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    羅漢果花枸杞復(fù)合飲料的研制

    2023-09-11 15:15:22汪洪濤郭亞楠
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2023年16期
    關(guān)鍵詞:解液羅漢果抗壞血酸

    汪洪濤,郭亞楠

    (江蘇經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院健康學(xué)院,江蘇省食品安全工程技術(shù)研究開發(fā)中心,江蘇 南京 211168)

    羅漢果是我國特有的一種珍貴葫蘆科植物,被譽(yù)為良藥良果[1]。羅漢果花來自于羅漢果的干雄花,富含黃酮、多酚、精油等活性成分,有抗炎抑菌、降血糖、抗氧化、清熱解毒等功效[2]。目前,對羅漢果花的研究主要集中在其活性成分的提取和性質(zhì)研究[3]、提取液的生理功能研究方面[4],對產(chǎn)品的開發(fā)應(yīng)用方面報(bào)道較少。

    枸杞又稱枸杞果、枸杞豆、甜菜子等,是茄科植物,也作為藥食兩用的植物。枸杞味甘、性平,富含蛋白質(zhì)、脂肪、枸杞素、維B1、維B2和鈣、鐵、磷等營養(yǎng)成分,還富含類黃酮、枸杞多糖、甜菜堿、紅色素等有效成分[5],具有補(bǔ)腎益精、潤肝明目、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞、抗輻射、降血糖,降低動脈硬化等功效[6]。在世界上被公認(rèn)為抗衰老、抗腫瘤和疾病防治的“神仙果”[5]。目前,枸杞研究的較多,主要集中在活性成分的提取和產(chǎn)品的開發(fā)等方面[7-12],但有關(guān)枸杞和羅漢果花搭配進(jìn)行產(chǎn)品的開發(fā)暫未見報(bào)道。

    為了進(jìn)一步開發(fā)利用農(nóng)副產(chǎn)品資源,提高農(nóng)產(chǎn)品的附加值,豐富市場的健康飲料品種,擬通過將羅漢果花和枸杞搭配,利用兩者營養(yǎng)成分和活性成分互補(bǔ)的特點(diǎn),通過酶促降解原料,提高活性成分的溶出率和原料的利用率,開發(fā)出一款富含多種活性成分、適合各種人群飲用的健康型飲料。

    1 材料與方法

    1.1 儀器與試劑

    KQ-500E 型超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司產(chǎn)品;FA1004N 型分析天平,上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;FW100 型高速萬能粉碎機(jī),天津市泰斯特儀器有限公司產(chǎn)品;GZX-9140MBE 型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱,上海博迅實(shí)業(yè)有限公司產(chǎn)品;SHBIII 型循環(huán)水多用真空泵,上海比朗文儀器有限公司產(chǎn)品。

    羅漢果花,購自廣西桂林,買回后挑選、清洗、于60 ℃下烘至恒質(zhì)量、粉碎過60 目篩后密封備用;枸杞(干果),購自寧夏中寧,經(jīng)人工挑選、清洗、于60 ℃下烘至恒質(zhì)量、粗粉碎后密封備用;食品級白砂糖,南京甘蔗園糖業(yè)有限公司提供;食品級纖維素酶(綠色木酶,1 萬U/g)、β - 葡聚糖酶(食用級,2 萬U/g)、檸檬酸,均為分析純,南京森貝伽生物科技有限公司提供;抗壞血酸(分析純),上海展云化工有限公司提供。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 加工工藝

    (1) 工藝流程。原料→浸泡→酶解→抽濾→調(diào)配→均質(zhì)→包裝→殺菌→成品。

    (2) 操作要點(diǎn)。①酶解。將枸杞粉和羅漢果花粉按比例復(fù)配,按不同料液比、酶配比和酶解時(shí)間進(jìn)行浸提、抽濾,濾液定容后密封冷藏備用。②調(diào)配。根據(jù)最佳的酶解液加入最佳配方的檸檬酸、白砂糖、抗壞血酸攪拌均勻。③均質(zhì)。原料混合攪拌均勻,加熱至65 ℃。進(jìn)行均質(zhì)處理,均質(zhì)壓力20~25 MPa,均質(zhì)2 次。均質(zhì)后能提高飲料的穩(wěn)定性,防止分層,使產(chǎn)品口感細(xì)膩。④殺菌。產(chǎn)品裝罐后于121 ℃下殺菌10 min 后冷卻即得成品。

