藤本月季多特蒙特組培快繁技術(shù)

閆春霞

摘要：以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度6-BA、IBA、KT植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，對(duì)藤本月季多特蒙特的組培快繁技術(shù)進(jìn)行了研究，同時(shí)進(jìn)行了試管苗移栽基質(zhì)篩選試驗(yàn)。結(jié)果表明，適宜的誘導(dǎo)發(fā)芽培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；增殖培養(yǎng)基以MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L效果最好，以上培養(yǎng)基且使芽生長(zhǎng)健壯；適宜的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5 mg/L，生根率可達(dá)92.5%，且根粗壯發(fā)達(dá)；在移栽試驗(yàn)中，適宜的移栽基質(zhì)為蛭石+泥炭（1∶1），在每年5、6和9月適宜進(jìn)行試管苗移栽，其移栽成活率可高達(dá)94.5%。

關(guān)鍵詞：藤本月季；多特蒙特；組織培養(yǎng)；擴(kuò)繁

中圖分類號(hào)：S685.12 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）10-1960-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.10.040

Technology of Climbing Rose Dortmund Tissue Culture and Rapid Propagation

YAN Chun-xia

（Garden Branch of Science and Technology，Xinjiang Agricultural Vocational Technical College，Changji 831100，Xinjiang，China）

Abstract： Taking MS as basic medium，adding plant growth regulator 6-BA，IBA，KT of different concentration，studying the technology of Dortmund Climbing Rose tissue culture and rapid propagation，and carried out test tube plantlet transplantation and substrate screening experiment. Results showed that medium suitable for Induced germination is MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L. Best medium for multiplication is MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L. Medium mentioned above can make sprout a robust growth. Best medium for root growth is 1/2MS+IBA 0.5 mg/L，with a thick and robust rooting rate of 92.5%. In transplantation experiment，the best medium is vermiculite+peat，and the best tube plantlet transplantation period is May，June and September，with a survival ratio above 94.5%.

Key words：climbing rose；dortmund；tissue culture；propagation

藤本月季為薔薇科薔薇屬攀緣植物，是近年來選育出的可用于城市園林綠化的新的月季品種。其三季開花，花朵繁多，略加修剪可形成圓球狀、圓柱狀、拱門形、花山等景觀，是城市垂直綠化美化中的優(yōu)良品種。藤本月季目前常采用扦插和嫁接繁殖，但其過程漫長(zhǎng)，用工量大。

近年來，組織培養(yǎng)法快速繁殖各種花卉苗木的技術(shù)得到了廣泛應(yīng)用。藤本月季多特蒙特為北方較耐寒、且在栽培中各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)較好的品種。本試驗(yàn)以適宜新疆地區(qū)種植的藤本月季品種多特蒙特為試驗(yàn)材料，進(jìn)行了誘導(dǎo)、繼代及生根的組織培養(yǎng)特性研究，優(yōu)化了適合該藤本月季品種組培快繁的最佳配比的培養(yǎng)基和移栽基質(zhì)，為北疆地區(qū)適宜栽培的藤本月季組培快繁提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以二年生藤本月季多特蒙特植株母枝為基礎(chǔ)材料，選擇生長(zhǎng)健壯、無病蟲害植株、芽體飽滿的當(dāng)年生枝條中段為外植體。將選取的外植體剪去葉片、保留葉柄，自來水沖洗干凈后，在超凈工作臺(tái)上將其剪成保留2～3個(gè)芽的莖段，放入高溫滅菌的瓶中，加入75%乙醇溶液浸搖30 s后，用0.1%的升汞溶液消毒8～10 min，再用無菌水徹底沖洗5次待接種。

1.2 培養(yǎng)基

1）誘導(dǎo)培養(yǎng)基：A1.MS+6-BA 0.5 mg/L；A2.MS+6-BA 1.0 mg/L；A3.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；A4.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L。

2）增殖培養(yǎng)基：B1.MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L； B2.MS+KT 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L； B3.MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L；B4.MS+KT 1.0 mg/L+IBA1.0 mg/L。

3）生根培養(yǎng)基：C1.1/2MS；C2.1/2MS+IBA 0.05 mg/L；C3.1/2MS+IBA 0.1 mg/L；C4.1/2MS+IBA 0.5 mg/L。

