅菌，備用，其余細(xì)粉與剩余黨參及柴胡、黃芩、大棗加水煎煮二次，第一次加7倍水，第二次加6倍水，每次煎煮1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至適量；姜半夏、生姜照流浸膏與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法（附錄 I O），用70%的乙醇作溶劑，浸漬24小時(shí)后，以每分鐘1～3ml的速度緩緩滲漉，收集漉液1333.3ml，回收乙醇，與濃縮液合并，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30～1.40（60℃）的稠膏，加入上述細(xì)粉，混勻，干燥，研細(xì)，加輔料適量，混勻，壓制成1000粒膠丸，即得。

3.丸芯配制工藝考查

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)小柴胡軟膠囊藥粉為45.0g，助懸劑蜂蠟的用量為4.5g （即4.5%），乳化劑大豆卵磷脂的用量為3.0g（即3.0%），加色拉油至100g時(shí)，可滿足本產(chǎn)品的工藝及膠丸內(nèi)容物物理穩(wěn)定性方面的要求。

4.制丸工藝

（1）配制膠液。

【處方】明 膠 100g 甘 油 50g 尼泊金乙酯 0.5g 三氧化二鐵 1.25g 純化水 100g

【制法】先將尼泊金乙酯溶于二倍量的乙醇中；三氧化二鐵加6倍量純化水，研磨均勻，備用。取明膠、甘油及剩余水置不銹鋼夾層鍋內(nèi)密封，在真空下攪拌，等混勻后，加熱至75℃使鍋內(nèi)明膠熔化。緩緩放去鍋內(nèi)真空，在連續(xù)攪拌下加入三氧化二鐵漿液、尼泊金乙酯醇液，待攪拌均勻后減壓濃縮至水分約30%，取出，濾過，保溫備用。

（2）壓丸，采用旋轉(zhuǎn)模壓法進(jìn)行壓丸。

（3）定型干燥、洗丸、揀丸、包裝。新制的軟膠囊在溫度20～24℃，相對(duì)濕度30%以下的條件下在定型轉(zhuǎn)籠中定型干燥4小時(shí)以上， 用乙醇洗去膠丸外層蠟質(zhì)，揮去乙醇，再送入干燥房?jī)?nèi)，同條件下干燥約16小時(shí)，直至膠丸干爽，硬度適中，取出，挑去不合格丸，用鋁塑泡罩包裝，外加鋁袋包裝，即得。

按以上工藝進(jìn)行三批試生產(chǎn)研究，結(jié)果所得產(chǎn)品的各檢查項(xiàng)目均符合要求。

5.小結(jié)

綜上所述，小柴胡軟膠囊生產(chǎn)工藝確定為：以上七味，黨參66.7g及甘草粉碎成細(xì)粉，取142.2g，用熱壓法滅菌，備用，其余細(xì)粉與剩余黨參及柴胡、黃芩、大棗加水煎煮二次，第一次加7倍水，第二次加6倍水，每次煎煮1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至適量；姜半夏、生姜照流浸膏與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，用70%的乙醇作溶劑，浸漬24小時(shí)后，以每分鐘1～3ml的速度緩緩滲漉，收集漉液1333.3ml，回收乙醇，與濃縮液合并，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.30～1.40（60℃）的稠膏，加入上述細(xì)粉，混勻，70℃下干燥，粉碎過100目篩，所得細(xì)粉加處方量4.5%的蜂蠟和3.0%的大豆卵磷脂，并加適量色拉油調(diào)整每粒重量為0.62g，研磨配制成具有適宜流動(dòng)性、勻質(zhì)的囊芯液，壓丸，每丸裝0.62g，干燥，包裝，即得。

二、三批樣品中試工藝研究

為進(jìn)一步驗(yàn)證該產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，投料進(jìn)行三批次中試生產(chǎn)研究，每批按10倍處方量進(jìn)行投料。

