羅漢果藥用功能研究與進展

羅漢果是多年生藤本植物，其果實成分中含有高甜度的羅漢果苷類，因其高甜低熱且安全可食用，1996我國將其做為食品添加劑后廣泛使用。李典鵬等[1]采用薄層層析方法檢測羅漢果子房及座果中的皂苷出現(xiàn)的時間發(fā)現(xiàn)在授粉后精確到小時的時間里就能檢測到皂苷成分的出現(xiàn)，且隨時間推移逐漸形成以五糖苷為主的成熟果實，說明果內(nèi)可能存在苷元物質(zhì)前體，隨著葡萄糖殘基逐漸轉(zhuǎn)移，形成以五糖苷為主的成熟果實。唐其等[2]對羅漢果的基因進行了初步的測序并得出其大小，為下一步的精細圖譜繪制打下了扎實的基礎(chǔ)。

雌雄異株藤本植物的羅漢果，通過育種培養(yǎng)，主要推廣品種有莫長明等培育的永青一號、普豐青皮品種，及柏林三號品種，培育于廣西，貴州，湖南等地。自20世紀70年代起，人們開始研究羅漢果的藥用成分。1975年Lee等探究羅漢果的主要活性成分，隨后發(fā)現(xiàn)四環(huán)三萜類皂苷是其主要活性物質(zhì)，且因具有很強的甜度，又稱為羅漢果甜苷。1977年竹本常松從香港購買羅漢果，而后分離出羅漢果皂苷Ⅳ、羅漢果皂苷Ⅴ、羅漢果皂苷Ⅵ。1983年分離并鑒定了羅漢果皂苷Ⅳ、羅漢果皂苷Ⅴ、賽門苷Ⅰ、11-氧化羅漢果皂苷Ⅴ、羅漢果皂苷ⅡE、羅漢果ⅢE、羅漢果甜苷ⅢA2。2006年李典鵬等[3]在對未成熟羅漢果果實研究中發(fā)現(xiàn)羥基-11-氧化羅漢果苷ⅠA、11-氧化羅漢果苷Ⅲ、11-氧化羅漢果苷ⅣA。2007年楊秀偉等[4]從羅漢果中分離得到羅漢果皂苷ⅣA、羅漢果皂苷ⅡA1，這兩種苷之前日本學(xué)者是通過水解羅漢果甜苷Ⅴ得到。2009年，陳兵等[5]從羅漢果根中得到兩個新化合物。至今，已從羅漢果植株中發(fā)現(xiàn)20多種皂苷成分。

羅漢果具有種類豐富的成分，其中有以山柰酚（I）為代表的眾多酮類，也有如SGPS1等許許多多的多糖成分，日后更多的羅漢果成分將被分離并鑒定。

1 羅漢果功能

1.1 祛痰鎮(zhèn)咳

羅漢果在民間常作為飲品，劉婷等[6]購買廣西永福的羅漢果，經(jīng)過提取得到濃度為1.5 g/mL羅漢果生藥，通過氨水誘導(dǎo)以不同組別處理的ICR小鼠咳嗽，發(fā)現(xiàn)其能減輕氨水對小鼠呼吸系統(tǒng)的刺激。其中比重最高的羅漢果皂苷Ⅴ在祛痰方面功能優(yōu)異，同時對消化系統(tǒng)也具有一定積極作用。

1.2 糖尿病治療

羅漢果具有多種藥理作用，聯(lián)合作用于糖尿病，可有助于糖尿病的治療。張等的實驗表明羅漢果粗提物對糖尿病模型鼠具有一定的治療作用，可達到降糖藥物消渴丸的類似作用，能抑制血糖的升高。羅漢果的皂苷和黃酮成分均具有抗氧化作用，它們一方面通過減少脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生回復(fù)肝臟的抗氧化能力；另一方面能清除胰島B細胞內(nèi)的超氧陰離子等自由基減輕胰島細胞的損傷，改善細胞狀態(tài)，恢復(fù)胰島細胞的合成能力。有研究表明羅漢果Ⅲe可通過激活A(yù)MPK信號通路抑制妊娠期糖尿病[7]。另外孟凡燕等[8]和何超文等[9]的實驗表明羅漢果皂苷通過抑制α一葡萄糖苷酶活性降低并減緩小腸對多糖類營養(yǎng)的吸收而穩(wěn)定餐后血糖值。

