孕婦生殖道B群鏈球菌培養(yǎng)篩查方法對(duì)比分析

黃思杰

摘要：目的：對(duì)孕婦B群鏈球菌（GBS）培養(yǎng)篩查方法進(jìn)行對(duì)比分析。方法：選取2019年10月～2021年10月在營(yíng)山縣中醫(yī)醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)前GBS普篩的200名孕婦為研究對(duì)象，所有孕婦均應(yīng)用四種GBS培養(yǎng)方法，包括血瓊脂培養(yǎng)、顯色瓊脂培養(yǎng)、普通增菌液培養(yǎng)以及顯色增菌液培養(yǎng)，對(duì)比四種GBS培養(yǎng)方法的陽(yáng)性檢出率，陽(yáng)性檢出時(shí)間。調(diào)查GBS陽(yáng)性及陰性孕產(chǎn)婦的妊娠結(jié)局及新生兒結(jié)局。結(jié)果：顯色增菌液培養(yǎng)的陽(yáng)性率最高（9.5 %），其次為普通增菌液培養(yǎng)（7.5 %）、顯色瓊脂培養(yǎng)（5.5 %），血瓊脂培養(yǎng)陽(yáng)性率最低（2.5 %）。顯色增菌液培養(yǎng)陽(yáng)性檢出時(shí)間最短，其次為顯色瓊脂培養(yǎng)。GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦的不良妊娠結(jié)局率為63.16 %，明顯高于GBS陰性孕產(chǎn)婦的9.94 %（P < 0.05）;GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦新生兒不良結(jié)局率為57.89 %，明顯高于GBS陰性的2.76 %（P < 0.05）。結(jié)論：顯色增菌液培養(yǎng)GBS的陽(yáng)性率最高，陽(yáng)性檢出時(shí)間最短，可作為預(yù)測(cè)孕產(chǎn)婦及新生兒結(jié)局的重要依據(jù)。

關(guān)鍵詞：生殖道B群鏈球菌;培養(yǎng)篩查;陽(yáng)性率;妊娠結(jié)局

B群鏈球菌（GBS）是一種寄居于女性生殖道的條件致病菌，也被稱為無(wú)乳鏈球菌，GBS感染是引起新生兒感染、死亡的重要原因。孕婦感染GBS后，可出現(xiàn)產(chǎn)褥感染、早產(chǎn)、胎膜早破等不良妊娠結(jié)局，同時(shí)也可能引起新生兒肺炎、腦膜炎、膿毒癥。研究認(rèn)為，大部分新生兒GBS感染均為母嬰垂直傳播所致，因此，做好GBS感染預(yù)防及治療非常重要[1]。美國(guó)疾病控制預(yù)防中心（CDC）GBS防治指南指出，建議對(duì)孕35～37周孕婦進(jìn)行普遍篩查，對(duì)存在潛在風(fēng)險(xiǎn)的孕婦應(yīng)用抗生素預(yù)防[2]。在GBS培養(yǎng)篩查方法選擇方面，以往主要應(yīng)用血平板分離鑒定法，但耗時(shí)較長(zhǎng)，技術(shù)要求較高，操作繁瑣，且具有一定假陽(yáng)性率。因此，為尋找更為準(zhǔn)確、高效的GBS檢測(cè)方案，本文將對(duì)孕婦GBS培養(yǎng)篩查方法進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 對(duì)象與方法

1.1 一般資料

選取2019年10月～2021年10月在營(yíng)山縣中醫(yī)醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)前GBS普篩的200名孕婦。年齡23～34歲，平均年齡（29.29±4.60）歲;孕周35～37周，平均孕周（36.78±0.82）周。所有孕婦取材前至少2周無(wú)性生活，未使用抗生素，單胎妊娠，可配合檢查及研究。

1.2 方法

所有孕婦均應(yīng)用四種GBS培養(yǎng)方法。使用無(wú)菌拭子采集陰道分泌物，分別應(yīng)用上海梅里埃公司的血瓊脂平皿、鄭州安圖生物的顯色瓊脂平皿、珠海迪爾生物的普通增菌液、選擇性顯色液體培養(yǎng)基接種。將標(biāo)本置于5% CO2培養(yǎng)箱，于37℃環(huán)境下培養(yǎng)，時(shí)間18～24 h，隨后對(duì)血瓊脂、顯色瓊脂上的可疑菌落進(jìn)行分純培養(yǎng)，例如革蘭陽(yáng)性球菌菌落、紅色菌落。另外兩者轉(zhuǎn)種于血瓊脂，置于5% CO2培養(yǎng)箱，于37℃環(huán)境下培養(yǎng)，時(shí)間18～24 h，分純培養(yǎng)可疑菌落。

