• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蛋白組學在中醫(yī)心系病癥證候的研究進展

    2020-09-12 14:25馮宇周曼麗王健章
    世界中醫(yī)藥 2020年16期
    關鍵詞:中醫(yī)學

    馮宇 周曼麗 王健章

    摘要 蛋白組學是在大規(guī)模水平上研究蛋白質表達水平、蛋白與蛋白相互作用、翻譯后修飾等,以獲得蛋白質水平上關于細胞代謝、疾病發(fā)生等過程全面整體的認識。其動態(tài)性、復雜性、整體性與中醫(yī)理論高度相似,且和中醫(yī)證候學都以整體作為研究對象,可利用其技術充分發(fā)揚中醫(yī)理論價值和中醫(yī)臨床價值。通過檢索中國知網(wǎng)、Pubmed等數(shù)據(jù)庫,歸納分析近5年應用蛋白組學技術研究中醫(yī)心系病癥證候的文獻,以期為中醫(yī)心系病癥證候研究提供更廣闊的思路。

    關鍵詞 蛋白組學;心系證候;心系病癥;中醫(yī)學

    Abstract Proteomics is to study protein expression levels,protein-protein interactions,post-translational modifications,etc.on a large scale to obtain a comprehensive understanding of the process of cell metabolism,disease occurrence and other processes at the protein level.Its dynamic,complex and holistic nature is highly similar to that of TCM theory,and both of them take the whole as the research object,and so its technology can be used to fully promote the theoretical and clinical value of TCM.By retrieving China National Knowledge Infrastructure(CNKI),Pubmed and other databases,we summarized the literature on the use of proteomics technology to study TCM heart disease syndromes in the past five years,in order to provide a broader idea for the study of TCM heart disease syndromes.

    Keywords Proteomics; Heart disease syndromes; Heart disease; Traditional Chinese medicine

    中圖分類號:R256.2 文獻標識碼:A doi:10.3969/j.issn.1673-7202.2020.16.034

    中醫(yī)證候是疾病發(fā)生及演變過程中某階段和患者個體當時所處內、外環(huán)境本質的反映,能不同程度地揭示病因、病位、病性、病勢等病機內容,在一定程度上,與近幾年研究中的蛋白質組學技術動態(tài)反映生物體病理生理具體過程在理念和思路上有共通之處[1]。蛋白質組學技術具有高精度、高靈敏度及整體性,通過其技術,既能發(fā)現(xiàn)與疾病相關的生物標志物,又可以深層次探討其發(fā)病機制,對中醫(yī)證候研究有借鑒意義[2]?,F(xiàn)將近5年來中醫(yī)心系病癥證候相關蛋白組學的研究進展概括如下。

    1 蛋白組學簡介

    蛋白組學(Proteomics)由澳大利亞科學家Marc Wilkins[3]于1994年首次提出,它是由細胞、組織、個人或單個基因組表達的蛋白質組分。與傳統(tǒng)蛋白質研究注重單一蛋白質相比,蛋白質組學更注重研究參與特定生理或病理狀態(tài)的所有蛋白質種類和其與周圍環(huán)境的關系。它通過對正常個體與病理個體間蛋白質組進行比較,找到“疾病特異性蛋白質分子”。這對于促進分子醫(yī)學的發(fā)展或為疾病的早期診斷提供分子標志有獨特優(yōu)勢。其研究基本技術包括毛細管等電聚焦(CIEF)、高效液相色譜(HPLC)毛細管電泳(CE)、飛行時間質譜分析(MALDI-MS)、電噴霧質譜分析(ESI-MS)等[4]。以基質輔助激光解離激光解析(MALDI)成像質譜(IMS)技術為例,樣品制備后,進行質譜數(shù)據(jù)采集,最后數(shù)據(jù)讀取及生成質譜圖像。它可通過實驗研究整個組織切片中數(shù)千種分子的空間分布,具有高靈敏度、高覆蓋等優(yōu)勢[5-6]。蛋白組學既能為生命活動規(guī)律提供物質基礎,又能為疾病機制的闡釋和攻克提供理論依據(jù)及解決途徑,獲得關于細胞代謝、疾病發(fā)生等過程全面整體的認識。

