恩替卡韋治療慢性乙型肝炎患者外周血T細(xì)胞亞群和補(bǔ)體的變化*

林孟新 蘇智軍 郭如意 林志鵬

慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，目前認(rèn)為宿主抗病毒免疫功能低下，尤其是乙型肝炎病毒特異性T細(xì)胞功能不全是乙型肝炎慢性化的主要機(jī)制之一[1]。本文通過比較慢性乙型肝炎（CHB）患者在恩替卡韋（ETV）治療前后T淋巴細(xì)胞和血清補(bǔ)體水平的變化，旨在了解 ETV治療對CHB患者免疫功能的影響。

資料與方法

一、病例來源 選取2010年～2012年我科就診的HBeAg陽性CHB患者63例，男性43例，女性20例，年齡23～65歲，平均年齡33±6歲。診斷符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》的標(biāo)準(zhǔn)[2]，并符合下列入選條件：（1）HBV DNA>1×104拷貝/毫升；（2）入院前未服用過核苷類藥物或者其他抗乙型肝炎病毒治療；（3）ALT>2倍正常值上限。排除HAV、HCV、HEV、HIV感染，排除藥物性、酒精性、自身免疫性及遺傳代謝性肝病。

二、治療方法 給予恩替卡韋（上海百時(shí)美施貴寶公司）0.5mg口服，1次/日，觀察24周。

三、檢測 采用Synchron CX9 ALX全自動(dòng)生化分析儀檢測肝功能（美國Beckman-Coulter公司及其配套試劑）；采用化學(xué)免疫發(fā)光法檢測HBV血清標(biāo)志（美國雅培公司I2000及其配套試劑）；采用熒光定量PCR法檢測HBV DNA（上海科華生物公司）；采用流式細(xì)胞儀檢檢測T淋巴細(xì)胞亞群（熒光標(biāo)記單克隆抗體購自Beckman-Coulter公司）；采用免疫比濁法測定血清C3和C4（Beckman-Coulter公司生產(chǎn)的Immage 800，補(bǔ)體C3和C4正常參考值分別為0.79～1.52g/L和0.16～0.38g/L。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0軟件，計(jì)量資料以表示，采用t檢驗(yàn)，率的比較采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、療效情況 在治療6月結(jié)束時(shí)，63例患者肝功能明顯好轉(zhuǎn)，HBV DNA轉(zhuǎn)陰，與治療前比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05，表1）。HBeAg陰轉(zhuǎn) 16例（25.4%）。

表1 63例慢性乙型肝炎患者治療前后血生化和HBV DNA水平（±s)變化

表1 63例慢性乙型肝炎患者治療前后血生化和HBV DNA水平（±s)變化

與治療前比，①P<0.05

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二、治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群和補(bǔ)體的變化患者治療后外周血CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)較治療前升高，CD4+/CD8+比值也顯著高于治療前，CD8+計(jì)數(shù)較治療前降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C3和 C4在治療后也明顯升高（表2）。

表2 63例患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群和補(bǔ)體（±s）的變化

表2 63例患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群和補(bǔ)體（±s）的變化

與治療前比，①P<0.05

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討論

恩替卡韋是新一代核苷酸類似物，通過人體內(nèi)磷酸化成為具有活性的三磷酸鹽，與多聚體的天然底物三磷酸脫氧鳥嘌呤核苷競爭，從而作用于HBV復(fù)制的啟動(dòng)、逆轉(zhuǎn)錄和合成三個(gè)步驟，發(fā)揮強(qiáng)大的抗病毒效應(yīng)[3]，恩替卡韋的短期臨床效應(yīng)明顯，主要體現(xiàn)在ALT復(fù)常、HBV DNA陰轉(zhuǎn)，HBeAg轉(zhuǎn)陰方面。恩替卡韋可以有效地抑制患者體內(nèi)的HBV DNA活性，使之不能順利地完成病毒復(fù)制，從而起到抑制病毒復(fù)制的功效[4]。本文評估了恩替卡韋在高效抗病毒的同時(shí)對慢性乙型肝炎患者免疫功能的影響。

慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，其中既有免疫病理損傷和炎癥介質(zhì)導(dǎo)致的微循環(huán)障礙，又有HBV持續(xù)感染導(dǎo)致肝細(xì)胞廣泛病變[5]。本研究通過觀察63例患者的治療效果，發(fā)現(xiàn)恩替卡韋能迅速降低HBV DNA水平，使ALT復(fù)常，臨床療效好，與Lai CL[6]的觀察結(jié)果一致。

CD4+T細(xì)胞數(shù)量下降是導(dǎo)致機(jī)體無法有效清除病毒，使感染變得遷徙的重要因素[7]。CD4+/CD8+比值是檢測人體細(xì)胞免疫功能，反映機(jī)體免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)，該比值失衡可以導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂和一系列免疫病理改變。通過此次檢測發(fā)現(xiàn)，CD4+/CD8+水平與HBV DNA無相關(guān)性，與其他報(bào)告一致[8]。檢測外周血T細(xì)胞亞群能反映機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)，當(dāng)T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常時(shí)，可導(dǎo)致免疫功能紊亂而發(fā)生持續(xù)的HBV感染。國外研究顯示，慢性乙型肝炎患者體內(nèi)存在細(xì)胞免疫功能的紊亂，T淋巴細(xì)胞亞群失衡導(dǎo)致機(jī)體不能有效清除入侵的HBV，導(dǎo)致疾病的發(fā)生和發(fā)展。有研究表明[9]，CHB患者CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞升高，使CD4+/CD8+比值下降。慢性乙型肝炎患者在HBV DNA復(fù)制時(shí)，T細(xì)胞亞群存在明顯的紊亂。本研究也提示，治療前患者CD4+下降，CD8+升高。有研究報(bào)告[10]，宿主的細(xì)胞免疫功能特別是CD4+和CD8+T細(xì)胞反應(yīng)對乙型肝炎病毒的清除和疾病的轉(zhuǎn)歸有重要的影響。T細(xì)胞免疫功能如何在乙型肝炎的病理損傷中發(fā)揮作用，具體機(jī)制目前仍不清楚。有報(bào)道乙型肝炎病毒被抑制后，宿主的T細(xì)胞免疫功能失衡將得到很好的糾正。

肝臟是合成補(bǔ)體成分的主要器官，約90%血漿補(bǔ)體由肝細(xì)胞合成。理論上講，肝臟損傷可導(dǎo)致血清補(bǔ)體C3和C4水平下降。國外研究結(jié)果提示[11]，急性肝炎患者補(bǔ)體C3和C4水平接近健康人群，中度和重型肝炎患者則顯著低于健康人群，提示血清C3和C4可能對慢性乙型肝炎肝組織病理狀態(tài)有預(yù)測作用。另有結(jié)果[12]提示補(bǔ)體C3和C4隨著肝臟組織炎癥活動(dòng)度和纖維化程度的升高而逐步降低，提示C3和C4水平隨肝臟損傷的加重而下降。我們發(fā)現(xiàn)CHB患者C3和C4水平明顯低于健康對照組，與國外報(bào)告一致[13]，表明HBV感染可能抑制C3和C4的合成和分泌。補(bǔ)體系統(tǒng)是固有免疫系統(tǒng)的一部分，參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)，防御外來病原體的入侵。

本研究提示，在使用恩替卡韋治療后，患者HBV DNA下降，CD4+升高，C3和C4水平也升高，表明恩替卡韋可能通過抑制HBV復(fù)制、降低CHB患者體內(nèi)病毒載量和HBV相關(guān)抗原的表達(dá)，間接引起機(jī)體細(xì)胞免疫功能的改善。

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