高金鑫,張貝貝,唐大智,甘利平,閆少佳,李 光,咼于明
(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100193)
鋅是一種與肉雞健康、疾病關(guān)系密切的重要金屬元素,參與眾多重要生理生化過(guò)程。鋅在細(xì)胞呼吸作用、免疫功能、抗氧化、蛋白合成、傷口愈合、DNA 合成及細(xì)胞分裂等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用,而鋅營(yíng)養(yǎng)的不足或過(guò)度吸收也會(huì)導(dǎo)致很多疾病。研究發(fā)現(xiàn),鋅缺乏對(duì)免疫系統(tǒng)的影響尤為嚴(yán)重。De Pasquale 等[1]研究表明,鋅缺乏可使小鼠的胸腺相對(duì)重量減輕,且這種變化隨著低鋅飼糧飼喂周期的延長(zhǎng)而加劇。Mohhamdi 等[2]研究發(fā)現(xiàn),相對(duì)于空白對(duì)照組,日糧中添加納米硫酸鋅和納米蛋氨酸鋅后肉雞抗體滴度、脾臟和法氏囊指數(shù)均顯著上升。Peterson 等[3]研究發(fā)現(xiàn),輕微缺鋅可加劇脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠空腸白細(xì)胞入侵,同時(shí)提高了血漿中白細(xì)胞介素-6(IL-6)和白細(xì)胞介素-10(IL-10)水平。Levkut 等[4]研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加30、70 mg/kg 硫酸鋅和30 mg/kg 甘氨酸鋅可提高肉仔雞空腸分泌型免疫球蛋白A(sIgA),且飼喂低鋅日糧對(duì)維持腸道免疫穩(wěn)態(tài)更有益處。Nagalakshmi 等[5]研究顯示,與無(wú)機(jī)鋅相比,飼喂不同來(lái)源的有機(jī)鋅可提高大鼠抗氧化酶的活性、加強(qiáng)免疫應(yīng)答,并提高血清孕酮水平。Zhang 等[6-7]研究表明,在基礎(chǔ)日糧中添加鋅(80 mg/kg 硫酸鋅和20、40、60、80 mg/kg 甘氨酸鋅)可改善肉種雞的生產(chǎn)性能、繁殖機(jī)能,提高鋅沉積量及抗氧化能力,其中添加80 mg/kg 甘氨酸鋅的效果最佳。
目前,有關(guān)不同化合物鋅源在促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、維持生化代謝有關(guān)酶活性、組織中鋅沉積等方面的相對(duì)生物效價(jià)的研究較多,但極少有調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng)方面的研究報(bào)道。本研究設(shè)置不同水平的硫酸鋅和甘氨酸鋅日糧,檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、脾臟和空腸mRNA 相對(duì)表達(dá)量等,研究不同化合物鋅源對(duì)正常生理?xiàng)l件及LPS攻毒感染條件下肉仔雞免疫的調(diào)節(jié)作用。
1.1 試驗(yàn)材料 LPS Escherichia coli O55:B5 購(gòu)于西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;甘氨酸鋅(22%)和硫酸鋅(34.5%)均購(gòu)于長(zhǎng)沙興嘉生物工程股份有限公司。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.2.1 試驗(yàn)一 選擇420 只1 日齡肉仔雞,設(shè)置7 個(gè)處理,分別為對(duì)照組(Ctrl)、無(wú)機(jī)鋅(IZ30、IZ60、IZ90)組(30、60、90 mg/kg 硫酸鋅)、有 機(jī)鋅(OZ30、OZ60、OZ90)組(30、60、90 mg/kg 甘氨酸鋅)。每個(gè)處理設(shè)置6 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10 只雞。試驗(yàn)日糧參考NRC(1994)肉仔雞營(yíng)養(yǎng)需要配制玉米- 豆粕型顆粒飼料,日糧組成與營(yíng)養(yǎng)成分見表1。試驗(yàn)期42 d,網(wǎng)上平養(yǎng),進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)管理。
1.2.2 試驗(yàn)二 選擇336 只1 日齡肉仔雞,設(shè)置7 個(gè)處理,分別為完全空白對(duì)照組(Ctrl)、生理鹽水對(duì)照組(Ctrl-)、攻毒對(duì)照組(Ctrl+)、無(wú)機(jī)鋅攻毒(IZ30+、IZ90+)組(30、90 mg/kg 硫酸鋅)、有機(jī)鋅攻毒(OZ30+、OZ90+)組(30、90 mg/kg 甘氨酸鋅)。每個(gè)處理設(shè)置6 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8 只雞。攻毒組為L(zhǎng)PS 攻毒。試驗(yàn)期42 d,網(wǎng)上平養(yǎng),進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)管理。
