華東地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)的回腸炎流行病學(xué)調(diào)查

曲向陽(yáng)，姚火春，張 璇，黃 濤，李喜煥

(1.美國(guó)禮來(lái)亞洲公司上海代表處，上海200020；2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，江蘇南京210095)

豬回腸炎又名豬增生性腸炎、豬增生性出血性腸炎，是由胞內(nèi)勞森氏菌(Lawsonia intracellularis)感染所致的以回腸、盲腸、結(jié)腸粘膜呈腺瘤樣增生為主要特征的一種重要豬腸道疾病。該菌易感染生長(zhǎng)育肥豬、后備母豬，嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)[1]。據(jù)報(bào)道每頭回腸炎感染豬的經(jīng)濟(jì)損失至少1.531美元[2]。

根據(jù)臨床癥狀可將豬回腸炎分為急性型、慢性型與亞臨床型。急性型多發(fā)于新引進(jìn)的后備母豬及17周齡以上的育肥豬，健康豬群更易感染急性型回腸炎[3]，常表現(xiàn)為出血性下痢，甚至突然死亡。慢性型與亞臨床型回腸炎無(wú)典型臨床癥狀，2周齡～20周齡的豬只均易感染[4]，無(wú)法依據(jù)臨床癥狀進(jìn)行診斷。

為研究豬回腸炎在華東三省一市的流行情況，采用Lawsonia FIRSTtestTM回腸炎診斷試劑盒對(duì)采集自規(guī)?；i場(chǎng)糞便樣品中的胞內(nèi)勞森氏菌進(jìn)行了病原學(xué)調(diào)查，了解回腸炎在該地區(qū)的感染率及感染時(shí)間點(diǎn)，為該病的精準(zhǔn)化策略性用藥預(yù)防或疫苗免疫提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣品采集 2009年12月～2011年4月從華東三省一市21個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)隨機(jī)采集特定周齡的新鮮松軟或水泥樣的糞便樣品各3克；糞便主要來(lái)自于4周齡、6周齡、8周齡、10周齡、12周齡、14周齡、后備母豬與經(jīng)產(chǎn)母豬，每階段樣品作2份～3份重復(fù)，采樣后立即檢測(cè)。

1.2 檢測(cè)試劑 本實(shí)驗(yàn)采用德國(guó)M icrocoat公司的Lawsonia FIRSTtestTM回腸炎現(xiàn)場(chǎng)診斷試劑盒(免疫磁珠法)。通過(guò)對(duì)比顏色變化，對(duì)胞內(nèi)勞森氏菌的感染狀態(tài)進(jìn)行半定量檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法 依照FIRSTtestTM試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 華東三省一市總體感染狀態(tài) 表1數(shù)據(jù)顯示，21個(gè)豬場(chǎng)100%存在勞森氏菌感染，321份樣品的總體陽(yáng)性率為59.8%(192/321)，并且不同地區(qū)的總體陽(yáng)性率差異不顯著。

表1 不同省市回腸炎的發(fā)病率Table 1Prevalence status of porcine ileitis in different regions of East China

表2數(shù)據(jù)顯示，不同生長(zhǎng)階段的感染率為：4周齡，9.1%；6周齡，28.3%；8周齡，41.5%；10周齡，67.9%；12周齡、14周齡及經(jīng)產(chǎn)母豬均超過(guò)85%。表明華東地區(qū)大部分豬場(chǎng)從8周齡～10周齡開(kāi)始感染回腸炎，12周齡～14周齡達(dá)到感染高峰期。感染率隨周齡的增加而升高，并且呈高比例持續(xù)性感染狀態(tài)。

從表3數(shù)據(jù)顯示，所檢樣品的總體強(qiáng)陽(yáng)性率為31.2%。強(qiáng)陽(yáng)性率也隨著周齡的增加而顯著提高，14周齡時(shí)高達(dá)66.7%。后備母豬與經(jīng)產(chǎn)母豬的強(qiáng)陽(yáng)性率分別為66.7%和48.6%。

表2 華東地區(qū)不同省市不同階段豬回腸炎的感染狀況Table 2Positive rate of porcine ileitis at different stages in pigs

表3 各生長(zhǎng)階段回腸炎感染強(qiáng)陽(yáng)性率Table 3Strong positive rate of porcine ileitis at different grow ing stages

2.2不同省市間感染差異 從區(qū)域角度分析(安徽檢測(cè)樣本較少，不作比較)，浙江、江蘇與上海在感染時(shí)間與總體陽(yáng)性率方面均存在差異(表2)。從90%以上的樣品呈現(xiàn)陽(yáng)性時(shí)周齡表明，江蘇最早(10周齡)，浙江次之(12周齡)，上海最晚(14周齡)?？傮w陽(yáng)性率也顯示江蘇地區(qū)最高(67.3%)，浙江次之(59.2%)，上海最低(50.0%)。

