質(zhì)壁分離操作技術(shù)

黃衛(wèi)華

【摘 要】本文介紹了質(zhì)壁分離技能高考的內(nèi)容，考核知識點與技能要求，提出了學(xué)生操作時易發(fā)生的問題以及提高質(zhì)壁分離技術(shù)的措施。

【關(guān)鍵詞】質(zhì)壁分離；學(xué)生技能；培養(yǎng)

【中圖分類號】G633.91 【文獻標識碼】A

【文章編號】2095-3089（2018）12-0101-01

16年來，《洋蔥鱗片表皮細胞質(zhì)壁分離臨時裝片的制作與觀察》新增為江蘇省對口單招農(nóng)業(yè)類專業(yè)技能高考項目。根據(jù)江蘇省普通高校對口單獨招生農(nóng)業(yè)類專業(yè)技能考試標準，《洋蔥鱗片表皮細胞質(zhì)壁分離臨時裝片的制作與觀察》主要包括臨時裝片的制作（30分）、顯微鏡使用（35分）、生物繪圖（20分）、熟練程度（15分）等四個部分。高考時間為30分鐘，總分為100分。一、高考內(nèi)容、考核知識點與技能要求

1.臨時裝片制作。

按照臨時裝片制作的技術(shù)要求完成擦皿、取材、浸泡、擦玻、滴糖、展片、制片等七個步驟全過程（具體略）。

2.顯微鏡使用。

按照顯微鏡使用的技術(shù)要求完成擦鏡、對光、裝片、低倍鏡觀察、高倍鏡觀察等五個步驟全過程（具體略）。

3.生物繪圖。

要求繪出高倍鏡下觀察到的細胞質(zhì)壁分離狀態(tài)（至少三個細胞），標注出觀察到的其中一個的細胞。二、學(xué)生操作時易發(fā)生的問題

1.臨時裝片制作時易發(fā)生的問題。

（1）擦培養(yǎng)皿：①取培養(yǎng)皿動作大、聲響大或損壞培養(yǎng)皿；②培養(yǎng)皿擦拭不干凈，放置位置不妥。

（2）撕取材料：①撕取洋蔥內(nèi)表皮或顏色較淺部位外表皮；②撕取的洋蔥外表皮邊緣不整齊、過大或過??；③未用刀片劃取，直接用鑷子撕取。

（3）浸泡材料 ：①洋蔥鱗片葉外表皮小塊浮于蔗糖溶液上；②洋蔥外表皮小塊未展平或部分重疊；③鑷子或解剖針處理時，破損洋蔥小塊。

（4）擦拭玻片：①用手直接拿在載玻片、蓋玻片的正反面；②玻片整體不干凈或部分不干凈；③夾取或擦拭蓋玻片用力過大，導(dǎo)致蓋玻片碎裂；④擦拭后的蓋玻片隨意放置。

（5）滴加蔗糖溶液：①在載玻片上滴加的蔗糖溶液過多或過少；②滴加的液滴不圓潤；③載玻片擦拭不干凈，液滴擴散不圓潤。

（6）展片：①洋蔥小塊浸泡時間過長或過短；②洋蔥外表皮未完全浸潤在液滴中；③洋蔥外表皮未展平，有折皺；④洋蔥外表皮放置傾斜，不水平。

（7）制片 ：①直接把蓋玻片整個蓋在洋蔥表皮上；②洋蔥外表皮傾斜，沒有扶正；③蓋玻片傾斜，沒有位于載玻片正中；④溢出的液滴，沒有用吸水紙吸取，整個裝片不干潔；⑤裝片中有氣泡，沒有排出。

2.顯微鏡使用時易發(fā)生的問題。

（1）擦鏡：①忘記用擦鏡紙擦目鏡、物鏡、反光鏡等；②忘記用干凈的抹布擦鏡臂、載物臺、鏡座等。

（2）對光：①沒有打開電源開關(guān)或未通電；②視野的明亮度不適宜：過暗或過亮；③雙目顯微鏡的左右視野未完全吻合；④聚光鏡孔徑光闌調(diào)節(jié)桿沒有撥至10×數(shù)字。

（3）放片：①標本夾彈片壓在裝片上面；②不會使用縱、橫向移動手輪調(diào)整裝片；③裝片中的觀察目標未調(diào)到光路中央。

（4）低倍鏡觀察：①未換用10×物鏡聚焦；②不是通過旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器調(diào)用低倍物鏡，用手指轉(zhuǎn)動低倍鏡鏡頭；③未調(diào)聚光鏡孔徑光闌至10×數(shù)字；④未旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦手輪上升載物臺；⑤不用微調(diào)節(jié)手輪、或圖像不清楚；⑥未將觀察目標調(diào)至視場中央。

（5）高倍鏡觀察：①不是通過旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器調(diào)用高倍物鏡，用手指轉(zhuǎn)動高倍鏡鏡頭；②未調(diào)聚光鏡孔徑光闌至40×數(shù)字；③不用微調(diào)節(jié)手輪、或圖像不清楚；④未將觀察目標調(diào)至視場中央；⑸高倍鏡下視野較暗，不會調(diào)節(jié)亮度。

