DRD2基因rs1800497多態(tài)性與精神分裂癥發(fā)病和認(rèn)知功能的關(guān)系

徐曉文+惠李+谷曉楚+吳兢勤+錢志平+孫洪言+潘名志+陳潔+朱宏亮+王小瓊+尹曉莉+臺勇

[摘要] 目的 調(diào)查多巴胺D2受體（DRD2）基因rs1800497多態(tài)性與慢性精神分裂癥發(fā)病和認(rèn)知功能的關(guān)系。 方法 招募567例慢性精神分裂癥患者和421例健康受試者，認(rèn)知功能采用重復(fù)性成套神經(jīng)心理狀態(tài)測驗(yàn)量表（RBANS）評估，DRD2基因rs1800497多態(tài)性采用TaqMan SNP方法進(jìn)行基因分型為：C/C、C/T、T/T。收集一般人口學(xué)和臨床數(shù)據(jù)。 結(jié)果 慢性精神分裂癥組和健康對照組DRD2基因rs1800497位點(diǎn)的等位基因頻率的分布沒有顯著性差異（χ2=0.05，df=1，P=0.83），但基因型頻率的分布出現(xiàn)顯著性差異（χ2=7.00，df=2，P=0.03）。精神分裂癥患者依據(jù)rs1800497位點(diǎn)基因型分組分析：組間延遲記憶分值出現(xiàn)顯著差異（F=3.91，P=0.02）。 結(jié)論 DRD2基因rs1800497位點(diǎn)可能參與了精神分裂癥的發(fā)病，并進(jìn)一步可能影響精神分裂癥的認(rèn)知功能。

[關(guān)鍵詞] 精神分裂癥；DRD2基因；認(rèn)知功能；rs1800497

[中圖分類號] R749.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701（2017）34-0001-03

Relationship between rs1800497 polymorphism of DRD2 gene and pathogenesis and cognitive function of schizophrenia

XU Xiaowen1 HUI Li1 GU Xiaochu1 WU Jingqin1 QIAN Zhiping1 SUN Hongyan1 PAN Mingzhi1 CHEN Jie1 ZHU Hongliang1 WANG Xiaoqiong2 YIN Xiaoli2 TAI Yong2

1.Guangji Hospital Affiliated to Soochow University， Suzhou 215137， China； 2.Department of Psychiatry， Affiliated Corning Hospital， Wenzhou Medical University， Wenzhou 325000， China

[Abstract] Objective To investigate whether rs1800497 polymorphism of Dopamine D2 receptor（DRD2） gene associated with the onset and cognitive function of chronic schizophrenia. Methods A total of 567 patients with chronic schizophrenia and 421 healthy subjects were enrolled in this study. Cognitive function was assessed by the Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Status（RBANS）. The rs1800497 polymorphism of DRD2 gene was genotyped by TaqMan SNP method as follows： C/C， C/T， T/T. The general demographic and clinical data were collected. Results There was no significant difference in allele frequencies of rs1800497 in the DRD2 gene between the chronic schizophrenia group and the healthy control group（χ2=0.05， df=1， P=0.83）. But there was a significant difference in the distribution of genotype frequencies（χ2=7.00， df=2， P=0.03）. Schizophrenia patients were grouped and analyzed according to rs1800497 locus genotypes. There was a significant difference in delayed memory scores between groups（F=3.91， P=0.02）. Conclusion The rs1800497 site of DRD2 gene may be involved in the pathogenesis of schizophrenia and may further affect the cognitive function of schizophrenia.

[Key words] Schizophrenia； DRD2 gene； Cognitive function； rs1800497

國內(nèi)外研究顯示，多巴胺D2受體（Dopamine D2 receptor， DRD2）與精神分裂癥的發(fā)病機(jī)制顯著相關(guān)。該基因位于染色體11q22～23，長度超過270 kb[1]，參與精神分裂癥患者的精神活動及認(rèn)知異常的可能機(jī)制為：腺苷酸環(huán)化酶與該基因負(fù)耦聯(lián)，作用于第二信使從而抑制鈣離子通道，并激活鉀離子通道[2]。精神分裂癥尸檢和活體PET研究發(fā)現(xiàn)紋狀體DRD2的密度顯著增高[3]。Ikeda等[6]發(fā)現(xiàn)DRD2基因rs1800497位點(diǎn)與利培酮治療首發(fā)精神分裂癥療效具有相關(guān)性。此外，有研究報道[7]DRD2基因變化與精神分裂癥患者的記憶異常相關(guān)。以上研究結(jié)果提示DRD2基因可能是精神分裂癥發(fā)病的易感基因，并影響精神分裂癥患者的認(rèn)知功能。因此，本研究仍需要進(jìn)一步驗(yàn)證DRD2基因rs1800497多態(tài)性是否參與精神分裂癥的發(fā)病，并影響其認(rèn)知功能?，F(xiàn)報道如下。endprint