1.3 樣本采集與制備
1.3.1 試驗(yàn)一 于26 d 時(shí),分別從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑選1 只肉仔雞,腿肌注射濃度為0.5%的牛血清蛋白(BSA)1 mL,并于注射后6、10、14 d 翅靜脈采血,3 000 r/min 離心10 min 后分離血清凍存?zhèn)溆?;?8 d 時(shí),分別從每重復(fù)中隨機(jī)挑選1 只肉仔雞,靜脈放血致死,立即剖開腹腔,迅速取胸腺、法氏囊、脾臟,稱重;于39 d 時(shí),分別從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑選1 只肉仔雞,翅靜脈無(wú)菌采集EDTA 抗凝血。
1.3.2 試驗(yàn)二 于21 d 注射LPS 和生理鹽水之前,稱取籠重(空腹8 h)和余料重。于25 d 和42 d 時(shí),稱取籠重和余料重。于肉仔雞25 d 和28 d 時(shí),分別從每重復(fù)中隨機(jī)挑選1 只肉仔雞,靜脈放血致死,立即剖開腹腔,迅速取胸腺、法氏囊、脾臟,稱重;于肉仔雞25 d時(shí),分別從每重復(fù)中隨機(jī)挑選1 只肉仔雞,靜脈放血致死,立即剖開腹腔,取脾臟和空腸樣品放入液氮速凍后保存于-80℃。
1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.4.1 免疫器官指數(shù) 免疫器官指數(shù)=免疫器官重(g)/活體重(kg)
1.4.2 外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率 采用淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)和四甲基偶氮唑鹽(MTT)檢測(cè)外周血全血中T、B 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,用伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激T 淋巴細(xì)胞,用LPS 刺激B 淋巴細(xì)胞。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分
1.4.3 脾臟和空腸mRNA 相對(duì)表達(dá)量 實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè) 定IL-1β、IL-8、TNF-α、NF-κB p65、TLR4 的mRNA相對(duì)表達(dá)量??俁NA 提取按照Invitrogen 公司提取步驟進(jìn)行,隨后用核酸蛋白測(cè)定儀ND-測(cè)定總RNA 的純度和濃度。cDNA 合成采用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(TaKaRa,大連)。采用 SYBR Green II 染料法進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR,采用美國(guó) ABI 7500 熒光定量PCR 儀進(jìn)行測(cè)定,引物序列見表2。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0 One-Way ANOVA對(duì)7 個(gè)處理進(jìn)行單因素方差分析,以P<0.05 認(rèn)為差異顯著。差異顯著則進(jìn)行Duncan′s 多重比較。采用一般線性模型(GLM)對(duì)鋅源和添加水平進(jìn)行2×3 主效應(yīng)分析,分別對(duì)硫酸鋅組和甘氨酸鋅組進(jìn)行線性和二次曲線估計(jì)。
表2 Real time PCR 引物序列
2.1 鋅源及鋅水平對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育的影響 由表3可知,在試驗(yàn)一中,鋅源和添加水平對(duì)免疫器官指數(shù)和肝臟指數(shù)無(wú)交互影響(P>0.05)。但相對(duì)于對(duì)照組(Ctrl),各鋅添加組可不同程度地提高肉雞的胸腺指數(shù),其中,IZ30 和OZ30 組的胸腺指數(shù)高于對(duì)照組(P<0.05),且OZ30 組高于IZ30 組(P<0.05)。