較多糖尿病患者具有高脂血癥與高脂蛋白血癥，羅漢果皂苷提取物有降低血清TG和TC含量提高血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的趨勢[10]，有利于調(diào)節(jié)糖尿病人的血脂紊亂。羅漢果皂苷Ⅴ作為已經(jīng)投入工業(yè)化生產(chǎn)的甜味劑，是糖尿病病人很好代用糖，對其調(diào)節(jié)血糖的穩(wěn)定具有輔助作用。通過各種作用聯(lián)合，羅漢果在糖尿病治療方面具有很好的開發(fā)潛力和藥用價值。

1.3 調(diào)節(jié)免疫功能

李俊等[11]在研究羅漢果甜苷對CTX免疫抑制小鼠影響時，羅漢果皂苷對正常小鼠巨噬細胞的功能影響很小，但對免疫抑制小鼠能顯著提高其細胞和體液免疫的功能。其原理可能為羅漢果皂苷通過下調(diào)子IFN-γ、TNF-α因子的表達水平，并改變淋巴細胞CD4、CD8亞群比值，提高淋巴細胞IL-4表達水平，提高免疫功能[12]。而羅漢果多糖可提高小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)和增強巨噬細胞吞噬功能來提升免疫功能。Pana等[13]在研究 LPS介導(dǎo)的鼠模型中，發(fā)現(xiàn)羅漢果提取物可通過干擾 PI3 K/ Akt/ IKK 和 MAPK信號通路，抑制核因子 NF-к B激活，從而下調(diào)巨噬細胞炎癥因子 i NOS和 COX-2基因表達。研究表明羅漢果ⅢE通過激活TLR 4/MAPK/nf-κb軸，減輕LPS所致小鼠急性肺損傷，且羅漢果ⅢE能通過TOLL樣受體4途徑減輕肺纖維化，證明羅漢果在免疫調(diào)節(jié)方面也具有一定的作用[14]。

1.4 抗腫瘤作用

羅漢果主要活性成分皂苷逐漸被鑒定分離，對于單體皂苷的研究逐漸增多，在腫瘤中的研究也日漸增多。作為廣泛熟知的甜味劑，羅漢果皂苷Ⅴ可通過促進凋亡、細胞G0/G1期阻滯、減少微血管密度（MVD）和腫瘤血管生成，可抑制胰腺癌的發(fā)展[15]。同時有研究表明羅漢果皂苷Ⅴ在前列腺癌、肝癌、鼻咽癌、肺癌、鼻咽癌中均具有一定的抑制癌細胞增殖的作用，在鼻咽癌cne-1中使凋亡相關(guān)基因（caspase-3、bax等）表達增高、抗凋亡基因（survivin、Bcl-2等）表達下降，誘導(dǎo)癌細胞凋亡[16]，且在對由DMBA或TAP誘導(dǎo)的皮膚癌模型中也有顯著的抑制作用。

羅漢果皂苷ⅣE在喉癌和結(jié)直腸癌中具有抗癌作用，在Liu等的實驗中，發(fā)現(xiàn)在大腸癌細胞株ht29和喉癌細胞株hp-2中羅漢果皂苷ⅣE通過上調(diào)p53、下調(diào)p-ERK 1/2和MMP-9而抑制大腸癌和喉癌細胞的增殖，提示了羅漢果皂苷具有的抗腫瘤作用[17]。

羅漢果醇作為羅漢果皂苷的前體物質(zhì)，也是研究的熱點詞匯[16]。研究表明，在口腔癌和乳腺癌中，羅漢果醇通過調(diào)節(jié)P-gp糖蛋白的轉(zhuǎn)運功能，促進ADR引起的乳腺癌MCF-7細胞G2/M阻滯、VCR誘導(dǎo)的口腔癌KB細胞的凋亡來抑制兩種腫瘤的發(fā)展。在白血病中，羅漢果醇抑制ERK及STAT3的磷酸化發(fā)揮其抗腫瘤作用[18]。劉等研究發(fā)現(xiàn)羅漢果醇能通過上調(diào)肺癌細胞 A549周期蛋白 p21的表達，使細胞發(fā)生 G0/ G1期阻滯并下調(diào)細胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表達，從而抑制肺癌[19]。