    2 中醫(yī)證候與蛋白組學

    中醫(yī)證候是辨證論治的基礎及理論體系的核心內容,其研究也是現(xiàn)代化中醫(yī)藥的關鍵環(huán)節(jié)[7]。證候即證的外候,是疾病過程中一定階段的病因、病位、病性、病勢和機體抗病能力強弱等本質有機聯(lián)系的反映狀態(tài)。它是一個動態(tài)變化的過程,具有多變性、復雜性、模糊性、隱匿性等特點,易受外界因素干擾。其名稱、術語、概念、診斷等尚未規(guī)范統(tǒng)一,故此,證的規(guī)范研究將成為中醫(yī)發(fā)展的必然趨勢[8]。從中醫(yī)學整體觀來講,證是在致病因素作用下的機體各系統(tǒng)之間內外環(huán)境產(chǎn)生紊亂而發(fā)生的病理生理狀態(tài)[9]。而蛋白組學技術致力于研究細胞、組織、器官、個體、某一物種在特定條件、時間表達的全部蛋白質圖譜,以期全面整體的認識細胞代謝、疾病發(fā)生等過程。其動態(tài)性、復雜性、整體性、穩(wěn)定性與中醫(yī)證候的恒動觀、整體觀、辨證論治思維極度相似,對揭示疾病的證候本質有巨大優(yōu)勢。因此利用蛋白組學技術既能為闡明中醫(yī)理論提供物質基礎,又能為中醫(yī)證候規(guī)范化提供新思路,可作為中醫(yī)證候研究的突破口[10]。

    3 心系病癥與蛋白組學

    心居胸中、兩肺之間,外有心包護衛(wèi)?!端貑枴れ`蘭秘典論》:“心者,君主之官也,神明出焉”?!端貑枴ゐ粽摗罚骸靶闹魃碇}”。《素問·脈要精微論》:“諸血者,皆屬于心”。此論述奠定了心病辨證的基礎。先天稟賦不足、成年后功能不足以主血充神、六淫內侵、七情內傷、飲食不節(jié)等皆是誘導心病的病因。心的主要病理表現(xiàn)為情志活動異常及血脈運行障礙[11]。對應于現(xiàn)代醫(yī)學可為冠心病、高血壓、冠狀動脈綜合征、心律失常、心力衰竭、抑郁癥等,現(xiàn)將蛋白組學在心系病癥不同病癥的研究進行概述。

    3.1 冠心病 Zou L等[12]運用ITRAQ標記及二維液相色譜-串聯(lián)質譜分析對早期發(fā)作心肌梗死(MI)患者及經(jīng)皮冠狀動脈介入治療7 d后患者進行尿蛋白分析。通過多反應監(jiān)測(MRM)分析,發(fā)現(xiàn)5種尿蛋白(抗凝血酶III,補體C3,α-1-酸糖蛋白1,血清轉鐵蛋白和組織蛋白酶Z)特異性和敏感性較高,可用于監(jiān)測心肌梗死(MI)的疾病狀態(tài)和治療效果。區(qū)文超等[13]將二維凝膠電泳技術與基質輔助激光解析/電離-飛行時間質譜分析相結合對冠心病患者血小板差異蛋白表達進行鑒別,結果得到6種血小板差異蛋白(Clusterin、Annexin A1、Plastin-2、Peroxiredoxin-6、Peroxiredoxin-2、Coronin-1A),可為血小板聚集機制的研究提供思路。Sun H等[14]研究冠心病患者尿液中差異蛋白的表達,通過ITRAQ標記及多重反應監(jiān)測(MRM)發(fā)現(xiàn)差異表達的蛋白質參與肝臟X受體/類維生素A X受體(LXR/RXR)途徑激活、動脈粥樣硬化信號傳導、一氧化氮和活性氧的產(chǎn)生等過程。Yi X等[15]將液相色譜與串聯(lián)質譜分析結合鑒定缺血性心肌?。↖CM)患者體內差異表達的蛋白質,結果發(fā)現(xiàn)多數(shù)蛋白質參與了與心臟代謝過程及炎性反應和免疫反應有關的生物學途徑。Anwar MA等[16]基于液相色譜-串聯(lián)質譜多重反應監(jiān)測聯(lián)用鑒定冠心?。–AD)患者血漿中的生物標記物,得到6種血漿蛋白(載脂蛋白CII,C反應蛋白,CD5抗原樣蛋白,纖連蛋白,α-胰蛋白酶抑制劑重鏈H1和蛋白S),涉及炎性反應、脂質調節(jié)、凝血級聯(lián)反應等。Kulasingam A等[17]采用新型臨近延伸測定法對ST抬高型心肌梗死(STEMI)急性期與恢復期患者血漿蛋白標志物進行比較,有29種生物標志物差異有統(tǒng)計學意義,結果說明急性期免疫和炎性反應,細胞黏附和止血增加,恢復期組織重塑和蛋白水解增加。

    3.2 高血壓 XU JW等[18]基于ITRAQ技術結合液相色譜、電噴霧電離串聯(lián)質譜技術對原發(fā)性高血壓(EH)患者進行血清蛋白組學分析,發(fā)現(xiàn)組織蛋白酶G,轉化生長因子β-1,透明質酸酶-1和激肽原-1等4種蛋白質共同參與了腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)。