    1.2.2 原料酶解液的制備

    (1) 原料酶解液制備的基本工藝參數(shù)。先將干燥粉碎后的枸杞粉和羅漢果花粉按質(zhì)量比1∶1 稱取混合至250 mL 錐形瓶中,按照料液比1∶30(g∶mL) 加入一定量的蒸餾水,于室溫下避光浸泡12 h,使原料充分吸水。然后在50 ℃的恒溫、pH 值為5~6時(shí)(加鹽酸用精密pH 值試紙) 按照纖維素酶和β -葡聚糖酶1∶1 的質(zhì)量配比,加入一定量的酶(占原料質(zhì)量的0.5%),利用超聲輔助酶解2 h。最后將酶解液用濾紙進(jìn)行抽濾,濾液定容后密封冷藏備用,濾渣烘干至恒質(zhì)量后稱量,計(jì)算原料的利用率。每個樣品重復(fù)3 次,取平均值。原料利用率計(jì)算見公式(1):

    (2) 原料酶解液制備單因素試驗(yàn)。按1.2.2(1)的方法,以原料的利用率為考查指標(biāo),其他條件不變,分別改變枸杞和羅漢果花配比、料液比、纖維素酶和β - 葡聚糖酶配比及酶解時(shí)間等因素來考查各種因素對原料利用率的影響。

    (3) 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇原料比、料液比和酶配比作為試驗(yàn)因素,利用響應(yīng)面軟件進(jìn)行試驗(yàn)及優(yōu)化,確定羅漢果花枸杞復(fù)合飲料酶解液的最佳工藝。

    Box-behnken 設(shè)計(jì)因素與水平設(shè)計(jì)見表1。

    表1 Box-behnken 設(shè)計(jì)因素與水平設(shè)計(jì)

    1.2.3 復(fù)合飲料的研制

    (1) 飲料配方的基本工藝參數(shù)。量取一定量的酶解液,以酶解液質(zhì)量為標(biāo)準(zhǔn),加入5%白砂糖,0.04%檸檬酸,0.05%抗壞血酸,按照飲料制備工藝流程操作得到羅漢果花枸杞復(fù)合飲料。

    (2) 單因素試驗(yàn)。按1.2.3(1) 的方法,以感官評價(jià)為評定指標(biāo),其他條件不變,通過改變白砂糖、檸檬酸和抗壞血酸的含量,考查各種因素對飲料風(fēng)味的影響。

    (3) 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)面軟件進(jìn)行試驗(yàn)及優(yōu)化,采用感官評分法進(jìn)行分析和處理,確定羅漢果花枸杞復(fù)合飲料的最佳配方。

    響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見表2。

    表2 響應(yīng)面試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)/%

    1.2.4 感官評分標(biāo)準(zhǔn)

    參照相關(guān)茶飲料感官標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合該產(chǎn)品的特點(diǎn),指定了產(chǎn)品感官評分標(biāo)準(zhǔn)。請10 名不同年齡、性別的學(xué)生根據(jù)感官評分表進(jìn)行評分,每個樣品重復(fù)3次,最后取評分的平均值。

    感官評分標(biāo)準(zhǔn)見表3。

    表3 感官評分標(biāo)準(zhǔn)

    1.2.5 數(shù)據(jù)分析與處理

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010 軟件和Design Expert8.0 軟件進(jìn)行分析處理。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 原料酶解液的制備

    2.1.1 原料酶解液制備單因素試驗(yàn)

    按照1.2.2 中(2) 的方法,其他條件不變,分別改變枸杞與羅漢果花質(zhì)量比為4∶1,3∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶3,1∶4(g∶g),料液比為1∶15,1∶20,1∶25,1∶30,1∶35,1∶40,1∶45(g∶mL),纖維素酶和β - 葡聚糖酶的質(zhì)量比為4∶1,3∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶3,1∶4(g∶g),酶解時(shí)間為0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5 h 進(jìn)行單因素試驗(yàn)。

    枸杞和羅漢果花的質(zhì)量比對原料利用率的影響見圖1,料液比對原料利用率的影響見圖2,纖維素酶和β - 葡聚糖酶質(zhì)量比對原料利用率的影響見圖3,酶解時(shí)間對原料利用率的影響圖4。

