糖鏈
- 用于N-連接完整糖肽鑒定的糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)處理方法最新研究亮點(diǎn)
白質(zhì)上位點(diǎn)特異性糖鏈修飾的主要手段,其主要優(yōu)勢(shì)在于分析過(guò)程中可以同時(shí)揭示蛋白位點(diǎn)與糖鏈修飾的信息,從而在組學(xué)層次實(shí)現(xiàn)規(guī)模化的蛋白糖基化分析。但是，與其他翻譯后修飾相比,糖基化具有組成復(fù)雜、相對(duì)分子質(zhì)量分布范圍廣的特點(diǎn),因此完整糖肽的數(shù)據(jù)庫(kù)檢索空間較大。同時(shí)完整糖肽的質(zhì)譜譜圖較為復(fù)雜。在碰撞誘導(dǎo)碎裂的完整糖肽質(zhì)譜譜圖中,糖鏈產(chǎn)生的碎片離子強(qiáng)度較高,而肽段骨架碎裂不完全,產(chǎn)生的碎片離子強(qiáng)度較低,給完整糖肽的譜圖解析帶來(lái)了困難。因此,發(fā)展具有高靈敏度與可信度的質(zhì)
色譜 2022年6期2023-01-17
- 血清IgG糖基化修飾特征與自身免疫性疾病關(guān)系及其檢測(cè)方法的研究進(jìn)展
連接的寡糖類(lèi)型，糖鏈分為G0型糖鏈、G1型糖鏈、G2型糖鏈。G1型較G0型在糖鏈末端多一個(gè)半乳糖；根據(jù)半乳糖連接的N-乙酰葡萄糖胺的不同，G1型又分為G1a型、G1b型；G2型糖鏈末端有兩個(gè)半乳糖。2 IgG糖基化修飾及其功能IgG-Fc段的N-糖基化可影響其理化性質(zhì)。AOYAGI等［11］報(bào)道IgG-Fc段的寡糖鏈可維持抗體四級(jí)結(jié)構(gòu)以及Fc段的熱穩(wěn)定性，在一定程度上調(diào)節(jié)抗體效能。末端糖基與IgG-Fc段的溶解性相關(guān)，糖鏈末端半乳糖能使氨基酸殘基的水溶性減
浙江臨床醫(yī)學(xué) 2022年1期2022-11-23
- 基于FFPE組織切片的膀胱癌N-連接糖鏈原位酶解及分析*
-5］。N-連接糖鏈是在肽序列Asn-X-Ser/Thr（其中X代表除脯氨酸以外的任何氨基酸）處共價(jià)連接到天冬酰胺的低聚糖，具有共同的五糖核心結(jié)構(gòu)，經(jīng)過(guò)一系列糖基化相關(guān)酶的催化，可產(chǎn)生多種N-連接糖鏈結(jié)構(gòu)變異，并被分為3種類(lèi)型：高甘露糖型、雜合型和復(fù)雜型［6］。有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與機(jī)體（組織、血清、尿液、腹水等）的N-連接糖基化異常密切相關(guān)［7］。更值得注意的是，N-連接糖基化修飾是在細(xì)胞器中一系列有組織的酶反應(yīng)控制下進(jìn)行的，具有很高的特異性，且
生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展 2022年10期2022-10-25
- 多天線(xiàn)N-糖鏈對(duì)雙表型肝細(xì)胞癌的輔助診斷價(jià)值
0%糖蛋白中N-糖鏈的形成。N-糖鏈根據(jù)天線(xiàn)(或分支)的數(shù)量可分為二天線(xiàn)、三天線(xiàn)、四天線(xiàn)及四天線(xiàn)以上N-糖鏈結(jié)構(gòu)，其中三天線(xiàn)、四天線(xiàn)及四天線(xiàn)以上N-糖鏈結(jié)構(gòu)稱(chēng)為多天線(xiàn)N-糖鏈結(jié)構(gòu)(Multi-glycan)[4]。研究[5]發(fā)現(xiàn)血清N-糖鏈表達(dá)水平(量)與糖鏈結(jié)構(gòu)(質(zhì))的改變可以成為HCC潛在診斷標(biāo)志物或治療靶標(biāo)，特別是血清中Multi-glycan表達(dá)水平的變化與腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。Huang等[6]研究發(fā)現(xiàn)，HCC患者血清三天線(xiàn)N-糖鏈結(jié)構(gòu)豐度
臨床肝膽病雜志 2022年6期2022-06-23
- 冠狀病毒的糖基化研究進(jìn)展*
糖基化位點(diǎn)分布、糖鏈結(jié)構(gòu)與生物學(xué)功能及糖生物學(xué)研究技術(shù)等，有助于對(duì)冠狀病毒相關(guān)的診斷、治療和疫苗開(kāi)發(fā)等工作。1 冠狀病毒S蛋白的糖基化修飾冠狀病毒同源三聚體S 蛋白是Ⅰ型膜蛋白，其氨基酸數(shù)目從1 150到1 450個(gè)不等，序列相似性在屬間和種間差異較大，但被描述為倒錐狀或丁香狀（clove）三維結(jié)構(gòu)單元組成相同［22-23］。S 蛋白由S1和S2 亞 基 組 成［24］。S1 亞 基 包 含N 端 結(jié) 構(gòu) 域（N-terminal domain，NTD）
生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展 2022年3期2022-03-31
- Core 3 O-型糖鏈參與大腸桿菌對(duì)腸上皮細(xì)胞黏附和侵襲的影響
20黏蛋白O-型糖鏈根據(jù)在絲氨酸/蘇氨酸（Ser/Thr）分子上不同連接，可分為Core 1～8八種不同O-型糖鏈[1]。不同類(lèi)型的O-型糖鏈由不同的糖基轉(zhuǎn)移酶催化合成，Core 3 O-型糖鏈由β-1，3-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶6（β3gnT6）催化合成。腸致病性大腸桿菌（EPEC）和腸出血性大腸桿菌（EHEC O157∶H7）可引起患者從輕度腹瀉到嚴(yán)重疾病的發(fā)生，如出血性腸炎[2]；O-型糖鏈可能與腸道共生菌群的選擇相關(guān)，同時(shí)可以作為不同細(xì)菌的黏附位
中國(guó)醫(yī)藥科學(xué) 2022年3期2022-03-16
- 一種具有方向性微結(jié)構(gòu)的聚乙烯醇-瓊脂糖水凝膠的制備方法及應(yīng)用
形成瓊脂糖大分子糖鏈，依靠前驅(qū)液的流動(dòng)引導(dǎo)瓊脂糖大分子鏈在前驅(qū)液內(nèi)產(chǎn)生方向性，在冷凍循環(huán)的過(guò)程中聚乙烯醇圍繞瓊脂糖的糖鏈結(jié)晶，形成具有方向性的纖維狀微結(jié)構(gòu)的水凝膠。該制備方法無(wú)需借助外加物理場(chǎng)的作用，制備的水凝膠具有各向異性，而且制備流程簡(jiǎn)單，可重復(fù)性高，對(duì)設(shè)備要求低。制備的水凝膠具有均勻方向性的纖維狀微結(jié)構(gòu)，提升了材料的抗拉伸性能，并通過(guò)注射器制得任意形狀的具有方向性的水凝膠，得到的水凝膠有望應(yīng)用于人造組織/器官修復(fù)材料領(lǐng)域。公開(kāi)號(hào) CN 1149209
合成樹(shù)脂及塑料 2022年6期2022-03-14
- 免疫球蛋白G糖基化修飾的質(zhì)譜分析方法及其應(yīng)用
蛋白質(zhì)合成相比，糖鏈合成沒(méi)有固定的模板，并且糖鏈具有復(fù)雜的分支結(jié)構(gòu)、連接方式和空間構(gòu)型，這使得糖基化修飾分析成為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)表征中最具挑戰(zhàn)性的任務(wù)之一。隨著基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)和電噴霧電離(ESI)技術(shù)的發(fā)展，質(zhì)譜技術(shù)已成為蛋白質(zhì)糖基化修飾研究中廣泛應(yīng)用的分析手段。然而，糖蛋白的高動(dòng)態(tài)范圍、糖基化修飾固有的低豐度、與無(wú)糖基化修飾肽段的共存等所導(dǎo)致的離子抑制以及糖鏈結(jié)構(gòu)的高度異質(zhì)性等因素，使得質(zhì)譜技術(shù)表征蛋白糖基化修飾面臨挑戰(zhàn)[2]。2019年，
質(zhì)譜學(xué)報(bào) 2021年5期2021-09-24
