紫薯脫毒苗的組培快繁技術研究

張 迪，張星辰，姜孟琪，劉兆輝，劉新元，鄭世英

（德州學院生態(tài)與園林建筑學院，山東德州 253000）

紫薯（Ipomoea batatas(L.)Poir.）旋花科（Convolvulaceae）番薯屬，又叫黑薯，薯肉呈紫色至深紫色。其富含蛋白質、淀粉、果膠、纖維素、氨基酸、維生素及多種礦物質，同時還富含硒元素和花青素[1]。紫薯營養(yǎng)豐富具特殊保健功能，其中的蛋白質氨基酸都是極易被人體消化和吸收的。其中富含的維生素A可以改善視力和皮膚的粘膜上皮細胞，維生素C可使膠元蛋白正常合成,防治壞血病的發(fā)生,花青素是天然強效自由基清除劑[2]。在實際生產中，影響紫薯品質和產量的主要因素是病毒[3]。通過組培方法繁育脫毒紫薯苗是目前防治紫薯病毒的有效途徑。本試驗利用不同類別的培養(yǎng)基和植物生長調節(jié)物質對紫薯品種泰中11號（由泰安農業(yè)科學研究院繁育）脫毒試管苗組培快繁進行研究，為泰中11號脫毒苗的生產提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試紫薯為泰中11號，置于28±2℃溫室中進行培養(yǎng)。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗材料的處理。取紫薯泰中11號植株，除掉大部分葉片、葉柄，用0.1%的洗衣粉液洗滌后,再用蒸餾水清洗干凈，放置于超凈工作臺上進行滅菌處理。具體操作步驟是先在75%酒精中浸泡30 s,再用0.1%的HgCl2溶液消毒20 min,用無菌水進行清洗。在超凈工作臺上將泰中11號脫毒苗修剪成段,截成1～2 cm帶1-2個腋芽的小段，按形態(tài)學方向在設計好的培養(yǎng)基上進行接種。每瓶接種6個外植體,觀察其生長狀況。

1.2.2 培養(yǎng)基設計。根據配方培養(yǎng)基設計為3種：（1）基本培養(yǎng)基分別為：MS、N6和B5。（2）分別添加NAA 0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/L 的 MS 培養(yǎng)基。（3）分別添加 6-BA 0.1、0.5、1.0、2.0、3.0mg/L 的 MS培養(yǎng)基。

所有培養(yǎng)基，pH值5.8～6.0,蔗糖含量3.0%，瓊脂0.7%。每處理接種10瓶，每瓶接種2株。接種后,置于28～30℃ ,光強 2000～2500Lx，光照 11h/d 條件下培養(yǎng)。每隔3d統(tǒng)計試管苗的生根和出芽，30d后測量株高、單株葉片數，單株根長和根數。

2 結果與分析

2.1 基本培養(yǎng)基對紫薯試管苗生長的影響

由表1可以看出，不同培養(yǎng)基對紫薯脫毒苗的生根率、平均根長、單株平均根數、單株平均葉片數、株高等均有明顯影響。其中MS培養(yǎng)基有利于提高紫薯脫毒苗的成苗率。

表1 基本培養(yǎng)基對泰中11號脫毒苗生長的影響（30d）

2.2 生長調節(jié)劑對泰中11號脫毒苗生長的影響

2.2.1 NAA對脫毒苗生長的影響。從表2可以看出，隨著NAA處理濃度的不斷增加，在含有NAA的MS培養(yǎng)基中，試管苗的出芽時間、生根時間、生根數、根長、葉片數和株高均有不同的變化。當NAA濃度為0.50mg/L時，接種后5.8d產生根原基，8.5d開始出芽，30d株高可達5.2cm，葉片數達4片，新生根數9條，平均根長4.0cm，生根、出芽比平均7.91d和10.8d分別快2.11d和2.3d.。當NAA濃度高于1.0mg/L時，根和芽的誘導時間均延長，并且根數、根長及葉片數也降低。所以，當NAA濃度為0.5～1.0 mg/L時，能有效促進泰中11號紫薯脫毒試管苗的生長發(fā)育。

表2 不同濃度的NAA對泰中11號脫毒苗生長的影響（30d）

2.2.2 6-BA對脫毒苗生長的影響。由表3可以看出，MS培養(yǎng)基中加入6-BA的濃度對試管苗生根、生芽、根數、根長、葉片數、株高等均有影響。當6-BA濃度為1.0mg/L時，試管苗出芽時間為7.2d，比平均出芽時間縮短2.02d；生根時間4.5d，比平均生根時間縮短1.13d；單株根數3.8條，單株葉數4.3個。當6-BA濃度為0.1mg/L時，根長為5.5cm，當6-BA濃度為0.5 mg/L時，株高生長最快為5.3cm。當6-BA濃度為2.0mg/L或更高時，抑制了根的形成，所有處理均未產生幼根，莖葉影響較小。說明當6-BA濃度為0.1～1.0 mg/L時，更有利于泰中11號紫薯脫毒試管苗的快速生長。

表3 不同濃度的6-BA對泰中11號脫毒苗生長的影響（30d）

3 討論

N6、B5、MS 培養(yǎng)基的生根株數分別是 10、9、18株，生根率分別為50%、45%、90%，根數分別為4.5、5.1和7.2條，根長分別為2.1、3.2和4.8cm，成苗數分別為10、8 和 19 個，片數分別為 4.5、4.1、和 7.8 片，株高分別為3.9、4.2和6.8cm，成苗率分別為 50%、40%和95%。MS培養(yǎng)基最有利于泰中11號紫薯試管苗的生長。

在含有NAA的MS培養(yǎng)基中，當NAA濃度為0.1和0.25mg/L時，出芽時間分別為9.8和9.7d；生根時間分別為7.8和7.6d；根數分別為5.4和3.6條；根長分別為4.7和4.5cm；葉片數分別為3.8片和2.片；株高分別為 6.4和 5.7cm。當 NAA濃度為 1.5、2.0和2.5mg/L時，出芽時間分別為11.5、12.3和14.6 d；生根時間分別為7.7、9.2和11.8d；根數分別為5.5、4.3和5.8條；根長分別為4.7和4.5cm；葉片數分別為3.8和2.7片；株高分別為6.4和5.7cm。所以，當NAA濃度為0.5～1.0mg/L時，能有效促進泰中11號紫薯脫毒試管苗的生長發(fā)育。

在含有6-BA的MS培養(yǎng)基中，當6-BA濃度為0.1、0.5、1.0mg/L 時，出芽時間分別為 9.8、8.2 和 7.2 d；生根時間分別為6.8、5.6和4.5 d；根數分別為2.8、3.0和3.8條；根長分別為5.5、4.8和4.5cm；葉片分別為3.2、3.5和4.0片；株高分別為5.0、5.3和5.2cm。

當6-BA濃度大于1.0mg/L時，不能生根。所以，6-BA濃度為0.1～1.0mg/L時，能促進泰中11號紫薯脫毒試管苗的生長發(fā)育。