由表4 可知,在試驗(yàn)二中,最后一次LPS 刺激3 h后,與空白對(duì)照組(Ctrl)和生理鹽水組(Ctrl-)相比,各攻毒組(Ctrl+、IZ30+、IZ90+、OZ30+、OZ90+)脾臟和肝臟指數(shù)顯著升高(P<0.05),添加鋅并不能減輕LPS 刺激導(dǎo)致的脾臟指數(shù)和肝臟指數(shù)升高;法氏囊和胸腺指數(shù)無(wú)顯著差異。最后一次LPS 刺激8 h 后,與空白對(duì)照組(Ctrl)相比,進(jìn)行攻毒處理的鋅添加組(IZ30+、IZ90+、OZ30+、OZ90+)脾臟指數(shù)顯著升高,肝臟指數(shù)無(wú)顯著變化;鋅添加組(IZ30+、IZ90+、OZ30+、OZ90+)的法氏囊指數(shù)與攻毒對(duì)照組(Ctrl+)相比無(wú)顯著差異,但不同鋅添加水平對(duì)法氏囊指數(shù)有顯著影響,0 mg/kg 鋅添加組(Ctrl+)和30 mg/kg 鋅添加組(IZ30+、OZ30+)的法氏囊指數(shù)高于90 mg/kg 鋅添加組(IZ90+、OZ90+)(P<0.05);與空白對(duì)照組(Ctrl)相比,LPS 攻毒降低了胸腺指數(shù)(P<0.05),日糧中添加鋅可緩解LPS 刺激導(dǎo)致的胸腺指數(shù)下降,30 mg/kg甘氨酸鋅的效果顯著。
表3 28 d 免疫器官指數(shù)及肝臟指數(shù)(試驗(yàn)一) g/kg
2.2 鋅源及鋅水平對(duì)肉雞外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響由表5 可知,鋅源、添加水平及二者的互作均可顯著影響 39 d 外周血T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。相對(duì)硫酸鋅,甘氨酸鋅提高了39 d 外周血T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(P<0.05),60 mg/kg 鋅水平組(IZ60、OZ60)的轉(zhuǎn)化率最高。鋅源和添加水平對(duì)T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的互作效應(yīng)顯著,即隨著鋅添加水平的提高,且日糧中添加硫酸鋅時(shí),T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率線性提高(P<0.05),而當(dāng)日糧中添加甘氨酸鋅時(shí),T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率呈現(xiàn)二次提高(P<0.05)。單因素方差分析結(jié)果顯示,相比對(duì)照組,OZ30組、OZ60組、OZ90 組和IZ90 組的T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著升高。鋅源和添加水平的互作對(duì)外周血B 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率并無(wú)顯著影響,但甘氨酸鋅組的轉(zhuǎn)化率高于硫酸鋅組(P<0.05)。
2.3 鋅源及鋅水平對(duì)肉雞脾臟mRNA 相對(duì)表達(dá)量的影響 由表6 可知,最后一次LPS 刺激3 h 后,與Ctrl 組和Ctrl-組相比,攻毒組(Ctrl+、IZ30+、IZ90+、OZ30+、OZ90+)IL-1β、IL-8、TNF-α、TLR4 的基因表達(dá)顯著升高。與Ctrl+組相比, IZ90+組和OZ30+組可提高IL-1β 的基因表達(dá)(P<0.05), IZ90+組可降低IL-8 和TLR4 的基因表達(dá)(P<0.05)。由主效應(yīng)分析可知,鋅源、添加水平及二者的互作對(duì)IL-1β 的基因表達(dá)有顯著影響,硫酸鋅組IL-1β 的表達(dá)量高于甘氨酸鋅組(P<0.05),90 mg/kg 鋅水平IL-1β 的表達(dá)量高于30 mg/kg鋅水平及Ctrl+組(P<0.05)。
表4 25 d LPS 攻毒3、8 h 后免疫器官指數(shù)(試驗(yàn)二) g/kg
表5 肉雞外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(試驗(yàn)一)
最后一次LPS 刺激8 h 后,相對(duì)Ctrl 組和Ctrl-組,攻毒組(Ctrl+、IZ30+、IZ90+、 OZ30+、OZ90+)IL-1β、IL-8 的基因表達(dá)上升(P<0.05)。與Ctrl+組相比,各鋅 添 加 組(IZ30+、IZ90+、OZ30+、OZ90+)IL-1β、TLR4 的基因表達(dá)下調(diào)(P<0.05),IZ90+ 組、OZ30+組、OZ90+組可降低TNF-α 的基因表達(dá)(P<0.05)。由主效應(yīng)分析可知,添加水平及鋅源和添加水平的互作對(duì)IL-1β、NF-κB p65 的基因表達(dá)有顯著影響。甘氨酸鋅組IL-8、TLR4 的基因表達(dá)均低于硫酸鋅組(P<0.05),硫酸鋅組NF-κB p65 的基因表達(dá)低于甘氨酸鋅組(P<0.05)。隨著鋅添加水平的升高,IL-1β、TNF-α、TLR4 的基因表達(dá)降低(P<0.05)。