2.3 未經(jīng)有效藥物干預(yù)的豬場(chǎng)回腸炎感染狀態(tài) 圖2為上海某未使用對(duì)勞森氏菌敏感藥物干預(yù)的豬場(chǎng)的感染狀態(tài)。6周齡前豬群處于陰性狀態(tài)，而8周齡后全群呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性，特別是種豬群(強(qiáng)陽(yáng)性)。

圖2 華東地區(qū)某豬場(chǎng)不同周齡豬糞樣中胞內(nèi)勞森氏菌的檢測(cè)結(jié)果Fig.2Detection results of Lintracellularis in fecal samples of differentweek-old pigs from certain swine farm

2.4 用藥方案對(duì)感染狀態(tài)的影響 表4為浙江8個(gè)豬場(chǎng)的各自檢測(cè)結(jié)果。因各場(chǎng)的飼養(yǎng)管理、生物安全，特別是用藥方案等因素不同，感染時(shí)間存在明顯差異。ZJ6在4周齡即存在感染，大部分豬場(chǎng)出現(xiàn)感染的時(shí)間在8周齡～10周齡(50%～60%)，12周齡100%感染。ZJ2、ZJ4、ZJ6的用藥方案均對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生了階段性的影響(表4)。

表4 浙江8個(gè)豬場(chǎng)的回腸炎的感染狀況Table 4Infection status of ileitis in 8sw ine farms of Zhejiang province

圖3為兩個(gè)豬場(chǎng)使用不同藥物方案對(duì)回腸炎干預(yù)后的檢測(cè)結(jié)果。第一個(gè)豬場(chǎng)在8周齡～10周齡使用泰樂(lè)菌素(泰農(nóng)R40，美國(guó)禮來(lái)公司產(chǎn)品)干預(yù)，結(jié)果呈陰性或弱陽(yáng)性。而第二個(gè)豬場(chǎng)在第9周齡使用金霉素干預(yù)后，10周齡樣品暫時(shí)呈陰性，但12周齡樣品再次轉(zhuǎn)陽(yáng)性。

3 討 論

目前回腸炎的主要診斷方法包括利用PCR、免疫過(guò)氧化酶法檢測(cè)糞便樣品中的勞森氏菌或采用ELISA、IFA等檢測(cè)胞內(nèi)勞森菌抗體[5]。本調(diào)查采用的FIRSTtestTM檢測(cè)可以在豬場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)糞便中是否含有感染劑量的勞森氏菌，適用于規(guī)?；i場(chǎng)回腸炎感染狀態(tài)與防控效果的評(píng)估。

圖3 不同藥物對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響Fig.3The effect of differentmedication protocols on testing results

回腸炎多發(fā)生于豬生長(zhǎng)育肥階段，但各國(guó)的開(kāi)始感染時(shí)間存在差異[6]，故本研究所檢樣品來(lái)自于4周齡～14周齡保育豬、生長(zhǎng)豬、后備母豬及經(jīng)產(chǎn)母豬。本次調(diào)查時(shí)未挑選生長(zhǎng)育肥階段有頑固性腹瀉的豬場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果總體陽(yáng)性率高達(dá)59.8%，表明華東地區(qū)規(guī)模化豬場(chǎng)亞臨床型回腸炎感染比例很高。

華東地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)100%呈胞內(nèi)勞森氏菌陽(yáng)性，這與其它國(guó)家與地區(qū)的報(bào)道基本相似(美國(guó)：90.9%[7]； 韓 國(guó) :100%[8]； 丹 麥 :93.7%[9])。 Guedes等人報(bào)道保育豬從7周齡左右開(kāi)始排菌，13周齡～16周齡達(dá)到排菌高峰期[10]。本調(diào)查結(jié)果與Guedes等的報(bào)道基本一致，但華東地區(qū)部分豬場(chǎng)的感染時(shí)間更早(6周齡的感染率達(dá)28.3%)。

不同省市回腸炎感染的差異性主要與飼養(yǎng)管理和藥物保健方案有關(guān)，如上述上海地區(qū)5個(gè)豬場(chǎng)在保育后期與生長(zhǎng)育肥前期均采用過(guò)相關(guān)藥物(如泰樂(lè)菌素、泰妙菌素、替米考星)對(duì)支原體等呼吸道疾病進(jìn)行干預(yù)，同時(shí)控制了回腸炎的發(fā)生。