1.5 抗菌抗疲勞

羅漢果作為民間常用茶飲，具有其獨特的魅力。羅漢果提取物可以抑制C型變形鏈球菌的生，其中的羅漢果皂苷Ⅴ的抑菌作用十分明顯，這使羅漢果在齲齒的治療方面具有獨特的作用[20]。羅漢果提取物有一定的抗疲勞作用，在通過羅漢果提取物對小鼠進行灌胃給藥，用強迫游泳試驗評價羅漢果給藥組的抗疲勞作用時，游泳耗竭實驗顯示羅漢果提取物具有抗疲勞作用，且呈劑量依賴性，表現(xiàn)為血液中乳酸的升高速度延緩，血液尿素氮的水平降低，延緩機體疲勞的發(fā)生，另小鼠睪丸組織細胞色素 C 氧化酶7A2較對照組有明顯降低，說明羅漢果在抗疲勞方面具有一定作用，開發(fā)潛力很大[21]。

2 討論

羅漢果作為國家批準的藥食兩用藥材，其干燥果實具有多種藥理作用，主要活性成分三萜皂苷在鎮(zhèn)咳祛痰，糖尿病治療，免疫調(diào)節(jié)，抑菌，保肝降酶，抗疲勞，抗癌、等方面都具有一定的作用，而對其有效成分功能的研究近來才逐漸展開，隨著越來越多的活性成分被分離和鑒定并研究，其多種藥理作用被開發(fā)出來，被廣泛應(yīng)用于疾病的治療中。范等對近10年羅漢果研究熱點進行了分析，結(jié)果表明“羅漢果皂苷”“羅漢果甜苷”“提取工藝”“組培苗”等關(guān)鍵詞是研究機構(gòu)持續(xù)關(guān)注的熱點，并“基因表達”等關(guān)鍵詞將是下一階段的研究熱點[22]。

近年來羅漢果在腫瘤中的研究很熱門，首先是研究其生藥對腫瘤的初步影響，發(fā)現(xiàn)對腫瘤具有抑制作用，但機制及是何成分的作用不明確。隨著羅漢果皂苷的鑒定和分離，羅漢果皂苷在腫瘤中的作用日漸被開發(fā)出來，如文中所述，但究竟是什么成分在腫瘤中起關(guān)鍵作用，仍待研究。

羅漢果有效成分三萜類皂苷的研究日漸增多，目前已知羅漢果皂苷Ⅲ在人體內(nèi)可被腸細菌轉(zhuǎn)化為羅漢果皂苷Ⅱ及其苷元羅漢果醇。羅漢果皂苷V 在人胃液和腸道中逐漸脫去糖苷，最終轉(zhuǎn)變?yōu)檐赵猍23]。酶水解50%羅漢果皂苷V 可獲得羅漢果皂苷IIIE、羅漢果皂苷Ⅲ、羅漢果皂苷IVE 和賽門苷Ⅰ等次級皂苷。根據(jù)已有的研究結(jié)果推斷羅漢果皂苷ⅠA，羅漢果皂苷ⅠE，羅漢果皂苷ⅡE，羅漢果皂苷Ⅳ，羅漢果皂苷ⅣE，羅漢果皂苷V和賽門苷Ⅰ在人體內(nèi)皆有可能被水解而產(chǎn)生羅漢果醇[24]，生物活性研究表明，羅漢果醇對TPA誘導(dǎo)的人類B淋巴細胞EB病毒早期抗原（Epstein—Barr virus early antigen，EBVEA）形成具有明顯的抑制作用，而當(dāng)分子結(jié)構(gòu)中結(jié)合糖基成為糖苷（如羅漢果皂苷Ⅰ A1，Ⅰ E，ⅡE，Ⅲ，Ⅳ，ⅣE，V和賽門苷Ⅰ）則活性大大降低。羅漢果醇灌胃給藥可以通過吸收和代謝進入血液，發(fā)揮其作用。但羅漢果在人體的代謝途徑還并不明確，羅漢果醇是通過什么途徑參與到人體的各種生理或病理變化任然是一個需要研究的事情。

羅漢果作為傳統(tǒng)藥用植物，目前作為甜味劑已經(jīng)投入量產(chǎn)，但是對羅漢果其他作用的開發(fā)仍然不足，其體內(nèi)代謝途徑仍不明確。具有多種藥理作用的羅漢果作為研究的熱點，隨著研究的深入，羅漢果的作用將變得越來越清晰。