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

（1）對(duì)比四種GBS培養(yǎng)方法的陽(yáng)性檢出率。（2）對(duì)比四種GBS培養(yǎng)方法的陽(yáng)性檢出時(shí)間。（3）調(diào)查GBS陽(yáng)性及陰性孕產(chǎn)婦的妊娠結(jié)局及新生兒結(jié)局。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0軟件對(duì)臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，行χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料用（x±s）表示，行t檢驗(yàn);P < 0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陽(yáng)性檢出率對(duì)比

200名孕婦，血瓊脂培養(yǎng)GBS陽(yáng)性5例，陽(yáng)性率2.5 %;顯色瓊脂培養(yǎng)GBS陽(yáng)性11例，陽(yáng)性率5.5 %;普通增菌液培養(yǎng)GBS陽(yáng)性15例，陽(yáng)性率7.5 %;顯色增菌液培養(yǎng)GBS陽(yáng)性19例，陽(yáng)性率9.5 %?？梢?jiàn)顯色增菌液培養(yǎng)的陽(yáng)性率最高，血瓊脂培養(yǎng)陽(yáng)性率最低，差異明顯（P < 0.05）。

2.2 陽(yáng)性檢出時(shí)間對(duì)比

血瓊脂培養(yǎng)陽(yáng)性檢出時(shí)間為（72.92±3.89）h，顯色瓊脂培養(yǎng)為（52.53±5.66）h，普通增菌液培養(yǎng)為（71.67±3.90）h，顯色增菌液培養(yǎng)為（39.62±3.72）h?？梢?jiàn)顯色增菌液培養(yǎng)陽(yáng)性檢出時(shí)間最短，明顯低于顯色瓊脂培養(yǎng)、血瓊脂培養(yǎng)、普通增菌液培養(yǎng)（P < 0.05）;其次為顯色瓊脂培養(yǎng)，明顯低于血瓊脂培養(yǎng)、普通增菌液培養(yǎng)（P < 0.05）;血瓊脂培養(yǎng)、普通增菌液培養(yǎng)無(wú)明顯差異（P > 0.05）。

2.3 孕產(chǎn)婦妊娠結(jié)局對(duì)比

GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦的不良妊娠結(jié)局率為63.16 %，明顯高于GBS陰性孕產(chǎn)婦的9.94 %，差異明顯（P < 0.05），見(jiàn)表1。

2.4? 新生兒結(jié)局對(duì)比

GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦新生兒不良結(jié)局率為57.89 %，明顯高于GBS陰性的2.76 %，差異明顯（P < 0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

女性在妊娠期機(jī)體及生殖道內(nèi)環(huán)境均會(huì)出現(xiàn)明顯改變，陰道上皮細(xì)胞糖原水平可出現(xiàn)明顯升高，乳酸濃度也處于較高水平，因此為耐酸微生物的生長(zhǎng)創(chuàng)造了良好的條件，導(dǎo)致其大量繁殖，并造成陰道內(nèi)微環(huán)境破壞，陰道黏膜受損，機(jī)體免疫下降，更容易受到病原菌入侵，增加細(xì)菌感染風(fēng)險(xiǎn)。GBS是一種常見(jiàn)的條件致病菌，屬于革蘭陽(yáng)性菌-無(wú)乳鏈球菌，主要存在于厭氧環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，鏈球菌感染是導(dǎo)致圍生期母嬰感染、嬰幼兒敗血癥、腦膜炎等并發(fā)癥的重要危險(xiǎn)因素[3]。主要是由于GBS對(duì)絨毛膜組織的吸附力、穿透力較強(qiáng)，因此更容易引起孕產(chǎn)婦不良結(jié)局，引起孕婦生殖道感染。同時(shí)若不能及時(shí)有效地控制GBS感染，還可能引起胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限、新生兒感染、智力發(fā)育遲緩、視聽(tīng)覺(jué)喪失等不良妊娠結(jié)局及遠(yuǎn)期后遺癥[4]。由此可見(jiàn)，應(yīng)對(duì)GBS感染提高重視程度，做好早期篩查，并采取恰當(dāng)?shù)母深A(yù)措施。

