抗青枯病花生種質(zhì)資源的鑒定與篩選

楊光 李航宇 陳龍 石守設(shè) 余明慧

摘要：為篩選適宜河南省信陽(yáng)市種植的抗青枯病花生品種，對(duì)27份花生品種青枯病田間病圃進(jìn)行鑒定，計(jì)算其發(fā)病率和病情指數(shù)，從而進(jìn)行抗病性鑒定和篩選。結(jié)果表明，27個(gè)供試品種中，中高抗品種共10個(gè)占總數(shù)的37%，3個(gè)品種類型各篩選出2個(gè)抗病品種。6個(gè)抗病品種發(fā)病規(guī)律表明，7天和14天病情指數(shù)增長(zhǎng)較快，21天后基本無(wú)變化。高油型花生‘遠(yuǎn)雜9102和‘信花425，高油酸型花生‘信花14號(hào)和‘駐花11號(hào)，普通型花生‘遠(yuǎn)雜21號(hào)和‘豫花149號(hào)為適宜信陽(yáng)種植的抗病品種。

關(guān)鍵詞：花生;青枯病;抗性鑒定;抗病品種;篩選

中圖分類號(hào)：S432.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A論文編號(hào)：cjas2020-0181

Identification and Evaluation of Peanut Germplasm Resistance to Bacterial Wilt

YANG Guang，LI Hangyu，CHEN Long，SHI Shoushe，YU Minghui

（Xinyang City Academy of Agricultural Science，Xinyang 464000，Henan，China）

Abstract：To select peanut cultivars which are resistant to bacterial wilt and suitable to grow in Xinyang of Henan Province，27 peanut cultivars were planted with bacterial wilt root soaking in field，and the incidence rate and disease index were calculated. Then we carried out disease resistance identification and screening. The results indicate that there are 10 cultivars with high and medium resistance to bacterial wilt，accounting for 37% of the total，among the 3 cultivar types，2 are resistant to the disease. The occurrence regularity of 6 resistant cultivars shows that the disease index increases rapidly on the 7th and 14th day，and there is no change after 21 days. The high oil type ‘Yuanza 9102and ‘Xinhua 425，high oleic type ‘Xinhua 14and ‘Zhuhua 11，and ordinary type ‘Yuanza 21and ‘Yuhua 149are disease-resistant cultivars suitable for cultivation in Xinyang.

Keywords：Peanut;Bacterial Wilt;Identification;Disease Resistant Variety;Screen

0引言

花生作為重要的油料作物，在國(guó)內(nèi)具有較強(qiáng)比較優(yōu)勢(shì)和國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力[1]。河南省是中國(guó)花生生產(chǎn)第一大省，2019年種植面積超過(guò)130萬(wàn)hm²[2]，信陽(yáng)作為黃淮海高油花生區(qū)，常年種植面積6萬(wàn)hm²以上[3]。在6—8月青枯病發(fā)病高峰期，花生莖和葉枯萎，最后植株全株死亡?；ㄉ嗫莶〉牟≡鸀榍芽评谞柺暇≧alstonia solanacearum）[4]，1905 年印度尼西亞首次發(fā)現(xiàn)花生青枯病，1930年前后在中國(guó)發(fā)現(xiàn)花生青枯病，在國(guó)內(nèi)南方地區(qū)造成嚴(yán)重危害，造成花生產(chǎn)量和品質(zhì)降低[5]。青枯病菌群體組成十分復(fù)雜，存在著明顯的生理分化;不同的地域、不同寄主來(lái)源青枯菌的種類也存在差異，增加了該病的防治難度[6]?？祻┢絒7]在演化型分類框架上對(duì)國(guó)內(nèi)花生青枯菌菌株進(jìn)行了研究，明確了長(zhǎng)江流域和南方地區(qū)花生青枯菌的遺傳多樣性和對(duì)花生致病性。丁雪玲[8]設(shè)計(jì)特異性引物W1/W2與細(xì)菌通用引物L(fēng)1/L2建立了花生青枯病菌的巢式PCR檢測(cè)方法，該技術(shù)可以用于潛伏期及發(fā)病前期的病害檢測(cè)。陸濟(jì)[9]從花生根際土壤中分離到的300多種菌株篩選出拮抗菌株A38，對(duì)中抗青枯病品種‘航花3號(hào)防效達(dá)到52.71%。Yoshida[10]在花生剛發(fā)病時(shí)，使用300～400倍的0.5% OS-施特靈水劑灌根1～2次或采用鏈浸種或灌根都具有一定的防治效果。目前防治花生青枯病的化學(xué)藥劑防效低、成本高，生物藥劑防效不太穩(wěn)定[11];最經(jīng)濟(jì)有效防治花生青枯病的方法是選育抗病品種[12]。筆者通過(guò)對(duì)河南省內(nèi)科研院所培育的27 份不同類型花生品種進(jìn)行抗青枯病鑒定及評(píng)價(jià)，旨在篩選出一批適宜信陽(yáng)種植的抗青枯病花生品種。

