深海魚油對蛋雞生產(chǎn)性能及蛋黃脂肪酸富集規(guī)律的影響

李菊芬 ， 李 麗 ， 李琦華*， 楊 凱， 余開文， 楊 梅， 黃 勁， 郭 敏

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，云南 昆明 650201；3.云南省昭通市昭陽區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣服務(wù)中心，云南 昭通 657000；4.云南云箐鳳農(nóng)牧發(fā)展有限公司，云南 昆明 650200；5.昆明晉寧祥和農(nóng)牧有限公司，云南 昆明 650600）

ω-3多不飽和脂肪酸（ω-3PUFA）在人體和動物營養(yǎng)中不可或缺，主要包括α-亞麻酸（ALA）、二十二碳六烯酸（DHA）和二十二碳五烯酸（EPA）。ω-3PUFA具有提高動物生產(chǎn)和繁殖性能、促進免疫調(diào)節(jié)、提高雞蛋蛋品質(zhì)和脂肪酸富集、改善抗氧化狀態(tài)和脂質(zhì)代謝等多種生理功能（Cui等，2020；Abdulla等，2019；Reza等，2018；Mahdi等，2018）。魚油富含ω-3PUFA，是魚粉生產(chǎn)過程中魚體及其廢棄物經(jīng)蒸、壓榨和分離得到的副產(chǎn)品（喻禮懷等，2014），是EPA和DHA的優(yōu)質(zhì)原料，研究表明在眾多蛋雞膳食補充劑中，魚油可有效提高蛋黃ω-3PUFA含量（Ebeid，2011）。在實際生產(chǎn)中，動物采食含有大量ω-6PUFA的飼糧，會導(dǎo)致動物所產(chǎn)的肉和蛋中ω-6PUFA偏高而ω-3PUFA偏低，而禽肉被廣泛食用，其脂肪酸組成可以通過改變禽類膳食脂質(zhì)的脂肪酸組成進行控制，因此雞蛋作為被食用最廣的禽類產(chǎn)品，其營養(yǎng)價值高，穩(wěn)定性較高，是最理想的不飽和脂肪酸載體（趙麗娜，2007）。因此本試驗以深海魚油作為ω-3PUFA飼料源，研究其對蛋雞生產(chǎn)性能的影響及在雞蛋黃中脂肪酸富集的規(guī)律，分析出符合ω-3PUFA雞蛋生產(chǎn)最適宜的魚油添加水平，為富含ω-3PUFA營養(yǎng)調(diào)控型雞蛋的生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1試驗材料 深海魚油，由云南云箐鳳農(nóng)牧發(fā)展有限公司提供，為透明黃色狀液體，總甘油酯≥99.99%，DHA含量占總脂肪酸的14.81%（實測值）。

1.2試驗動物及分組 試驗選取198日齡體況良好、產(chǎn)蛋性能一致的海蘭灰商品蛋雞672只（昆明晉寧祥和農(nóng)牧有限公司提供），隨機分成6組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)28只進行分籠飼養(yǎng)。對照組（Ⅰ組）飼喂基礎(chǔ)飼糧，各處理組蛋雞飼糧在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上分別添加0.75%（Ⅱ組）、1.00%（Ⅲ組）、1.25%（Ⅳ組）、1.50%（Ⅴ組）、1.75%（Ⅵ組）的深海魚油，預(yù)飼期7 d，正試期共42 d。采用網(wǎng)上平養(yǎng)，自然光照加人工補光。人工加機器拌料，人工飼喂粉料，每日喂料4次（8∶00，12∶00，16∶00，20∶00），自由飲水。清糞和消毒每2 d 1次，每日記錄溫度和濕度。

1.3試驗飼糧 基礎(chǔ)飼糧為昆明晉寧祥和農(nóng)牧有限公司自配的產(chǎn)蛋高峰期蛋雞飼料，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗飼糧及深海魚油脂肪酸組成見表2。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及其營養(yǎng)水平

