兒童手足口病流行特征及腸道病毒核酸檢測(cè)分析

[摘" "要]" "目的：分析兒童手足口病（hand，foot and mouth disease，HFDM）流行特征及腸道病毒感染情況。方法：手足口病患兒600例，在服用抗病毒藥物前無(wú)菌采集咽、肛拭子標(biāo)本。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）進(jìn)行腸道病毒核酸檢測(cè)，并進(jìn)行分型鑒定。結(jié)果：600例手足口病患兒標(biāo)本中417例腸道病毒核酸呈陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為69.50%。陽(yáng)性病例中男童262例（62.83%），女童155例（37.17%），男童占比高于女童（Plt;0.05）?？滤_奇病毒A16（Coxsackie virusA16，CVA16）陽(yáng)性306例，陽(yáng)性率51.00%，CVA6陽(yáng)性96例，陽(yáng)性率16.00%，CVA10陽(yáng)性8例，陽(yáng)性率1.33%，其他腸道病毒7例，陽(yáng)性率1.17%。不同血清型腸道病毒陽(yáng)性率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。417例腸道病毒核酸陽(yáng)性病例中1～2歲患兒72例（17.27%），～3歲91例（21.82%），～4歲107例（25.66%），～5歲89例（21.34%），～6歲58例（13.91%），不同年齡段患兒發(fā)病率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），其中3～4歲發(fā)病率最高。600例患兒中咽拭子檢出382例（63.70%）病毒核酸陽(yáng)性，肛拭子檢測(cè)出415例（69.17%），肛拭子檢測(cè)陽(yáng)性率高于咽拭子（Plt;0.05）。結(jié)論：多種腸道病毒可以引起兒童手足口病，其中以CVA16型最多見(jiàn)，3～4歲患兒是手足口病的防控重點(diǎn)。

[關(guān)鍵詞]" "腸道病毒核酸檢測(cè)；流行特征；手足口??；兒童

[中圖分類(lèi)號(hào)]" "R725.1 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]" "B [DOI]" "10.19767/j.cnki.32-1412.2024.05.029

手足口?。╤and，foot and mouth disease，HFDM）是常見(jiàn)的兒童傳染病，流行十分廣泛，主要由腸道病毒引起，同一患兒可能因感染不同類(lèi)型腸道病毒而在一年內(nèi)多次發(fā)病[1]。該病發(fā)生率通常在春夏季節(jié)達(dá)到高峰，主要感染嬰幼兒和幼兒園兒童[2-3]?；純撼３霈F(xiàn)發(fā)熱、咽痛、口腔潰瘍、手掌腳底皮疹等癥狀，多數(shù)患兒為輕癥，1～2周痊愈，但少數(shù)重癥和危重癥患兒可并發(fā)心肌炎、腦膜炎、肺水腫等，具有較高的致殘率和致死率。手足口病傳統(tǒng)診斷依賴(lài)臨床癥狀和體征，但易與其他病毒感染混淆，造成漏診、誤診[4]。為了解本區(qū)域兒童手足口病流行特征及腸道病毒感染情況，本研究于2023年1月—12月對(duì)手足口病哨點(diǎn)監(jiān)測(cè)醫(yī)院收治的手足口病患兒進(jìn)行腸道病毒核酸檢測(cè)，分析流行特征。

1" "資料與方法

1.1" "一般資料" "隨機(jī)選取鹽城市亭湖、鹽都、大豐等九個(gè)縣市區(qū)手足口病哨點(diǎn)監(jiān)測(cè)醫(yī)院收治的手足口病患兒600例，其中男性426例，女性174例，年齡1～6歲，平均（4.01±0.33）歲，均符合《手足口病診療指南（2018年版）》相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2" "研究方法

1.2.1" "標(biāo)本采集：發(fā)病3天內(nèi)、使用抗病毒藥物前，無(wú)菌采集患兒咽、肛拭子標(biāo)本，置入含有3～5 mL保存液的采樣管中，緊密封閉，冷藏條件下4小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)[5-6]。

1.2.2" "實(shí)時(shí)熒光定量PCR法（quantitative real-time PCR，RT-PCR）檢測(cè)病毒核酸：提取患兒咽、肛拭子核酸作為模板，采用ABI系列Q5實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)儀器進(jìn)行擴(kuò)增。采用廣州中山達(dá)安基因試劑公司RT-PCR試劑盒（探針?lè)ǎ┻M(jìn)行腸道病毒通用型、腸道病毒71型（Enterovirus 71，EV71）、柯薩奇病毒A16（Coxsackievirus A16，CVA16）、CVA6、CVA10分型鑒定。