4）移栽基質(zhì)：D1.基質(zhì)∶蛭石；D2.基質(zhì)∶珍珠巖； D3.基質(zhì)∶蛭石+泥炭（1∶1）；D4.基質(zhì)∶河沙。

1.3 方法

1.3.1 誘導(dǎo)培養(yǎng) 用鑷子去除消毒莖段上的葉柄，使腋芽顯出，再將莖端切成長(zhǎng)1.5 cm的單芽小段，分別接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基A1、A2、A3、A4，每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)接種25個(gè)單芽莖段，接種7～15 d后觀察芽萌發(fā)情況。

1.3.2 芽的增殖繼代培養(yǎng) 將已萌發(fā)且芽高1.5 cm以上的叢生芽切成單芽，轉(zhuǎn)接到增值繼代培養(yǎng)基B1、B2、B3、B4中，每個(gè)處理接種30個(gè)單芽，接種5～7 d后觀察離體芽的增殖情況。

1.3.3 試管苗的生根培養(yǎng) 將繼代培養(yǎng)苗中生長(zhǎng)健壯，苗高在2 cm以上的無根苗切成單株，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基C1、C2、C3、C4中，每個(gè)處理接種40個(gè)單株，接種7 d后觀察幼苗的生根情況。

1.3.4 移栽 當(dāng)繼代培養(yǎng)的升根苗根系生長(zhǎng)良好時(shí)，可將試管苗在室內(nèi)揭開封膜口煉苗2～3 d，然后輕輕取出試管苗，用溫水洗凈根部黏附的培養(yǎng)基，在溫室中，移栽于厚度達(dá)15 cm的栽培基質(zhì)苗床中。選用的栽培基質(zhì)分別為D1、D2、D3、D4，均經(jīng)高錳酸鉀徹底消毒。從4月下旬開始到10月中旬為止，每月進(jìn)行移栽試驗(yàn)，每個(gè)處理均為80棵苗。幼苗栽植后用低濃度的多菌靈溶液澆濕基質(zhì)，遮陰保濕，移栽20 d后統(tǒng)計(jì)幼苗成活率。

1.3.5 培養(yǎng)條件 MS培養(yǎng)基中蔗糖為30.0 g/L， 1/2MS培養(yǎng)基中蔗糖為20.0 g/L，瓊脂均為3.8 g/L，pH 5.8，培養(yǎng)溫度為（25±2） ℃，光照度2 000～2 500 lx，光照時(shí)間10～12 h/d。

2 結(jié)果與分析

2.1 腋芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)

藤本月季多特蒙特的莖端在接種3 d后腋芽開始萌動(dòng)，但萌芽率及生長(zhǎng)情況因植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度的不同而異。由表1可知，培養(yǎng)基MS+6-BA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0 mg/L中由于只加入了細(xì)胞分裂素（6-BA），誘導(dǎo)產(chǎn)生的叢生芽數(shù)、腋芽萌發(fā)率和平均芽高均明顯低于培養(yǎng)基A3。培養(yǎng)基A3中細(xì)胞分裂素和較低濃度的生長(zhǎng)素（NAA）配合使用有利于腋芽的萌發(fā)，腋芽萌發(fā)率高達(dá)117.3%，平均芽高2.60 cm， 且叢生芽生長(zhǎng)健壯。培養(yǎng)基A4中生長(zhǎng)素濃度增大，腋芽萌發(fā)率下降至93.3%，平均芽高 2.01 cm，且叢生芽長(zhǎng)勢(shì)一般。綜上所述，以萌芽率及生長(zhǎng)情況作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，培養(yǎng)基A3（MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L）為藤本月季多特蒙特腋芽誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基。

2.2 增殖繼代培養(yǎng)

