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    小麥及其饅頭制品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量的測定*

    2021-08-19 07:06:04寧,趙佳,2,任
    糧食加工 2021年1期
    關(guān)鍵詞:發(fā)酵粉麥粉特制

    劉 寧,趙 佳,2,任 歌

    (1.陜西科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,西安 710021;2.西安市糧油質(zhì)量檢驗中心,西安710003)

    小麥赤霉病由多種鐮刀菌引起,是全球范圍內(nèi)小麥的主要病害之一。病麥中的鐮刀菌可產(chǎn)生多種單端孢子,這種單端孢子大多可產(chǎn)毒,即為單端孢霉烯族毒素。谷物中常見的單端孢霉烯族毒素有20多種,其中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是小麥中最主要的糧食污染毒素之一[1]。2016年,在河北抽樣調(diào)查的672份小麥樣品中,有91.5%的樣品檢出DON[2]。2020年3月,《消費者報道》整理了國家、省級市場監(jiān)督管理局以及部分省市市場和質(zhì)量監(jiān)督管理委員會公布的自2015年2月~2020年2月對小麥粉的質(zhì)量抽檢數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示,近5年監(jiān)管部門共檢出235批次不合格小麥粉,其中DON超標(biāo)導(dǎo)致小麥粉不合格問題最為突出,不合格比例為76.6%。DON慢性毒性實驗發(fā)現(xiàn),攝入DON會導(dǎo)致肝癌的發(fā)生。知名國際癌癥研究機(jī)構(gòu)IARC已將DON列為第3類致癌物質(zhì)[3]。

    小麥?zhǔn)俏覈?大主食來源之一,小麥粉及其制品中的DON超標(biāo)事件屢次發(fā)生,在一次對安徽省人群膳食DON暴露量的調(diào)查發(fā)現(xiàn),饅頭、花卷和面條等小麥制品是其主要暴露來源[4]。據(jù)報道,因小麥品種的不同,毒素侵入小麥籽粒的程度有所不同,經(jīng)碾磨后,小麥制出的面粉及面制品中毒素含量也存在差異。本研究以自然污染小麥為對象,加工制成全麥粉、特制二等粉,并進(jìn)一步加工制成饅頭,探究發(fā)酵粉和添加食用堿面對饅頭中DON含量的影響,旨在為小麥制粉和饅頭加工企業(yè)對DON的控制提供一定的理論參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    自然污染小麥:實驗室留存;甲醇:色譜純,德國默克公司;DON 標(biāo)準(zhǔn)樣品(1000 mg/kg):色譜純,國家糧科院;硫酸:分析純,天津科密歐化學(xué)試劑有限公司。

    1.2 主要儀器與設(shè)備

    JFSD-70實驗室粉碎磨:上海嘉定糧油儀器有限公司;LRMM8040-3-D實驗?zāi)シ蹤C(jī):無錫錫糧機(jī)械制造有限公司;JXFM110全自動錘式旋風(fēng)磨:鄭州中谷機(jī)械設(shè)備有限公司;JHMZ 200和面機(jī)、JXFD 12恒溫恒濕醒發(fā)箱:北京東方孚德技術(shù)發(fā)展中心;Z-32-HK高速冷凍離心機(jī):德國HERMLE公司;R5901免疫親和柱:德國拜發(fā)中國子公司;Agilen 1200高效液相色譜儀:安捷倫科技(中國)有限公司;Turbovap Lv氮吹儀:拜泰齊貿(mào)易(上海)有限公司。

    1.3 實驗方法

    1.3.1 全麥粉、特制二等粉和饅頭的制備

    以實驗室留存自然污染小麥樣品為原料,進(jìn)行全麥粉和特制二等粉的制備。制備前挑出小麥樣品中的雜質(zhì)[5],用濕布擦去麥粒表面灰塵并晾干,倒入錘式旋風(fēng)磨制備全麥粉。參照GB/T 20571-2006《小麥儲存品質(zhì)判定規(guī)則》[6]使用實驗室磨粉機(jī)制備特制二等粉。

    使用已制得的全麥粉和特制二等粉進(jìn)行饅頭的加工,其方法參照GB/T 20571-2006附錄A《小麥蒸煮品質(zhì)評定試驗方法》。加工好后晾干,粉碎備用。