    3.3 急性冠狀動脈綜合征 Htun NM等[19]對急性冠狀動脈綜合征(ACS)患者尿液進行蛋白組學分析,發(fā)現(xiàn)75種與ACS相關的尿肽,反映了與動脈粥樣硬化斑塊向“脆弱”斑塊演變,斑塊破裂以及血栓性動脈閉塞有關的分子病理學改變。

    3.4 心律失常 Zhou J等[20]運用蛋白組學技術對心房顫動(AF)患者血漿進行分析,結果發(fā)現(xiàn)16種蛋白質明顯失調,涉及嘌呤代謝及脂肪酸代謝。Lind L等[21]通過臨近延伸分析(PEA)芯片對房顫(AF)患者血漿蛋白進行評估,證實NT-pro-BNP,F(xiàn)GF-23,GDF-15與房顫(AF)有關,并發(fā)現(xiàn)4種蛋白(FABP4,IL-6,TIM-1和AM)在房顫發(fā)展中具有重要意義。李陽明[22]采用ITRAQ技術對風濕性心臟病慢性房顫患者進行血漿蛋白組學研究,結果篩選出57種差異蛋白,其中33種表達上調,24種表達下調,其參與的腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)、半乳糖代謝、ABC轉運子、凝血和補體系統(tǒng)等與慢性房顫有關。

    3.5 心力衰竭 Rüdebusch J等[23]對心力衰竭(HF)小鼠每個時間點的蛋白質組進行質譜(MS)分析,發(fā)現(xiàn)熱休克蛋白β-7(HSPB7)在HF的早期顯示出組織和血清豐度的差異。

    3.6 抑郁癥 Choi JE等[24]結合二維凝膠電泳(2D-PAGE)與nanoUPLC-ESI-q-TOF串聯(lián)質譜對抑郁癥小鼠模型進行蛋白質分離,結果表明海馬中泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)的半胱氨酸氧化修飾在神經(jīng)保護作用中發(fā)揮關鍵作用。

    4 心系證候與蛋白組學

    在心系疾病研究方面,運用蛋白組學技術已具備一定條件。在此基礎上,利用蛋白組學技術研究心系病證不同證候,將為證型規(guī)范化提供更多的研究思路與參考價值。

    4.1 心血瘀阻證 肖隋熙等[25]基于iTRAQ技術對冠心病血瘀證組蛋白質進行分離鑒別,共有27個差異蛋白點明顯表達,其中11個表達上調,16個表達下調,涉及血小板的黏附遷移、血小板參與凝血反應的亢進、免疫反應等,說明冠心病血瘀證與血小板的黏附遷移等具相關性。

    4.2 氣虛血瘀證與氣陰兩虛證 孟永梅等[26]采用iTRAQ標記結合串聯(lián)質譜技術對慢性心力衰竭(Chronic Heart Failure,CHF)氣虛血瘀證和氣陰兩虛證患者進行差異蛋白組學研究。與健康組比較,CHF氣虛血瘀證組有16個差異蛋白表達,11個蛋白質表達上調,5個蛋白質表達下調,主要涉及代謝紊亂、炎性反應、免疫反應、細胞凋亡。CHF氣陰兩虛證有15個差異蛋白表達,10個蛋白質表達上調,5個蛋白質表達下調,說明與代謝、免疫、炎性反應相關。

    4.3 氣虛血瘀證 李琪琳等[27]運用蛋白組學技術探究曲美他嗪對氣虛血瘀證心力衰竭大鼠心肌線粒體影響,共鑒定10個蛋白,結果表明曲美他嗪干預可能與減輕應激反應等有關。

    4.4 腎虛血瘀證 劉如秀等[28]采用雙向電泳法及四級桿飛行時間質譜分析探究滋腎活血方對冠心病腎虛血瘀型大鼠缺血心肌的蛋白蛋白表達。與空白組比較均有變化的靶點蛋白質有肌凝蛋白-6、乳酸脫氫酶B鏈、異檸檬酸脫氫酶、肉堿棕櫚酰轉移酶-2、ATP合酶α亞基,表明滋腎活血方干預機制與保護細胞骨架等有關。

    4.5 肝陽化風證與陰虛風動證 楊波等[29]運用蛋白組學技術對高血壓腦出血急性期肝陽化風證患者及恢復期陰虛風動證患者蛋白質展開研究,結果得到肌動蛋白在急性期與恢復期均有下調,提示其表達水平與血小板早期活化有關。

