高效液相色譜法快速檢測在乳品檢測中的應(yīng)用

秦思文

摘 要：隨著社會(huì)市場經(jīng)濟(jì)的大力發(fā)展，人們對更高品質(zhì)的生活有著更強(qiáng)烈的追求，在日常生活中，對營養(yǎng)的補(bǔ)充也是非常重要的。不少人會(huì)選擇通過乳制品來補(bǔ)充蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，在乳制品中有一款產(chǎn)品就是酸奶，酸奶在牛奶的基礎(chǔ)上增加了風(fēng)味，其本質(zhì)就是多了一種有機(jī)酸，而有機(jī)酸的存在就能有效抑制有害菌種的產(chǎn)生，同時(shí)還提高了酸奶的口號(hào)，因此，為保證乳制品的食品安全，必須進(jìn)行有機(jī)酸的相關(guān)檢測工作。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法;乳制品檢測;有機(jī)酸

為提高乳制品的食品安全品質(zhì)，會(huì)采用當(dāng)前科學(xué)權(quán)威的檢查方法，對乳制品中有機(jī)酸的成分進(jìn)行檢測。現(xiàn)目前常用的檢測方法有以下三種，即離子色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法。本文主要針對高效液相色譜法檢測乳制品進(jìn)行詳細(xì)分析，得出該方法是當(dāng)前檢測方法中操作最為簡單，同時(shí)兼具極高的準(zhǔn)確度。因此，該方法是乳制品行業(yè)應(yīng)用最廣泛的檢測途徑，并且可以同時(shí)完成9種有機(jī)酸的檢測，在市面上具有超高的實(shí)用價(jià)值。

一、通過高效液相色譜法檢測所需要的材料及檢測方法

1、檢測中所需要用到的相關(guān)儀器

在進(jìn)行高效液相色譜法檢測乳制品的過程中，通常會(huì)使用到以下幾種儀器，其中包括高效液相色譜儀（ PE -200型）超聲、波振蕩儀（ KQ -250型）可見分光光度計(jì)（ UV -260）離心機(jī)。

2、檢測中所需要用到的相關(guān)試劑

所需運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)試劑來檢測乳制品中存在有機(jī)酸的成分，其中包括乳酸，乙酸、檸檬酸，草酸、酒石酸、丁二酸、丙酸等，將這些試劑日常用于冰箱保存，作為后期檢測中所需的貯備液。

3、檢測時(shí)具體的實(shí)驗(yàn)方法及步驟

首先是需要滿足色譜條件，將色譜柱設(shè)置為C18桂（5u m .250×4.6mm），其中所需的桂溫：25C;流動(dòng)相：甲醇：0.01mol/ L （ NH ） HO 緩沖溶液pH2.8;流速：0.7m1/mnin：可見光一紫外檢測器，檢測波長215rm。

另外還需通過對檢測樣品進(jìn)行處理和測定，選擇實(shí)驗(yàn)所需的酸奶，將其重量攝取為2g，將其存放于10ml的比色管中，再通過超純水將其稀釋至10ml，將比色管搖勻后進(jìn)行超聲脫氣，在已備好的樣品中取出400 u L .稀釋酸奶于 Eppendof 管中，再在其中加入100 u L 超純水和3.5mol/ L 高氯酸25uL，將其混勻，再對其進(jìn)行離心（12000r/ m ，6min），通過以上幾個(gè)步驟，使得乳制品中的蛋白成分被充分的沉淀，之后再取上清液過0.45u m 濾膜作為樣液。樣液及自制的混合標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液均取10uL，在相同特定的時(shí)間內(nèi)，觀察其數(shù)量的變化并制定標(biāo)準(zhǔn)的曲線圖來判斷其量變的效果。

二、對已檢測到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行深入的研究

當(dāng)前市面上采用的高效液相色譜法進(jìn)行乳制品檢測，該方法憑借著操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確優(yōu)點(diǎn)得到乳制品相關(guān)行業(yè)的廣泛應(yīng)用，高效液相色譜法檢測主要是從1970年開始得到全面快速的發(fā)展。具體實(shí)驗(yàn)操作中，根據(jù)不同的分離機(jī)制，可以將高效液相色譜法分為以下幾種，不同的類型液周色譜法、液相色譜法、離子交換色譜、離子色譜。色譜法應(yīng)該得到更多更廣泛的應(yīng)用。