2.4 鋅源及鋅水平對(duì)肉雞空腸mRNA 相對(duì)表達(dá)量的影響由表7 可知,最后一次LPS 刺激3 h 后,LPS 刺激可上調(diào)空腸IL-1β、IL-8、TNF-α 基因表達(dá)(P<0.05),上調(diào)NF-κB p65 基因表達(dá)(P<0.05)。相比Ctrl+組,IZ90+ 組、OZ30+ 組、OZ90+ 組可提高IL-1β 基因表達(dá)(P<0.05)。由主效應(yīng)分析可知,鋅源和添加水平對(duì)IL-1β 基因表達(dá)存在顯著的交互作用,鋅源和添加水平均顯著影響IL-1β 的表達(dá)量,且甘氨酸鋅組高于硫酸鋅組(P<0.05),隨著鋅添加水平的提高,IL-1β 的表達(dá)量隨之提高(P<0.05)。鋅源和添加水平的互作可顯著影響TNF-α 基因表達(dá),表現(xiàn)為OZ30+組和IZ30+組無(wú)顯著差異,而IZ90+組高于OZ90+組(P<0.05)。
表6 LPS 最后一次注射3、8 h 后脾臟免疫相關(guān)基因的表達(dá)(試驗(yàn)二)
表7 LPS 最后一次注射3、8 h 后空腸免疫相關(guān)基因表達(dá)(試驗(yàn)二)
由表7 可見,在最后一次LPS 刺激8 h 后,LPS刺激可提高空腸IL-1β、IL-8、TLR4 基因表達(dá)(P<0.05),而日糧中添加鋅降低了上述3 個(gè)基因表達(dá)(P<0.05)。其中,與Ctrl+組相比,各鋅添加組(IZ30+、IZ90+、OZ30+、OZ90+)均可降低IL-1β 和IL-8 基因表達(dá),IZ30+組、IZ90+組和OZ90+組可降低TLR4 基因表達(dá)(P<0.05)。由主效應(yīng)分析可知,鋅源可影響IL-8、TLR4 基因表達(dá),甘氨酸鋅組的IL-8 表達(dá)量低于硫酸鋅組(P<0.05),但甘氨酸鋅組TLR4 表達(dá)量高于硫酸鋅組(P<0.05)。隨著鋅添加水平的提高,IL-1β、IL-8、TLR4 的基因表達(dá)提高(P<0.05)。
3.1 鋅對(duì)免疫器官發(fā)育的影響 免疫器官是淋巴細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞發(fā)生、分化、成熟、定居、增殖以及產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所,可分為中樞免疫器官和外周免疫器官。鋅是直接參與免疫功能的重要生命相關(guān)元素,正常含量的鋅有利于維持免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育和保持正常的組織結(jié)構(gòu)。鋅缺乏則致使胸腺、脾臟、法氏囊等免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育不良,器官萎縮,重量減輕,而鋅劑量過(guò)高可使免疫器官發(fā)生明顯的病理變化。De Pasquale 等[1]和Pimental 等[8]均發(fā)現(xiàn)飼喂低鋅日糧會(huì)引起肉仔雞胸腺和法氏囊重量下降,與本研究結(jié)果一致。本研究還發(fā)現(xiàn),日糧中添加中高劑量的鋅可顯著提高外周血T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,并緩解LPS 刺激8 h 后的胸腺指數(shù)下降,表明鋅可提高機(jī)體的免疫機(jī)能。不管是在發(fā)育層面還是功能發(fā)揮層面,T 淋巴細(xì)胞對(duì)鋅缺乏都尤為敏感。缺鋅會(huì)導(dǎo)致胸腺萎縮及淋巴細(xì)胞減少癥[9]。胸腺是T 細(xì)胞分化發(fā)育和成熟的部位,胸腺指數(shù)增加,表明T 淋巴細(xì)胞功能增強(qiáng),細(xì)胞免疫功能得到強(qiáng)化。鋅對(duì)胸腺的功能發(fā)揮也不可或缺,一種名為胸腺肽的胸腺激素依賴于鋅。與T 淋巴細(xì)胞相比,B 淋巴細(xì)胞的發(fā)育和功能受鋅變化的影響較小,但是鋅缺乏仍然會(huì)導(dǎo)致B 細(xì)胞數(shù)量減少,影響未成熟及前成熟B 細(xì)胞的發(fā)育及抗體的產(chǎn)生[10]。