    1.3.2 小麥質(zhì)量及品質(zhì)檢測

    參照GB 1351-2008《小麥》[7]檢測小麥的質(zhì)量指標(biāo),包括水分、容重、不完善粒、雜質(zhì)、色澤氣味等。參照GB/T 14614-2019《糧油檢驗 小麥粉面團(tuán)流變學(xué)特性測試 粉質(zhì)儀法》、GB/T 14615-2019《糧油檢驗小麥粉面團(tuán)流變學(xué)特性測試 拉伸儀法》、GB 5009.5-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》、GB/T 10361-2008《小麥、黑麥及其面粉,杜倫麥及其粗粒粉降落數(shù)值》等檢測小麥的品質(zhì)指標(biāo),包括穩(wěn)定時間、拉伸面積、粗蛋白、降落數(shù)值、沉降值、面筋指數(shù)等。

    1.3.3 全麥粉、特制二等粉質(zhì)量指標(biāo)檢測

    參照 LS/T 3244-2015《全麥粉》、GB 1355-1986《小麥粉》檢測全麥粉和小麥粉的質(zhì)量指標(biāo)。

    1.3.4 小麥籽粒、全麥粉、小麥粉及饅頭等制品中DON含量測定

    制備全麥粉、特制二等粉、全麥粉饅頭、特制二等粉饅頭,參照GB 5009.111-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙?;苌锏臏y定》中的高效液相色譜法,進(jìn)行樣品中DON的提取、凈化、洗脫等操作,上機(jī)檢測。

    1.3.5 饅頭加工影響因素實驗

    根據(jù)饅頭蒸制的常用方法,以自然污染DON的小麥制備的特制二等粉為原料,設(shè)計不同酵母、食用堿面添加量進(jìn)行饅頭的蒸制,研究DON在饅頭加工過程中含量變化的有效影響因素。

    (1)發(fā)酵粉添加量:設(shè)計 0.2 g、0.5 g、1.0 g、2.0 g及3.0 g酵母粉添加量,將其溶于40 mL 38℃的蒸餾水中,加入自然污染小麥加工制得的特制二等粉中進(jìn)行饅頭加工,特制二等粉的用量為200 g,研究不同發(fā)酵粉添加量對DON去除效果的影響。

    (2)食用堿面添加量:將0.8 g酵母粉溶于40 mL 38℃的蒸餾水中,加入自然污染小麥加工制得的特制二等粉進(jìn)行和面,待醒發(fā)過程結(jié)束后,分別加入 0.1 g、0.2 g、0.3 g、0.4 g 及 0.5 g 食用堿面, 簡單揉制壓片成型、二次醒發(fā)及蒸制,在二次醒發(fā)后和蒸制后分別取樣,研究不同食用堿面添加量對DON去除效果的影響。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 小麥質(zhì)量及品質(zhì)檢測結(jié)果

    小麥的質(zhì)量檢測項目包括容重、不完善粒、雜質(zhì)、水分、色澤氣味等。容重是小麥質(zhì)量的綜合標(biāo)志,與籽粒的組織結(jié)構(gòu)、化學(xué)成分、籽粒形狀、含水量、比重等密切相關(guān)。以容重大小衡量小麥等級,3等容重為750~770 g/L,這是小麥允許入庫儲存的最低標(biāo)準(zhǔn)。不完善粒是指受到損傷但尚有食用價值的小麥籽粒,包括蟲蝕粒、病斑粒、破損粒、生芽粒和生霉粒。其中病斑粒、生霉粒對小麥的DON污染有正相關(guān)關(guān)系。小麥中的水分包含籽粒里的游離水和結(jié)合水,其與小麥總重量的百分比即小麥的水分含量,它是反映小麥耐儲藏性能的指標(biāo)。由表1可知,本實驗小麥屬于3等麥,不完善粒小于8.0%,雜質(zhì)總量小于1.0%,水分小于12.5%,質(zhì)量指標(biāo)均未出現(xiàn)超標(biāo)情況。