- 糖生物學(xué)或解開(kāi)疾病關(guān)鍵密碼
學(xué)研究回答人體的糖鏈（多糖或聚糖）在細(xì)胞的什么地方、怎樣形成;從分子水平揭示它的結(jié)構(gòu)、它和什么分子結(jié)合并蘊(yùn)含了怎樣的信息;又如何發(fā)揮生物學(xué)功能等問(wèn)題。葉新山認(rèn)為，蛋白質(zhì)和核酸研究發(fā)展很快，人們對(duì)生命的認(rèn)識(shí)和理解想再向前一步，還需對(duì)糖類(lèi)展開(kāi)研究。“糖的絕大多數(shù)功能還是未知的奧秘，如果打開(kāi)了這一扇大門(mén)，人類(lèi)與疾病的斗爭(zhēng)勢(shì)必更有把握。”他說(shuō)。多數(shù)疾病背后都能找到“糖”的影子糖鏈與人類(lèi)健康息息相關(guān)，幾乎涉及所有疾病種類(lèi)。目前，人們已經(jīng)知道，糖鏈與傳染性疾病、免疫性
中國(guó)科學(xué)探險(xiǎn) 2021年2期2021-06-01
- 甲型流感病毒血凝素糖基化的生物學(xué)效應(yīng)
將“劫持”的細(xì)胞糖鏈以N-糖苷鍵形式連接到HA的N-連接糖基化基序(N-linked glycosylation sequon，NGS)——N-X-S/T-Y(X和Y是除P以外的任何氨基酸)[2]，從而實(shí)現(xiàn)自身蛋白的糖基化。當(dāng)HA從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)，糖苷酶和甘露糖苷酶會(huì)對(duì)HA的糖鏈進(jìn)行修剪和重塑等再加工。需要指出的是，HA的NGS并非都要進(jìn)行糖基化修飾，具體是哪個(gè)(些)NGS會(huì)被糖基化，加載何種類(lèi)型的糖鏈，以及糖鏈的加工程度，要取決于IAV感染的特定
中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2021年4期2021-04-16
- 異常糖鏈糖蛋白在膽道良惡性腫瘤鑒別診斷中的價(jià)值
戴映，張騰騰異常糖鏈糖蛋白(TAP)是蛋白質(zhì)糖基化異常，糖基化修飾不完全或新的糖基轉(zhuǎn)移酶被激活產(chǎn)生新的糖基化而形成的。細(xì)胞癌變時(shí)發(fā)生特異性糖鏈變化，促使多種異常糖鏈糖蛋白形成，臨床可以使用特殊技術(shù)檢測(cè)這些異常蛋白來(lái)區(qū)分疾病良惡性，使腫瘤早期檢測(cè)成為可能[1]。近年來(lái)，有多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在肺癌、鼻咽癌、乳腺癌等多種原發(fā)性惡性腫瘤中可檢測(cè)到異常糖鏈糖蛋白的表達(dá)，為異常糖鏈糖蛋白輔助惡性腫瘤診斷提供依據(jù)。TAP對(duì)于多種惡性腫瘤的早期診斷具有較高的敏感度與特異度，具
疑難病雜志 2020年12期2020-12-29
- 精準(zhǔn)捕獲“糖鏈”有助揭示病毒侵染機(jī)制
，實(shí)現(xiàn)了對(duì)唾液酸糖鏈的精確捕獲，這為后續(xù)揭示病毒侵染機(jī)制、發(fā)現(xiàn)新的疾病生物標(biāo)記物和藥物靶點(diǎn)，以及開(kāi)發(fā)抗病毒藥物或疫苗打下基礎(chǔ)。該成果發(fā)表在《美國(guó)化學(xué)會(huì)志》上。唾液酸糖鏈的異常表達(dá)是惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的標(biāo)志。唾液酸通常位于糖鏈的最外端，這種特殊的位置及其廣泛分布的特點(diǎn)，使得唾液酸糖鏈在病毒感染、免疫響應(yīng)和癌癥的發(fā)生、發(fā)展等過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。糖鏈在細(xì)胞膜表面分布眾多，如同一層“糖被”覆蓋在細(xì)胞表面，參與并調(diào)節(jié)一系列生物過(guò)程，包括細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞增殖等
醫(yī)藥前沿 2020年18期2020-12-03
- 鯽魚(yú)籽唾液酸糖蛋白的N-糖鏈結(jié)構(gòu)及生物活性
在于細(xì)胞表面復(fù)合糖鏈末端，主要以糖蛋白或糖脂形式存在[2]。由于其獨(dú)特的位置特點(diǎn)和結(jié)構(gòu)特性，唾液酸參與調(diào)節(jié)大量生理及病理進(jìn)程，例如在一些癌癥細(xì)胞中，唾液酸往往過(guò)量表達(dá)[3]。在受精過(guò)程中，唾液酸也在卵細(xì)胞與精子結(jié)合過(guò)程中扮演著重要作用[4]。此外，在一些特殊細(xì)胞表面還有聚唾液酸，主要存在于新生嬰兒、精子和部分腫瘤細(xì)胞上[5]。唾液酸糖蛋白(SGP)是指一類(lèi)富含唾液酸的糖蛋白，大部分含有分支型、復(fù)雜型的末端唾液酸化的寡糖鏈。SGP具有良好的抗結(jié)合作用，主要表
生物加工過(guò)程 2020年5期2020-10-15
- 哺乳動(dòng)物細(xì)胞中糖鏈結(jié)構(gòu)的改造
數(shù)分泌蛋白質(zhì)具有糖鏈，為了維持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和功能以及抵御免疫反應(yīng)，適當(dāng)?shù)?span id="j5i0abt0b" class="hl">糖鏈是非常必要的。使用哺乳動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)生物藥物分子依然有幾個(gè)缺點(diǎn)，包括高成本和糖鏈的不均一性。 為了確保用作為生物藥物分子的蛋白質(zhì)質(zhì)量和穩(wěn)定性，糖鏈的不均一性是一個(gè)必須要解決的問(wèn)題。 舉例來(lái)說(shuō)，紅細(xì)胞生成素和粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）之類(lèi)的細(xì)胞因子在體外必須具有含唾液酸的復(fù)合型糖鏈才具有活性[6-9]。 同時(shí)，對(duì)蛋白質(zhì)的糖鏈結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造可以提高蛋白質(zhì)的功能活性。 舉例來(lái)說(shuō)，具有
食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào) 2020年2期2020-05-11
- 離線(xiàn)二維色譜結(jié)合糖苷外切酶酶解用于IgG與人血清糖蛋白中N-糖鏈的結(jié)構(gòu)表征
過(guò)程，糖蛋白中的糖鏈結(jié)構(gòu)不僅影響蛋白質(zhì)的性質(zhì)，如折疊、穩(wěn)定性和溶解性等，還在細(xì)胞識(shí)別、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞粘合以及免疫應(yīng)答等多種細(xì)胞過(guò)程中具有重要作用[1]。在這些糖蛋白中，N-糖鏈的還原端通過(guò)糖肽鍵連接到肽鏈的天冬酰胺(Asn)殘基上，而O-糖鏈連接到肽鏈的絲氨酸(Ser)或蘇氨酸(Thr)殘基上。免疫球蛋白是血清中高豐度的糖蛋白，也是一類(lèi)重要的免疫效應(yīng)分子。人體血清中抗體的主要成分——免疫球蛋白G(Immunoglobulin G，IgG)由兩條重鏈和兩條輕
分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2020年2期2020-03-19
- 宿主抗病毒因子MARCH8 具有廣譜抗病毒囊膜糖蛋白成熟功能