    圖1 枸杞和羅漢果花的質(zhì)量比對原料利用率的影響

    圖2 料液比對原料利用率的影響

    圖3 纖維素酶和β - 葡聚糖酶質(zhì)量比對原料利用率的影響

    圖4 酶解時(shí)間對原料利用率的影響

    由圖1 可知,隨著羅漢果花比例的增加原料利用率在逐漸降低,原因可能是羅漢果花中纖維較多,水解率較低。在枸杞和羅漢果花的質(zhì)量比為2∶1~ 1∶2 原料的利用率降低的非常明顯。枸杞比例過高對產(chǎn)品的口感有影響且不利于渣液分離,綜合考慮后選取枸杞和羅漢果花的質(zhì)量比為2∶1、1∶1,1∶2為響應(yīng)面試驗(yàn)的試驗(yàn)因素水平;由圖2 可知,隨著料液比的增加原料利用率在逐漸提高,在1∶30 處提高最為明顯,隨著料液比的繼續(xù)增加,原料利用率增加變慢。綜合考慮后選取料液比為1∶30、1∶35,1∶40 為響應(yīng)面試驗(yàn)的試驗(yàn)因素水平;由圖3 可知,隨著β - 葡聚糖酶比例的增加,原料利用率先增加后減少,在1∶3 處最高,在1∶3 之后開始降低。故選取纖維素酶和β - 葡聚糖酶的質(zhì)量比為1∶2, 1∶3,1∶4 為響應(yīng)面試驗(yàn)因素的水平;由圖4可知,隨著酶水解反應(yīng)時(shí)間的延長,原料利用率先增加后減少在2 h 時(shí)處最大,隨著時(shí)間不斷延長,原料利用率處于相對平穩(wěn)狀態(tài),而且不利于試驗(yàn)的操作,浪費(fèi)時(shí)間。綜合考慮后,將2 h 作為后續(xù)試驗(yàn)的酶解時(shí)間。

    2.1.2 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

    根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,按照1.2.2 中(3) 的方法,采用Box-behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì),對原料酶解液工藝進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。

    響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)方案及結(jié)果見表4,原料利用率方差分析見表5。

    表4 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)方案及結(jié)果

    表5 原料利用率方差分析

    通過軟件Design Expert 8.0 對表5 數(shù)據(jù)進(jìn)行了回歸分析,得出以原料酶解液的原料利用率為響應(yīng)值的回歸方程為:

    一次項(xiàng)F值的大小與因素對響應(yīng)值的影響程度大小成正比[8]。由表4 可知,每個因素對原料利用率的影響程度順序?yàn)樵媳?酶質(zhì)量比>料液比。模型F值為17.61,p<0.001 說明差異非常顯著,失擬項(xiàng)p=0.084 5>0.050 0 差異不顯著,模型的相關(guān)系數(shù)R2=0.952 0,表明模型擬合程度較好。變異系數(shù)(Coefficient of Variation,C.V) 2.45%較小,說明該模型能較好地反映真實(shí)的試驗(yàn)值。回歸模型中的一次項(xiàng)原料比(A) 非常顯著,交互項(xiàng)和二次項(xiàng)A2,C2不顯著,說明每個因素對原料利用率的影響不是線性關(guān)系[13]。

    由響應(yīng)面軟件分析可知原料最佳酶解液工藝參數(shù)為原料比2∶1,料液比1∶34.73,酶質(zhì)量比1∶2.26。在此條件下,復(fù)合飲料酶解液的原料利用率為60.1%??紤]到方便實(shí)際操作將最佳配方優(yōu)化為原料質(zhì)量比2∶1,料液比1∶35,酶質(zhì)量比1∶2.3,并根據(jù)優(yōu)化后的最佳工藝參數(shù)進(jìn)行了5 次平行驗(yàn)證試驗(yàn),結(jié)果表明原料利用率平均為60.6%,與預(yù)測值相對偏差為0.83%,得到的最佳酶解液工藝參數(shù)可靠。

    2.2 復(fù)合飲料配方的確定

    2.2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

    按1.2.3 中(2) 的方法,其他條件不變,分別改變白砂糖添加量為3%,4%,5%,6%,7%;檸檬酸添加量為0.010%,0.025%,0.040%,0.055%,0.060%;抗壞血酸添加量為0.01%,0.03%,0.05%,0.07%,0.09%進(jìn)行試驗(yàn)。