    表1 小麥質(zhì)量檢測結(jié)果

    小麥的品質(zhì)檢測項目包括穩(wěn)定時間、拉伸面積、降落數(shù)值、沉降值、粗蛋白及面筋指數(shù)等。其中穩(wěn)定時間反映面團(tuán)的耐攪拌程度,穩(wěn)定時間越長,說明面粉筋力越強(qiáng),韌性越好。小麥專用粉(饅頭粉、面條粉等)質(zhì)量指標(biāo)中明確規(guī)定了穩(wěn)定時間值,以確保小麥粉品質(zhì)。拉伸面積即拉伸能量,能量越大,筋力越強(qiáng),烘焙質(zhì)量越好,當(dāng)其小于50 cm2時,小麥粉烘焙特性較差。小麥硬度反應(yīng)小麥胚乳的質(zhì)地,是抵抗外力作用下發(fā)生破碎和變形的能力,它是評價小麥加工品質(zhì)和食用品質(zhì)的重要指標(biāo),也是小麥分類和定價的重要依據(jù)。硬度指數(shù)不低于60為硬質(zhì)小麥,硬度越高面筋含量及質(zhì)量越高。面筋指數(shù)越大,面筋筋力越強(qiáng),反之,面筋指數(shù)越小,面筋筋力越弱。有實驗表明[8],面筋指數(shù)為45%~65%時,最適用于饅頭的制作。面筋吸水率是小麥儲存品質(zhì)的重要指標(biāo),當(dāng)面筋吸水率低于180%時,已為輕度不宜存小麥。

    由表2可知,本實驗小麥穩(wěn)定時間處于3~5 min之間,拉伸面積大于50 cm2,沉降值處于30.0~45.0 mL之間,粗蛋白(干基)小于14%,大于11.5%,可作為中筋小麥粉的原料。降落數(shù)值大于190 s,面筋吸水量大于180%,屬于宜存小麥。硬度為68.4%,為硬質(zhì)小麥。面筋指數(shù)處于45%~65%之間,適用于饅頭的制作。綜合來看,自然污染DON的小麥質(zhì)量和品質(zhì)未出現(xiàn)降低現(xiàn)象。

    表2 小麥品質(zhì)檢測結(jié)果

    2.2 全麥粉、特制二等粉質(zhì)量指標(biāo)檢測

    將自然污染小麥進(jìn)行全麥粉和特制二等粉的制備后,對其質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行檢測,實驗結(jié)果見表3、表4。由表3可知,全麥粉水分含量為10.3%,小于小麥籽粒的水分11.6%?;曳郑ㄒ愿苫嫞?.6%,總膳食纖維含量(以干基計)為23.1%,含砂量、磁性金屬物未檢出,質(zhì)量指標(biāo)全部符合國標(biāo)要求。脂肪酸值(以干基KOH計)為37.3 mg/100 g,質(zhì)量良好。

    表3 全麥粉質(zhì)量檢測結(jié)果

    由表4可知,特制二等粉的水分為13.4%,灰分(以干基計)為0.58%,面筋質(zhì)(以濕重計)為29.1%,脂肪酸值(以干基KOH計)為21.3 mg/100 g,含砂量、磁性金屬物未檢出。粗細(xì)度為全部通過CB30號篩,留存在CB36號篩的為0.2%,質(zhì)量指標(biāo)均符合國標(biāo)要求。由此可得,自然污染DON的小麥加工制得的全麥粉和特制二等粉的質(zhì)量不一定會降低。

    表4 特制二等粉質(zhì)量檢測結(jié)果

    2.3 小麥及饅頭等制品中DON含量測定

    取 50 μL濃度為 0.1~1.0 μg/mL的 DON 標(biāo)準(zhǔn)工作液,按液相色譜條件進(jìn)行檢測,得到如圖1所示的DON標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖。由圖1知,DON標(biāo)準(zhǔn)樣品的保留時間為6.651 min,目標(biāo)峰分離度良好,未見拖尾等不良現(xiàn)象。以DON標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo),繪制DON標(biāo)準(zhǔn)曲線??傻玫紻ON標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=38.854x-3.0071,相關(guān)系數(shù)R2=0.9987,線性關(guān)系較好。