    5 討論

    蛋白質是生命活動的執(zhí)行者,是證的物質載體,其功能表現(xiàn)呈階段性特點,而證候出現(xiàn)在疾病病程中的各個階段,兩者具有相似性。近幾年,國內外以蛋白質組學為代表的系統(tǒng)生物學興起,它是生命科學進入后基因時代的特征。蛋白組學在為我們研究生命活動、疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律及證候規(guī)范化等提供新思路新方法的同時,也為中醫(yī)藥現(xiàn)代化發(fā)展擴寬道路。然而,在中醫(yī)證候蛋白組學研究中還存在一些問題,如欒依含等[30]認為蛋白組學設備儀器、檢測方法不同,結果尚不統(tǒng)一;研究大多集中于同病異證及一病一證,異病同證研究較少;臨床樣本量較少;現(xiàn)階段蛋白組學研究僅局限于發(fā)現(xiàn)差異蛋白等。除此之外,我們發(fā)現(xiàn)近5年中醫(yī)心系證候蛋白組學研究較少,這可能與其研究所需耗費過多有關。且研究對象分為動物模型與臨床患者,無法確認實驗動物檢測結果是否適用于人類。

    基于目前存在的問題,有學者提出擴大樣本量、減小差異性,加強病證結合研究,將蛋白組學、基因組學和代謝組學相結合等。我們認為在此基礎上還可加入能量代謝研究,從蛋白質、基因、代謝產(chǎn)物、能量變化方面系統(tǒng)闡釋辨證論治規(guī)律。隨著蛋白組學技術的日益精進,中醫(yī)證候研究將趨于標準化、規(guī)范化,也為后續(xù)疾病的預防、診治提供更成熟的方法及技術。

    參考文獻

    [1]馮瑞賓,羅世興,趙勁民,等.蛋白組學在骨關節(jié)炎中的研究進展[J].中華關節(jié)外科雜志(連續(xù)型電子期刊),2018,12(6):71-74.

    [2]Duarte TT,Spencer CT.Personalized proteomics:the future of precision medicine[J].Proteomes,2016,4(4):29.

    [3]Wasinger VC,Cordwell SJ,Cerpa-Poljak A,et al.Progress with gene-product mapping of the Mollicutes:Mycoplasma genitalium[J].Electrophoresis,1995,16(7):1090-1094.

    [4]劉嘉,李冬,王徐.蛋白質組學的研究進展[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2019,35(9):1380-1384.

    [5]Ryan DJ,Spraggins JM,Caprioli RM.Protein identification strategies in MALDI imaging mass spectrometry:a brief review[J].Curr Opin Chem Biol,2019,48:64-72.

    [6]葛均悅,胡德俊,張穎,等.MALDI質譜成像技術在藥用植物研究中的應用[J].藥學學報,2019,54(7):1179-1189.

    [7]樊訊,王階,姚魁武.心系病證中醫(yī)證候模型研究進展[J].中華中醫(yī)藥雜志,2012,27(2):426-429.

    [8]高宇.心系證侯規(guī)范研究[D].南京:南京中醫(yī)藥大學,2006.

    [9]張冠,王恒和.基于代謝組學的中醫(yī)心系病癥證候研究進展[J].江蘇中醫(yī)藥,2019,51(8):86-89.

    [10]王新賢,殷海波,姜泉,等.蛋白質組學在中醫(yī)證候學研究中的應用進展[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(8):1965-1969,1973.

    [11]張連貴.中醫(yī)臟象“心”之探討[J].臨床醫(yī)藥文獻雜志(連續(xù)型電子期刊),2015,2(35):7348-7349.

    [12]Zou L,Wang X,Guo Z,et al.Differential urinary proteomics analysis of myocardial infarction using iTRAQ quantification[J].Mol Med Rep,2019,19(5):3972-3988.

    [13]區(qū)文超,馮俊靈,靳麗君,等.冠心病患者血小板蛋白質組學研究[J].內科,2016,11(3):350-354.

    [14]Sun H,Wang D,Liu D,et al.Differential urinary proteins to diagnose coronary heart disease based on iTRAQ quantitative proteomics[J].Anal Bioanal Chem,2019,411(11):2273-2282.

    [15]Yi X,Jiang DS,F(xiàn)eng G,et al.An altered left ventricle protein profile in human ischemic cardiomyopathy revealed in comparative quantitative proteomics[J].Kardiol Pol,2019,77(10):951-959.

    [16]Anwar MA,Dai DL,Wilson-McManus J,et al.Multiplexed LC-ESI-MRM-MS-based Assay for Identification of Coronary Artery Disease Biomarkers in Human Plasma[J].Proteomics Clin Appl,2019,13(4):e1700111.