表2 試驗飼糧及深海魚油脂肪酸組成（占總脂肪酸的百分比%）

1.4檢測指標(biāo)及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 試驗期間每天以重復(fù)為單位，記錄蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)、破蛋數(shù)、耗料量、死淘數(shù)，計算平均日采食量、平均蛋重、產(chǎn)蛋率、破軟殼蛋率和料蛋比，計算公式如下：

日平均采食量/（g/只·d）=（每組每天的喂料量-剩余量）/每組存欄雞只數(shù)；

日平均蛋重=每組總蛋重/每組產(chǎn)蛋個數(shù)；

日均產(chǎn)蛋率=總產(chǎn)蛋數(shù)/存欄雞只數(shù)×100；

日均破軟殼蛋率=破軟殼蛋總數(shù)/總產(chǎn)蛋數(shù)×100；

料蛋比=總耗料量/總蛋重。

1.4.2 脂肪酸測定及含量計算 分別于正式試驗第7、14、28、42天，每個重復(fù)隨機抽取4枚雞蛋，分離蛋黃和蛋清，并將4枚分離得到的蛋黃混勻制成一個雞蛋樣，凍干樣品后研磨稱重，用甲醇、氯仿抽取脂肪，室溫下氫氧化鉀-甲醇甲酯化，采用氣相色譜法（Hp6890GC/5973MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀）測定脂肪酸組成和含量，各處理組飼糧及蛋黃脂肪酸含量的計算采用面積歸一法（陳秀麗等，2014）。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 用Excel整理數(shù)據(jù)，用SPSS 22.0軟件中ANOVA進行單因素方差分析，同時采用線性模型（GLM）程序分析不同添加水平下ALA、DHA和總ω-3PUFA在蛋黃中的沉積量隨時間變化的規(guī)律，采用Duncan’s法進行多重比較，顯著水平為P<0.05，極顯著水平為P<0.01，結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1飼糧添加不同水平深海魚油對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表3可知，飼喂期至第42天，隨著深海魚油添加水平的增加，蛋雞日平均采食量呈先增加后降低的趨勢，Ⅴ組在第14天時采食量達到最大，各試驗組在不同的時間段內(nèi)差異不顯著（P>0.05），第42天時，Ⅵ組蛋雞日平均采食量明顯降低（P<0.05），可能與魚油添加水平過高有關(guān)。飼糧中深海魚油的添加對蛋雞蛋重影響較大，隨著時間的延長，蛋重逐漸增加，飼喂至第7天，除Ⅵ組外（P<0.05），其他試驗組蛋重較對照組極顯著提高（P<0.01），飼喂至第14天以后各試驗組蛋雞蛋重較對照組有所降低，但差異均不顯著（P>0.05）。飼喂至第7天，除Ⅲ組產(chǎn)蛋率較對照組下降比較明顯外（P<0.05），其余各試驗組與對照組之間差異均不顯著（P>0.05）。飼喂期至第14天后，Ⅳ組產(chǎn)蛋率均高于對照組，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組之間差異均不顯著（P>0.05），Ⅲ組產(chǎn)蛋率最低，是因為試驗期內(nèi)Ⅲ組有雞只生病，導(dǎo)致產(chǎn)蛋率下降。飼喂至第7天，各試驗組破蛋率較對照組有所增加，Ⅱ組差異比較顯著（P>0.05），飼喂至第14天，Ⅵ組破蛋率明顯升高（P<0.05）；飼喂至第28天和第42天時，各試驗組破蛋率有下降的趨勢，各處理組之間差異不顯著（P>0.05）。添加深海魚油可降低蛋雞料蛋比，且隨著時間的延長，各試驗組蛋雞料蛋和破蛋率較對照組均有所降低。

表3 深海魚油添加水平對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2飼糧添加不同水平深海魚油對蛋雞蛋黃脂肪酸富集規(guī)律的影響