3.生物繪圖時易發(fā)生的問題。

（1）所繪圖大小與實際不符。

（2）沒有畫圓，沒有標注細胞的各部分名稱。

（3）細胞線條反復(fù)擦改。

（4）沒有至少繪出3個相鄰?fù)暾募毎蚱渌毎喞煌暾?/p>

（5）線條斷斷續(xù)續(xù)，不是一筆畫成；或線條連接點明顯。

（6）細胞膜、液泡膜等用完整的線條畫出。

（7）畫點時，鉛筆傾斜，點畫成短線條。

（8）點的稀疏與視野內(nèi)的亮暗不符。

（9）各引出線之間不等距，細胞名稱沒有右對齊。

（10）標注不齊全，文字潦草。

（11）繪圖沒有左右對稱，影響整幅圖的效果；⑿圖的下方?jīng)]有標注圖的名稱。

4.整理與清潔桌面。

（1）未先降低燈泡亮度，后關(guān)閉電源。

（2）沒有把高倍鏡還原到低倍鏡。

（3）沒有清潔臺面、或臺面清理不干凈。三、提高質(zhì)壁分離操作技術(shù)的一些措施

1.制作臨時裝片（30分）。

（1）擦培養(yǎng)皿：取一個培養(yǎng)皿，用吸水紙擦拭干凈，在里面滴加2～3滴蔗糖溶液，斜靠在另一個培養(yǎng)皿上。

（2）撕取材料：靠洋蔥頂端下側(cè)，用刀片劃約5×3mm大小的洋蔥鱗片葉外表皮一塊，置于蔗糖溶液的培養(yǎng)皿中，浸泡1～2分鐘。

（3）擦拭玻片：用左手的食指和拇指夾住載玻片的長邊，右手用吸水紙包住載玻片，均勻擦拭，直至擦拭干凈。擦拭蓋玻片的方法類似，擦拭后放置于載玻片的一側(cè)邊緣，外露一小部分。

（4）滴加蔗糖溶液：將載玻片水平放置于實驗臺上，在中央偏左滴加一滴蔗糖溶液。

（5）展片：用鑷子把培養(yǎng)皿中浸泡過的洋蔥外表皮小塊放入載玻片上的蔗糖溶液中，并把它展平。

（6）制片：用鑷子夾起蓋玻片，使其一邊先接觸載玻片上蔗糖溶液的一側(cè)，然后緩緩地放下。

（7）檢查：檢查所做裝片是否美觀。若蓋片后有液滴溢出，則用吸水紙吸取多余的液滴；若裝片中有氣泡，則左手持鑷子抵住蓋玻片左側(cè)，右手持解剖針，從右側(cè)輕輕掀起蓋玻片，然后緩緩放下，若氣泡較多，則可重復(fù)幾次；若洋蔥表皮小塊傾斜，可在掀起蓋玻片時，用解剖針挑正。

2.顯微鏡使用（35分）。

（1）擦鏡：用擦鏡紙擦目鏡、物鏡、反光鏡等，用抹布擦鏡臂、鏡座、載物臺等。

（2）對光：旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，將10×物鏡移至光路，再將聚光鏡孔徑光闌調(diào)節(jié)桿撥至10×數(shù)字。打開電源開關(guān)，緩緩旋轉(zhuǎn)亮度旋鈕調(diào)節(jié)視場的明亮度適宜，調(diào)節(jié)雙目鏡鏡筒轉(zhuǎn)座至左右視場完全吻合。

（3）放片：把制作好的臨時裝片放在載物臺上，將裝片固定住。轉(zhuǎn)動縱、橫向移動手輪，把裝片中的洋蔥小塊調(diào)至光路中央。

（4）低倍鏡觀察：旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦手輪，將載物臺升至最高點。雙眼通過目鏡觀察，慢慢旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦手輪，降低載物臺，至標本像出現(xiàn)。旋轉(zhuǎn)微調(diào)焦手輪對標本的像進行精確聚焦，至看到清晰的圖像，并把觀察目標調(diào)至視場中央。

（5）高倍鏡觀察：旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，將40×物鏡移至光路，再將聚光鏡孔徑光闌調(diào)節(jié)桿撥至40×數(shù)字。雙眼通過目鏡觀察，雙手轉(zhuǎn)動微調(diào)焦手輪，緩緩下降載物臺，直至看到物像為止，并把觀察目標調(diào)到視場中央。若視野較暗，則可旋轉(zhuǎn)亮度調(diào)節(jié)旋鈕，使視場亮度適宜。

3.生物繪圖（20分）。

（1）畫圓：在考試紙的中間偏左的位置，用圓規(guī)畫出一個直徑9厘米的圓。要考慮好標注細胞名稱后左右對稱。

（2）繪圖：一邊觀察，一邊繪圖。至少要詳繪出視場中3個質(zhì)壁分離進程不同的相鄰?fù)暾毎?，其他周圍細胞要繪出細胞壁。繪出的細胞形狀要與顯微鏡中觀察到的細胞形狀一致。

用垂直點繪細胞膜、細胞質(zhì)、液泡膜、細胞核，點由密到稀、由深到淺。

（3）標注：向右水平橫線引出說明細胞的各部分，等距均勻分布，右對齊清晰標注各部分名稱。圖的下方標注圖的名稱，并加上放大倍數(shù)。

4.整理與清潔（15分）。

操作完畢，關(guān)閉電源，旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，將物鏡轉(zhuǎn)到10×物鏡。物品歸位，清潔桌面。形成良好的職業(yè)素養(yǎng)。