滇水金鳳花距發(fā)育相關(guān)基因ABP的克隆及表達(dá)分析

魏春梅　孟丹晨　李凡　向南星　楊建園　黃美娟　黃海泉

摘 要：? 為探究滇水金鳳（Impatiens uliginosa）ABP基因的結(jié)構(gòu)和表達(dá)特征，該研究以滇水金鳳為材料，采用RT-PCR 技術(shù)對(duì)滇水金鳳ABP基因進(jìn)行克隆，運(yùn)用DNAMAN和MEGA對(duì)其所編碼的蛋白序列進(jìn)行同源性分析和系統(tǒng)進(jìn)化分析，并利用qRT-PCR分析ABP基因的時(shí)空表達(dá)模式。結(jié)果表明：（1）滇水金鳳ABP基因的cDNA 全長(zhǎng)為627 bp，編碼208 aa，命名為IuABP基因，其蛋白具有Cupin超家族蛋白的典型結(jié)構(gòu)。（2）同源性分析表明滇水金鳳ABP基因的氨基酸序列與喜馬拉雅鳳仙花（I. glandulifera）、月季（Rose chinensis）、木薯（Manihot esculenta）等物種的同源性均達(dá)71%；系統(tǒng)進(jìn)化分析表明IuABP與喜馬拉雅鳳仙花（Impatiens glandulifera）聚為一支，親緣關(guān)系最近。（3）qRT-PCR分析表明IuABP基因在滇水金鳳花距發(fā)育的3個(gè)時(shí)期及2個(gè)部位均有表達(dá)。隨著花距的發(fā)育，IuABP基因在滇水金鳳花距檐部的表達(dá)量呈先下降后上升的趨勢(shì)，在盛花期時(shí)達(dá)最高，而在花距距部的表達(dá)量逐漸下降。以上結(jié)果為進(jìn)一步研究滇水金鳳ABP基因在花距發(fā)育中的功能及其表達(dá)調(diào)控機(jī)制提供了一定的理論參考。

關(guān)鍵詞： 滇水金鳳， 花距發(fā)育， ABP基因， 基因克隆， 表達(dá)分析

中圖分類號(hào)：? Q943 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：? A 文章編號(hào)：? 1000-3142（2023）06-1051-08

Cloning and? expression analysis of ABP gene related to spur development in Impatiens uliginosa

WEI Chunmei， MENG Danchen， LI Fan， XIANG Nanxing， YANG Jianyuan， HUANG Meijuan， HUANG Haiquan*

（ College of Landscape Architecture and Horticulture Sciences， Southwest Research Center for Engineering Technology of Landscape Architecture

（State Forestry and Grassland Administration）， Yunnan Engineering Research Center for Functional Flower Resources and Industrialization，

Research and Development Center of Landscape Plants and Horticulture Flowers， Southwest Forestry University， Kunming 650224， China ）

Abstract：? The purpose of this study was to explore the structural and expression characteristics of ABP gene from Impatiens uliginosa. ABP gene related to spur development of I. uliginosa was cloned by using RT-PCR method， whose homology and phylogenetic analyses of protein sequence were analyzed by using DNAMAN and MEGA softwares. In addition， the spatiotemporal expression patterns of ABP gene were investigated by qRT-PCR method. The results were as follows： （1） ABP gene of I. uliginosa was successfully cloned， whose full-length cDNA sequences was 627 bp， encoding 208 aa， and named IuABP. The protein encoded by ABP gene had the typical structure of Cupin superfamily proteins. （2） According to the result of its homology analysis， it showed that the homology of ABP gene of I. uliginosa reached 71% with those of I. glandulifera， Rose chinensis and Manihot esculenta. Based on phylogenetic analysis， it was found that IuABP and Impatiens glandulifera clustered into a branch， with the most close genetic relationship. （3） qRT-PCR analysis showed that the? IuABP were expressed in both three stages and two different parts of spur development of I. uliginosa. With the development of spur， the expression level of IuABP in the blade had a tendency of declining at the beginning and rising up later， and reached the highest in the blooming stage， while the expression level decreased gradually in the spur cup. These results provide a theoretical reference for further studies on the function and the expression regulation mechanism of IuABP gene in spur development.