初步高甘露糖N-糖鏈修飾。經(jīng)此修飾的病毒囊膜糖蛋白，進(jìn)入到高爾基體內(nèi)（一般在反式高爾基體）進(jìn)行復(fù)合型N-糖鏈修飾、雜合型N-糖鏈修飾和O-糖鏈修飾，完成病毒囊膜的糖基化修飾成熟。糖基化修飾成熟的病毒囊膜糖蛋白對(duì)于病毒毒力和逃避宿主免疫系統(tǒng)攻擊有重要作用。I-型病毒囊膜糖蛋白（如埃博拉病毒和人艾滋病病毒）在高爾基體內(nèi)完成糖基化成熟后，需要被宿主細(xì)胞蛋白裂解酶Furin（或者類(lèi)似于Furin 的細(xì)胞蛋白裂解酶）切割成兩個(gè)單體。兩個(gè)單體以二硫鍵連接形成異二聚體，
中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2020年10期2020-01-15
- 微量樣本中N-糖組分析技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用
備要求起始量高、糖鏈標(biāo)準(zhǔn)品缺少等原因，限制了糖組學(xué)的發(fā)展和應(yīng)用?，F(xiàn)階段，N-糖組學(xué)樣品制備的常規(guī)過(guò)程，需經(jīng)過(guò)蛋白的提取、變性、還原烷基化、蛋白消化、N-糖鏈的釋放及N-糖鏈的富集等多個(gè)步驟，容易造成糖鏈組分的損失。2014年Kulak等[9]研發(fā)了一種In-Stage Tip方法，用于在單個(gè)封閉空間內(nèi)中進(jìn)行蛋白樣品處理，該方法將樣品制備的多步驟合并成單一步驟用于蛋白質(zhì)組學(xué)的研究，在一定程度上降低了蛋白樣品制備的起始量。2016年Chen等介紹了一種簡(jiǎn)單和集
分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2019年12期2020-01-08
- 質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)糖基化研究中的應(yīng)用
基化位點(diǎn)的鑒定、糖鏈組成的解析及定量分析等方面。蛋白質(zhì)糖基化；質(zhì)譜技術(shù)；糖鏈；定性定量分析1 引言蛋白質(zhì)糖基化指單糖或寡糖與蛋白質(zhì)之間通過(guò)共價(jià)結(jié)合形成糖蛋白的過(guò)程，50%以上的蛋白質(zhì)存在糖基化現(xiàn)象[1]。根據(jù)蛋白質(zhì)被糖類(lèi)修飾形式的不同可以把蛋白質(zhì)糖基化分為四類(lèi)：O位糖基化、N位糖基化、C位糖基化及糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定連接。糖基化可改變分子結(jié)構(gòu)的特異性，影響細(xì)胞間的識(shí)別、黏附、代謝及免疫等過(guò)程，從而影響疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。例如N-聚糖上的末端殘基、唾
科技與創(chuàng)新 2019年15期2019-11-29
- 蛋白N-糖基化分析方法研究進(jìn)展
蛋白[6]。N-糖鏈在整個(gè)糖蛋白中只占很小的一部分，但是對(duì)整個(gè)糖蛋白的性質(zhì)影響巨大。關(guān)于N-糖基化的研究通?？梢詮娜齻€(gè)方面考量：①研究整體糖蛋白的糖鏈；②糖蛋白經(jīng)過(guò)酶切后，糖肽水平的研究；③經(jīng)過(guò)化學(xué)手段或酶切釋放寡糖鏈，對(duì)游離N-糖的研究，其中對(duì)酶切游離后N-糖鏈的研究也是最簡(jiǎn)單、高效的方法[7,8]。目前，N-糖鏈主要是用肽N-糖苷酶F(PNGase F)酶解[9]，得到游離的N-糖鏈，再結(jié)合毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis
生物技術(shù)進(jìn)展 2019年3期2019-05-28
- Ogataea minuta來(lái)源的內(nèi)切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的異源表達(dá)和純化
譯后修飾[1]，糖鏈對(duì)糖蛋白的生化性質(zhì)具有重要的作用。隨著糖組學(xué)的發(fā)展，對(duì)糖鏈結(jié)構(gòu)和功能的研究越來(lái)越多。然而，天然糖肽和糖蛋白上的糖鏈結(jié)構(gòu)復(fù)雜，并呈現(xiàn)多樣性，因而很難從中純化出帶有均一糖鏈的糖肽或糖蛋白[2]。目前，化學(xué)酶合成法尤其是利用內(nèi)切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶（ENGase）來(lái)合成此類(lèi)糖肽或糖蛋白是發(fā)展較快且具有實(shí)踐意義的方法[3]。ENGase（EC 3.2.1.96）是一類(lèi)糖苷酶，其可以水解N糖鏈上兩個(gè)N-乙酰葡糖胺 （GlcNAc）之間的β-
食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào) 2018年12期2019-01-03
- 人血漿N-糖鏈超高效液相色譜檢測(cè)方法的優(yōu)化
5)人體血漿N-糖鏈結(jié)構(gòu)和含量會(huì)因人體健康狀況而異，因此血漿中N-糖鏈成為臨床上診斷和監(jiān)測(cè)多種疾病發(fā)生和發(fā)展的新的重要標(biāo)志物。研究表明，N-糖鏈結(jié)構(gòu)和含量的改變與疾病，例如炎癥反應(yīng)和癌癥等密切相關(guān)[1 - 3]。人血漿中的N-糖鏈結(jié)構(gòu)具有多樣性，以復(fù)雜型N-糖鏈為主，也含有少量高甘露糖型和雜合型糖鏈。人血漿樣品中的N-糖鏈富含末端唾液酸修飾。但唾液酸的性質(zhì)不穩(wěn)定，容易在酸堿條件下解離[4]。目前除了直接使用質(zhì)譜分析，國(guó)內(nèi)外糖蛋白N-糖鏈的分析多采用液相色譜
分析科學(xué)學(xué)報(bào) 2018年6期2018-12-25
- 植物N-糖鏈檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展
T)過(guò)程中，N-糖鏈合成異?？捎绊懪咛サ陌l(fā)育[4]；唾液酸化的N-糖基化對(duì)于腦發(fā)育和乳腺癌的發(fā)生發(fā)展具有重要影響[4]。植物N-糖基化的研究相對(duì)較少，但近年來(lái)也得到了研究人員的重視。在植物中，N-糖基化對(duì)于細(xì)胞壁的形成[5]、生殖發(fā)育[6]和抵御病原菌入侵[7]等諸多生理過(guò)程具有重要意義。如擬南芥突變體lew3(leafwilting3)中編碼α-1,2-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶ALG11的LEW3基因缺失會(huì)導(dǎo)致纖維素合成受損進(jìn)而影響細(xì)胞壁的形成[8]；擬南芥N-糖
生物技術(shù)進(jìn)展 2018年6期2018-11-28
- 基于Endo-M N175Q糖鏈轉(zhuǎn)移反應(yīng)與丙酮富集糖肽的LC-MS分析糖蛋白N-糖鏈
生和發(fā)展均與N-糖鏈結(jié)構(gòu)和表達(dá)量的改變有關(guān)[5-6]。因此，建立糖蛋白中N-糖鏈的分析方法對(duì)尋求疾病中有效的生物信息具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。糖蛋白N-糖鏈的常用分析過(guò)程為：首先用蛋白酶(如N-糖苷酶F)釋放糖蛋白的糖鏈，獲得糖鏈與蛋白混合物，然后對(duì)糖鏈進(jìn)行富集純化，最后對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。生物質(zhì)譜可對(duì)各種糖鏈進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，是解決糖鏈結(jié)構(gòu)的有效手段。糖鏈結(jié)構(gòu)研究中，采用電噴霧離子化-質(zhì)譜(ESI-MS)技術(shù)無(wú)需衍生化即能確定糖鏈的組成和結(jié)構(gòu)，但易受樣品盒溶劑中干擾
分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2018年11期2018-11-21