    圖1 DON標(biāo)準(zhǔn)溶液高效液相色譜圖

    全麥粉是由小麥籽粒經(jīng)清理后不脫皮進(jìn)行整籽粒磨粉后制得的,特制二等粉是小麥經(jīng)過清理、潤麥、小麥皮磨和心磨后所制得的小麥粉。兩種制粉方法的主要區(qū)別在于小麥麥皮的去除與否。由圖2可知,自然污染小麥中的DON含量為0.881 mg/kg。全麥粉DON的含量較原小麥有所升高。吳麗[9]的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),熱加工會使得DON乙?;苌镛D(zhuǎn)化為DON。本實驗中,由于小麥基質(zhì)存在復(fù)雜性,采用全自動錘式旋風(fēng)磨進(jìn)行磨粉時會產(chǎn)生摩擦熱,這可能導(dǎo)致小麥中少許DON乙?;苌镛D(zhuǎn)化成DON,從而表現(xiàn)出DON檢出水平的升高。特制二等粉DON的含量較原小麥均有所下降,其主要原因是經(jīng)過皮磨,小麥的麥皮被去除,富集在麥皮上的DON隨之被去除,從而表現(xiàn)出DON檢出水平的降低。磨粉后所得的麩皮中DON的含量較原小麥升高幅度較大,這也進(jìn)一步說明DON在污染小麥的麥皮中的分布更多。全麥饅頭中DON的含量較原小麥和全麥粉相差不大,而特制二等粉饅頭中DON的含量較原小麥和特制二等粉有一定下降。由此可得,隨著加工工序的逐步增多,小麥制品中DON含量逐步降低。

    圖2 自然污染小麥及其制品中DON含量

    2.4 不同因素對饅頭加工中DON的含量影響

    2.4.1 發(fā)酵粉添加量的影響

    饅頭加工過程中,酵母對面團(tuán)的發(fā)酵起到關(guān)鍵性作用。本實驗中,饅頭蒸制選用特制二等粉(用量為200 g),其DON含量為0.822 mg/kg。由圖3可知,當(dāng)饅頭中發(fā)酵粉的添加量為0.2 g時,發(fā)酵面團(tuán)中DON的含量為0.795 mg/kg。當(dāng)發(fā)酵粉的添加量增大為3.0 g時,DON的含量為0.781 mg/kg。與饅頭制備原料特制二等粉相比,發(fā)酵粉的添加對DON含量變化的影響不大。

    圖3 不同發(fā)酵粉添加量饅頭中DON的含量

    2.4.2 食用堿面添加量的影響

    傳統(tǒng)的饅頭制作過程中常添加食用堿面,其主要成分是碳酸鈉。可中和面團(tuán)發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酸,改善口感。一般蒸制過程中,當(dāng)堿面添加量高于0.5g時(特制二等粉用量為200 g),饅頭會有明顯的堿味,影響口感。因此,本實驗研究了0.1~0.5 g食用堿面添加量對饅頭中DON去除效果的影響,結(jié)果如圖4所示??梢园l(fā)現(xiàn),在醒發(fā)后和蒸制后取樣,隨著食用堿面添加量的增大,饅頭中DON的含量不斷降低,其去除率均不斷升高。與特制二等粉相比,經(jīng)計算,加堿醒發(fā)后DON的去除率為4.99%~8.52%,加堿蒸制后的去除率為10.10%~24.57%。隨著加堿量的增大,DON的去除率也隨之升高。當(dāng)食用堿面的添加量為0.5 g時,DON的去除率最高。由此可知,加堿和蒸制過程對饅頭中DON的去除均較為有效。

    圖4 不同食用堿面添加量饅頭醒發(fā)后和蒸制后DON的含量

    3 結(jié)論

    自然污染DON對小麥及其制得的全麥粉、特制二等粉的品質(zhì)指標(biāo)未產(chǎn)生影響。全麥粉加工過程未去除麥皮且有摩擦熱產(chǎn)生,會導(dǎo)致部分DON乙酰基衍生物結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,間接增加了全麥粉中DON的含量。特制二等粉的加工過程中,小麥的麥皮被去除,富集在麥皮上的DON隨之被去除,使得特制二等粉中的DON含量下降。一般來說,隨著加工工序的增多,制品中DON的含量逐步降低。發(fā)酵粉的添加對饅頭中DON的去除率影響不大,添加一定量的食用堿面,可有效去除饅頭中的DON。

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