Key words：? Impatiens uliginosa， spur development， ABP gene， gene cloning， expression analysis

花距是植物進(jìn)化的結(jié)果，它不僅能提高植物的傳粉效率和繁殖成功率（童禎開等，2022），還造成某些植物發(fā)育譜系的迅速多樣化（Hodges & Arnold， 1995），成為調(diào)節(jié)生物入侵的重要性狀（Vervoort et al.， 2011）。開展植物花距的研究，不僅能夠判斷物種形成和進(jìn)化的機(jī)制，還能更加了解植物與傳粉者個(gè)體之間的相互作用（Hodges et al.， 2003；Fernández-Mazuecos & Glover， 2017）。Puzey等（2011）對(duì)耬斗菜花距組織和細(xì)胞水平進(jìn)行觀測(cè)，結(jié)果表明耬斗菜花距的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)主要依賴于細(xì)胞的各向異性擴(kuò)張。Mack和Davis（2015）對(duì)紅排草（Centranthus ruber）的研究也發(fā)現(xiàn)其花距的伸長(zhǎng)主要是通過表皮細(xì)胞的各向異性生長(zhǎng)。然而，Tsai等（2018）對(duì)兩種天竺葵屬植物（Pelargonium ionidiflorum和P. odoratissimum）的花距研究發(fā)現(xiàn)，花托生長(zhǎng)速度的加快和發(fā)育時(shí)間的延長(zhǎng)是花距形成的主要原因；Cullen等（2018）認(rèn)為細(xì)胞分裂是柳穿魚屬（Linaria）花距長(zhǎng)度變化的主要原因，這與植物花距的伸長(zhǎng)主要是通過細(xì)胞各向異性實(shí)現(xiàn)的觀點(diǎn)形成鮮明對(duì)比。此外，研究還發(fā)現(xiàn)某些調(diào)控細(xì)胞分裂和伸長(zhǎng)的基因也參與了花距發(fā)育的調(diào)控，如在耬斗菜花距杯中表達(dá)量較高的TCP、ARF6/8和BEH基因，通過VIGS病毒對(duì)其進(jìn)行沉默后，花距杯內(nèi)的細(xì)胞分裂與細(xì)胞擴(kuò)張的平衡被擾亂，最終導(dǎo)致花距變短并且向內(nèi)彎曲生長(zhǎng)（Yant et al.， 2015；Zhang et al.， 2020；Stephanie et al.， 2021）。綜上表明，植物花距的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)不僅依賴于細(xì)胞分裂與細(xì)胞各向異性的擴(kuò)張，而且花距發(fā)育相關(guān)基因ABP、TCP、ARF及BEH對(duì)花距的細(xì)胞分裂與伸長(zhǎng)也起重要作用。

ABP（auxin binding protein）是一種生長(zhǎng)素受體，包括ABPⅠ、ABPⅡ、ABPⅢ，以及生長(zhǎng)素運(yùn)輸抑制劑NPA的結(jié)合蛋白4類，在植物體內(nèi)廣泛分布。ABP基因參與質(zhì)膜上生長(zhǎng)素的響應(yīng)過程，還參與調(diào)控細(xì)胞擴(kuò)增、細(xì)胞擴(kuò)張以及細(xì)胞周期等快速反應(yīng)（喬麟軼等，2012）。研究發(fā)現(xiàn)，ABP1基因在苧麻的幼莖和芽中大量表達(dá)；ABP1基因在玉米幼苗中表達(dá)較高，而在根內(nèi)的表達(dá)較低；在煙草植物細(xì)胞生長(zhǎng)比較活躍的時(shí)期，ABP1基因的表達(dá)量極高，而在細(xì)胞快結(jié)束分化時(shí)的表達(dá)較低，并且ABP基因在細(xì)胞中不同位置的分布存在較大的差異（高啟祥等，2001；黃妤等，2008）。ABP基因不僅具有在植物生長(zhǎng)較快的組織器官中表達(dá)量較高的特點(diǎn)，還能介導(dǎo)生長(zhǎng)素誘導(dǎo)的細(xì)胞擴(kuò)張，進(jìn)而調(diào)控植株大小。在煙草中，誘導(dǎo)擬南芥ABP1基因過表達(dá)能夠促進(jìn)葉表皮細(xì)胞的擴(kuò)張，組成型ABP1基因在玉米或煙草的懸浮細(xì)胞中，過表達(dá)ABP1基因能夠正向調(diào)節(jié)細(xì)胞尺寸（Jones et al.， 1998）。此外，對(duì)擬南芥組織葉片中的ABP1進(jìn)行下調(diào)，能導(dǎo)致細(xì)胞的體積縮?。˙raun et al.， 2008）；而當(dāng)擬南芥胚中的ABP1基因缺失后，胚內(nèi)細(xì)胞不能正常擴(kuò)張且細(xì)胞直徑均等（Chen et al.， 2001）。由此發(fā)現(xiàn)ABP1基因在植物細(xì)胞分裂、細(xì)胞體積增大及分生組織伸長(zhǎng)方面具有重要意義。