由表2可知，培養(yǎng)基B1由于生長(zhǎng)素（IBA）濃度偏低而增殖芽數(shù)較少，增殖系數(shù)明顯低于其他培養(yǎng)基。隨著6-BA和NAA濃度的增加，培養(yǎng)基B2和B3增殖芽數(shù)增多，增殖系數(shù)分別達(dá)2.7和2.2，且芽生長(zhǎng)健壯。培養(yǎng)基B4中將6-BA更換為KT，增殖芽和增殖系數(shù)均明顯提高，且明顯高于其他培養(yǎng)基，芽生長(zhǎng)健壯，同時(shí)在芽基部不斷有不定芽萌動(dòng)的跡象。因此，培養(yǎng)基B4（MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L），既可實(shí)現(xiàn)芽的高效增殖，又能保證分化出的芽健壯生長(zhǎng)，為藤本月季多特蒙特適宜的增殖繼代培養(yǎng)基。

2.3 生根培養(yǎng)

從表3可以看出，未使用任何植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基C1中，幼苗培養(yǎng)12 d后開始生根，生根率僅有28%，明顯低于其他培養(yǎng)基，平均生根數(shù)為4條，且根生長(zhǎng)細(xì)弱。培養(yǎng)基C2和C3中根數(shù)達(dá)到6條和10條，幼苗培養(yǎng)8～10 d開始生根，且以培養(yǎng)基C4中幼苗根系發(fā)達(dá)，質(zhì)量較高。培養(yǎng)基1/2MS中加入IBA作為生根調(diào)節(jié)劑，幼苗生根效果明顯好于加入NAA的培養(yǎng)基，生根率達(dá)到92.5%，明顯高于培養(yǎng)基C1和C2、C3，且其平均根數(shù)為12條，幼苗培養(yǎng)7 d即開始生根，小苗長(zhǎng)勢(shì)良好，根粗壯、根系發(fā)達(dá)。因此，適合藤本月季多特蒙特品種的最佳生根培養(yǎng)基為C4 1/2MS+IBA 0.5 mg/L，其生根率達(dá)到92.5%。

2.4 移栽成活情況

由圖1可知，4個(gè)栽培基質(zhì)處理均在5、6和9月移栽成活率較高，幼苗生長(zhǎng)健壯，新葉黑而亮；而4、7、8和10月的移栽成活率相對(duì)較低，幼苗生長(zhǎng)細(xì)弱，這可能與氣溫及地溫的高低有關(guān)。5、6和9月氣溫適中（20～30 ℃），有利于試管苗的移栽；4、10月氣溫偏低（20 ℃以下），而7、8月氣溫偏高（30 ℃以上），均不利于試管苗的移栽。4個(gè)不同基質(zhì)處理中，以栽培基質(zhì)D3即采用蛭石+泥炭（1∶1）的處理試管苗移栽成活率都較高，其中又以5月最高，達(dá)到94.5%，7月最低，僅有65.0%。

3 小結(jié)與討論

結(jié)果表明，在藤本月季多特蒙特的誘導(dǎo)培養(yǎng)中需較低濃度的細(xì)胞分裂素（6-BA）和生長(zhǎng)素（IBA），適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L；增殖培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素選用KT比6-BA更適宜芽的增殖，最佳的繼代增殖培養(yǎng)基為MS+KT 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L；生長(zhǎng)素IBA作為生根激素，幼苗生根效果要比NAA效果更好；最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5 mg/L。在試管苗移栽試驗(yàn)中，氣溫和栽培基質(zhì)均對(duì)試管苗的移栽成活率影響明顯，5、6和9月氣溫適中（20～30 ℃），試管苗的移栽成活率均較高，氣溫偏低（20 ℃以下）或偏高（30 ℃以上）都不利于試管苗的移栽。蛭石+泥炭（1∶1）通氣保水，是試管苗移栽的最佳栽培基質(zhì)，且適宜在5、6和9月移栽，成活率可高達(dá)94.5%；珍珠巖雖透氣，但保水性太差，而泥炭吸水力過強(qiáng)，根系因水分過多而腐爛。

采用組培快繁技術(shù)可生產(chǎn)出根系發(fā)達(dá)、生長(zhǎng)健壯的批量?jī)?yōu)質(zhì)藤本月季商品苗，滿足生產(chǎn)的需求，但本試驗(yàn)只是對(duì)藤本月季多特蒙特1個(gè)品種進(jìn)行了研究，因此該技術(shù)在其他品種上的應(yīng)用還有待進(jìn)一步的研究。

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