人參四逆顆粒對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄所致心力衰竭大鼠的治療作用

邸 琳 劉新宇 徐雅娟 張春柳 趙宏宇 王 玉 解生旭

(吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院藥效毒理評(píng)價(jià)中心，吉林 長(zhǎng)春 130012)

人參四逆湯(人參、附子、干姜、甘草)出自醫(yī)圣張仲景《傷寒論》霍亂病篇，是為霍亂亡陽(yáng)脫液之證，是歷代醫(yī)家推崇的回陽(yáng)救逆的著名方劑。具有回陽(yáng)救逆，益氣生津之功效。適用于因吐利、大汗，出血，傷津所致之惡寒、脈微欲絕諸癥。人參四逆顆粒是將傳統(tǒng)經(jīng)方人參四逆湯，按組分組方的研究原則和方法，研制成治療慢性心力衰竭(心衰)的創(chuàng)新新藥——人參四逆顆粒，本文探討人參四逆顆粒對(duì)腹主動(dòng)脈狹窄所致心衰大鼠的治療作用。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物、飼料及藥物 SD大鼠雄性，180～220 g，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證編號(hào)為SCXK-(京)2006-0009。清潔級(jí)大小鼠維持料，購(gòu)自北京科澳協(xié)力飼料有限公司，許可證編號(hào)：SCXK(京)2009-0012。人參四逆顆粒，棕黃色顆粒，3.66 g(生藥)/g粉，由吉林省中醫(yī)中藥研究院化學(xué)所提供。生產(chǎn)批號(hào)：20100601。芪藶強(qiáng)心膠囊，批號(hào)100701，石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。馬來(lái)酸依那普利片，批號(hào)：10061706，揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)生產(chǎn)。

1.2試劑盒和試劑 超氧化物歧化酶(SOD，20110705)、丙二醛(MDA，20110706)、肌酸激酶(CK)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。心鈉素(ANF)、醛固酮(ALD)、血管緊張素(Ang)Ⅱ酶免試劑盒為美國(guó)RD生物科學(xué)公司產(chǎn)品，上海源葉生物科技有限公司分裝，批號(hào)20110802B。

1.3儀器 ST-360酶標(biāo)儀上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司產(chǎn)品，752紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠產(chǎn)品。LBY-N6K全自動(dòng)血流變快速測(cè)定儀，北京普利生儀器有限公司產(chǎn)品。

1.4造?！?,2〕和分組給藥方法 選用SD雄性大鼠200只，留取20只大鼠做空白對(duì)照，其余大鼠按照腹主動(dòng)脈狹窄法誘導(dǎo)心衰，手術(shù)前禁食不禁水16 h，按35 mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，將大鼠仰臥在固定臺(tái)上，常規(guī)消毒，在左上腹部打開(kāi)腹腔，暴露腹主動(dòng)脈，在雙側(cè)腎動(dòng)脈上方0.5 cm處將8號(hào)針頭與腹主動(dòng)脈共同結(jié)扎，然后拔出針頭復(fù)制腹主動(dòng)脈狹窄誘導(dǎo)心衰模型?？瞻讓?duì)照組同樣方法麻醉大鼠，打開(kāi)腹腔分離腹主動(dòng)脈，但不結(jié)扎。4 w后，將心衰模型大鼠隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性中藥組、陽(yáng)性西藥組、人參四逆顆粒高劑量組、中劑量組、低劑量組。對(duì)照組、模型組給予10 ml/kg蒸餾水，陽(yáng)性中藥組給予芪藶強(qiáng)心膠囊0.65 g/kg,陽(yáng)性西藥組給予1 mg/kg馬來(lái)酸依那普利片，人參四逆顆粒組分別給予17.2，8.6，4.3 g/kg人參四逆顆粒粉，每天給藥1次，連續(xù)30 d。

1.5檢查方法和檢測(cè)指標(biāo) 按35 mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠，頸部腹側(cè)偏右縱向切開(kāi)皮膚，在胸鎖乳突肌內(nèi)側(cè)分離右頸總動(dòng)脈，用眼科剪子剪一小口插入已注入肝素生理鹽水的左室導(dǎo)管，將充滿肝素生理鹽水的壓力換能器連接Bl-420+生物功能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，左手用鑷子夾住頸總動(dòng)脈，右手將導(dǎo)管插入左室腔，固定好導(dǎo)管，平穩(wěn)一段后，記錄15 min大鼠心率、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、平均血壓(MBP)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末期壓(LVEDP)、左室最大上升和下降速率(+dp/dtmax、-dp/dtmax)測(cè)定值，然后打開(kāi)腹腔，腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定全血黏度、血漿黏度，酶聯(lián)免疫法測(cè)定醛固酮、ANF、AngⅡ，MDA、SOD等指標(biāo)。摘取大鼠心臟做組織病理學(xué)檢查。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0軟件行方差分析。