- 膀胱癌細(xì)胞YTS-1的條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)膀胱上皮細(xì)胞HCV29發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和糖鏈表達(dá)變化
變。黏蛋白類(lèi)O-糖鏈的大量表達(dá)會(huì)導(dǎo)致結(jié)腸癌病人的不良預(yù)后并且使細(xì)胞發(fā)生EMT轉(zhuǎn)化[4]。本實(shí)驗(yàn)室前期的研究發(fā)現(xiàn)了小鼠乳腺上皮細(xì)胞NMuMG經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)的誘導(dǎo)能發(fā)生EMT過(guò)程，從而導(dǎo)致細(xì)胞高表達(dá)高甘露糖型以及唾液酸型N-糖鏈[5]。癌癥的發(fā)生通常受到腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞間信息傳遞的影響，腫瘤細(xì)胞能夠通過(guò)傳遞DNA，microRNA，mRNA，脂質(zhì)以及與侵襲相關(guān)的蛋白等來(lái)改變正常細(xì)胞的
生物學(xué)雜志 2018年5期2018-10-15
- 骨髓基質(zhì)細(xì)胞中MGAT3催化的平分型N-糖鏈對(duì)血液細(xì)胞黏附和遷移的影響
AT3，是與N-糖鏈合成或分解代謝相關(guān)的基因。前期研究表明，HS5比HS27a中表達(dá)高水平的MGAT3，MGAT3能催化生成以β-1,4 鍵連接于N-糖鏈β-Man上的平分型GlcNAc[10](圖1)。推測(cè)HS5比HS27a表達(dá)更多的平分型N-糖鏈。蛋白質(zhì)上的平分型N-糖鏈糖基化修飾對(duì)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞黏附、細(xì)胞遷移等生物過(guò)程都有重要影響[11]。MGAT3 催化生成的平分型N-糖鏈能夠抑制細(xì)胞生長(zhǎng)因子途徑，如Ras 信號(hào)途徑，從而抑制腫瘤的增長(zhǎng)和遷移
生物學(xué)雜志 2018年5期2018-10-15
- 布氏錐蟲(chóng)來(lái)源內(nèi)切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的異源表達(dá)和活性鑒定
修飾的重要環(huán)節(jié)，糖鏈對(duì)于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能具有重要的影響[1]。目前在醫(yī)藥用的蛋白中，70%以上都是糖蛋白。藥用糖蛋白表面的糖鏈具有改善藥物在體內(nèi)的穩(wěn)定性，增強(qiáng)藥物的靶向性等功能[2]。然而，目前生產(chǎn)出來(lái)的重組藥用糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的非均一性造成了藥效下降及批次間不一致，甚至產(chǎn)生免疫副反應(yīng)，這些都嚴(yán)重影響了藥用糖蛋白的臨床應(yīng)用[3]。因此，如何生產(chǎn)糖鏈結(jié)構(gòu)均一的糖蛋白十分重要[4]。目前糖苷內(nèi)切酶催化的轉(zhuǎn)糖基作用對(duì)于生產(chǎn)均一糖鏈的糖蛋白是一種重要的手段。ENG
食品與發(fā)酵工業(yè) 2018年8期2018-09-06
- 基于生物質(zhì)譜技術(shù)解析食源性糖蛋白糖基化位點(diǎn)的研究進(jìn)展
白是蛋白質(zhì)分子和糖鏈通過(guò)糖苷鍵相連的一類(lèi)復(fù)合物[1],廣泛存在于動(dòng)物的體細(xì)胞和植物的細(xì)胞壁、細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中。糖蛋白因具有多糖和蛋白質(zhì)的部分性質(zhì),部分糖蛋白可以溶于水、酸、堿、鹽溶液和有機(jī)溶劑中。隨著對(duì)糖蛋白研究不斷深入,糖蛋白被定義為由比較短并且一般帶有分支的寡糖鏈和多肽在糖苷轉(zhuǎn)移酶的作用下,通過(guò)糖苷鍵共價(jià)連接所形成的結(jié)合蛋白[2]。糖蛋白是生物體內(nèi)重要的生物大分子,可以參與細(xì)胞膜的形成,作為識(shí)別位點(diǎn)參與細(xì)胞間信息交流,同時(shí)還是抗體的重要組成成分[3]。
食品工業(yè)科技 2018年14期2018-08-04
- 雙重衍生化-質(zhì)譜法同時(shí)分析檢測(cè)人血清中酸性與中性N-糖鏈
互作用等。因此，糖鏈分析至關(guān)重要[3 - 4]。根據(jù)糖基化位點(diǎn)以及糖類(lèi)物質(zhì)與蛋白質(zhì)之間連接方式的不同，可將糖蛋白中糖鏈的構(gòu)成類(lèi)型主要分為兩大類(lèi)：N-糖鏈與O-糖鏈。目前已發(fā)現(xiàn)N-糖基化異常與許多重大疾病，如癌癥、心血管疾病等均有密切關(guān)系[5 - 6]，研究N-糖鏈的結(jié)構(gòu)變化對(duì)于闡明糖鏈在疾病發(fā)生與發(fā)展中的作用，尋找疾病標(biāo)志物進(jìn)而實(shí)現(xiàn)疾病的早期診斷治療乃至藥物的研發(fā)具有重要意義。復(fù)雜生物基質(zhì)中糖鏈相對(duì)豐度較低，且由于糖鏈本身結(jié)構(gòu)復(fù)雜、無(wú)法擴(kuò)增、離子化效率低[
分析科學(xué)學(xué)報(bào) 2018年2期2018-05-05
- 唾液糖蛋白糖鏈和腫瘤
變化的唾液糖蛋白糖鏈中找到的與疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物，也預(yù)示著基于唾液檢測(cè)的新技術(shù)和新方法會(huì)逐漸成為今后非侵襲性臨床診斷發(fā)展的一個(gè)方向[8-11]。1 唾液作為診斷介質(zhì)的優(yōu)勢(shì)和可行性人體唾液由腮腺、下頜下腺、舌下腺和其他一些小腺體分泌，正常人分泌唾液中水分占九成以上，此外還包含黏多糖、脂類(lèi)、礦物質(zhì)和其他小分子物質(zhì)與黏蛋白、球蛋白、抑制和消滅細(xì)菌和病毒的免疫球蛋白等蛋白質(zhì)。唾液能起到維持口腔內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、潤(rùn)滑口腔壁、方便咀嚼、發(fā)聲和吞咽的作用。唾液總量和組成上的
中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志 2018年1期2018-01-16
- 糖鏈能使腫瘤增大
分子PECAM的糖鏈“α2,6-唾液酸”可以調(diào)節(jié)腫瘤血管生成，從而促使腫瘤增大。腫瘤會(huì)釋放血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF），在腫瘤內(nèi)部形成新的血管，從而獲得氧和營(yíng)養(yǎng)成分，增加細(xì)胞數(shù)量，使腫瘤進(jìn)一步增大。迄今為止，雖然開(kāi)發(fā)了以血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體路徑為目標(biāo)的血管新生抑制劑作為抗癌藥物，但僅對(duì)原發(fā)癌有效，對(duì)癌轉(zhuǎn)移沒(méi)有效果。血管新生抑制劑難以獲得療效的原因之一，是低氧微環(huán)境下腫瘤的代謝經(jīng)過(guò)再編程適應(yīng)低氧低糖的新環(huán)境，使得腫瘤繼續(xù)增大。血管內(nèi)皮細(xì)胞是構(gòu)成血管內(nèi)腔側(cè)
醫(yī)藥前沿 2018年30期2018-01-16
- 膀胱癌臨床血清樣本N-連接糖鏈的表達(dá)分析
