兩種方法檢測血清肝纖維化標(biāo)記物結(jié)果對(duì)比分析

陳 莉 王全楚 王東琳

檢測血清肝纖維化標(biāo)志物有助于對(duì)肝病活動(dòng)度的判斷[1]，但血清檢測結(jié)果往往受到方法學(xué)和各種因素的影響。既往應(yīng)用的放射免疫分析法（Radioimmunoassay，RIA）由于放射性同位素具有輻射性而逐漸被高靈敏的化學(xué)發(fā)光分析法（Chemiluminescence analysis，CLIA）所代替。與RIA比，CLIA具有無輻射污染和可實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化檢測等優(yōu)點(diǎn)。我們分別采用RIA和CLIA法對(duì)121例慢性乙型肝炎患者血清肝纖維化指標(biāo)進(jìn)行了檢測，現(xiàn)將結(jié)果分析、報(bào)道如下。

材料與方法

一、研究對(duì)象 選擇我科2012年7月～2012年12月期間住院的慢性乙型肝炎患者121例，男84例，女37例，年齡13～69歲，平均年齡45.8歲。符合2005年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)修訂的慢性乙型肝炎防治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。另選同期健康體檢者40例，男女各20例，平均年齡46歲。

二、血清肝纖維化指標(biāo)的檢測 分別采用CLIA法（鄭州安圖綠科生物工程有限公司）和RIA法（上海海研醫(yī)學(xué)研究所生物技術(shù)中心）檢測。

三、肝穿刺活檢 采用18G肝穿刺針和美國BARD自動(dòng)活檢槍，用40g/L甲醛液固定標(biāo)本，石蠟包埋，連續(xù)切片，HE染色。按照《慢性乙型肝炎防治指南》的標(biāo)準(zhǔn)將慢性肝炎肝組織纖維化程度分為5期（S0～S4）。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS11.5軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以±s表示，采用兩個(gè)獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，組間率的比較采用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

兩種方法檢測血清肝纖維化標(biāo)記物的結(jié)果比較見表1。經(jīng)CLIA和RIA兩種方法檢測的121例慢性乙型肝炎患者血清HA、LN、PCⅢ/PⅢNP和CⅣ含量均較對(duì)照組明顯升高（P<0.01）。

表1 兩種方法檢測血清肝纖維化標(biāo)記物（±s，ng/ml）比較

表1 兩種方法檢測血清肝纖維化標(biāo)記物（±s，ng/ml）比較

S1～S4與S0期比較，①P<0.05，②P<0.01，CLIA檢測的結(jié)果與RIA比較，P>0.05

RIA

討 論

研究表明，血清HA、LN、PCⅢ/PⅢNP和CⅣ水平的變化與肝纖維化的活動(dòng)水平及程度密切相關(guān)，對(duì)肝纖維化的診斷有重要意義，但單項(xiàng)測定這些指標(biāo)有時(shí)并不可靠[3～5]。HA反映肝纖維化活動(dòng)及肝損傷；PCⅢ/PⅢNP反映膠原合成的情況；CⅣ反映膠原降解程度；LN反映基底膜的變化，與門脈高壓有一定的關(guān)系。這些指標(biāo)分別從不同角度反映肝纖維化的變化。 因此，聯(lián)合檢測血清HA、LN、PCⅢ/PⅢNP和CⅣ水平可明顯提高肝纖維化診斷的準(zhǔn)確性和可靠性[6～8]。

肝硬化早期以Ⅲ型膠原合成增加為主，細(xì)胞合成膠原時(shí)以前膠原形式分泌到細(xì)胞外。PⅢN P是Ⅲ型前膠原（PCⅢ）經(jīng)氨基內(nèi)切酶作用脫下的多肽，PⅢN P的含量可以反映Ⅲ型膠原的代謝。近年研究表明，血清PⅢNP是反映早期肝纖維化程度和活動(dòng)性的良好指標(biāo)[9～12]。

本文采用CLIA和RIA法同時(shí)測定臨床病人血清肝纖維化標(biāo)記物，顯示兩種方法在檢測肝纖維化血清標(biāo)志物上均能取得較好的效果。但CLIA法較RIA法有其特有的優(yōu)勢(shì)，RIA法是利用放射性核素標(biāo)記抗原或抗體，然后與被測的抗體或抗原結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物。RIA多為手工操作，反應(yīng)時(shí)間長，所用試劑對(duì)操作人員及周圍環(huán)境有一定程度的污染。CLIA法消除了同位素的污染，大大提高了試劑的穩(wěn)定性，檢測結(jié)果可靠。同時(shí)樣本無需提前預(yù)處理，縮短了分析時(shí)間[13～15]。

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