帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)及其與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性

靳艷茹，楊 帆，劉孝兵，李雅琴，宋印娥，李 鋒，馮 倩，惠海英

帶狀皰疹是由帶狀皰疹病毒引起的感染性皮膚疾病，初次感染多在少兒時(shí)代，可引起水痘，之后長(zhǎng)期潛伏于人體脊髓神經(jīng)后根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，若成年后病毒被再次激活，將侵犯患者皮膚和外周神經(jīng)使其產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致帶狀皰疹發(fā)生，部分患者可伴有持續(xù)數(shù)月甚至數(shù)年的后遺神經(jīng)痛，嚴(yán)重影響日常生活質(zhì)量[1-3]。目前，有學(xué)者認(rèn)為機(jī)體免疫功能下降，與T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量異常尤其是CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)目減少密切相關(guān)[4]。為進(jìn)一步了解帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)及其與病情嚴(yán)重程度的關(guān)系，本研究對(duì)帶狀皰疹100例外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年7月—2016年2月安康市中心醫(yī)院皮膚科收治的符合納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的帶狀皰疹100例作為帶狀皰疹組。100例中男54例，女46例；年齡25～64(46.23±7.74)歲。病程2～6(3.67±0.73)d。根據(jù)水皰簇?cái)?shù)、水皰數(shù)目、紅斑面積、瘙癢疼痛、水皰變化及燒灼感這6個(gè)因子將帶狀皰疹100例進(jìn)行病情嚴(yán)重程度評(píng)分，分?jǐn)?shù)越高，病情越嚴(yán)重[2]。100例中總分≤6分(輕度帶狀皰疹)30例，總分6～12分(中度帶狀皰疹)44例，總分>12分(重度帶狀皰疹)26例。另選取同期在該院門診進(jìn)行健康體檢的健康體檢者70例作為健康組，其中男36例，女34例；年齡27～63(45.11±7.84)歲。帶狀皰疹組和健康組性別及年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意執(zhí)行。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者臨床癥狀和體征符合帶狀皰疹診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②患者均于發(fā)病7 d內(nèi)就診；③患者和(或)其家屬對(duì)本研究知情同意并自愿參與本研究、簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴(yán)重器質(zhì)性疾病及免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病者；②合并惡性腫瘤者；③服用免疫抑制劑者；④妊娠或哺乳期婦女。

1.3治療方法 帶狀皰疹組均采用相同措施治療，靜脈滴注阿昔洛韋(麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字：H10960079)每日600 mg，持續(xù)滴注7 d，后改為口服阿昔洛韋每日300 mg，持續(xù)口服7 d，治療期間不服用其他糖皮質(zhì)激素類藥物。

1.4觀察指標(biāo)及方法 比較帶狀皰疹組和健康組外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平，不同病情程度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平，以及帶狀皰疹患者治療前后病情程度評(píng)分及外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平變化；采用Spearman相關(guān)分析對(duì)帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平與病情程度的相關(guān)性進(jìn)行分析。所有帶狀皰疹患者于入院第2天和治療結(jié)束后1 d抽取靜脈血5 ml，對(duì)照組于體檢時(shí)抽取靜脈血5 ml，加入100 μl肝素抗凝，6 h內(nèi)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平。標(biāo)本檢測(cè)，采用單克隆抗體三色熒光標(biāo)記法，取抗凝細(xì)胞混懸液100 μl，加入10 μl標(biāo)記的熒光單克隆抗體(Tritest CD3+、CD4+、CD8+，賽默飛有限公司)，室溫避光反應(yīng)15 min，溶血后采用流式細(xì)胞儀(美國(guó)Beckman-Coulter公司，型號(hào)：EPICS-XL Ⅱ型)分析，流式細(xì)胞儀每次采集細(xì)胞數(shù)10 000個(gè)以上，采用Listmode系統(tǒng)軟件分析數(shù)據(jù)，分析T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平，即T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+占淋巴細(xì)胞的百分比。

2 結(jié)果

2.1帶狀皰疹組和健康組外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較 帶狀皰疹組外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+及CD4+水平低于健康組，CD8+水平高于健康組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

2.2不同病情程度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較 帶狀皰疹患者隨著病情程度增加，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+及CD4+水平逐漸降低，CD8+水平逐漸升高，不同病情程度帶狀皰疹患者總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。重度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕、中度帶狀皰疹患者(重度vs輕度：t=3.889、P<0.001,t=5.797、P<0.001;重度vs中度：t=2.393、P=0.020,t=2.839、P=0.006)，CD8+水平高于輕、中度帶狀皰疹患者(重度vs輕度：t=4.457、P<0.001;重度 vs 中度：t=3.421、P=0.001)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。中度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕度帶狀皰疹患者，CD8+水平高于輕度帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.047、P=0.044，t=3.022、P=0.004，t=4.398、P<0.001)。見表2。