樣品強(qiáng)陽(yáng)性率的分布狀態(tài)表明14周齡以后的生長(zhǎng)育肥豬及后備母豬大量排菌，其強(qiáng)感染所造成的經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重。各胎次經(jīng)產(chǎn)母豬的陽(yáng)性率均很高，表明經(jīng)產(chǎn)母豬排菌具有持續(xù)性，可以成為傳染源。

保育前期豬的回腸炎感染率比較低(4周齡：9.1%；6周齡：28.3%)的原因可能有以下兩點(diǎn)。第一：藥物干預(yù)。豬場(chǎng)保育前期常用藥物如泰樂(lè)菌素、替米考星、金霉素等對(duì)胞內(nèi)勞森氏菌有抑制或殺滅所用。第二：母源抗體的影響。據(jù)Guedes等人[10]發(fā)現(xiàn)抗體陽(yáng)性的母豬所產(chǎn)仔豬的母源抗體可以持續(xù)至5周齡，可以保護(hù)哺乳仔豬與保育前期豬免受勞森氏菌感染。隨著母源抗體的消退，加之保育轉(zhuǎn)群應(yīng)激與衛(wèi)生消毒等生物安全措施不到位等，回腸炎易感性增加。

同一豬場(chǎng)同一生長(zhǎng)階段不同樣品的檢測(cè)結(jié)果一致性很高，表明本調(diào)查中所使用的FIRSTtestTM回腸炎檢測(cè)試劑盒的重復(fù)性良好。同時(shí)表明胞內(nèi)勞森氏菌豬群中感染所需病原菌量比較低，這與sm ith等人報(bào)道一致[11]。

藥物對(duì)回腸炎檢測(cè)結(jié)果影響顯著。故在檢測(cè)前應(yīng)先調(diào)查豬場(chǎng)的用藥狀況、臨床癥狀、生長(zhǎng)速度等信息，以便結(jié)合檢測(cè)結(jié)果對(duì)豬場(chǎng)的感染狀況作綜合診斷。表4結(jié)果顯示ZJ2與ZJ4均在9周齡～10周齡用藥干預(yù)，ZJ6在5周齡～6周齡用藥干預(yù)。但回腸炎在ZJ2、ZJ4、ZJ63個(gè)豬場(chǎng)均出現(xiàn)復(fù)發(fā)，這可能與藥物選擇及使用方法有關(guān)。

結(jié)合本次病原學(xué)調(diào)查結(jié)果，建議華東地區(qū)規(guī)模化豬場(chǎng)在9周齡～11周齡或10周齡～12周齡添加泰樂(lè)菌素(110g/噸飼料)，連續(xù)用藥3周，以后每月脈沖式加藥一周，直到上市前5d。

[1]Sm ith S H,M c Orist S.Development of persistent intestinal infection and excretion of Lawsonia intracellularis by piglets[J].Res Vet Sci,1997,62:6-10.

[2]Jensen M.Health management w ith reduced antibiotic use-experiences of a Danish pig vet[J].Anim Biotechnol,2006,17:189-194.

[3]Winkelman N L,Dee S.Ileitis:an update[C].Comp Contin Educ,1996,18:S19-S25.

[4] Jensen T K,Vigre H,So¨rensen V,et al.Naturally acquired Lawsonia intracellularis infection in pigs studied from weaning to slaughter by indirect immunofluorescence antibody test and polymerase chain reaction on faeces[J].Res Vet Sci,2005,79:93-98.

[5]楊小燕，鄭新添，陳杰，等.閩西地區(qū)豬增生性腸炎的調(diào)查[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展.2010，31(10)：126-128.

[6]Stege H,Jensen T K,Mo¨ller K,et al.Infection dynam ics of Lawsonia intracellularis in pig herds[J].Vet M icrobiol,2004,104:197-206.

[7]Armbruster G A,Deen J,Gebhart C J,et al.Review of Lawsonia intracellularis seroprevalence screening in the United States,June 2003to July 2006[C].38th Annu Meet Amer Assoc Swine Vet,2007:231-233.

[8]Lee SW,Kim T J,Park S Y,et al.Prevalence of porcine proliferative enteropathy and its control with tylosin in Korea[J].J Vet Sci,2001,2:209-212.

[9]Stege H,Jensen T K,Moler K,et al.Prevalence of intestinal pathogens in Danish finishing pig herds[J].Prev Vet Med,2000,46:279-292.

[10]Guedes R M C,Gebhart C J,Armbruster G A,et al.Serologic follow-up of a repopulated sw ine herd after an outbreak of proliferative hemorrhagic enteropathy[J].J Vet Res,2002,66(4):258-263.

[11]Sm ith S H,M cOrist S.Development of persistent intestinal infection and excretion of Lawsonia intracellularis by piglets[J].Res Vet Sci,1997,62:6-10.