血清樣本N-連接糖鏈的表達(dá)分析王雯雯1，孫承文2，楊剛龍1，關(guān) 鋒1(1. 江南大學(xué) 生物工程學(xué)院 糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 無(wú)錫 214122； 2. 江南大學(xué) 附屬醫(yī)學(xué)院泌尿科， 無(wú)錫 214122)膀胱癌是發(fā)生在膀胱黏膜上的惡性腫瘤，是最常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)腫瘤之一。國(guó)內(nèi)外研究表明糖鏈表達(dá)的異常改變與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移緊密關(guān)聯(lián)。分析膀胱癌臨床樣本糖鏈的表達(dá)變化可以為膀胱癌研究提供有效的分析手段，有助于發(fā)現(xiàn)潛在的臨床早期診斷標(biāo)志物。首先利用乙酰
生物學(xué)雜志 2017年5期2017-10-16
- 低氧誘導(dǎo)引發(fā)乳腺腫瘤細(xì)胞MDA-MB-231 N-糖鏈表達(dá)差異研究
B-231 N-糖鏈表達(dá)差異研究王晨星， 郭 佳， 楊剛龍， 劉昌梅， 關(guān) 鋒(江南大學(xué) 生物工程學(xué)院 糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 無(wú)錫 214122)低氧是腫瘤組織中常見(jiàn)的病理現(xiàn)象之一，低氧微環(huán)境能改變細(xì)胞內(nèi)葡萄糖代謝途徑，增加胞內(nèi)葡萄糖攝取，提高核苷酸糖含量。以人源惡性乳腺腫瘤細(xì)胞MDA-MB-231為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)低氧培養(yǎng)較常氧培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)呈纖維化，細(xì)胞遷移能力提高，上皮細(xì)胞標(biāo)志物β-catenin表達(dá)下調(diào)，間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物fibronect
生物學(xué)雜志 2017年5期2017-10-16
- 基于結(jié)構(gòu)糖組學(xué)的食源性糖蛋白研究進(jìn)展
的重要化合物,其糖鏈結(jié)構(gòu)復(fù)雜,功能多樣,在生物體內(nèi)參與多種細(xì)胞活動(dòng)。糖組學(xué)是繼基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)后又一新興領(lǐng)域,而結(jié)構(gòu)糖組學(xué)作為糖組學(xué)的重要組成部分,主要用于分析糖蛋白的結(jié)構(gòu)。本文介紹利用結(jié)構(gòu)糖組學(xué)相關(guān)技術(shù)在食源性糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)以及糖基化位點(diǎn)研究中的應(yīng)用,旨在為結(jié)構(gòu)糖組學(xué)在糖蛋白結(jié)構(gòu)解析中的廣泛應(yīng)用提供依據(jù)。糖蛋白,糖鏈,糖組學(xué),結(jié)構(gòu)糖組學(xué)聚糖是第三類(lèi)生物信息大分子,其較高的復(fù)雜性取決于組成聚糖的單糖種類(lèi)繁多并且每種單糖都有各種形式的異構(gòu)體以及不同的糖苷
食品工業(yè)科技 2017年12期2017-07-05
- 食源性糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的研究進(jìn)展
2)食源性糖蛋白糖鏈結(jié)構(gòu)的研究進(jìn)展趙文竹1,張宏玲1,陳月皎1,于志鵬1,*,馬 勇1,劉靜波2,勵(lì)建榮1,*(1.渤海大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,生鮮農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工及安全控制技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心,遼寧錦州 121013;2.吉林大學(xué)營(yíng)養(yǎng)與功能食品研究室,吉林長(zhǎng)春 130062)糖蛋白作為一種結(jié)合蛋白質(zhì),是由寡糖鏈與蛋白質(zhì)共價(jià)相連構(gòu)成的分子,具有多種生物活性。糖鏈作為糖蛋白的組成部分,發(fā)揮重要生理活性,影響糖蛋白的構(gòu)象并且參與糖蛋白生理功能。文章綜述了
食品工業(yè)科技 2017年6期2017-04-14
- 多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片在卵巢癌診斷中的應(yīng)用
果。結(jié)果 觀(guān)察組糖鏈抗原125（CA125）、糖鏈抗原242（CA242）、人附睪蛋白4（HE4）、癌胚抗原（CEA）、和糖鏈抗原199（CA199）的檢測(cè)水平均高于對(duì)照組，兩組之間差異顯著具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；多腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行聯(lián)合診斷的卵巢癌準(zhǔn)確度均高于單項(xiàng)指標(biāo)。結(jié)論 多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測(cè)對(duì)于卵巢癌患者的診斷具有一定的臨床價(jià)值，能夠有效的避免以及減少卵巢癌的臨床誤診及漏診率，幫助患者得到快速確診。多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片；卵巢癌；診斷價(jià)值1 資
臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)雜志(電子版) 2017年6期2017-03-07
- 舌癌臨床樣本N-連接糖鏈的表達(dá)分析
臨床樣本N-連接糖鏈的表達(dá)分析郭 輝1，張 健3，楊剛龍2，黃如今2，郭 佳2(1.江南大學(xué) 無(wú)錫醫(yī)學(xué)院，無(wú)錫 214122; 2.江南大學(xué) 糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，無(wú)錫 214122; 3.南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫二院 口腔科，無(wú)錫 214122)從糖組學(xué)角度分析健康志愿者和舌癌患者血清中差異表達(dá)的N-連接糖鏈，找出與舌癌密切相關(guān)的N-連接糖鏈結(jié)構(gòu)，為舌癌早期診斷、治療及預(yù)后提供參考依據(jù)。以臨床血清樣品為研究材料，采用濾膜分離全糖蛋白N-連接糖鏈法
生物學(xué)雜志 2016年6期2016-12-22
- 糖類(lèi)化合物PMP衍生分析進(jìn)展
析以及在N/O-糖鏈的釋放和定量分析等方面的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行了綜述。1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)；衍生化方法；糖類(lèi)分析；綜述生物體內(nèi)的糖類(lèi)物質(zhì)已被證明具有抗腫瘤、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等重要的生物活性，對(duì)糖類(lèi)進(jìn)行定性定量分析研究有助于探索糖類(lèi)生物學(xué)功能以及相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理[1]。然而由于糖類(lèi)物質(zhì)極性大，缺乏光學(xué)吸收基團(tuán)，無(wú)法滿(mǎn)足高靈敏度分析手段的檢測(cè)要求，糖類(lèi)分析手段成為制約整個(gè)糖類(lèi)研究領(lǐng)域發(fā)展的瓶頸[2]。衍生化可使糖鏈帶上紫外或熒光基團(tuán)，在滿(mǎn)足高靈