小柴胡軟膠囊制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

1.設(shè)備與藥品

設(shè)備：TQ-6直筒式提取罐，DJE-2000三效濃縮蒸發(fā)器，CT-C-II熱風(fēng)循環(huán)烘箱，30 B萬能高效粉碎機(jī)組，F(xiàn)S0.6×1.5方形振蕩篩、RJNJ-2水浴式化膠罐，RJWJ-II軟膠囊機(jī)，RJWG軟膠囊轉(zhuǎn)籠干燥機(jī)，DPP-250II自動(dòng)泡罩包裝機(jī)等。

藥品：柴胡、姜半夏、黃芩、黨參、甘草、生姜、大棗，蜂蠟、大豆卵磷脂、色拉油、明膠、甘油、三氧化二鐵、尼泊金乙酯，乙醇等。

2.方法與結(jié)果

（1）中試方法。處方中各藥按10倍處方量配齊，按上述擬定的制備方法制得膠丸。

（2）中試結(jié)果。按上述擬定的制備工藝條件，生產(chǎn)三批中試樣品，測(cè)定各工藝過程中收率，結(jié)果如表1。

3.結(jié)果分析

由以上三批樣品中試結(jié)果可知，小柴胡軟膠囊生產(chǎn)各工藝過程：提取粉碎、囊芯液配制、制丸等收率數(shù)據(jù)較為穩(wěn)定、物料平衡，表明該工藝是符合生產(chǎn)要求的。

三、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1. 方法與結(jié)果

（1）黃芩、甘草的薄層鑒別：因工藝無質(zhì)的變化，故參照2010版《中國藥典》中原小柴胡片項(xiàng)下黃芩、甘草的薄層鑒別方法[1]。

（2）如法進(jìn)行試驗(yàn)，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的斑點(diǎn)。取缺黃芩或甘草的陰性樣品進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)果陰性對(duì)照在與黃芩或甘草對(duì)照藥材色譜的相應(yīng)的位置上無干擾。

（3）柴胡的薄層鑒別。取本品內(nèi)容物2g加甲醇40ml，超聲20分鐘（59kHz，45W），濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。取缺柴胡的陰性樣品，同法制得陰性對(duì)照溶液。另取柴胡對(duì)照藥材1g，同法制得對(duì)照藥材溶液。分別吸取上述三種試液5μl，點(diǎn)于同一硅膠G板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8∶2∶1）展開，取出，晾干，噴以2%對(duì)二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，60℃加熱至斑點(diǎn)清晰，日光及紫外燈（365nm）檢視，可見供試品溶液在與對(duì)照藥材溶液斑點(diǎn)相同位置呈相同顏色斑點(diǎn)，而缺柴胡的陰性樣品色譜在相應(yīng)位置上無干擾。

（4）黨參的薄層鑒別（新增）[2]：取本品內(nèi)容物5g，加正丁醇20mL，超聲處理20min（59kHz，45W），濾過，濾液濃縮至0.5mL，作為供試品溶液。另取黨參對(duì)照藥材1g，同法制得對(duì)照藥材溶液。按處方配比，取除黨參外的其他藥材按工藝制成內(nèi)容物，再按供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B）實(shí)驗(yàn)，吸取上述三種溶液5～10uL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-乙醇-水（15∶3∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無此斑點(diǎn)。

（5）姜半夏薄層色譜鑒別（新增）[3]：取本品內(nèi)容物10g加甲醇50mL，加熱回流30min，濾過，濾液濃縮至約0.5mL，作為供試品溶液。 另取姜半夏對(duì)照藥材3g，同法制得對(duì)照藥材溶液。按處方配比，取除姜半夏外的其他藥材按工藝制成內(nèi)容物，再按供試品溶液制備方法制得陰性樣品溶液。照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B）實(shí)驗(yàn)，吸取上述四種溶液各10uL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（10∶7∶0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無此斑點(diǎn)。