1.3" "統(tǒng)計(jì)學(xué)處理" "應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2" "結(jié)" " " 果

2.1" "手足口病病例核酸檢測(cè)及病原譜構(gòu)成分析" "經(jīng)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，600例手足口病患兒標(biāo)本中有417例腸道病毒核酸（咽拭子或者肛拭子）呈陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為69.50%，陽(yáng)性病例中男童262例（62.83%），女童155例（37.17%），男童占比高于女童，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=54.911，Plt;0.05）。其中CVA16陽(yáng)性306例（男童188例，女童118例），陽(yáng)性率51.00%。CVA6陽(yáng)性96例（男童64例，女童32例），陽(yáng)性率16.00%。CVA10陽(yáng)性8例（男童3例，女童5例），陽(yáng)性率1.33%。其他腸道病毒7例（男童6例，女童1例），陽(yáng)性率1.17%。不同血清型腸道病毒陽(yáng)性率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.907，Plt;0.05），四種血清型腸道病毒陽(yáng)性病例中男女構(gòu)成比比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.604，P＞0.05）。見(jiàn)圖1。

2.2" "手足口病時(shí)間及年齡段分布" "手足口病呈現(xiàn)典型的季節(jié)性雙峰型分布，從3月開(kāi)始增多，4～7月出現(xiàn)最高峰（春夏高峰），7月逐漸降低，9～11月出現(xiàn)小幅反彈，出現(xiàn)次高峰（秋冬高峰），見(jiàn)圖2。417例腸道病毒核酸陽(yáng)性病例中1～2歲患兒72例（17.27%），～3歲91例（21.82%），～4歲107例（25.66%），～5歲89例（21.34%），～6歲58例（13.91%），不同年齡段發(fā)病率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=21.301，Plt;0.05），其中3～4歲發(fā)病率最高。見(jiàn)圖3。

2.3" "咽、肛拭子腸道病毒核酸檢測(cè)陽(yáng)性率比較" "手足口病600例中，咽拭子檢出382例病毒核酸陽(yáng)性，陽(yáng)性率63.70%，肛拭子檢出415例病毒核酸陽(yáng)性，陽(yáng)性率69.17%，肛拭子檢測(cè)陽(yáng)性率高于咽拭子，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.069，Plt;0.05）。咽拭子陽(yáng)性病例在年齡構(gòu)成上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=17.177，Plt;0.05），肛拭子陽(yáng)性病例在年齡構(gòu)成上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=19.547，Plt;0.05）。見(jiàn)表1。

3" "討" " " 論

腸道病毒相關(guān)的手足口病的臨床癥狀和體征分為五個(gè)階段：皮疹和發(fā)熱階段、神經(jīng)系統(tǒng)障礙階段、心肺衰竭早期階段、心肺衰竭全面階段和恢復(fù)階段[7]。大多數(shù)病例通常僅表現(xiàn)為輕微癥狀或發(fā)熱，并在一周內(nèi)恢復(fù)[7-8]。然而，少部分患者會(huì)發(fā)展為重癥病例，有神經(jīng)系統(tǒng)受累、呼吸及循環(huán)功能障礙等表現(xiàn)，甚至導(dǎo)致死亡[7-9]。

目前診斷手足口病主要基于臨床癥狀和體征，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。病毒培養(yǎng)需要數(shù)日才能得到結(jié)果，無(wú)法滿(mǎn)足臨床診斷需求。腸道病毒核酸檢測(cè)具有高度特異性和敏感性，能迅速確定患者是否感染腸道病毒，同時(shí)有助于分型鑒定，了解流行的腸道病毒類(lèi)型[10-11]。

本研究結(jié)果顯示，600例手足口病患兒標(biāo)本共檢出4種血清型腸道病毒，分別為CVA16、CVA6、CVA10和其他腸道病毒，與近年北京豐臺(tái)[12]、江蘇徐州[13]，陜西西安[14]等地區(qū)基本一致。本研究結(jié)果顯示，CVA16為絕對(duì)優(yōu)勢(shì)基因型，陽(yáng)性占比51.00%，其次為CVA6型，陽(yáng)性占比16.00%。不同血清型腸道病毒可能引起不同嚴(yán)重程度的癥狀，分型鑒定有助于評(píng)估病情，指導(dǎo)治療和隔離措施的制定。陽(yáng)性病例中男童占比高于女童（Plt;0.05），說(shuō)明男童更易感染腸道病毒引起手足口病[15]。腸道病毒陽(yáng)性病例中～4歲患兒占比最高，～3歲、～4歲次之，最低為～2歲、～6歲，可能因?yàn)椤?歲患兒最活躍，不注重個(gè)人衛(wèi)生，防護(hù)意識(shí)差，1～2歲患兒由家長(zhǎng)照顧，相對(duì)衛(wèi)生習(xí)慣良好，尚有母?jìng)骺贵w保護(hù)，～6歲患兒抵抗力較強(qiáng)，除個(gè)人衛(wèi)生意識(shí)較強(qiáng)外，還可能通過(guò)隱性感染而獲得抗體[16]。本研究還發(fā)現(xiàn)，咽拭子陽(yáng)性檢出率低于肛拭子（Plt;0.05），提示結(jié)合兩種方式開(kāi)展腸道病毒檢查可提升診斷準(zhǔn)確率和降低漏檢率。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 鄭嘉穎，吳艷芝. 鄭州市0～6歲兒童手足口病流行現(xiàn)狀及其影響因素［J］. 中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué)，2022，21（2）：258-260.