分析測(cè)試學(xué)報(bào) 2016年3期2016-12-20
- 植物蛋白質(zhì)N-糖基化修飾研究進(jìn)展*
的糖基化修飾是指糖鏈與蛋白質(zhì)上特定氨基酸殘基共價(jià)結(jié)合的過(guò)程.根據(jù)連接方式,主要分為N-糖基化、O-糖基化、C-糖基化及糖基磷脂酰肌醇錨定連接4種類(lèi)型[3-5].N-糖基化是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum,ER)上糖基轉(zhuǎn)移酶催化轉(zhuǎn)移至新生肽Asn-X-Ser/Thr(X是除脯氨酸Pro外的任一氨基酸；Asn為天冬酰胺；Ser為絲氨酸；Thr為蘇氨酸)基序的Asn殘基,是蛋白質(zhì)糖基化修飾的重要形式,胞外分泌蛋白、膜整合蛋白及構(gòu)成內(nèi)膜系統(tǒng)的
- 花生致敏糖蛋白Ara h1糖鏈決定簇的質(zhì)譜分析
蛋白Ara h1糖鏈決定簇的質(zhì)譜分析彭藝芳, 王承健, 王晶晶, 李玲梅, 晉萬(wàn)軍, 強(qiáng)珊, 師紅丹,張英, 黃琳娟, 王仲孚(西部資源生物與現(xiàn)代生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 陜西省生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 西安 710069)以花生種子總蛋白及其主要致敏糖蛋白Ara h1為研究對(duì)象, 采用“一釜法”對(duì)蛋白上的糖鏈進(jìn)行釋放并同時(shí)進(jìn)行衍生化標(biāo)記, 通過(guò)C18固相萃取柱純化, 以電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)、 多級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜(MSn)和親水性液相色
高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào) 2016年9期2016-11-03
- 微量生物樣品中糖蛋白N-糖鏈電噴霧電離質(zhì)譜分析前處理方法的建立
樣品中糖蛋白N-糖鏈電噴霧電離質(zhì)譜分析前處理方法的建立張 英 劉 影 劉 洋 強(qiáng) 珊 楊冰瑩 黃琳娟 王仲孚*（西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，西安 710069）基于電噴霧電離質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)，建立了一種可靠、高效、簡(jiǎn)單，適合于微量糖蛋白N-糖鏈解離、富集純化的方法。以糖蛋白牛胰核糖核酸酶（Rib B）和卵清白蛋白（OVA）為模型蛋白直接酶解，比較了4種方法純化酶解樣品的效果。比較了直接酶解和經(jīng)過(guò)聚偏氟乙烯（PVDF）膜富集后酶解微量復(fù)雜生物來(lái)源樣品胎牛血清的酶解效果
分析化學(xué) 2016年2期2016-11-01
- 甾體糖苷抗腫瘤活性構(gòu)效關(guān)系研究
甾體糖苷的苷元和糖鏈結(jié)構(gòu)對(duì)其抗腫瘤活性的影響,采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法測(cè)定了五種結(jié)構(gòu)相關(guān)的甾體糖苷薯蕷皂苷、纖細(xì)皂苷、邊緣茄堿、澳洲茄堿和查茄堿對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(Hela細(xì)胞)、人肝癌細(xì)胞(H7402細(xì)胞)和小鼠成纖維細(xì)胞(L929細(xì)胞)增殖的影響,隨后測(cè)定了化學(xué)修飾的6-O-雙硫酸茄堿、6-O-硫酸查茄堿和全乙酰化查茄堿對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-8細(xì)胞)增殖的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),以查茄三糖為糖鏈的薯蕷皂苷、邊緣茄堿和查茄堿抗增殖活性明顯高于以其它三糖為糖鏈的纖
食品工業(yè)科技 2016年11期2016-09-10
- N-糖鏈切除對(duì)重組抗狂犬病毒單克隆抗體中和活性的影響
50015?N-糖鏈切除對(duì)重組抗狂犬病毒單克隆抗體中和活性的影響呂若蕓§,王輝§,陳忱,張世雄,張曉楠,曹晨華,魏敬雙*華北制藥集團(tuán)新藥研究開(kāi)發(fā)有限責(zé)任公司, 抗體藥物研制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 石家莊 050015重組抗狂犬病毒單克隆抗體是一種全人源的抗病毒感染單抗，主要用于狂犬病毒暴露后預(yù)防。采用糖苷酶處理2種重組抗狂犬病毒單克隆抗體Mab1、Mab2水解切除N-糖鏈，通過(guò)糖染色和毛細(xì)管電泳檢測(cè)確定N-糖鏈酶解程度，利用快速熒光灶抑制試驗(yàn)檢測(cè)其中和活性，分析
生物技術(shù)進(jìn)展 2016年4期2016-08-15
- 新型核殼型親水聚合物-硅膠雜化填料的合成及其在蛋白質(zhì)N-糖鏈富集中的應(yīng)用
2］。蛋白質(zhì)N-糖鏈的組成和結(jié)構(gòu)對(duì)糖基化蛋白質(zhì)的構(gòu)象、功能以及與其他生物分子的相互作用都具有巨大的影響。大量研究表明，多種疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中都伴隨著蛋白質(zhì)N-糖鏈組成和結(jié)構(gòu)的改變，如腫瘤、自身免疫疾病、糖尿病等［3，4］。因此，發(fā)展高通量、高靈敏度的蛋白質(zhì)N-糖鏈鑒定技術(shù)對(duì)于闡明糖鏈在各個(gè)生理過(guò)程和疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用以及篩選臨床診斷標(biāo)志物尤為重要。但是N-糖鏈本身含量有限，并具有高度微不均一性，同時(shí)質(zhì)譜分析信號(hào)易受高豐度蛋白質(zhì)、肽段、核酸及鹽類(lèi)等的
色譜 2015年3期2015-12-26
- 新型N-糖鏈受體氘代MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc的合成及其受體性能
02 )新型N-糖鏈受體氘代MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc的合成及其受體性能于田， 金東日*( 延邊大學(xué)長(zhǎng)白山生物資源與功能分子教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 吉林 延吉 133002 )為利用糖鏈轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)定量分析糖蛋白N-糖鏈，首先用d8-1-甲基-4-[2,4-二硝基-5-(1-哌嗪基)苯基]哌嗪(d8-PDPZ)與Nω-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基)-Nα-(叔丁氧羰基)-L-天冬酰胺(Boc-Asn-GlcNAc)縮合反應(yīng)生成d8
- 鐵過(guò)載引發(fā)人肝細(xì)胞HH4 N-糖鏈表達(dá)差異研究
