漢族和維吾爾族宮頸癌患者外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞與TGF-β1及IL-10的表達及意義

陳志剛，阿曼古麗，陳志芳，李宏

（1.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)實驗室，新疆 石河子 832008；2.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦科，新疆石河子 832008；3.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科，新疆 烏魯木齊 830054）

宮頸癌是維吾爾族的高發(fā)疾病，發(fā)病率為476/10萬，死亡率為17.27/10萬，我國是一般水平的四倍。CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞是近年發(fā)現(xiàn)的具有免疫調(diào)節(jié)功能的T細胞亞群，其在宮頸癌中的作用尚不清楚。Treg細胞與腫瘤的關(guān)系已成為近年免疫學(xué)的研究熱點。近年來已有國內(nèi)外研究報道多種腫瘤患者外周血CD4+CD25+Treg細胞表達增加，并與臨床分期和預(yù)后相關(guān)[1-2]。但是有關(guān)維吾爾族宮頸癌患者外周血Treg細胞的研究卻鮮有報道。本文對漢族、維吾爾族宮頸癌患者外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞及血清中細胞因子TGF-β1、IL-10表達與免疫功能下降的關(guān)系進行研究，探討Treg細胞在宮頸癌患者免疫負調(diào)節(jié)中的作用及民族間的差異性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 病例組為本院2015年1月～2017年5月病理活檢確診的漢族、維吾爾族宮頸癌組各25例，年齡30～66歲，平均年齡（48.9±8.7）歲。對照組為在本院體檢中心體檢的漢族、維吾爾族健康女性各25位。對照組判斷標準為婦科檢查加TCT檢查證實為正常人群，年齡29～62歲，平均（47.9±8.1）歲，兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 方法 Treg細胞的檢測于晨時空腹采集維吾爾族、漢族正常人群以及宮頸癌患者外周靜脈血2 ml進行流式細胞儀檢測CD4+CD25+Treg的含量。采用先分離人外周血單個核細胞，加入熒光標記的抗細胞表面特異性抗原CD4/CD25抗體，染色后用流式細胞儀檢測CD4+CD25+Treg/CD4+T細胞比率。通過ELISA檢測血清中Treg細胞相關(guān)細胞因子TGF-β 1、IL-10的水平，試劑盒購自于美國Linco公司。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)處理用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件，組間比較用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血Treg細胞和TGF-，組、IL-10的比較 宮頸癌組外周血Treg細胞和TGF-β1、IL-10表達水平均高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 宮頸癌患者外周血Treg細胞和TGF-β1、IL-10的表達Table 1 Expression of TGF-β1，IL-10 andregulatory T cells of peripheral blood in cervical cancer patients

2.2 各組不同民族間外周血Treg細胞表達和TGF-β1、IL-10水平比較 ①各組內(nèi)不同民族間比較。除病例組維吾爾族較漢族Treg細胞比例增加外，對照組和病例組內(nèi)漢族和維吾爾族Treg細胞表達和TGF-β1、IL-10表達水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。②組間同一民族比較。漢族和維吾爾族的病例組Treg細胞比例和TGF-β1、IL-10表達水平均較對照組升高（P＜0.05），見表2。

表2 漢族、維吾爾族宮頸癌患者外周血Treg細胞及TGF-β1、IL-10表達比較Table 2 Comparison of theExpression of TGF-β1,IL-10 and CD4+CD25+regulatory T cells of peripheral blood in cervical cancer patients of the Hans and Uygurs

2.3 Treg細胞與TGF-β1、IL-10表達水平的相關(guān)性分析宮頸癌外周血Treg細胞和TGF-β1相關(guān)性（r=0.66）、IL-10（r=0.75）表達水平具有明顯相關(guān)性（P＜0.05）。

3 討論

在人體免疫中，Treg細胞主要維持機體的免疫穩(wěn)態(tài)，人體患腫瘤后，Treg細胞升高可抑制人體對腫瘤抗原的免疫應(yīng)答，起到負向免疫調(diào)節(jié)作用。多項研究表明，Treg細胞在腫瘤外周血及組織中表達升高，并在腫瘤發(fā)病和預(yù)后方面具起重要作用[1-3]。 Treg細胞通過對機體抗腫瘤免疫應(yīng)答的抑制作用，導(dǎo)致了腫瘤細胞的免疫逃逸。其發(fā)生機制可能的是：增殖活化的Treg細胞能夠通過細胞間直接接觸來介導(dǎo)免疫抑制,影響CD8+T及NK細胞的活化、增殖；抑制APC產(chǎn)生協(xié)同刺激分子，從而抑制效應(yīng)性T細胞的增殖和IL-2的產(chǎn)生[4]。TGF-β1和IL-10是介導(dǎo)免疫抑制的細胞因子，在Treg細胞的募集和擴增中起重要作用。 TGF-β1和擴可抑制細胞毒性T細胞的成熟和巨噬細胞的激活；IL-10可降低抗原特異性T細胞增殖，阻止T細胞介導(dǎo)的CD4+細胞活化。還有研究證明，阻斷IL-10能夠阻斷Treg細胞對機體免疫耐受的誘導(dǎo)[5]。

本研究顯示，漢族、維吾爾族宮頸癌患者Treg細胞表達和TGF-β1、IL-10含量相比對照組顯著增高，這和陳志芳等[6]報道相同。說明隨著Treg細胞及IL-10、TGF-β1表達增高使效應(yīng)T細胞活性下降，引起腫瘤免疫逃逸。分析TGF-β1、IL-10和Treg細胞的相關(guān)性顯示，TGF-β1、IL-10和Treg細胞有明顯相關(guān)，顯示在宮頸癌免疫逃逸過程中二者可能參與了對Treg細胞的反饋調(diào)節(jié)，起到抑制性細胞因子的作用，進而促進了宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展。本研究還顯示，維吾爾宮頸癌患者Treg細胞表達高于漢族宮頸癌患者，這在以前文獻未見報道，我們認為可能是宮頸癌患者細胞免疫水平低下，體內(nèi)發(fā)生免疫抑制，提示這可能是宮頸癌細胞發(fā)生免疫逃逸的機制之一[7]，由于本研究樣本較少，還需要今后進一步驗證。

總之，宮頸癌患者外周血Treg細胞比例升高，可能是引起疾病發(fā)生的一項重要免疫指標。TGF-β1、IL-10表達升高抑制了效應(yīng)T性細胞增殖，有助于腫瘤細胞的免疫逃逸[8]。而漢族、維吾爾族宮頸癌患者Treg細胞表達不同仍需深入研究。