乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化

張建春 翁錫定 陳孫云 張菊花

HBV感染主要是通過(guò)免疫損害引起肝臟病變，其中細(xì)胞免疫在肝臟損害中起主導(dǎo)作用[1，2]，而T細(xì)胞是免疫系統(tǒng)發(fā)揮功能的重要組成部分,在乙型肝炎病毒的清除和發(fā)病機(jī)制中,細(xì)胞免疫起著重要的作用[3～6]。因此,保證T淋巴細(xì)胞的正常免疫功能及各亞群的相對(duì)穩(wěn)定是非常重要的。本研究檢測(cè)了急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化，從細(xì)胞免疫的角度分析乙型肝炎患者的免疫狀態(tài)，為乙型肝炎的臨床治療提供理論依據(jù)。

資料與方法

一、病例選擇 選擇我科2011年11月到2012年6月收治的乙型肝炎患者100例，男65例，女35例，年齡18～75歲，平均年齡44.49歲。診斷均符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的慢性乙型肝炎防治指南的標(biāo)準(zhǔn)[1]，其中急性乙型肝炎15例，慢性乙型肝炎43例，乙型肝炎肝硬化26例，慢性肝衰竭16例。另選擇正常體檢健康者20例，男15例，女5例，平均年齡47.5±7.2歲。排除甲、丙、丁、戊型肝炎，入院前3個(gè)月內(nèi)無(wú)免疫制劑治療史。

二、檢測(cè)方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清肝炎病毒標(biāo)記物；采用流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群，儀器購(gòu)置美國(guó)BECKMAN-COULTER公司?？沽馨图?xì)胞亞群?jiǎn)慰寺】贵w（simultestTM IMK-Lymphocyte）購(gòu)自美國(guó)BD公司。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用表示，組間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，以為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

各型乙型肝炎患者與正常對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值檢測(cè)結(jié)果見表1。研究結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比，急性肝炎患者T淋巴細(xì)胞亞群無(wú)顯著性變化（P>0.05），而慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值均有明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），在乙型肝炎肝硬化組尤為顯著。慢性肝炎與慢性肝衰竭患者CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表1 乙型肝炎患者與正常人外周血T淋巴細(xì)胞亞群（%，±s）比較

表1 乙型肝炎患者與正常人外周血T淋巴細(xì)胞亞群（%，±s）比較

與正常人比，①P<0.05；與慢性肝炎和慢性肝衰竭比，②P<0.05

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討論

有研究發(fā)現(xiàn)，HBV感染人體后可引起肝臟和其他臟器的病變。乙型肝炎的發(fā)生是機(jī)體與病毒相互作用的結(jié)果。HBV侵入肝細(xì)胞內(nèi)增殖，可使受染細(xì)胞表達(dá)HBsAg和HBcAg等，后者可被機(jī)體免疫系統(tǒng)所識(shí)別，引起一系列免疫應(yīng)答[7]。人體外周血T淋巴細(xì)胞由不同的亞群組成，T淋巴細(xì)胞是宿主抗病毒、抗腫瘤免疫反應(yīng)中起主導(dǎo)作用的免疫活性細(xì)胞，構(gòu)成了免疫系統(tǒng)的主要部分[8～10]。

T淋巴細(xì)胞由不同亞群組成。人成熟T細(xì)胞按表型不同可將其分為CD4+T細(xì)胞和CD8+細(xì)胞。CD3+代表總T淋巴細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞為輔助性T細(xì)胞，機(jī)體CD4+細(xì)胞數(shù)量減少和功能下降將直接導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能低下。CD8+細(xì)胞為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，對(duì)清除感染的肝細(xì)胞及清除病毒感染有重要作用，它的功能發(fā)揮有賴于CD4+淋巴細(xì)胞的存在，而且CD4+淋巴細(xì)胞Th1亞型通過(guò)直接對(duì)肝細(xì)胞的溶解而間接清除病毒，同時(shí)也使肝臟病變加重[11]。黃玉波[12]等發(fā)現(xiàn)HBV感染的肝硬化和肝癌患者CD4+和CD8+細(xì)胞亞群較急性肝炎和健康對(duì)照組人群顯著降低，尤其是肝癌患者CD8+細(xì)胞下降更為明顯。CD3陽(yáng)性細(xì)胞減少可能與慢性病毒感染狀態(tài)下病毒誘導(dǎo)T細(xì)胞活化凋亡（AICD）和T細(xì)胞增殖不足有關(guān)，CD3陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量下降說(shuō)明機(jī)體參與免疫反應(yīng)的免疫活性細(xì)胞數(shù)量不足。CD4除在免疫應(yīng)答中起輔助和誘導(dǎo)作用外，還分泌細(xì)胞因子，啟動(dòng)遲發(fā)性過(guò)敏反應(yīng)。CD4細(xì)胞減少和功能下降將導(dǎo)致機(jī)體免疫功能低下，尤其是細(xì)胞免疫功能低下，使得HBV不能被有效清除。CD4/CD8比值是監(jiān)測(cè)人體細(xì)胞免疫功能，反映機(jī)體免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)，該比值失衡可以導(dǎo)致免疫系統(tǒng)紊亂和一系列免疫病理改變[13]。

本研究結(jié)果表明，急性肝炎患者T淋巴細(xì)胞亞群與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者外周血CD3+、CD4+和CD8+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值均較對(duì)照組有明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），乙型肝炎肝硬化組尤為顯著，提示細(xì)胞免疫在乙型肝炎發(fā)展為肝硬化進(jìn)程中是不可忽視的重要因素。慢性肝炎與慢性肝衰竭患者CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值的變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

我們發(fā)現(xiàn)所有慢性乙型肝炎患者，包括慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD8+T細(xì)胞數(shù)量較正常人明顯下降，反映出這類病人的細(xì)胞免疫水平低下，可能與HBV感染慢性化有關(guān)。從本研究結(jié)果可以看出，CD4+/CD8+比值在所有慢性乙型肝炎患者均下降，但在不同乙型肝炎慢性進(jìn)程中無(wú)一定規(guī)律，彼此間無(wú)顯著性差異。研究表明，CD4+/CD8+比值沒有出現(xiàn)隨著病情的加重而增加或者減少的趨勢(shì)。因此，不能用外周血T細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)或比值的變化來(lái)評(píng)價(jià)乙型肝炎患者病情輕重。

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