在GBS培養(yǎng)方面，分子生物學(xué)方法雖然能夠在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)，但操作復(fù)雜，成本較高，技術(shù)及設(shè)備要求較高，且無(wú)法針對(duì)菌種進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，因此在一定程度上限制了其臨床應(yīng)用。傳統(tǒng)微生物檢驗(yàn)檢出率不高，耗時(shí)較長(zhǎng)，不適合高通量的GBS檢測(cè)。因此，本文應(yīng)用了四種GBS培養(yǎng)方法，結(jié)果顯示，顯色增菌液培養(yǎng)的陽(yáng)性率最高（9.5 %），其次為普通增菌液培養(yǎng)（7.5 %）、顯色瓊脂培養(yǎng)（5.5 %），血瓊脂培養(yǎng)陽(yáng)性率最低（2.5 %）。顯色增菌液培養(yǎng)陽(yáng)性檢出時(shí)間最短，其次為顯色瓊脂培養(yǎng)，與血瓊脂培養(yǎng)、普通增菌液培養(yǎng)差異明顯（P < 0.05），可見(jiàn)顯色增菌液培養(yǎng)在檢出陽(yáng)性率及檢出時(shí)間方面均更具優(yōu)勢(shì)。從整體上看，單純平皿培養(yǎng)具有較高的漏檢率，分析其原因，主要是由于陰道內(nèi)雜菌較多，其生長(zhǎng)會(huì)被其他雜菌抑制，導(dǎo)致漏檢發(fā)生，而液體增菌能夠使原始標(biāo)本菌量擴(kuò)大，從而達(dá)到提高陽(yáng)性檢出率的目的。同時(shí)，與普通增菌液相比，顯色液體培養(yǎng)基的陽(yáng)性檢出率更高，主要是由于其中含有萘啶酮酸、慶大霉素，能夠?qū)﹃幍兰纳钠渌?xì)菌產(chǎn)生抑制作用，因此GBS能夠更好地生長(zhǎng)，通過(guò)大量擴(kuò)增提高培養(yǎng)陽(yáng)性率[5]。此外從檢出時(shí)間上看，可見(jiàn)顯色培養(yǎng)的檢出時(shí)間均短于普通培養(yǎng)，而顯色培養(yǎng)方法中，顯色增菌液培養(yǎng)的檢出時(shí)間更短。主要是由于顯色瓊脂及增菌液均有能夠促使GBS特異性顯色的底物，培養(yǎng)物能夠表現(xiàn)出不同的顏色，不需過(guò)多的操作和實(shí)驗(yàn)技能，可直接根據(jù)顏色判斷結(jié)果，因此檢測(cè)時(shí)間明顯縮短。以往有研究顯示，顯色培養(yǎng)法的靈敏度、特異度均高于普通培養(yǎng)，但培養(yǎng)6 h靈敏度偏低，反應(yīng)顏色較淺，培養(yǎng)12 h后可達(dá)到更高的靈敏度及特異度[6]。分析其對(duì)孕婦妊娠結(jié)局預(yù)測(cè)價(jià)值，在本次研究中，GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦的不良妊娠結(jié)局率為63.16 %，明顯高于GBS陰性孕產(chǎn)婦的9.94 %（P < 0.05）;GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦新生兒不良結(jié)局率為57.89 %，明顯高于GBS陰性的2.76 %（P < 0.05），可見(jiàn)GBS陽(yáng)性孕產(chǎn)婦及新生兒不良結(jié)局的風(fēng)險(xiǎn)更高。顯色增菌液培養(yǎng)能夠更好地檢出GBS感染情況，從而預(yù)測(cè)其不良結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)，指導(dǎo)臨床治療。

綜上所述，顯色增菌液培養(yǎng)GBS的陽(yáng)性率最高，陽(yáng)性檢出時(shí)間最短，可作為預(yù)測(cè)孕產(chǎn)婦及新生兒結(jié)局的重要依據(jù)。

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