1材料與方法

1.1材料

2018年發(fā)病高峰期在信陽(yáng)肖王鄉(xiāng)取發(fā)病植株，對(duì)病原菌進(jìn)行分離純化并保存[13]。供試材料為27份花生品種，對(duì)照為高抗品種‘中花6號(hào)和高感品種‘中花12號(hào)。選取的27份供試品種包括高油品種7個(gè)（‘漯花21號(hào)、‘漯花19號(hào)、‘宛花7號(hào)、‘遠(yuǎn)雜20號(hào)、‘遠(yuǎn)雜9102、‘豫花159和‘信花425）、高油酸品種10個(gè)（‘駐花11、‘信花14、‘商花186、‘鄭農(nóng)花25號(hào)、‘商花296、‘豫花134號(hào)、‘濮花71號(hào)、‘豫花154號(hào)、‘豫花150號(hào)、‘豫花139號(hào)）、普通品種10個(gè)（‘安花5號(hào)、‘信花12號(hào)、‘駐花7號(hào)、‘豫花142號(hào)、‘豫花143號(hào)、‘豫花144號(hào)、‘豫花149號(hào)、‘遠(yuǎn)雜21號(hào)、‘豫花132號(hào)、‘豫花176號(hào)）?！呕ㄏ盗衅贩N由信陽(yáng)市農(nóng)科院選育，其他品種由河南省農(nóng)科院和省轄市農(nóng)科院選育和提供。

1.2品種抗性評(píng)價(jià)

2019年6月10日在信陽(yáng)農(nóng)科院湖東試驗(yàn)基地對(duì)27份供材料和2份對(duì)照材料定量點(diǎn)播，每組試驗(yàn)品種隨機(jī)排列，每個(gè)小區(qū)2 m²，種植20粒，每粒間隔10 cm，重復(fù)3次。在花生6葉期用菌液浸根法[14]通過(guò)滴灌設(shè)備對(duì)27份供試材料和2份對(duì)照品種根部滴施濃度為1.0×10⁸cfu/mL菌液各5 mL，并使土壤保持濕潤(rùn)。調(diào)查每份材料的發(fā)病情況，計(jì)算發(fā)病率[式（1）]并做抗性評(píng)價(jià)。

發(fā)病率發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100%（1）

根據(jù)花生青枯病抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[15]將發(fā)病率≤1%定為免疫（I），1%<發(fā)病率≤20%定為高度抗?。℉R），21%<發(fā)病率≤45%定為中度抗?。∕R），45%<發(fā)病率≤60%定為中度感?。∕S），發(fā)病率61%以上定為高度感病（HS）。

1.3抗性規(guī)律調(diào)查

在高油、高油酸和普通型中各選擇2個(gè)抗病性表現(xiàn)最好的品種，在每小區(qū)每隔7天共5次進(jìn)行病情調(diào)查，重復(fù)3次，計(jì)算病情指數(shù)[式（2）]。

分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[16]。0級(jí)，無(wú)發(fā)病;1級(jí)，接種植株只有少數(shù)葉片出現(xiàn)小的褪綠斑;2級(jí)，接種植株有1/3的葉片出現(xiàn)褪綠斑，植株輕度凋萎;3級(jí)，接種植株有1/3～2/3的葉片出現(xiàn)褪綠斑，植株發(fā)病凋萎，莖部出現(xiàn)黑色病斑;4級(jí)，接種植株全部葉片均出現(xiàn)褪綠斑，植株凋萎或枯死。

2結(jié)果與分析

2.1品種抗病評(píng)價(jià)