    [17]Kulasingam A,Hvas AM,Grove EL,et al.Detection of biomarkers using a novel proximity extension assay in patients with ST-elevation myocardial infarction[J].Thromb Res,2018,172:21-28.

    [18]Xu JW,Li YL,Zhang SJ,et al.Quantitative Serum Proteomic Analysis of Essential Hypertension Using iTRAQ Technique[J].Biomed Res Int,2017,2017:6761549.

    [19]Htun NM,Magliano DJ,Zhang ZY,et al.Prediction of acute coronary syndromes by urinary proteome analysis[J].PLoS One,2017,12(3):e0172036.

    [20]Zhou J,Sun L,Chen L,et al.Comprehensive metabolomic and proteomic analyses reveal candidate biomarkers and related metabolic networks in atrial fibrillation[J].Metabolomics,2019,15(7):96.

    [21]Lind L,Sundstrm J,Stenemo M,et al.Discovery of new biomarkers for atrial fibrillation using a custom-made proteomics chip[J].Heart,2017,103(5):377-382.

    [22]李明陽.風濕性心臟病慢性房顫患者的血漿蛋白質組學和代謝組學研究[D].北京:北京協(xié)和醫(yī)學院,2017.

    [23]Rüdebusch J,Benkner A,Poesch A,et al.Dynamic adaptation of myocardial proteome during heart failure development[J].PLoS One,2017,12(10):e0185915.

    [24]Choi JE,Lee JJ,Kang W,et al.Proteomic Analysis of Hippocampus in a Mouse Model of Depression Reveals Neuroprotective Function of Ubiquitin C-terminal Hydrolase L1(UCH-L1)via Stress-induced Cysteine Oxidative Modifications[J].Mol Cell Proteomics,2018,17(9):1803-1823.

    [25]肖隋熙,李杰,袁肇凱,等.基于iTRAQ技術的冠心病血瘀證蛋白質譜研究[J].湖南中醫(yī)藥大學學報,2016,36(7):5-10.

    [26]孟永梅,王偉.基于iTRAQ技術的慢性心力衰竭氣虛血瘀證及氣陰兩虛證組差異蛋白質組學研究[J].世界中醫(yī)藥,2018,13(9):2111-2116.

    [27]李琪琳,胡元會,霍艷明,等.曲美他嗪干預氣虛血瘀證心衰大鼠心肌線粒體蛋白質組學研究[J].世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2018,20(11):2001-2007.

    [28]劉如秀,周晟芳,關宣可,等.滋腎活血方改善冠心病腎虛血瘀型大鼠缺血心肌的蛋白組學研究[J].中華中醫(yī)藥學刊,2017,35(2):441-444.

    [29]楊波,梁清華,熊新貴,等.高血壓腦出血急性期肝陽化風證與恢復期陰虛風動證的蛋白質組學比較研究[J].湖南中醫(yī)藥大學學報,2014,34(10):34-38,65.

    [30]欒依含,劉先利,宗文靜,等.心血管病中醫(yī)證候蛋白質組學研究概述[J].中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志,2016,22(9):1277-1280.

    (2019-11-12收稿 責任編輯:王明)