    白砂糖添加量對飲料感官指標(biāo)的影響見圖5,檸檬酸添加量對飲料感官指標(biāo)的影響見圖6,抗壞血酸添加量對飲料感官指標(biāo)的影響見圖7。

    圖5 白砂糖添加量對飲料感官指標(biāo)的影響

    圖6 檸檬酸添加量對飲料感官指標(biāo)的影響

    圖7 抗壞血酸添加量對飲料感官指標(biāo)的影響

    由圖5 可知,隨著白砂糖添加量增加飲料感官評分先增后降,在6%時(shí)感官評分最高。當(dāng)白砂糖添加量較低時(shí),飲料的味道偏淡有少許苦味;白砂糖添加量過高時(shí)飲料味道太甜。因此,選取白砂糖添加量5%,6%,7%為響應(yīng)面試驗(yàn)的因素水平。由圖6 可知,隨著檸檬酸添加量的增加,飲料的感官評分值也逐漸增大,在檸檬酸添加量為0.04% 時(shí)達(dá)到最大值。此時(shí)飲料酸甜適中,繼續(xù)增加檸檬酸添加量時(shí),飲料則由于味道太酸導(dǎo)致評分值逐漸下降。因此,選取檸檬酸添加量0.025%,0.040%,0.055%為響應(yīng)面試驗(yàn)的因素水平。由圖7 可知,隨著抗壞血酸添加量的增加,飲料的酸度逐漸增加,在抗壞血酸添加量為0.07%時(shí)達(dá)到最大值,此時(shí)飲料酸甜適中。繼續(xù)增加抗壞血酸量時(shí)飲料由于酸度過大而使評分值逐漸下降??箟难岢峁┧嵛锻膺€是抗氧化劑,加入飲料中可保持其外觀和風(fēng)味。綜合考慮后,選取抗壞血酸添加量0.05%,0.07%,0.09%為響應(yīng)面試驗(yàn)的因素水平。

    2.2.2 飲料配方的響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)

    根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,按照1.2.3(3) 的方法,采用Box-behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì),對飲料的配方進(jìn)行優(yōu)化。

    響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)方案及結(jié)果見表6。

    表6 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)方案及結(jié)果

    通過軟件Design Expert 8.0 對表6 數(shù)據(jù)進(jìn)行了回歸分析,得出以飲料感官評分為響應(yīng)值的回歸方程為:

    飲料配方試驗(yàn)方差分析見表7。

    表7 飲料配方試驗(yàn)方差分析

    一次項(xiàng)F值的大小與因素對響應(yīng)值的影響程度大小成正比[8]。由表7 可知,每個因素對飲料感官評分的影響程度順序?yàn)榭箟难崽砑恿?白砂糖添加量>檸檬酸添加量。模型F值為10.48,p=0.002 7<0.05 說明差異顯著,失擬項(xiàng)p=0.148 3>0.05 差異不顯著,模型的相關(guān)系數(shù)R2=0.928 3,表明模型擬合程度較好。變異系數(shù)(C.V) 2.78%較小,說明該模型能很好的反映真實(shí)的試驗(yàn)值。回歸模型中的一次項(xiàng)抗壞血酸(C) 顯著,交互項(xiàng)不顯著和二次項(xiàng)A2非常顯著、B2和C2顯著,說明每個因素對原料利用率的影響不是線性關(guān)系[13]。為進(jìn)一步考查各因素中交互作用對飲料感官評分的影響,用Design Expert 8.0.6軟件繪制三維曲線圖(圖8)。響應(yīng)曲面圖是每個試驗(yàn)因素響應(yīng)值的三維空間曲線圖,表面的幅度越大,則表明對試驗(yàn)結(jié)果的影響越大[14]。等高線圖的形狀可反映出各因素效應(yīng)強(qiáng)弱的大小,橢圓形這2 個因素之間的相互作用顯著,而圓形則相反[15]。3 個因素可在選定的范圍內(nèi)均能產(chǎn)生最好的響應(yīng)值,這表明3 個因素的試驗(yàn)范圍合理有效,能夠最佳反映響應(yīng)值的影響趨勢。

    圖8 因素交互作用對飲料感官評分的影響

    因素交互作用對飲料感官評分的影響見圖8。

    利用Design Expert 8.0.6 軟件分析得出羅漢果花枸杞復(fù)合飲料的最佳配方為白砂糖添加量5.9%,檸檬酸添加量0.04%,抗壞血酸添加量0.06%。在此最佳配方下復(fù)合飲料感官評分為89.4 分。為了檢驗(yàn)響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果的可靠性進(jìn)行了5 次平行驗(yàn)證試驗(yàn),得到飲料的感官評分平均值為90.1 分,與預(yù)測值有0.78%的相對偏差。結(jié)果表明,得到的復(fù)合飲料的最佳配方參數(shù)可靠。

    3 結(jié)論

    通過優(yōu)化原料酶解液的工藝參數(shù),從而大大提高了原料利用率。對飲料的配方進(jìn)行優(yōu)化后所生產(chǎn)的復(fù)合飲料色澤紅亮透明,含有羅漢果花淡淡的清香和枸杞的醇香,口感酸甜可口,無沉淀析出。由于該飲料所使用原料羅漢果花和枸杞本身是一種可食用資源,再加上整個生產(chǎn)過程中僅使用水和食品級酶制劑,無任何化學(xué)試劑。其他輔助材料都是可食用級別,利用超聲波輔助酶法水解原料具有操作簡便、能耗低的特點(diǎn)。因此,該飲料的制作工藝簡單,具有原料的特有風(fēng)味,是一款營養(yǎng)豐富、口感純正的健康飲料,適合各類人群長期飲用。關(guān)于飲料中具體的活性成分和衛(wèi)生指標(biāo)有待于進(jìn)一步的試驗(yàn)。

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