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      蒙藥復(fù)方特潤舒都樂中抗菌化合物大黃酚的分離鑒定

      2012-09-11 07:22:34納仁高娃王純潔敖日格樂
      關(guān)鍵詞:浸膏蒙藥石油醚

      納仁高娃,王純潔,敖日格樂

      (1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院,內(nèi)蒙古呼和浩特010010;2.內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院生理教研室,內(nèi)蒙古呼和浩特010059)

      蒙醫(yī)藥是我國4大民族醫(yī)藥體系之一,是具有完整理論體系和豐富臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的傳統(tǒng)醫(yī)藥學(xué),是我國乃至世界傳統(tǒng)醫(yī)藥學(xué)的重要組成部分[1]。在蒙藥典中記載著豐富的藥物,其中包含有多種天然、綠色的抑菌、殺菌的蒙藥以及多種含有抗炎免疫等生物活性的藥物。蒙藥復(fù)方特潤舒都樂作為傳統(tǒng)復(fù)方,由大黃、梔子等7味藥構(gòu)成,已經(jīng)經(jīng)過長期的臨床應(yīng)用,明確了其具有很強(qiáng)的抑菌、抗菌抗炎的作用。本研究室對其進(jìn)行了系統(tǒng)的體內(nèi)外抑菌、抗菌試驗(yàn)研究結(jié)果顯示其抑菌效果與環(huán)丙沙星相當(dāng)[2]。本研究利用天然藥物化學(xué)法,對其抗菌有效成分進(jìn)行分離鑒定,為藥物的二次開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

      1 材料和方法

      1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料 蒙藥復(fù)方特潤舒都樂由大黃、梔子等7味藥構(gòu)成,均購自內(nèi)蒙古九合永齡堂藥店,符合《內(nèi)蒙古蒙藥材標(biāo)準(zhǔn)》。

      1.2 主要試劑和儀器 薄層層析用正相硅膠板、拌樣用硅膠(80目~100目)和柱層析用硅膠(200目~300目)均為青島海洋化工廠生產(chǎn);凝膠Sephadex LH-20為瑞典Amershan公司產(chǎn)品;顯色劑為10%H2SO4乙醇溶液;無水乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚均為分析純(天津市化學(xué)試劑三廠,批號:20090202);Bruker AM-400和 Bruker Avance III 600型核磁共振儀為Bruker公司產(chǎn)品;分析和半制備型高效液相色譜儀Agilent 1100HPLC為Agilent公司產(chǎn)品,色譜柱為Zorbax SB-C18(Agilent,4.6mm×250mm,1m L/min;9.4mm×250mm,3m L/min),檢測器為二極管陣列檢測器(DAD)。

      1.3 藥物成分提取與分離 稱取蒙藥復(fù)方,70%乙醇提取后,分別用石油醚、正丁醇、乙酸乙酯、水溶液萃取,獲得不同溶劑萃取浸膏[3]。前期研究表明石油醚部分為體內(nèi)抗菌最有效部位[2]。每次取石油醚浸膏1g,加10m L(乙酸乙酯:正己烷=1∶9)稀釋,經(jīng)硅膠柱多次洗脫,獲得約20mg橙黃色固體夾雜白色粉末,先用0.5m L CDCl3溶解樣品,在400M Hz核磁共振波譜儀上做氫譜,表明樣品為混合物,在低場區(qū)有類似黃酮信號,高場區(qū)有脂肪酸和其它雜質(zhì)信號。需對樣品進(jìn)行分離純化后再鑒定其結(jié)構(gòu)。采用葡聚糖凝膠色譜對其進(jìn)行分離,用氯仿-甲醇(1∶1)進(jìn)行洗脫,收集不同的流份,用硅膠薄層色譜進(jìn)行檢測,合并相同的流份;對合并后的不同流份根據(jù)薄層色譜檢驗(yàn)情況,采用硅膠柱色譜進(jìn)一步分離,用石油醚-丙酮(8∶1~6∶1)進(jìn)行梯度洗脫,薄層色譜檢測,最后用反相高效液相色譜進(jìn)行純化(流動相為50%乙腈)。