    猜你喜歡
    中醫(yī)學
    鄉(xiāng)村醫(yī)學專業(yè)中醫(yī)學課程的教學改革
    論云南民族醫(yī)藥與中醫(yī)學交融發(fā)展
    分泌性中耳炎的研究進展
    太極拳預防腦卒中風的效果觀察與體會
    論將中醫(yī)學納入大學教育教學領域中的重要性
    透過歷史學的塵埃看中醫(yī)
    語言,當代社會理解和發(fā)展中醫(yī)學的關鍵
    人的體內之氣經(jīng)肌膚透發(fā)于體外的實踐及感受
    中醫(yī)學中的“七”
    99久久精品国产国产毛片| 成人性生交大片免费视频hd| 激情 狠狠 欧美| 中文字幕av成人在线电影| 国产伦理片在线播放av一区| 久久久国产成人精品二区| 最近中文字幕高清免费大全6| 热99在线观看视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲怡红院男人天堂| 高清午夜精品一区二区三区| 99久久精品一区二区三区| 免费看av在线观看网站| 亚洲欧美日韩高清专用| 综合色丁香网| 亚洲18禁久久av| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 国产精品久久久久久av不卡| 黑人高潮一二区| 五月伊人婷婷丁香| 男女下面进入的视频免费午夜| 精品国产三级普通话版| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲五月天丁香| av国产久精品久网站免费入址| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产高清国产精品国产三级 | 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 91狼人影院| 色尼玛亚洲综合影院| 成人av在线播放网站| 精品免费久久久久久久清纯| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 亚洲乱码一区二区免费版| 在线观看66精品国产| 97超碰精品成人国产| 高清毛片免费看| 熟女人妻精品中文字幕| 成人无遮挡网站| 亚州av有码| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | av在线播放精品| 69av精品久久久久久| 色播亚洲综合网| 国产精品熟女久久久久浪| 成人av在线播放网站| 久久精品久久久久久久性| 免费黄网站久久成人精品| 国产在视频线在精品| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品国产三级国产专区5o | 九九在线视频观看精品| 午夜福利在线在线| 日本色播在线视频| 国产不卡一卡二| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲精品日韩av片在线观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 能在线免费观看的黄片| 国产麻豆成人av免费视频| 国产淫片久久久久久久久| 插阴视频在线观看视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 视频中文字幕在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲av免费在线观看| 婷婷色综合大香蕉| 永久免费av网站大全| 夫妻性生交免费视频一级片| 波多野结衣巨乳人妻| 国产乱人偷精品视频| 99久国产av精品| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产精品电影一区二区三区| 国产成人a区在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 岛国毛片在线播放| 日本免费在线观看一区| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 美女国产视频在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 高清av免费在线| 男女边吃奶边做爰视频| 国国产精品蜜臀av免费| 嫩草影院新地址| 性色avwww在线观看| 岛国在线免费视频观看| 国产精品久久视频播放| 国产老妇伦熟女老妇高清| 三级国产精品片| 国产精品久久电影中文字幕| 干丝袜人妻中文字幕| 99久国产av精品国产电影| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 久久久精品欧美日韩精品| 一边亲一边摸免费视频| 热99在线观看视频| 国产一区二区三区av在线| 国产乱人视频| 永久免费av网站大全| 九九在线视频观看精品| 亚洲色图av天堂| 高清视频免费观看一区二区 | 亚洲精品一区蜜桃| 特大巨黑吊av在线直播| 秋霞在线观看毛片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 美女cb高潮喷水在线观看| 日本欧美国产在线视频| 国产精品久久视频播放| 水蜜桃什么品种好| 国产在线一区二区三区精 | 男女啪啪激烈高潮av片| 草草在线视频免费看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产淫片久久久久久久久| 中文字幕亚洲精品专区| 精品国内亚洲2022精品成人| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 岛国在线免费视频观看| 一本一本综合久久| 国产一级毛片在线| 免费观看精品视频网站| 成人欧美大片| 18+在线观看网站| h日本视频在线播放| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲av日韩在线播放| 美女大奶头视频| 国产一区二区在线观看日韩| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 搡老妇女老女人老熟妇| 91久久精品国产一区二区成人| 丰满少妇做爰视频| av卡一久久| 欧美zozozo另类| 亚洲av男天堂| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 午夜激情欧美在线| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 嫩草影院新地址| 精品无人区乱码1区二区| 99热精品在线国产| 精品人妻偷拍中文字幕| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 一夜夜www| 麻豆av噜噜一区二区三区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产成人精品久久久久久| 精品一区二区免费观看| 国产免费视频播放在线视频 | 狠狠狠狠99中文字幕| 淫秽高清视频在线观看| 欧美色视频一区免费| 久久久久久久国产电影| 欧美激情国产日韩精品一区| 2022亚洲国产成人精品| 亚洲av免费在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 久热久热在线精品观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 免费看光身美女| 国产精品国产三级专区第一集| 日日撸夜夜添| 天美传媒精品一区二区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩视频在线欧美| 国产精品.