具體高效液色譜法所具備的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)如下：

1、高效液相色譜法需要超高的電壓

在高效液相色譜法具體的實(shí)驗(yàn)中，需要將液體作為流動(dòng)相的載體，讓液體流通色譜柱，需要更大的高電壓來輔助完成，促使液體流過的壓力較大且速度較快，一般會(huì)給予液體的壓力為150-350x105pa。

2、高效液相色譜法需要超高的速度及效率

在被檢測的樣品中，每一個(gè)液體都受著高壓的影響，導(dǎo)致其流速非常的快，并迅速抵達(dá)色譜柱，由于速度過快，因此給與分析所需的時(shí)間，就與其他經(jīng)典液相不足相比要短暫很多。由于速度較快，所以就給后期判斷分析的時(shí)間較短，因此，需要高效液相色譜柱的效率非常的高。最高可達(dá)超過30000板/ m 。

3、高效液相色譜法具有較高的靈敏度和分辨率且適用范圍較廣

在進(jìn)行高效液相色譜法快速檢測乳制品的應(yīng)用時(shí)，由于本身所需要的相關(guān)檢測設(shè)備具有較高的靈敏度，設(shè)備通過設(shè)置后可進(jìn)行自動(dòng)操作，且具有較高的分析精度，在進(jìn)行檢測的過程中，需要采樣的樣本量較少。在檢測的具體過程中，由于其具有較高的分辨率，所以可以直接將機(jī)器設(shè)置為固定象，這樣在流動(dòng)性經(jīng)過時(shí)可以達(dá)到最佳的分離效果。高效液相色譜法還具有一個(gè)非常理想的使用特點(diǎn)，就是其具有較廣的適用范圍，基本市面上70%以上的有機(jī)化合物均可以使用高效液相色譜法來完成物質(zhì)含量的分析，尤其是分析物質(zhì)具有高沸點(diǎn)、大分子、極性強(qiáng)、熱穩(wěn)定性差的特點(diǎn)，仍然可以通過高效液相色譜法完成分離和分析，展現(xiàn)出高效液相色譜法在乳制品行業(yè)中檢測的優(yōu)點(diǎn)。

但高效液相色譜法在檢測中也具有一定的缺點(diǎn)。例如，前文所提到的高效液相色譜法的液體在流向色譜柱時(shí)，需要借助較高的電壓來輔助完成，另外就是在色譜柱與檢測器之間，如果流動(dòng)相的流行發(fā)生任何的變化，那么，分離物質(zhì)就會(huì)進(jìn)行相應(yīng)的擴(kuò)散，這樣會(huì)造成色譜數(shù)據(jù)采集的變化顯著，從而影響結(jié)果的準(zhǔn)確率。

高效液相色譜法會(huì)根據(jù)分離機(jī)制的不同，而分為不同的類型，首先，因?yàn)榉峙渖V固定相是液體，不同的液體對于樣品的溶解能力有所不同，因此，在進(jìn)行分配系數(shù)時(shí)存在著差異。在固定相和流動(dòng)相的選擇中，當(dāng)固定項(xiàng)選擇確定后，通過使用不同極性溶劑作為其流動(dòng)性來判斷每一次樣本實(shí)現(xiàn)分離的現(xiàn)象。

三、結(jié)束語

在完成乳制品檢測的過程中，需要通過相關(guān)試劑來將乳制品中的蛋白質(zhì)含量進(jìn)行沉淀，如果在試劑的選擇上不夠?qū)I(yè)，將會(huì)使得檢測的操作步驟較多，使得檢測較為繁瑣，因此，更多的是采用3.5mol/ L 高氣酸來沉淀乳制品中的蛋白質(zhì)成分，這樣可以在一定程度上簡化了操作步驟，并且不影響后期的檢測數(shù)據(jù)。綜上所述，采用高效液相色譜法在乳制品中的檢測已得到市面上的廣泛應(yīng)用，通過此方法，可以很好的避免食品衛(wèi)生安全問題的發(fā)生，具有較高的市場使用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳軍妃，路燕，梁健軍.高效液相色譜（HPLC）在食品添加劑檢測中的應(yīng)用[J].應(yīng)用科技，2017（11）：61-97.

[2]丁峰.高效液相色譜（HPLC）法在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].科技與創(chuàng)新，2017（4）：148-149.

[3]劉子奇，劉羅發(fā)，劉志成.高效液相色譜在食品分析中的應(yīng)用分析[J].技術(shù)與應(yīng)用，2017（9）：155.