細(xì)胞HH4 N-糖鏈表達(dá)差異研究李士偉1,2，關(guān) 鋒1,2，李 想3（1.江南大學(xué)糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇無(wú)錫214122 2.江南大學(xué)生物工程學(xué)院，江蘇無(wú)錫214122 3.江南大學(xué)無(wú)錫醫(yī)學(xué)院，江蘇無(wú)錫214122）肝臟鐵過(guò)載是血液系統(tǒng)疾病患者進(jìn)行骨髓移植后的典型并發(fā)癥之一，長(zhǎng)期鐵過(guò)載可引發(fā)肝臟細(xì)胞凋亡和器官損壞，然而鐵過(guò)載的分子調(diào)控機(jī)理迄今仍不清楚。以培養(yǎng)的枸櫞酸鐵銨過(guò)載人肝細(xì)胞HH4和正常人肝細(xì)胞HH4為研究對(duì)象，細(xì)胞裂解提取總蛋白，分
生物學(xué)雜志 2015年3期2015-06-09
- 糖蛋白糖基化位點(diǎn)及糖型的多重質(zhì)譜分析
為SRNLTK、糖鏈結(jié)構(gòu)為（HexNAc）2（Hex）5（HexNAc）2（Hex）9及糖基化位點(diǎn)為第34位氨基酸殘基。本方法為糖蛋白結(jié)構(gòu)的全面解析提供了一種快速、有效、全面的研究思路。關(guān)鍵詞 基質(zhì)輔助激光解吸電離串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜； 傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜； 碰撞活化解離； 電子捕獲解離； 核糖核酸酶B1 引 言蛋白質(zhì)的糖基化是糖鏈在糖基轉(zhuǎn)移酶作用下結(jié)合到蛋白質(zhì)特定氨基酸殘基上[1]，是蛋白質(zhì)的一種重要的翻譯后修飾方式[2]。目前， 已知哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)
分析化學(xué) 2015年4期2015-06-08
- 異常糖鏈糖蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及檢測(cè)進(jìn)展
)?·綜述·異常糖鏈糖蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及檢測(cè)進(jìn)展邴振，盧愿，孫立榮，仲任(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院血液兒科，山東 青島 266003)異常糖鏈糖蛋白是蛋白質(zhì)糖基化異?！堑鞍?span id="j5i0abt0b" class="hl">糖鏈結(jié)構(gòu)或糖基轉(zhuǎn)移酶活性的變化而形成的，蛋白質(zhì)翻譯后加工修飾異常與疾病發(fā)生、發(fā)展存在密切關(guān)系，而在多種多樣的蛋白質(zhì)翻譯后加工中，糖基化修飾是最普遍的一種，糖基化生物合成狀態(tài)比蛋白質(zhì)的改變能更有效地提示疾病狀態(tài)。因此，異常糖鏈糖蛋白檢測(cè)使腫瘤在發(fā)生早期即可作出診斷，并為疾病進(jìn)展
精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)雜志 2015年2期2015-04-17
- ldlD-14細(xì)胞表達(dá)NCAM并控制其N(xiāo)-聚糖合成的細(xì)胞模型的建立
縱NCAM分子上糖鏈的修飾，為后期研究糖基化對(duì)NCAM分子功能的影響提供工作基礎(chǔ)。糖鏈，神經(jīng)細(xì)胞黏附分子，轉(zhuǎn)染，多聚唾液酸，ldlD-14細(xì)胞糖生物學(xué)是21世紀(jì)生命科學(xué)的前沿和熱點(diǎn)領(lǐng)域之一，其核心內(nèi)容是揭示細(xì)胞糖鏈的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能。糖鏈作為生物信息分子參與細(xì)胞生物幾乎所有的生命過(guò)程，特別是在細(xì)胞分化、發(fā)育、免疫、老化、癌變、信號(hào)傳遞等生命和疾病過(guò)程中起著重要作用。糖生物學(xué)研究的對(duì)象之一是發(fā)生了糖基化修飾的糖蛋白。糖蛋白上的糖鏈主要是通過(guò)兩種糖基化形式形成
生物工程學(xué)報(bào) 2014年6期2014-09-16
- 巴戟天糖鏈對(duì)骨骼肌成肌細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的影響
0052)巴戟天糖鏈是巴戟天醇提物水溶性部分中的主要有效成分，研究發(fā)現(xiàn)在經(jīng)典成骨誘導(dǎo)組(地塞米松、維生素C和β-甘油磷酸鈉)中使用巴戟天水提取物和巴戟天醇提取物含藥血清能顯著促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化作用〔1〕。但巴戟天寡糖對(duì)成肌細(xì)胞增殖分化的研究，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)研究巴戟天糖鏈誘導(dǎo)成肌細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的作用及機(jī)制。1 材料與方法1.1動(dòng)物、藥品與試劑、儀器 新生1～3 d SD大鼠(合格證號(hào)：410116)，雌雄不限，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提
中國(guó)老年學(xué)雜志 2014年23期2014-09-13
- 卵粘蛋白的糖鏈解析及構(gòu)效關(guān)系研究進(jìn)展
修飾。糖蛋白上的糖鏈是重要的信息分子，承載著數(shù)倍于核酸蛋白的生物信息，因而其被認(rèn)為是繼核酸鏈與蛋白質(zhì)鏈之后，與生命活動(dòng)息息相關(guān)的第三鏈。雞蛋中的卵粘蛋白就是一種糖基化程度超過(guò)30%的高分子量硫酸酯糖蛋白。1898年Eichlolz首次從雞蛋蛋清中分離出卵粘蛋白[1]。卵粘蛋白主要分布在禽蛋蛋清中，占蛋清總蛋白質(zhì)含量的2%～4%[2]，此外，在系帶和卵黃膜外層中也有分布。蛋清中的卵粘蛋白與溶菌酶和其它蛋白質(zhì)等形成復(fù)合物而存在[3-4]。卵粘蛋白對(duì)維持蛋清粘稠
食品研究與開(kāi)發(fā) 2014年12期2014-07-26
- 糖組學(xué)研究技術(shù)進(jìn)展
組的分離與純化、糖鏈組的分離和富集糖鏈的結(jié)構(gòu)解析和定量以及糖鏈的性質(zhì)和功能研究。根據(jù)糖蛋白組、蛋白聚糖組和糖脂組生物化學(xué)性質(zhì)的不同,可相應(yīng)采用分步沉淀法、硼酸親和法、二氧化鈦法、親和層析法、體積排阻法、凝膠過(guò)濾層析和柱層析法等進(jìn)行分離與純化,進(jìn)而通過(guò)植物凝集素、親水色譜和固相萃取等技術(shù)富集高純度且特異性的糖鏈。通過(guò)凝集素芯片技術(shù)、各種生物質(zhì)譜及其聯(lián)用并輔以糖鏈的衍生化標(biāo)記對(duì)糖鏈進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析,并用同位素標(biāo)記法和代謝標(biāo)記法對(duì)糖鏈進(jìn)行相對(duì)定量。最后,借助糖鏈結(jié)構(gòu)
中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志 2014年6期2014-03-22
- 流感病毒蛋白糖基化及其功能研究進(jìn)展
毒與宿主細(xì)胞表面糖鏈受體之間結(jié)合能力和特異性的功能[2-3]。1.1血凝素糖蛋白1.1.1HA的糖鏈受體結(jié)合特異性 HA是流感病毒最重要的表面糖蛋白，由病毒RNA 片段4 編碼，在病毒表面以三聚體的形式存在，包括胞內(nèi)尾巴、穿膜區(qū)、頸部和頭部4部分[4]。HA遠(yuǎn)膜端三聚體球形頭部的受體結(jié)合位點(diǎn)(receptor binding site，RBS)識(shí)別宿主細(xì)胞膜上的糖蛋白或糖脂糖鏈末端的唾液酸(sialic acid，SA)多糖受體并與之相結(jié)合是A型流感病毒接