久久久| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产精品久久久久久精品电影| 日本av手机在线免费观看| a级毛色黄片| 亚洲在线自拍视频| 99热精品在线国产| 日本黄大片高清| 久久久久久久久大av| 毛片一级片免费看久久久久| 老司机福利观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲欧美一区二区三区国产| 91精品伊人久久大香线蕉| 最近中文字幕高清免费大全6| 一级毛片久久久久久久久女| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品国产三级专区第一集| 三级经典国产精品| 天堂网av新在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久午夜福利片| 综合色av麻豆| 日本午夜av视频| 欧美精品一区二区大全| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 一级黄色大片毛片| 国产毛片a区久久久久| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲av成人精品一区久久| 国产一区有黄有色的免费视频 | 精品熟女少妇av免费看| 亚洲伊人久久精品综合 | 国产美女午夜福利| av黄色大香蕉| 国产黄片美女视频| 日韩av不卡免费在线播放| 国产高清视频在线观看网站| 春色校园在线视频观看| 中文字幕免费在线视频6| 99久久精品一区二区三区| 亚洲电影在线观看av| 国产极品天堂在线| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 草草在线视频免费看| 国产亚洲最大av| 国产精品久久久久久av不卡| 水蜜桃什么品种好| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久久精品大字幕| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产一区有黄有色的免费视频 | 蜜桃亚洲精品一区二区三区| av专区在线播放| .国产精品久久| 深夜a级毛片| 精品久久国产蜜桃| 欧美成人一区二区免费高清观看| 三级国产精品片| 午夜精品一区二区三区免费看| 看十八女毛片水多多多| 日韩中字成人| 国产精品精品国产色婷婷| av女优亚洲男人天堂| 99久久成人亚洲精品观看| 黄色配什么色好看| 亚洲精品,欧美精品| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 丰满少妇做爰视频| 亚洲精品一区蜜桃| 夫妻性生交免费视频一级片| 网址你懂的国产日韩在线| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 精品酒店卫生间| 久久欧美精品欧美久久欧美| 日韩精品青青久久久久久| 欧美一区二区国产精品久久精品| 久久久久久久午夜电影| 一区二区三区免费毛片| 亚洲综合精品二区| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久热精品热| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产亚洲av嫩草精品影院| 午夜精品国产一区二区电影 | 男人舔女人下体高潮全视频| av在线播放精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲无线观看免费| 中文欧美无线码| av视频在线观看入口| 18禁动态无遮挡网站| 国产激情偷乱视频一区二区| 欧美激情久久久久久爽电影| 91久久精品电影网| 亚洲自拍偷在线| 高清日韩中文字幕在线| 最近视频中文字幕2019在线8| 水蜜桃什么品种好| 26uuu在线亚洲综合色| 国产精品三级大全| 一本久久精品| 特大巨黑吊av在线直播| 午夜免费男女啪啪视频观看| 插逼视频在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 99九九线精品视频在线观看视频| 精品欧美国产一区二区三| 成年av动漫网址| av专区在线播放| 日本-黄色视频高清免费观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 日本av手机在线免费观看| 熟女人妻精品中文字幕| 观看免费一级毛片| 免费观看在线日韩| 亚洲av福利一区| 久久99热6这里只有精品| 91狼人影院| 3wmmmm亚洲av在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲国产最新在线播放| 直男gayav资源| .国产精品久久| 成人三级黄色视频| 综合色av麻豆| 欧美xxxx性猛交bbbb| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 搞女人的毛片| 国产真实伦视频高清在线观看| 色哟哟·www| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲国产成人一精品久久久| 高清视频免费观看一区二区 | 日本黄色视频三级网站网址| 日本wwww免费看| 视频中文字幕在线观看| 亚洲人与动物交配视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲国产欧美人成| 国产成人aa在线观看| 午夜视频国产福利| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 舔av片在线| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产成人freesex在线| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美成人a在线观看| 国产成人a区在线观看| 两个人的视频大全免费| 欧美性猛交黑人性爽| 国产69精品久久久久777片| 日韩欧美国产在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 久久久精品欧美日韩精品| 少妇人妻精品综合一区二区| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 成人无遮挡网站| 水蜜桃什么品种好| 99热这里只有是精品50| 亚洲第一区二区三区不卡| 一边亲一边摸免费视频| 免费黄色在线免费观看| 欧美+日韩+精品| eeuss影院久久| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产高清三级在线| 国产高潮美女av| 乱人视频在线观看| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲最大成人中文| 国内揄拍国产精品人妻在线| 六月丁香七月| 精品久久久久久成人av| 伦理电影大哥的女人| 99久久精品热视频| 精品欧美国产一区二区三| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 观看美女的网站| 国产成人精品一,二区| 91aial.com中文字幕在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 嘟嘟电影网在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 黄片无遮挡物在线观看| 国产视频首页在线观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 日韩视频在线欧美| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 亚洲图色成人| 精品不卡国产一区二区三区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 色播亚洲综合网| 在线播放国产精品三级| 国产av码专区亚洲av| 亚洲av.av天堂| 春色校园在线视频观看| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲av日韩在线播放| 在线免费观看的www视频| 精品欧美国产一区二区三| 看片在线看免费视频| 国产三级中文精品| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 久久久国产成人精品二区| 国产老妇女一区| or卡值多少钱| 直男gayav资源| 午夜福利高清视频| 深爱激情五月婷婷| 国产精品永久免费网站| 边亲边吃奶的免费视频| 