表1 帶狀皰疹組和健康組外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較

表2 不同病情程度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較

注：與輕度帶狀皰疹患者同一指標(biāo)比較，aP<0.05，bP<0.01；與中度帶狀皰疹患者同一指標(biāo)比較，cP<0.05，dP<0.01

2.3帶狀皰疹患者治療前后病情程度評(píng)分及外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平比較 治療后，帶狀皰疹患者病情程度評(píng)分及外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD8+水平與治療前比較降低，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平與治療前比較升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 帶狀皰疹患者治療前后病情程度評(píng)分及外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平比較

2.4外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平與帶狀皰疹患者病情程度相關(guān)分析 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD8+水平與帶狀皰疹患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.475，P<0.001)，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平與帶狀皰疹患者病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.432，P<0.001；r=-0.364，P<0.001)。

3 討論

帶狀皰疹為一種病毒感染性疾病，在機(jī)體細(xì)胞免疫力下降時(shí)易因過度飲酒、勞累、呼吸道感染及月經(jīng)來潮等原因?qū)е虏《驹诔赡旰笤俅伪患せ?，使皮膚和周圍神經(jīng)出現(xiàn)炎癥反應(yīng)[6-11]。因此，帶狀皰疹的發(fā)病與機(jī)體的免疫力有密切關(guān)系。B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞在機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中分別介導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫，已有研究表明在帶狀皰疹發(fā)病過程中機(jī)體防御以細(xì)胞免疫應(yīng)答為主[12]，機(jī)體內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群功能和數(shù)量在維持機(jī)體正常免疫功能中發(fā)揮著重要的作用，故本研究將T淋巴細(xì)胞亞群水平作為免疫功能的重要指標(biāo)[13]。

正常機(jī)體內(nèi)各T淋巴細(xì)胞亞群互相作用，并維持一定動(dòng)態(tài)平衡，共同發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，當(dāng)不同T淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量異常時(shí)，可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂，并發(fā)生病理改變，機(jī)體被病毒感染的風(fēng)險(xiǎn)增加[14-15]。CD3+ T淋巴細(xì)胞是外周血中成熟T淋巴細(xì)胞的標(biāo)志，CD4+ T淋巴細(xì)胞可輔助活化B細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，激活巨噬細(xì)胞，已有研究表明帶狀皰疹患者在細(xì)胞免疫應(yīng)答方面有一定異?，F(xiàn)象[16-17]。周海林和蔣法興[12]研究認(rèn)為CD3+和CD4+T淋巴細(xì)胞在病毒性疾病發(fā)病中有重要意義，特別是CD4+ T淋巴細(xì)胞數(shù)量下降可能是帶狀皰疹患者免疫功能受損的主要原因。許蕓等[18]研究認(rèn)為CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量增加表示機(jī)體內(nèi)抑制性T淋巴細(xì)胞增多，CD8+T淋巴細(xì)胞可作為判斷機(jī)體免疫狀態(tài)的客觀指標(biāo)之一。

本研究結(jié)果顯示，帶狀皰疹組外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+及CD4+水平低于健康組，CD8+水平高于健康組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群受到明顯抑制，與劉軍超等[19]研究相符，該研究結(jié)果顯示帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+及CD4+處于低水平，經(jīng)治療后帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+和CD4+上升至正常。本研究結(jié)果還顯示，帶狀皰疹患者隨著病情程度增加，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+及CD4+水平逐漸降低，CD8+水平逐漸升高，不同病情程度帶狀皰疹患者總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；重度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕、中度帶狀皰疹患者，CD8+水平高于輕、中度帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；中度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕度帶狀皰疹患者，CD8+水平高于輕度帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；治療后，帶狀皰疹患者病情程度評(píng)分及外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD8+水平與治療前比較降低，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平與治療前比較升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平與病情嚴(yán)重程度相關(guān)，經(jīng)治療后病情趨于好轉(zhuǎn)，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+指標(biāo)也趨于恢復(fù)正常。Laing等[20]研究表示，經(jīng)過相應(yīng)治療后帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD4+水平可較治療前升高，與本研究結(jié)果相符。本研究Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD8+水平與帶狀皰疹患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+水平與帶狀皰疹患者病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)，這與Vukmanovic Stejic等[21]研究報(bào)道相符。

總之，帶狀皰疹患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+及CD4+水平低于健康人群，CD8+水平高于健康人群；外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平與帶狀皰疹患者病情嚴(yán)重程度存在相關(guān)性。因此，早期監(jiān)測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平變化，有助于盡快對(duì)帶狀皰疹患者病情發(fā)展做出合理判斷，并及時(shí)給出相應(yīng)治療方案，利于疾病治療。