滇水金鳳（Impatiens uliginosa）是鳳仙花科（Balsaminaceae）鳳仙花屬（Impatiens）的一年或多年生植物，具有分布廣、生長(zhǎng)快、生物量大、周年開花、抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)，全草可入藥，也可用于染指甲，是具有觀賞、生態(tài)、藥用以及經(jīng)濟(jì)價(jià)值的重要花卉材料（Luo et al.， 2019）。滇水金鳳作為觀賞植物不僅具有花色多樣、花形奇特的特點(diǎn)，其花距的長(zhǎng)短、數(shù)量及顏色各異還具有很好的研究?jī)r(jià)值。迄今為止，國(guó)內(nèi)外尚未見有關(guān)滇水金鳳ABP基因的相關(guān)報(bào)道。因此，在滇水金鳳中克隆ABP基因并分析其分子機(jī)制及表達(dá)特征，對(duì)深入研究其在花距發(fā)育中的調(diào)控機(jī)制具有重要意義。本研究在課題組前期滇水金鳳轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的基礎(chǔ)上，對(duì)滇水金鳳花距發(fā)育相關(guān)基因ABP進(jìn)行克隆，借助在線軟件與qRT-PCR分析，利用生物信息學(xué)方法，通過對(duì)ABP基因的進(jìn)化關(guān)系、結(jié)構(gòu)特征、組織表達(dá)等進(jìn)行分析，擬探討以下問題：（1）滇水金鳳ABP蛋白親緣進(jìn)化關(guān)系；（2）該蛋白的基本理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特征；（3）滇水金鳳ABP基因在花距發(fā)育的不同時(shí)期和不同部位中的表達(dá)模式。

1 材料與方法

1.1 材料

材料為西南林業(yè)大學(xué)后山試驗(yàn)大棚的滇水金鳳，采取其花苞期（S1）、始花期（S2）和盛花期（S3）的花距距部和花距檐部進(jìn)行目的基因的qRT-PCR實(shí)驗(yàn)（圖1）。

1.2 總RNA的提取與ABP基因的克隆

利用RNA提取試劑盒（OMEGA）提取滇水金鳳花器官總RNA；根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（全式金）將 RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，保存在-20 ℃條件下備用。

以滇水金鳳轉(zhuǎn)錄組中的IuABP基因?yàn)橐罁?jù)，對(duì)引物進(jìn)行設(shè)計(jì)，并送往生工合成。引物為IuABPF（5′-ATGTTGCGCCTCGTTTTC-3′）、IuABPR（5′-TTAATTGGTTCCTCCAAGAACACC-3′）。以滇水金鳳花距的cDNA為模板進(jìn)行ABP基因的cDNA擴(kuò)增，擴(kuò)增體系為20 μL，反應(yīng)條件：95 ℃ 5 min；95 ℃ 5 s，56 ℃ 30 s，72 ℃ 48 s，35個(gè)循環(huán)；72 ℃ 10 min，4 ℃保存。PCR產(chǎn)物經(jīng)回收純化后，與載體pMD19-T連接，轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)胞，最后挑選陽(yáng)性菌液送生工測(cè)序。