2.2.1 深海魚油對雞蛋黃ALA含量的影響 由表4可知，同一天數(shù)不同處理比較，在試驗第7、28天和42天時對照組和添加深海魚油的各處理組蛋黃ALA含量變化不顯著（P＞0.05）；第14天時，與對照組相比各試驗組蛋黃ALA含量都有增加的趨勢，尤以Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ3組增加比較明顯（P＜0.05），但3組之間ALA含量差異不顯著（P>0.05），與對照組相比分別升高了30.51%、25.42%和38.98%。同一處理不同天數(shù)比較，各處理組蛋黃ALA含量呈先增加后降低的趨勢。飼喂至第42天，對照組蛋黃ALA含量明顯降低（P＜0.05），第Ⅲ組蛋黃ALA含量隨時間變化不明顯（P＞0.05）；前14天，各試驗組隨著時間的延長各試驗組蛋黃中ALA的含量逐漸升高，Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組變化尤為明顯（P＜0.05），第Ⅵ組在第14天時ALA的沉積量達到最大，與第14天時相比，第42天時ALA含量顯著降低（P＜0.05）。

表4 深海魚油添加水平對雞蛋黃ALA含量的影響（占總脂肪酸的百分比）%

2.2.2 深海魚油對雞蛋黃DHA含量的影響 由表5可知，同一天數(shù)不同處理比較，第7天時，各試驗組DHA含量較對照組升高，第Ⅵ組增加比較明顯（P<0.05），各試驗組之間DHA含量差異不顯著（P＞0.05）。飼喂至第14、28、42天時，各試驗組與對照組相比DHA含量均有大幅度的提升（P<0.05），且DHA的沉積量隨魚油添加水平的增加而增加；Ⅵ組蛋黃中DHA含量在第14天時達到最大，與對照組相比升高了312%，Ⅴ、Ⅵ組之間差異不顯著（P＞0.05）；第28天時，DHA的沉積量隨魚油添加水平先升高后降低，第Ⅴ組蛋黃DHA沉積量達到3.28%，為全期最高，比對照組相比升高了412.5%。同一處理不同天數(shù)比較時，飼喂基礎(chǔ)飼糧也可以小幅增加雞蛋蛋黃中DHA含量，且在第14天時差異比較明顯（P<0.05）；在第14、28天和42天時，各試驗組蛋黃中DHA含量隨著時間的延長都有了大幅度的提升（P<0.05），在第28天蛋黃中的DHA沉積量達到最大，較第7天提高了368.57%。

表5 深海魚油添加水平對雞蛋黃DHA含量的影響（占總脂肪酸的百分比）%

2.2.3 深海魚油對蛋黃ω-3PUFA含量的影響由表6可知，蛋黃中ω-3PUFA的沉積規(guī)律與DHA的沉積規(guī)律相似。同一天數(shù)不同處理比較，飼喂至第7天時，飼喂基礎(chǔ)飼糧對蛋黃中ω-3PUFA含量變化不明顯（P＞0.05）；第14、28、42天時，與對照組相比各試驗組均顯著提高了蛋黃ω-3PUFA含量（P<0.05）。在第14、42天時，蛋黃ω-3PUFA含量隨著添加水平的增加而升高，Ⅵ組蛋黃ω-3PUFA含量在第14天時達到最大，與對照組相比升高了191.79%，Ⅴ、Ⅵ組之間差異不顯著（P＞0.05），即Ⅴ組能達到與Ⅵ組同樣的效果；第28天時，蛋黃中ω-3PUFA含量隨著添加水平的增加先升高后降低，Ⅴ組蛋黃ω-3PUFA富集量達到全期最高3.81%，且富集效果最明顯，較對照組提升了209.76%。同一處理不同天數(shù)比較時，隨著時間的延長，各處理組蛋黃ω-3PUFA的沉積均呈現(xiàn)先升高后降低的規(guī)律，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ這4組在第28天時ω-3PUFA含量達到最大值（P＜0.05），其中Ⅴ組相比于第7天提升了220.17%；Ⅵ組在第14天時ω-3PUFA沉積量達到最大（P＜0.05），較第7天升高了187.5%。