2 結(jié) 果

2.1各組血流動(dòng)力學(xué)比較 模型組心率明顯低于空白對(duì)照組(P<0.05)，SBP明顯高于空白對(duì)照組。人參四逆顆粒高、中、低劑量組和陽(yáng)性中藥組及陽(yáng)性西藥組心衰大鼠心率均無(wú)明顯變化(P>0.05)。各給藥組MBP、DBP，SBP與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。模型組LVSP降低，陽(yáng)性中藥組、陽(yáng)性西藥組、人參四逆顆粒高、中劑量組與模型組比較，LVSP明顯增加(P<0.05)。各給藥組LVEDP無(wú)明顯變化(P>0.05)。模型組-dp/dtmax較空白對(duì)照組明顯降低(P<0.05)，人參四逆顆粒高、中劑量組、陽(yáng)性西藥組±dp/dtmax較模型組明顯提高(P<0.05，P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 各組血流動(dòng)力學(xué)比較

與模型組相比：1)P<0.05，2)P<0.01，3)P<0.001，下表同

2.2各組神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞因子比較 模型組AngⅡ和ALD、ANF含量較空白對(duì)照組明顯增加(P<0.05，P<0.001)。人參四逆顆粒中、低劑量組、陽(yáng)性西藥組AngⅡ含量較模型組均明顯降低(P<0.05，P<0.01)。各給藥組ALD和ANF含量較模型組均明顯降低(P<0.05，P<0.01，P<0.001)。見(jiàn)表2。

表2 各組神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞因子比較

2.3各組自由基比較 模型組血清中MDA水平較空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01)，SOD活性明顯降低(P<0.05)。人參四逆顆粒高、中劑量組大鼠MDA含量較模型組明顯降低(P<0.05)。陽(yáng)性中藥組、陽(yáng)性西藥組、人參四逆顆粒中、低劑量組SOD活性較模型組明顯提高(P<0.05，P<0.01)。見(jiàn)表3。

2.4各組血液黏度比較 模型組血液黏度和血漿黏度較空白對(duì)照組顯著增加(P<0.01，P<0.001)，陽(yáng)性中藥組對(duì)全血黏度無(wú)明顯影響(P>0.05)，但能明顯降低血漿黏度(P<0.05)。陽(yáng)性西藥組、人參四逆顆粒高、中劑量組全血黏度和血漿黏度較模型組明顯降低(P<0.05，P<0.01)，以人參四逆顆粒高劑量組效果最為顯著。人參四逆顆粒低劑量組顯著降低全血黏度低切 (P<0.05)。見(jiàn)表4。

表3 各組自由基比較

表4 各組血液黏度比較

2.5各組心臟指標(biāo)比較 模型組較空白對(duì)照組心肌明顯增厚，心肌膠原變性面積明顯增加(P<0.01)。各個(gè)給藥組均能降低心肌厚度(P<0.05，P<0.01)，陽(yáng)性中藥組和人參四逆顆粒中劑量組降低心肌膠原變性面積(P<0.05)。見(jiàn)表5。

表5 各組心臟厚度和心肌變性膠原面積比較

3 討 論

慢性心力衰竭當(dāng)屬中醫(yī)心悸、喘證、水腫、痰飲范疇。它的最根本中醫(yī)病機(jī)為內(nèi)虛，早期主要為心氣心陽(yáng)虧虛，可兼肺氣虧虛，隨病情發(fā)展及病機(jī)變化，心氣心陽(yáng)虧虛致運(yùn)血無(wú)力，瘀血內(nèi)停；中期脾陽(yáng)受損，脾虛失運(yùn)，復(fù)加肺氣虧虛，水道失其通調(diào)，水濕內(nèi)停；后期腎陽(yáng)虛衰，膀胱氣化不利，水飲泛濫。因此，慢性心力衰竭的病機(jī)可用“虛”“瘀”“水”三者概括〔3〕。

心功能減退，心排血量減少，心臟前后負(fù)荷增加，血流動(dòng)力異常改變，不是慢性心衰的誘發(fā)原因，而是最后結(jié)果，慢性心力衰竭本質(zhì)是心臟重塑，而神經(jīng)內(nèi)分泌的長(zhǎng)期興奮和激活是導(dǎo)致心臟重塑的根本原因。心衰時(shí)神經(jīng)內(nèi)分泌常過(guò)度激活，從而加劇心室重構(gòu)和促進(jìn)心衰惡化。ANF、Ang、ALD等神經(jīng)內(nèi)分泌因子的激活與慢性心力衰竭嚴(yán)重程度呈正相關(guān)〔4〕。本文提示，人參四逆顆粒治療可以明顯增加心肌收縮力，增加心輸出量，降低心臟前后負(fù)荷，降低ANF、AngⅡ、ALD含量等而達(dá)到治療慢性心力衰竭的作用。

4 參考文獻(xiàn)

1馬曉斌，王楊慧，劉建勛,等.參芪益心顆粒對(duì)慢性心力衰竭大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2007；13(11):27-9.

2蔡 輝，沈思鈺，董曉蕾，等.壓力負(fù)荷增加大鼠模型血漿血管緊張素Ⅱ及醛固酮水平的改變〔J〕.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2010；18(1)：63-4.

3徐雅娟，宋風(fēng)瑞，趙洪峰，等.人參四逆湯抗體克作用的有效組分成分分析〔J〕.中草藥，2002；33(5)：392.

4張 建，華 琦.心力衰竭的診斷與治療〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：9-13.