1.3 滇水金鳳ABP基因序列分析

運(yùn)用ExPasy在線軟件（https：//web.expasy.org/protparam/）對(duì)滇水金鳳IuABP基因的基本理化特性進(jìn)行分析；借助SMART在線工具（http：//smart.embl-heidelberg.de/）來預(yù)測(cè)IuABP基因結(jié)構(gòu)域；運(yùn)用Target P（https：//services.healthtech.dtu.dk/service.php？TargetP-2.0）預(yù)測(cè)IuABP蛋白的亞細(xì)胞定位；借助SWISS-MODEL（https：//swissmodel.expasy.org/interactive）預(yù)測(cè)IuABP蛋白的三維空間結(jié)構(gòu)；利用DNAMAN v9.0對(duì)IuABP蛋白進(jìn)行比對(duì)分析；運(yùn)用MEGA-X軟件的鄰接法（Bootstrap= 1 000）進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。

1.4 滇水金鳳ABP時(shí)空表達(dá)模式分析

分別提取滇水金鳳3個(gè)時(shí)期（花苞期、始花期、盛花期）和2個(gè)部位（檐部和距部）花距器官的RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成的cDNA備用。IuABP基因qRT-PCR引物為qABPF（5′-CGGGCTTTGTGGCTCAAT

AC3′）、qABPR（5′-TTCGCAAACAGCGCGAAATC′），內(nèi)參基因?yàn)镮uActin［ActinF（5′-TGAATGTCCCTGCT

GTTTG-3′）、ActinR （5′-ACCTTCCGCATAACTTTAC

C-3′）］。以3個(gè)時(shí)期的2個(gè)部位的cDNA為模板，借助Light Cycler 480 Ⅱ（Roche）實(shí)時(shí)定量PCR儀進(jìn)行基因表達(dá)相對(duì)定量分析。反應(yīng)體系為20 μL，反應(yīng)程序?yàn)轭A(yù)變性95 ℃，5 min；變性95 ℃，10 s，退火60 ℃，20 s；延伸72 ℃，20 s，40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品進(jìn)行3個(gè)重復(fù)，采用 2-△△Ct法計(jì)算。將盛花期花距距部定義為單位1作為對(duì)照，對(duì)IuABP基因在不同時(shí)期和不同部位的時(shí)空表達(dá)模式進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 滇水金鳳 ABP基因的克隆及序列分析

根據(jù)滇水金鳳花距轉(zhuǎn)錄組設(shè)計(jì)的特異性擴(kuò)增引物，以花距器官的cDNA為模板，采用 RT-PCR克隆獲得ABP的基因片段（圖2：A）。

運(yùn)用ExPasy-ProtParam對(duì)滇水金鳳ABP基因編碼的蛋白進(jìn)行分析，IuABP全長(zhǎng)627 bp，編碼208 aa，相對(duì)分子量為22 108.6 Da，理論等電點(diǎn)為6.95，總共包括3 162個(gè)原子，不穩(wěn)定指數(shù)為27.46，屬于穩(wěn)定蛋白?？偲骄H疏水性指數(shù)為0.405，表明該蛋白為疏水性蛋白。利用SMART分析發(fā)現(xiàn)IuABP含有一個(gè)典型的Cupin-1結(jié)構(gòu)域（147個(gè)氨基酸），E-value為7.85e-36， 并含有一個(gè)20 aa的信號(hào)肽， 說明該基因?qū)儆贑upin超家族成員（圖2：B）。滇水金鳳ABP基因不存在跨膜結(jié)構(gòu)域，亞細(xì)胞定位于細(xì)胞壁。此外，借助SWISS-MODEL對(duì)滇水金鳳ABP基因進(jìn)行三維空間結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)IuABP蛋白具有Cupin超家族蛋白典型的小桶裝折疊結(jié)構(gòu)（圖2：C）。