表6 深海魚油添加水平對雞蛋黃ω-3PUFA含量的影響（占總脂肪酸的百分比）%

3 討論

3.1飼糧中深海魚油添加水平對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 本試驗發(fā)現(xiàn)，在蛋雞基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平的深海魚油對蛋雞的產(chǎn)蛋率影響不顯著，蛋雞日平均采食量呈先增加后降低的趨勢，魚油添加水平過高，采食量降低；飼糧添加深海魚油可降低蛋雞料蛋比和破軟殼蛋率，隨著時間的延長，蛋重逐漸增加，試驗期內(nèi)產(chǎn)蛋率較對照組下降可能是試驗期間多為陰雨天氣，氣溫驟降，從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率下降。飼糧中添加富含ω-3PUFA的原料，能顯著影響蛋黃ω-3PUFA的組成，但對蛋雞生產(chǎn)性能的影響也一直是人們所關(guān)注的重點。喻禮懷等（2014）在花鳳蛋雞基礎(chǔ)飼糧中添加3%深海魚油，結(jié)果表明添加魚油對蛋雞生產(chǎn)性能無不良影響，試驗組蛋重和產(chǎn)蛋率較對照組有所降低，但差異不顯著，本試驗結(jié)果與其一致。這是因為提高基礎(chǔ)飼糧中ω-3PUFA水平會導(dǎo)致蛋黃中ω-6PUFA的沉積量降低，ω-6PUFA的不足導(dǎo)致脂質(zhì)向卵巢的轉(zhuǎn)運速度減慢，脂蛋白合成減少，血漿雌二醇水平降低，從而抑制卵泡發(fā)育（盧元鵬，2009；Herber，1996），導(dǎo)致蛋重降低。

3.2飼糧中深海魚油添加水平對雞蛋黃ω-3PUFA含量的影響Cruickshank（1934）發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)飼糧中的脂肪酸組成及含量可以影響雞蛋蛋黃中脂肪酸的組成。Konieczka等（2017）報道，用魚油、豬油、亞麻籽以及油菜籽相結(jié)合方式來飼喂蛋雞，可誘導(dǎo)雞肉脂質(zhì)中EPA和DHA的沉積。Elswyk等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，添加3%魚油可使蛋黃中的ALA和DHA含量大幅度提高，EPA的含量亦顯著上升；也有研究表明蛋黃中ω-3PUFA沉積效率為：ALA>DHA>EPA（齊廣海，1995）。在本試驗中蛋黃EPA含量很少所以忽略不計，可能是由于蛋雞體內(nèi)存在著EPA的血卵屏障，將EPA阻擋在屏障之外，幾乎不能進入卵黃內(nèi)，對DHA卻無明顯屏障作用，這與人體內(nèi)EPA的血腦屏障作用一致，也可能與蛋雞品種、飼喂方式、試驗時間短從而轉(zhuǎn)化不完全有關(guān)。本試驗結(jié)果表明，隨著深海魚油添加水平的增加，各處理組蛋黃中ALA、DHA含量隨添加量增加而增加，ω-3PUFA含量也升高，1.5%魚油組表現(xiàn)出較好的沉積效果，但隨著時間延長脂肪酸并不會無限富集，到達高峰以后會有所下降，這說明ω-3PUFA在蛋黃中的富集具有一定的時間效應(yīng)和劑量效應(yīng)，添加量過高或時間過長反而會抑制其吸收代謝。綜合本試驗蛋黃中ω-3PUFA的富集規(guī)律，在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上深海魚油最佳添加量為1.5%。

4 結(jié)論

本試驗條件下，蛋雞基礎(chǔ)飼糧中深海魚油最適宜添加量為1.5%，可有效促進ALA、DHA和ω-3PUFA在蛋黃中的沉積，且對蛋雞的生產(chǎn)性能無不良影響。