[2] HU X，ZHANG W，YUAN T，et al. Evolving pathogen trends and spatial-temporal dynamics of hand，foot，and mouth disease in Fengxian District，Shanghai（2009-2022）［J］. Sci Rep，2024，14（1）：20398.

[3] LI K，CHEN S，LI Z，et al. Epidemiological characterization of hand，foot，and mouth disease among hospitalized children from 2014 to 2023 in a hospital in Henan Province： longitudinal surveillance study［J］. J Med Virol，2024，96（9）：e29916.

[4] 戴雨珂，陳果，周良君，等. 2016—2021年綿陽(yáng)市手足口病流行特征與病原學(xué)檢測(cè)分析［J］. 醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制，2023，39（7）：648-652.

[5] 錢(qián)曉萍，凌健，劉騰. 吳興區(qū)6歲以下兒童手足口病流行特征分析［J］. 預(yù)防醫(yī)學(xué)，2023，35（3）：243-245，249.

[6] 何斌，孫亞敏，邱傳營(yíng). 2009—2019年北京市海淀區(qū)學(xué)齡前兒童手足口病流行病學(xué)及病原學(xué)特征分析［J］. 中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志，2022，45（2）：151-154.

[7] LI X W，NI X，QIAN S Y，et al. Chinese guidelines for the diagnosis and treatment of hand，foot and mouth disease（2018 edition）［J］. World J Pediatr，2018，14（5）：437-447.

[8] MILLER G，TINDALL J. Hand-foot-and-mouth disease［J］. JAMA，1968，203（10）：827-830.

[9] 趙曉莉，李慧，宋宇，等. 兒童EV71型手足口病血清內(nèi)皮素-1和炎性因子水平及其與重型發(fā)病的關(guān)系［J］. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2023，33（6）：929-932.

[10] ZHANG S Y，WANG J，YAN Q，et al. A one-step，triplex，real-time RT-PCR assay for the simultaneous detection of enterovirus 71，Coxsackie A16 and pan-enterovirus in a single tube［J］. PLoS One，2014，9（7）：e102724.

[11] WANG M，REN Q，ZHANG Z J，et al. Rapid detection of hand，foot and mouth disease enterovirus genotypes by multiplex PCR［J］. J Virol Methods，2018，258：7-12.

[12] 曹佳琪，邢洪光，張志敏，等. 2019-2021年北京市豐臺(tái)區(qū)手足口病及皰疹性咽峽炎病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析［J］. 寄生蟲(chóng)病與感染性疾病雜志，2023，21（2）：95-99，103.

[13] 張文婷，杜陽(yáng)光，高雪，等. 2021年江蘇省徐州市手足口病和皰疹性咽峽炎病例腸道病毒病原譜分析［J］. 疾病監(jiān)測(cè)雜志，2024，39（7）：863-868.

[14] 薛澤潤(rùn)，陳海龍，杜全麗，等. 西安市2022年手足口病的病原構(gòu)成與EV-A71抗體調(diào)查［J］. 公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2024，35（5）：134-137.

[15] MOHAMMAD F M，NAZIRUL H，IZYAN A M，et al. Biological and ecological determinants of hand foot and mouth disease （HFMD） in coastal district of Northeastern Peninsular Malaysia： A 5-Year retrospective study［J］. J Public Hlth Dev，2024，22（3）：256-271.

[16] GUI J，LIU Z，ZHANG T，et al. Epidemiological characte-ristics and spatial-temporal clusters of hand，foot，and mouth disease in Zhejiang Province，China，2008-2012［J］. PLoS One，2015，10（9）：e0139109.

[收稿日期] 2024-09-21

（本文編輯" "趙喜）