1 對象與方法

1.1 研究對象

項目方案和知情同意書經(jīng)蘇州大學(xué)附屬廣濟(jì)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，項目執(zhí)行時間2013年9月～2016年3月。567例慢性精神分裂癥患者（男378例，女189例）血液樣本來自本院檢驗(yàn)科，平均年齡（46.6±9.1）歲，符合入組標(biāo)準(zhǔn)：①國際疾病分類標(biāo)準(zhǔn)第10版和《中國精神病分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)（第2版）》修訂本診斷為精神分裂癥；②年齡18～60歲，病程超過2年；③能參與臨床癥狀和認(rèn)知評估；④自愿參加，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無精神分裂癥受試者；②中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病受試者等；③軀體疾病受試者，如感染、糖尿病和高血壓等；④妊娠期或哺乳期婦女。

421例健康受試者（男281例，女140例）來自蘇州市市立醫(yī)院健康體檢中心，平均年齡（47.1±9.0）歲，入組標(biāo)準(zhǔn)：①既往或目前無精神疾病及家族史；無中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾?。粺o酒精依賴和物質(zhì)依賴史；②身體健康；③自愿參加本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①精神分裂癥受試者；②中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病受試者；③軀體疾病受試者，如感染、糖尿病和高血壓等；④妊娠期或哺乳期婦女?；颊呔栽竻⒓硬⒑炇鹬橥鈺?。精神分裂癥患者和健康受試者兩組資料間具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 采用自制CRF表收集患者一般社會人口學(xué)資料，主要包括性別、年齡、民族、受教育水平、家族疾病史等和疾病相關(guān)的資料。并采用重復(fù)性成套神經(jīng)心理狀態(tài)測驗(yàn)（the Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Status，RBANS）[8，9]評估受試者的認(rèn)知功能。

1.2.2 DNA提取 采集所有受試者清晨空腹靜脈血5 mL于促凝管中，分離血漿后剩余血液樣本按美國Promega公司的DNA試劑盒方案提取DNA，然后Nanodrop 2000檢測DNA濃度，按每微升50 ng稀釋成為工作液，每管分裝100 μL-86℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 DRD2基因 rs1800497位點(diǎn)的檢測應(yīng)用Thermo公司QuantStudioTM Dx 實(shí)時熒光定量PCR設(shè)備，訂購Thermo公司DRD2基因rs1800497位點(diǎn)的熒光探針和引物（編號為：C_7486676_10，貨號：4351379），采用TaqMan SNP基因分型檢測方法對該多態(tài)性進(jìn)行基因分型，其結(jié)果為CC、CT和TT。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對兩組的一般人口學(xué)和臨床數(shù)據(jù)計數(shù)資料采用方差分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，在線遺傳統(tǒng)計SHEsis軟件分別分析慢性精神分裂癥患者組和健康對照組的該基因位點(diǎn)是否符合Hardy-Weinberg（H-W）遺傳平衡度，并檢測該基因位點(diǎn)是否是精神分裂癥的易感位點(diǎn)。按該基因的基因型分組，應(yīng)用方差分析對精神分裂癥認(rèn)知功能進(jìn)行分析，并調(diào)整協(xié)變量，檢驗(yàn)水準(zhǔn)P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 DRD2rs1800497基因型在慢性精神分裂癥組和健康對照組中的H-W遺傳平衡

SHEsis在線遺傳軟件分析結(jié)果顯示精神分裂癥患者組和健康對照組之間DRD2 rs1800487的基因型分布均符合H-W遺傳平衡（χ2=6.11，P>0.05；χ2=1.83，P>0.05）。

2.2 DRD2rs1800497與慢性精神分裂癥

DRD2基因rs1800497位點(diǎn)的等位基因頻率分布在精神分裂癥和健康對照組中分布沒有顯著性差異（χ2=0.05，df=1，P=0.83），但基因型在兩組之間具有顯著性差異（χ2=7.00，df=2，P=0.03），見表1。進(jìn)一步調(diào)整性別和年齡，兩組間基因型仍然沒有顯著差異（P<0.05）。