久久综合国产亚洲精品| videos熟女内射| av福利片在线观看| 日韩欧美三级三区| 亚洲国产色片| 97超碰精品成人国产| 26uuu在线亚洲综合色| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 一本久久精品| 国产精品不卡视频一区二区| 精品久久久久久久久亚洲| 国产亚洲av嫩草精品影院| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产av在哪里看| 午夜免费激情av| av在线亚洲专区| 五月玫瑰六月丁香| 超碰97精品在线观看| 人体艺术视频欧美日本| 国产精品女同一区二区软件| 国产综合懂色| 欧美日韩在线观看h| 日本一二三区视频观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 高清日韩中文字幕在线| 韩国高清视频一区二区三区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久久久久大精品| 别揉我奶头 嗯啊视频| 久久久午夜欧美精品| 插阴视频在线观看视频| a级一级毛片免费在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 欧美激情在线99| 色视频www国产| 国产精品人妻久久久久久| 97超视频在线观看视频| 免费大片18禁| 午夜免费激情av| 中国美白少妇内射xxxbb| 黄色配什么色好看| eeuss影院久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 直男gayav资源| www.av在线官网国产| 国产成人福利小说| 久久草成人影院| 1000部很黄的大片| 一区二区三区四区激情视频| 国产成人精品一,二区| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| av福利片在线观看| 岛国在线免费视频观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产不卡一卡二| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲最大成人中文| 黑人高潮一二区| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 日韩国内少妇激情av| 日韩三级伦理在线观看| 成人av在线播放网站| 看免费成人av毛片| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 麻豆精品久久久久久蜜桃| 免费无遮挡裸体视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 男女啪啪激烈高潮av片| 日韩强制内射视频| 亚洲人成网站在线播| 国产极品精品免费视频能看的| 欧美性感艳星| 国产在视频线在精品| 日韩一本色道免费dvd| 六月丁香七月| 国产精品人妻久久久久久| 久久久久精品久久久久真实原创| 精品人妻熟女av久视频| 国产成人一区二区在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产久久久一区二区三区| av国产免费在线观看| 麻豆av噜噜一区二区三区| 男女啪啪激烈高潮av片| 禁无遮挡网站| 国语自产精品视频在线第100页| 18禁在线播放成人免费| 老女人水多毛片| av国产免费在线观看| 一级黄片播放器| 天堂中文最新版在线下载 | 能在线免费观看的黄片| 高清午夜精品一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 麻豆成人av视频| 床上黄色一级片| 99久久人妻综合| 久久99蜜桃精品久久| 免费观看的影片在线观看| 免费看光身美女| 男女国产视频网站| 精品人妻一区二区三区麻豆| 成人三级黄色视频| 免费在线观看成人毛片| 成人毛片60女人毛片免费| 性插视频无遮挡在线免费观看| 人人妻人人看人人澡| 97超视频在线观看视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲精品日韩av片在线观看| 免费黄色在线免费观看| 1000部很黄的大片| 最后的刺客免费高清国语| 白带黄色成豆腐渣| 免费搜索国产男女视频| 内射极品少妇av片p| 97在线视频观看| 午夜视频国产福利| 在线免费观看的www视频| 国产 一区 欧美 日韩| 婷婷色综合大香蕉| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 波多野结衣高清无吗| 能在线免费观看的黄片| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 91av网一区二区| 热99re8久久精品国产| 久久久亚洲精品成人影院| 国产精品熟女久久久久浪| 国产黄片美女视频| av视频在线观看入口| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久久久久久大av| 国产精品一二三区在线看| 男女啪啪激烈高潮av片| 国模一区二区三区四区视频| 少妇的逼水好多| 变态另类丝袜制服| 嘟嘟电影网在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产成人freesex在线| 久久久久久久午夜电影| 欧美成人午夜免费资源| 欧美又色又爽又黄视频| 禁无遮挡网站| 久久精品91蜜桃| 日日摸夜夜添夜夜爱| 免费av观看视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲丝袜综合中文字幕| 久久久成人免费电影| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲欧美精品专区久久| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲人与动物交配视频| 久久精品人妻少妇| 国产淫片久久久久久久久| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲综合精品二区| 国产熟女欧美一区二区| 插阴视频在线观看视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 男女视频在线观看网站免费| 国产精品.久久久| av在线播放精品| 看十八女毛片水多多多| 两个人视频免费观看高清| 午夜免费男女啪啪视频观看| 成年女人永久免费观看视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美一区二区亚洲| 亚洲在线观看片| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 日本-黄色视频高清免费观看| 性插视频无遮挡在线免费观看| 亚洲三级黄色毛片| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产在视频线精品| 色5月婷婷丁香| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产又黄又爽又无遮挡在线| 日日撸夜夜添| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产成人一区二区在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 中国美白少妇内射xxxbb| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产午夜精品论理片| 天美传媒精品一区二区| 麻豆成人av视频| 国产精品精品国产色婷婷| 久久亚洲国产成人精品v| or卡值多少钱| 亚洲欧美成人精品一区二区| 嫩草影院精品99| 中文资源天堂在线| 欧美一区二区亚洲| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产黄片视频在线免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产av不卡久久|