2.2 滇水金鳳ABP基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析

運(yùn)用NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中的BlastP功能，將IuABP基因編碼的氨基酸序列與其他物種的ABP氨基酸序列進(jìn)行在線比對(duì)，結(jié)果表明IuABP與喜馬拉雅鳳仙花（Impatiens glandulifera XP_047342663.1）、辣椒（Capsicum annuum XP_016567466.1）、桃（Prunus persica XP_007202573.1）、擬絨毛煙草（Nicotiana tomentosiformis XP_009600028.1）、野草莓（Fragaria vesca XP_004287628.1）、斑點(diǎn)猴面花（Erythranthe guttata XP_012830892.1）、美國(guó)山核桃 （Carya illinoinensis XP_042972396.1）、月季（Rosa chinensis XP_024182988.1）、胡桃 （Juglans regia XP_018844294.1）、楊梅（Morella rubra KAB1209489.1）、開心果（Pistacia vera XP_031267949.1）、馬鈴薯（Solanum tuberosum XP_006342915.1）、木薯（Manihot esculenta XP_021596589.1）、橡膠樹（Hevea brasiliensis XP_021647439.1）的ABP蛋白同源，并且與它們具有較高的相似性。利用DNAMAN v9.0將IuABP和這些物種的氨基酸序列進(jìn)行多序列比對(duì)，結(jié)果顯示，IuABP與其他物種的ABP蛋白具有較高的相似性，均達(dá)71%（圖3）。進(jìn)一步利用MEGA-X軟件，采用鄰接法（Bootstrap=1 000）構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹，發(fā)現(xiàn)滇水金鳳ABP基因與喜馬拉雅鳳仙花聚為一支，親緣關(guān)系最近（圖4）。

2.3 滇水金鳳ABP基因的時(shí)空表達(dá)分析

研究發(fā)現(xiàn)IuABP基因在滇水金鳳花距發(fā)育的3個(gè)時(shí)期（花苞期、始花期和盛花期）及2個(gè)部位（檐部和距部）均有表達(dá)（圖5）。在滇水金鳳花距檐部中，IuABP基因的表達(dá)量呈先下降后上升的趨勢(shì)，在盛花期時(shí)達(dá)最高；而在花距距部中，在花苞期時(shí)表達(dá)最高，隨后逐漸下降。此外，IuABP基因在滇水金鳳盛花期檐部中表達(dá)量最高，其次是在花苞期檐部中，可能與IuABP基因在滇水金鳳花距檐部的細(xì)胞生長(zhǎng)與擴(kuò)張中起重要作用有關(guān)。因此，可以推測(cè)IuABP基因在滇水金鳳花距的細(xì)胞發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用。

3 討論與結(jié)論

ABP對(duì)植物細(xì)胞的分裂與伸長(zhǎng)具有較為顯著的促進(jìn)作用，因此逐漸被當(dāng)作為一種生長(zhǎng)素的潛在受體蛋白（張聰?shù)龋?018）。近年來，越來越多的ABP基因從不同植物中被分離克隆出來，并對(duì)其功能作用進(jìn)行了研究。本研究從滇水金鳳中成功克隆了花距發(fā)育相關(guān)基因IuABP，其cDNA 全長(zhǎng)為627 bp，編碼208 aa，屬于疏水性穩(wěn)定蛋白。Cupin結(jié)構(gòu)域的β折疊桶狀結(jié)構(gòu)，具有熱穩(wěn)定性，能夠用來儲(chǔ)存氨基酸（符霖等，2021）。本研究中IuABP基因具有典型的Cupin-1結(jié)構(gòu)域，三維空間結(jié)構(gòu)也具有典型的小桶狀折疊結(jié)構(gòu)，與任浩然等（2019）對(duì)月季RcABP19基因結(jié)構(gòu)的研究結(jié)果一致，推測(cè)IuABP屬于Cupin超家族，可能參與了花距發(fā)育所需的氨基酸的儲(chǔ)存過程。同源性分析發(fā)現(xiàn)，滇水金鳳ABP基因與桃、喜馬拉雅鳳仙花、月季等物種ABP基因的同源性較高，均達(dá)71%。張巍等（2013）對(duì)桃ABP1進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)在桃的果實(shí)發(fā)育過程中，存在ABP1介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。大量研究表明ABP蛋白能夠接收和轉(zhuǎn)運(yùn)生長(zhǎng)素信號(hào)，并誘導(dǎo)細(xì)胞快速膨大和伸長(zhǎng)等。因此，滇水金鳳ABP蛋白是否與桃ABP1蛋白具有相似的功能仍需進(jìn)一步探究。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明滇水金鳳ABP基因與喜馬拉雅鳳仙花聚為一支，兩者親緣關(guān)系最近。