2.3 DRD2rs1800497與慢性精神分裂癥患者認(rèn)知功能

DRD2基因rs1800497位點(diǎn)的基因型和精神分裂癥患者的認(rèn)知功能之間的關(guān)系，見表2。結(jié)果表明rs1800497位點(diǎn)的基因型組間延遲記憶分具有顯著差異（F=3.91，P=0.02）。

3 討論

在漢族人群中，DRD2基因的rs1800497多態(tài)性是慢性精神分裂癥的易感基因位點(diǎn)，提示該基因位點(diǎn)與漢族精神分裂患者的發(fā)病具有相關(guān)性。Parsons等研究人員發(fā)現(xiàn)DRD2rs1800497多態(tài)性在歐洲精神分裂癥和對照組中的等位基因和基因型分布存在顯著性差異，表明該位點(diǎn)可能是精神分裂癥的易感基因位點(diǎn)[10]。以前研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)DRD2啟動子區(qū)域存在-141C del/ins（-141C插入/缺失）位點(diǎn)的突變影響該基因的編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和翻譯等各種變化，并與瑞典精神分裂癥發(fā)病具有密切的相關(guān)性[11，12]。Meta分析結(jié)果顯示：DRD2基因外顯子上的7個位點(diǎn)（如：rs1801028、rs6275和rs6277）與精神分裂癥發(fā)病也具有相關(guān)性[13，14]。Muller等[6]的研究顯示DRD2rs 1800497位點(diǎn)參與了抗精神病藥物導(dǎo)致精神分裂癥患者的體重增加。此外，Ikeda等[7]的研究也顯示DRD2 rs1800497位點(diǎn)被看作利培酮治療首發(fā)精神分裂癥的重要生物遺傳標(biāo)記。然而也有研究發(fā)現(xiàn)，DRD2基因的啟動子區(qū)域-141C del/ins位點(diǎn)與英國白種人精神分裂癥發(fā)病不相關(guān)，這種不一致的結(jié)果可能是由于種族、性別等因素的差異造成。因此，未來有必要研究該位點(diǎn)在首發(fā)精神分裂癥發(fā)病中是否發(fā)揮作用，并進(jìn)一步研究該基因其他位點(diǎn)及位點(diǎn)間的交互作用在首發(fā)精神分裂癥發(fā)病中的作用。

我們的結(jié)果還發(fā)現(xiàn)：DRD2基因的rs1800497多態(tài)性與慢性精神分裂癥的延長記憶具有顯著的相關(guān)性。該基因位點(diǎn)影響精神分裂癥的認(rèn)知功能的可能機(jī)制：該位點(diǎn)堿基的變化可能影響多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞，進(jìn)而出現(xiàn)精神分裂癥的延長記憶的異常。有研究[15]已發(fā)現(xiàn)DRD2基因突變與精神分裂癥患者記憶功能和工作記憶異常具有相關(guān)性。因此，該基因位點(diǎn)的變化可能涉及慢性精神分裂癥的認(rèn)知功能。endprint

本研究存在的不足：①僅檢測DRD2基因的一個多態(tài)性位點(diǎn)，并不能代表該基因的突變位點(diǎn)，因此，應(yīng)該檢測該基因其他功能位點(diǎn)，進(jìn)行多位點(diǎn)聯(lián)合分析，并進(jìn)一步與環(huán)境因素聯(lián)合分析對精神分裂癥發(fā)病的影響；②該基因位點(diǎn)在不同種族的突變率不同，因此，應(yīng)該在其他不同地區(qū)、不同種族開展研究，進(jìn)一步驗(yàn)證該位點(diǎn)是否是精神分裂癥的易感位點(diǎn)；③該研究樣本主要來自每月固定醫(yī)院患者體檢，因而可能不同醫(yī)生對患者的診斷存在差異；④本研究招募的是長期住院慢性患者，藥物和病程等干擾因素多，因此，采用首發(fā)精神分裂癥患者進(jìn)一步研究是必要的。

總之，DRD2基因rs1800497位點(diǎn)可能參與了精神分裂癥的發(fā)病機(jī)制，并且影響精神分裂癥受試者的認(rèn)知功能。然而，這個結(jié)果僅僅是初步結(jié)果，仍然需要在不同地區(qū)、不同種族的首發(fā)精神分裂癥患者中進(jìn)行大樣本的驗(yàn)證。

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（收稿日期：2017-09-19）endprint