中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào) 2014年12期2014-01-28
- 糖組學(xué)在生命科學(xué)及體育科學(xué)的研究述評(píng)
指的是細(xì)胞中全部糖鏈及相關(guān)糖基復(fù)合物。而糖組學(xué)(Glycomics)是專(zhuān)門(mén)研究糖鏈表達(dá)、調(diào)控和生理學(xué)功能的一門(mén)科學(xué)，主要研究糖蛋白的空間結(jié)構(gòu)，確定糖蛋白的編碼基因，分析探明相關(guān)蛋白質(zhì)糖基化的內(nèi)部機(jī)制［1－2］。牛津大學(xué)教授Dwek于1988年首次提出糖生物學(xué)的概念并由此產(chǎn)生了糖生物學(xué)是糖組學(xué)的基礎(chǔ)研究部分，近年來(lái)該學(xué)科在糖鏈的結(jié)構(gòu)、生物合成、生理功能等方面取得了巨大進(jìn)展。日本學(xué)者的研究在尋找糖鏈合成的酶基因并解析糖鏈的功能方面取得了顯著成果，美國(guó)學(xué)者在糖組
和田師范專(zhuān)科學(xué)校學(xué)報(bào) 2013年2期2013-08-15
- 毛冬青中三萜皂苷類(lèi)化合物的提取分離及電噴霧多級(jí)質(zhì)譜快速分析研究
青中三萜皂苷按其糖鏈結(jié)構(gòu)主要分為C-3單糖鏈皂苷和C-3，28雙糖鏈皂苷。單糖鏈皂苷的二級(jí)質(zhì)譜中主要給出C-3位糖鏈依次脫去單糖基的碎片離子，而雙糖鏈皂苷則優(yōu)先在C-28位發(fā)生各單糖基的順序斷裂，脫去整個(gè)C-28位糖鏈后形成的離子峰為基峰，以之為母離子繼續(xù)進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)則出現(xiàn)C-3位糖鏈的斷裂［12］。表2給出了本研究檢測(cè)到的各皂苷成分在負(fù)離子模式下的多級(jí)質(zhì)譜中主要碎片離子的質(zhì)量數(shù)。根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道［3-10］，確定組分Ⅰ中含有 ilexo
天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā) 2013年3期2013-05-17
- 機(jī)械牽張力對(duì)人成骨樣細(xì)胞糖鏈影響的初步研究
中差異表達(dá)糖蛋白糖鏈，從而分析糖蛋白糖鏈在不同加載時(shí)長(zhǎng)情況下與骨改建中細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系。1 材料和方法1.1 主要材料和儀器人成骨肉瘤 MG－63細(xì)胞(ATCC，MI，美國(guó));MEM(北京賽默飛世爾公司);胎牛血清(北京民海生物公司);6孔彈性基底膜培養(yǎng)板(Flexcell，美國(guó));BCA蛋白定量試劑盒(武漢博士德公司);Cy3熒光染料(Amerhsma公司，美國(guó));76 mm×25 mm×1 mm玻璃片基(Gold Seal公司);37種凝集素(表1)
牙體牙髓牙周病學(xué)雜志 2012年2期2012-11-05
- 應(yīng)用凝集素芯片檢測(cè)細(xì)胞膜表面糖鏈種屬特異性
否具有相同類(lèi)型的糖鏈這方面報(bào)道尚不多。凝集素（lectin）是一類(lèi)糖結(jié)合蛋白，能專(zhuān)一地識(shí)別單糖或寡糖中特定的糖基序列并與之結(jié)合，常用于寡糖和糖復(fù)合物的分離純化和糖鏈的結(jié)構(gòu)分析[2]。在本研究中，我們用構(gòu)建的凝集素芯片分別對(duì)小鼠和兔的細(xì)胞膜表面糖鏈類(lèi)型進(jìn)行了檢測(cè)，提取相同組織細(xì)胞并進(jìn)行熒光標(biāo)記，利用凝集素與糖鏈的親和性捕獲細(xì)胞，激光掃描儀掃描檢測(cè)捕獲細(xì)胞的凝集素位點(diǎn)，根據(jù)捕獲得到的細(xì)胞膜表面糖鏈與凝集素特異親和性的不同確定不同組織細(xì)胞膜的糖鏈類(lèi)型[3]，以探
中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù) 2011年1期2011-06-08
- 昆蟲(chóng)與哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì) N-糖基化修飾異同的比較及其潛在的應(yīng)用意義
端的雜合型 N-糖鏈構(gòu)型,而昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)的糖蛋白糖鏈具有非常簡(jiǎn)單的側(cè)鏈,是低甘露糖型,并且含有對(duì)人類(lèi)具有過(guò)敏反應(yīng)［7］的核心 α-1,3連接的巖藻糖。這些糖鏈結(jié)構(gòu)的差異,極大地限制了昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在人類(lèi)醫(yī)藥上的應(yīng)用。因此,正確認(rèn)識(shí)、分析比較昆蟲(chóng)與哺乳動(dòng)物的蛋白質(zhì) N-糖基化修飾途徑及其分子機(jī)制的不同,對(duì)改造昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)糖基化修飾途徑,表達(dá)人源化糖蛋白具有非常重要的必要性。本文對(duì)昆蟲(chóng)與哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì) N-糖基化修飾途徑中的糖鏈修飾的起始、核心糖
中國(guó)蠶業(yè) 2011年2期2011-02-10
- 仿刺參皂苷類(lèi)化合物的電噴霧負(fù)離子質(zhì)譜裂解規(guī)律研究
鍵,然后連續(xù)丟失糖鏈的末端單糖,最后生成苷元的特征碎片離子m/z423,這些特征有助于皂苷類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)解析。仿刺參;皂苷;質(zhì)譜;裂解規(guī)律海參皂苷是棘皮動(dòng)物海參體內(nèi)所特有的一類(lèi)三萜皂苷,由苷元和寡糖鏈兩部分組成,苷元均為羊毛甾烷的衍生物,寡糖鏈一般由2～6個(gè)單糖組成,常見(jiàn)的單糖有木糖(Xyl)、奎諾糖(Qui)、葡萄糖(Glc)、甲基葡萄糖(MeGlc)和甲基木糖(MeXyl),其化學(xué)結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,且呈現(xiàn)多樣性[1]。研究表明,海參皂苷具有抗真菌、抗病毒、細(xì)
質(zhì)譜學(xué)報(bào) 2011年2期2011-02-02
- 基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜和電噴霧電離質(zhì)譜在辣根過(guò)氧化物酶糖肽結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用
海200032)糖鏈結(jié)構(gòu)的質(zhì)譜解析是今后糖蛋白分析中的重要研究?jī)?nèi)容,其中完整糖肽的分析,由于可以同時(shí)獲得糖基化位點(diǎn)和對(duì)應(yīng)糖鏈的結(jié)構(gòu)信息,更具有重要意義和研究前景。本工作對(duì)質(zhì)譜軟電離技術(shù)在完整糖肽分析中的應(yīng)用進(jìn)行了研究,其中包括了基質(zhì)輔助激光解吸電離(matrix-assisted laser desorption ionization,MALD I)和電噴霧電離(electrosp ray ionization,ESI)技術(shù)。通過(guò)平行使用兩種串聯(lián)質(zhì)譜(ta
色譜 2010年2期2010-10-21