ABP1作為生長(zhǎng)素信號(hào)途徑中的新受體，不僅能夠調(diào)控非轉(zhuǎn)錄細(xì)胞質(zhì)反應(yīng)，還能誘導(dǎo)許多生長(zhǎng)素早期應(yīng)答基因的轉(zhuǎn)錄，如PLT、Aux/IAA以及ARF基因等，從而參與細(xì)胞擴(kuò)張和細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)素反饋調(diào)控等過程（Chen et al.， 2001；Kim & Triplett， 2004）。Steffens等（2001）的研究發(fā)現(xiàn)，促使原生質(zhì)體變得膨大的生長(zhǎng)素信號(hào)是因?yàn)槭艿皆|(zhì)體外面的ABP1基因誘導(dǎo)，玉米中的ABP1基因在煙草葉片中過量表達(dá)，能夠提高細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)素的敏感能力。本研究通過qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)，在滇水金鳳檐部，IuABP基因的表達(dá)量隨著花距的發(fā)育逐漸上升，在盛花期達(dá)到最高；而在距部中，IuABP基因的表達(dá)量在花苞期最高，隨著花距的發(fā)育逐漸降低，這與ABP1基因在煙草細(xì)胞生長(zhǎng)活躍的時(shí)期表達(dá)量較高，而在細(xì)胞快結(jié)束分化時(shí)表達(dá)較低的情況一致（高啟祥等，2001）。ABP基因在植物體不同部位的表達(dá)可能存在較大的差異，本研究中IuABP基因在滇水金鳳花距的檐部和距部的表達(dá)情況相反，這說明IuABP基因在滇水金鳳花距中的表達(dá)存在發(fā)育時(shí)期和組織特異性， 推測(cè)IuABP基因在檐部和距部的作用機(jī)制可能不同（喬麟軼等，2012；張巍等，2013）。IuABP基因在距部的表達(dá)模式可能是在始花期促進(jìn)了細(xì)胞分裂與伸長(zhǎng)，而盛花期時(shí)其促進(jìn)作用急劇減緩。綜上所述，推測(cè)IuABP基因在滇水金鳳花距生長(zhǎng)發(fā)育過程具有重要作用，可能通過調(diào)控生長(zhǎng)素來促進(jìn)細(xì)胞的分裂與伸長(zhǎng)進(jìn)而參與調(diào)控花距的發(fā)育，但具體的調(diào)控機(jī)制有待進(jìn)一步探究。

本研究發(fā)現(xiàn)的IuABP基因?qū)儆诘崴瘌PABP亞族新成員，具有Cupin超家族典型的結(jié)構(gòu)域。IuABP基因熒光定量的結(jié)果表明IuABP基因?qū)Φ崴瘌P的花距細(xì)胞生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，但具體作用機(jī)制還需進(jìn)一步探究。在今后的實(shí)驗(yàn)中，可以利用VIGS對(duì)IuABP基因進(jìn)行沉默，驗(yàn)證IuABP基因在滇水金鳳花距細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育中的功能。對(duì)本研究的進(jìn)一步探索不僅為探究滇水金鳳花距發(fā)育的分子機(jī)制奠定研究基礎(chǔ)，還為鳳仙花花距發(fā)育、花形改良及新品種培育提供一定的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。

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（責(zé)任編輯 周翠鳴）

收稿日期：? 2022-07-29

基金項(xiàng)目：? 國(guó)家自然科學(xué)基金（32060364，32060366，31860230，31560228）； 云南省重大科技專項(xiàng)（202102AE090052）； 云南省高校園林植物與觀賞園藝科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（51700204）； 云南省園林植物遺傳改良與高效繁育博士生導(dǎo)師團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目； 云南省中青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人培養(yǎng)項(xiàng)目（2018HB024）。

第一作者： 魏春梅（1998-），碩士，研究方向?yàn)閳@林植物資源與應(yīng)用，（E-mail）weichunmei@swfu.edu.cn。

*通信作者：? 黃海泉，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)閳@林植物研究，（E-mail）haiquanl@163.com。