      1.4 藥物提取成份的結(jié)構(gòu)鑒定 對得到的橙黃色化合物,用400M Hz核磁共振波譜儀(NMR)測定氫譜、碳譜、無畸變極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)譜(DEPT)、異核單量子相關(guān)譜(HSQC),用600M Hz核磁共振波譜儀(NMR)測定異核多鍵相關(guān)譜(HMBC)[3],確定該物質(zhì)結(jié)構(gòu)。

      2 結(jié)果與討論

      2.1 藥物成分提取與分離結(jié)果 治療奶牛乳房炎蒙藥復(fù)方特潤舒都樂是沿用至今的傳統(tǒng)復(fù)方,具有抑菌抗菌抗炎免疫等藥理作用[2]。為初步探索蒙藥復(fù)方的活性部位,對兩種蒙藥復(fù)方做了乙醇回流提取,依次用石油醚、正丁醇、乙酸乙酯等不同有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取,得到石油醚層浸膏、乙酸乙酯層浸膏、正丁醇層浸膏和水母液浸膏[3]。前期研究表明抗菌成分主要集中在石油醚層浸膏內(nèi)[2]。因此,本實(shí)驗(yàn)采用硅膠色譜和反相高效色譜及葡聚糖凝膠色譜對其進(jìn)行分離,不同溶劑進(jìn)行洗脫,反相高效液相色譜純化,最終得到一橙黃色化合物(約8mg)。

      2.2 藥物提取成分的結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果 得到的單一成分通過NMR測定氫譜、碳譜、DEPT譜、HSQC譜,HMBC譜[4],得出該化合物結(jié)構(gòu)(圖1)。與文獻(xiàn)對照表明,該化合物為大黃酚(Chrysophanol)[5-6],NMR數(shù)據(jù)歸屬見表1。

      圖1 大黃酚分子結(jié)構(gòu)圖Fig.1Molecular structuer of Chrysophanol

      表1 大黃酚在CDCl3中核磁共振波普數(shù)據(jù)排布(J in Hz)Table 1NMR assignments for Chrysophanol in CDCl3(J in Hz)

      分離鑒定結(jié)果為大黃酚,大黃酚為已知的體內(nèi)有效抗菌抑菌成分[7],大黃酚屬蒽醌類化合物[8-9],具有很強(qiáng)的體內(nèi)外抑菌作用,對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、甲型鏈球菌、肺炎球菌、流感桿菌等多種細(xì)菌具有不同程度的抑制作用[10]。因此,確定蒙藥復(fù)方特潤舒都樂抗菌抑菌有效成分為大黃酚。特潤舒都樂作為傳統(tǒng)復(fù)方應(yīng)用至今,臨床效果非常顯著,但其服用量大、不夠經(jīng)濟(jì)等弱點(diǎn),有待于通過有效成分,獲得新的經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的抗菌、抑菌抗炎的新藥物。

      [1]白長喜.關(guān)于蒙醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的思路與方法[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2010,7:14-15.

      [2]包金榮,王純潔,戰(zhàn)永波,等.治療奶牛乳腺炎蒙藥復(fù)方提取物抗大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌作用研究[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2010,31(9):55-58.

      [3]烏日娜,王純潔,包金榮,等.蒙藥特潤舒都樂對小鼠特異性免疫機(jī)能的影響[J].中國獸醫(yī)雜志,2009,45(2):57-58.

      [4]吳繼洲,孔令義.天然藥物化學(xué)[M].第一版.北京:中國醫(yī)藥出版社,2008,80-103.

      [5]趙軍,常軍民,堵年生.枝穗大黃化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志,2002,27(4):281-282.

      [6]鞏婷,王東曉,劉屏,等.白花油麻藤化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志,2010,35(13):1720-1722.

      [7]Shan Bin,Cai Yi-zhong,John D,et al.Antibacterial properties of Polygonum cuspidatum roots and their major bioactive constituents[J].Food Chem istry,2008,109:530-537.

      [8]曹崗,邵玉藍(lán),金奇.黃芩活性成分提取分離研究進(jìn)展[J].抗感染藥學(xué),2009,6(2):87-91.

      [9]肖艷,杜智敏.大黃中有效成分提取分離條件的優(yōu)化[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2003,8(1):98-100.

      [10]Lizuka A,lijima O T,Kondo K,et al.Evaluation of Rhubarb using antioxidative activity as an index of pharmacological usefulness[J].JEthnopharmacol,2004,91(1):89-94.

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