3.2 鋅對(duì)炎性因子表達(dá)量的影響 LPS 又名內(nèi)毒素,可引起免疫炎癥反應(yīng),表現(xiàn)為大量細(xì)胞因子,尤其是炎性細(xì)胞因子的產(chǎn)生。細(xì)胞因子產(chǎn)生和炎癥反應(yīng)是有效免疫反應(yīng)的重要過(guò)程。炎癥反應(yīng)過(guò)程中炎性細(xì)胞因子對(duì)代謝的調(diào)節(jié)作用而消耗養(yǎng)分和能量,降低畜禽的生產(chǎn)效率。長(zhǎng)期低強(qiáng)度的炎癥與很多疾病(如代謝病等)密切相關(guān)[11]。小鼠體內(nèi)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),鋅缺乏會(huì)提高LPS 注射后的IL-6 和IL-1β 水平[12]。Perez 等[13]研究發(fā)現(xiàn),肉雞臨界缺乏鋅和錳會(huì)降低42 日齡IL-1β 和抗菌肽的基因表達(dá),從而嚴(yán)重影響機(jī)體的抗炎能力。關(guān)于鋅和錳在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)上的作用也有報(bào)道,鋅是將轉(zhuǎn)錄因子NF-κB結(jié)合到DNA 上的蛋白結(jié)構(gòu)域的重要組分,添加適量鋅可增強(qiáng)NF-κB 功能[14]。免疫反應(yīng)不是將每一種細(xì)胞功能簡(jiǎn)單疊加聚合,而是在不同功能的可溶性介質(zhì)的作用下,使不同種類的細(xì)胞完美合作。理想的免疫反應(yīng)是針對(duì)不同的胞外或胞內(nèi)病原體迅速且特異性地將其識(shí)別并清除[15]。本研究表明,LPS 刺激3 h 后,日糧中添加不同劑量的鋅可顯著地提高IL-1β 基因表達(dá),增強(qiáng)短時(shí)間內(nèi)炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度,表明免疫機(jī)能增強(qiáng)。而在免疫后期炎癥反應(yīng)進(jìn)入平穩(wěn)階段時(shí),日糧中添加鋅可通過(guò)抑制炎性細(xì)胞因子的表達(dá)減輕炎癥對(duì)機(jī)體造成的損害,這與本試驗(yàn)中最后一次LPS 刺激8 h 后,各鋅添加組脾臟IL-1β 和TLR4、空腸IL-1β 和IL-8 的基因表達(dá)相較攻毒對(duì)照組顯著下調(diào)的結(jié)果相一致。
3.3 甘氨酸鋅與硫酸鋅 無(wú)機(jī)鋅是微量元素添加劑的第一代產(chǎn)品,常用的添加形式為氧化鋅和硫酸鋅。無(wú)機(jī)鋅的生物學(xué)利用效率很低,難以被機(jī)體吸收利用,而生產(chǎn)中為滿足動(dòng)物需要常常大劑量使用,長(zhǎng)時(shí)間飼喂容易造成動(dòng)物中毒和環(huán)境污染。氨基酸絡(luò)合鋅中因有配位鍵和離子鍵共存的獨(dú)特結(jié)構(gòu),分子內(nèi)電荷趨于中性,不易與其他物質(zhì)結(jié)合或吸附,具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性;此外,氨基酸絡(luò)合鋅不僅是機(jī)體吸收金屬離子的主要形式,又是動(dòng)物體內(nèi)合成蛋白質(zhì)的中間物質(zhì),吸收速度快,可減少許多生化過(guò)程,節(jié)約體內(nèi)能量消耗,具有較高的生物學(xué)利用效率。周錦蘭等[16]研究表明,蛋氨酸能有效促進(jìn)AA 肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育,更有利于鋅在動(dòng)物體內(nèi)的沉積;成廷水等[17]研究表明,飼糧中添加60 mg/kg 氨基酸鋅可提高蛋雞外周血淋巴細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)化率及BSA 抗體水平,使蛋雞具有較強(qiáng)的抗病和抗應(yīng)激能力,降低了疾病發(fā)生并提高了產(chǎn)蛋量及雞蛋品質(zhì)。本研究發(fā)現(xiàn),與硫酸鋅相比,日糧中添加同等劑量的甘氨酸鋅可提高免疫器官指數(shù),增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能,在炎癥反應(yīng)發(fā)生過(guò)程中可有效調(diào)節(jié)炎性因子的表達(dá),降低炎癥損傷。這可能與甘氨酸鋅存在形式更為穩(wěn)定、在機(jī)體內(nèi)生物學(xué)利用效率更高有關(guān)。
日糧中添加30 mg/kg 甘氨酸鋅和硫酸鋅可顯著提高肉仔雞的胸腺指數(shù),日糧中添加60 mg/kg 甘氨酸鋅、90 mg/kg 硫酸鋅和甘氨酸鋅可顯著提高T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。在免疫反應(yīng)早期,日糧中添加鋅可增強(qiáng)炎癥反應(yīng)強(qiáng)度;而在免疫反應(yīng)后期,日糧中添加鋅可通過(guò)抑制炎性細(xì)胞因子等的表達(dá),緩解LPS 誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng),減輕慢性炎癥反應(yīng)損傷。甘氨酸鋅比硫酸鋅具有更強(qiáng)的調(diào)節(jié)功效。