2. 含量測(cè)定

本品由小柴胡片劑改劑型而得。原2010版《中國藥典》小柴胡片劑標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下已有黃芩苷含量測(cè)定的指標(biāo)。故本品參照2010版《中國藥典》第509頁黃芩苷含量測(cè)定方法[1]，該法操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、專屬性高，可作為含量測(cè)定的方法。其方法學(xué)研究如下。

（1）檢測(cè)波長(zhǎng)的確定：參照文獻(xiàn)[1]選用315nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

（2）流動(dòng)相的確定：參照文獻(xiàn)[1]，選用甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動(dòng)相，經(jīng)過試驗(yàn)，選用甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）時(shí)，樣品峰形對(duì)稱，理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算不低于3000。黃芩陰性樣品溶液在相同色譜條件下未見有干擾色譜峰。

（3）供試品溶液制備：取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，精密稱定約0.5g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱重，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5ml，用70%乙醇稀釋，定容至10ml，即得。

（4）對(duì)照品溶液制備：取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1ml含黃芩苷60μg的溶液，即得。

（5）線性關(guān)系考察。精密吸取濃度為0.061μg/μl的黃芩苷對(duì)照品溶液2.5μl 、5.0μl、 7.5μl、10.0μl、15μl、20.0μl，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定，記錄對(duì)照品峰面積， 以注入的對(duì)照品溶液所含黃芩苷的含量為橫坐標(biāo)（X）， 對(duì)照品峰面積的積分值為縱坐標(biāo)（Y）， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程為： Y=6997+6.433e+005X， R=0.9998。結(jié)果表明， 注入的對(duì)照品溶液黃芩苷在0.1525μg～1.22μg間呈良好線性關(guān)系。

（6）精密度考察。取同一供試品，按[含量測(cè)定]項(xiàng)下方法重復(fù)測(cè)定5次，試驗(yàn)結(jié)果平均峰面積為336657，峰面積的RSD為0.52% 。由此可知儀器的精密度符合要求。

（7）穩(wěn)定性考察：取同一批樣品，按樣品制備方法制備供試品溶液，精密吸取10μl，間隔2小時(shí)測(cè)定其含量，測(cè)定供試品溶液峰面積RSD為0.77% （ n=5）， 結(jié)果表明供試品溶液在10h內(nèi)穩(wěn)定。

（8）回收率考察：采用加樣回收法，分別精密稱取已知含量（9.934mg/g）的樣品適量，分別加入0.061ug/ul的黃芩苷對(duì)照品溶液1ml使其含量為100%，按樣品測(cè)定方法制備供試液，依法測(cè)定，結(jié)果平均回收率=99.83%（n=6），RSD=1.29% 。由上述結(jié)果說明方法回收率較好。

（9）樣品測(cè)定：分別取三批小柴胡軟膠囊，按樣品制備方法制備樣品。分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，以外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果140801批， 140802批140803批中黃芩苷的平均含量（ mg/粒 ）分別為6.363， 5.702， 6.056。

四、結(jié)論與討論

鑒別方法項(xiàng)下樣品和供試品色譜行為良好，特征斑點(diǎn)明顯，專屬性強(qiáng)，可作為小柴胡軟膠囊的鑒別標(biāo)準(zhǔn)。

含量測(cè)定方法學(xué)考察項(xiàng)目指標(biāo)均達(dá)到要求，證明該含量測(cè)定方法可行。參考原標(biāo)準(zhǔn)中小柴胡片的黃芩苷限量，即本品每片（每片相當(dāng)于總藥材1.5g）含黃芩以黃芩苷計(jì)，不得少于含量2.0mg，同時(shí)考慮到藥材的來源并參考三批樣品的含量測(cè)定的結(jié)果，暫定小柴胡軟膠囊中黃芩苷的限量標(biāo)準(zhǔn)，即本品每粒（相當(dāng)于總藥材1.2g）含黃芩以黃芩苷計(jì)，不低于2.0mg/粒，我們將在生產(chǎn)中繼續(xù)積累相關(guān)數(shù)據(jù)，制定更為合理的含量限度。

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責(zé)任編輯 陳春陽