對(duì)27個(gè)供試品種和2個(gè)對(duì)照品種進(jìn)行方差分析（表1）。高感對(duì)照'中花12號(hào)'發(fā)病率91.19%最高，高抗對(duì)照‘中花6號(hào)發(fā)病率7.91%最低，供試菌液致病性較好;27個(gè)供試品種高抗品種1個(gè)（占鑒定總數(shù)的3.72%），中抗品種9個(gè)（占鑒定總數(shù)的33.33%），中感品種13個(gè)（占鑒定總數(shù)的48.14%），高感品種4個(gè)（占鑒定總數(shù)的14.81%）。3個(gè)品種類型中，高油型花生高抗（‘遠(yuǎn)雜9102）和中抗‘信花425）品種各1個(gè)（圖1），高油酸型花生中抗品種4個(gè)（‘商花186、‘鄭農(nóng)花25號(hào)、‘信花14號(hào)和‘駐花11號(hào)），普通型花生中抗品種4個(gè)‘豫花149號(hào)、‘遠(yuǎn)雜21號(hào)、‘安花5號(hào)和‘豫花132號(hào)）。高油型花生高感品種3個(gè)，普通型花生高感品種1個(gè)，高油酸型花生無(wú)高感品種;高油型花生高感品種較多，占所有高感品種的75%。

在各型花生中各挑選出抗病性最好的2個(gè)品種，高油型抗病品種為‘遠(yuǎn)雜9102、‘信花425，高油酸型抗病品種為‘信花14號(hào)、‘駐花11號(hào)，普通型抗病品種為‘遠(yuǎn)雜21號(hào)、‘豫花149號(hào)。

2.2抗病品種發(fā)病規(guī)律

對(duì)供試品種的病情指數(shù)調(diào)查中，6個(gè)供試品種和對(duì)照品種在7天和14天病情指數(shù)增長(zhǎng)較快，21天后病指增長(zhǎng)較慢;‘遠(yuǎn)雜910214天后病指沒(méi)有變化，其他5個(gè)供試品種都在28天后病指無(wú)變化（表2）。7天時(shí)供試品種‘遠(yuǎn)雜9102、‘遠(yuǎn)雜21號(hào)和‘豫花149號(hào)的病指和對(duì)照相比差異不顯著;35天時(shí)‘遠(yuǎn)雜9102的病指和對(duì)照相比差異不顯著。

3結(jié)論

對(duì)27個(gè)供試花生品種進(jìn)行抗青枯病評(píng)價(jià)，普通型花生品種和高油酸型花生品種總體抗病性較好;高油型花生品種抗病性總體較弱，個(gè)別較強(qiáng)。高油型花生‘遠(yuǎn)雜9102和‘信花425，高油酸型花生‘信花14號(hào)和‘駐花11號(hào)，普通型花生‘遠(yuǎn)雜21號(hào)和‘豫花149號(hào)為相對(duì)適宜信陽(yáng)種植的抗青枯病品種。

4討論

筆者通過(guò)試驗(yàn)篩選出高油、高油酸和普通型抗青枯病品種，但未對(duì)這幾個(gè)品種產(chǎn)量和生理生化指標(biāo)以及品種抗葉斑病、根腐病等其他病害的抗性做進(jìn)一步研究。

近30年來(lái)，中國(guó)在花生青枯病抗性遺傳改良及應(yīng)用方面取得了很大進(jìn)展，抗源幾乎都來(lái)源于‘協(xié)抗青、‘臺(tái)山三粒肉等少數(shù)幾個(gè)疏枝亞種種質(zhì)[17]。但是通過(guò)對(duì)抗青枯病花生品種的產(chǎn)量、品質(zhì)及品種的系譜分析比較，發(fā)現(xiàn)抗病品種的莢果小，產(chǎn)量普遍低于具有相同生態(tài)適應(yīng)性的非抗病品種的20%左右[18-20];而且品質(zhì)性狀差，尤其是含油量和油酸含量偏低;而這些抗源種質(zhì)的抗性與高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)存在負(fù)相關(guān)[21-22]。河南省農(nóng)科院利用二倍體野生種Arachis chacoense與栽培種遠(yuǎn)緣雜交，選育出‘遠(yuǎn)雜9102和‘遠(yuǎn)雜93072個(gè)高油高抗青枯病品種[23-25]。本研究通過(guò)大田抗病性篩選驗(yàn)證了‘遠(yuǎn)雜9102高抗青枯病。

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